G試驗(yàn)和GM試驗(yàn)PPT參考課件.ppt

1、G test and GM test,1,一、血清G試驗(yàn) 二、血清GM試驗(yàn) 三、肺泡灌洗液GM試驗(yàn),主 要 內(nèi) 容,2,血清G試驗(yàn)原理 血清G試驗(yàn)的臨床價(jià)值 血清G試驗(yàn)檢測(cè)方法 血清G試驗(yàn)假陽(yáng)性的情況 血清G試驗(yàn)假陰性的情況 血清G試驗(yàn)的優(yōu)勢(shì)和局限,一、血清G試驗(yàn),3,1.1 血清G試驗(yàn)原理,G試驗(yàn)檢測(cè)的是真菌的細(xì)胞壁成分-1,3-D-葡聚糖（BG），人體的吞噬細(xì)胞吞噬真菌后，能持續(xù)釋放該物質(zhì)，使血液中含量增高。 定植時(shí)BG很少釋放入血，因此可有助于鑒別真菌侵襲與定植。,-(1,3)-D-葡聚糖,細(xì)胞核,（1-3）-D-Glucan,鱟變形細(xì)胞裂解物的G因子,活化G因子,凝固酶原,凝固酶,凝固

2、蛋白原,凝固蛋白（凝膠）,4,1 ,3-D 葡聚糖為真菌細(xì)胞壁成分,適用于除隱球菌和接合菌（毛霉菌）外的所有深部真菌感染的早期診斷，尤其是念珠菌和曲霉菌，但不能確定菌種。 診斷侵襲性真菌感染（如侵襲性念珠菌病、侵襲性曲霉菌病、肺孢子菌肺炎等）的方法之一。,1.2 血清G試驗(yàn)的臨床價(jià)值,5,1.3 血清G試驗(yàn)檢測(cè)方法,Fungitec G test 陽(yáng)性閾值為20ng/L 敏感性67-100% 特異性84-100%,Glucatell test 陽(yáng)性閾值為60ng/L或80ng/L 敏感性70-80% 特異性90%左右,6,使用纖維素膜進(jìn)行血透，標(biāo)本接觸過(guò)紗布或其他含有葡聚糖的材料； 靜脈輸注免

3、疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品； 標(biāo)本中存在脂多糖； 操作者處理標(biāo)本時(shí)存在污染； 使用多糖類(lèi)抗癌藥物； 放化療造成的粘膜損傷導(dǎo)致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌經(jīng)胃腸道進(jìn)入血液； 服用多粘菌素,厄他培能,頭孢噻肟、吡肟, 磺胺也會(huì)不同程度引起假陽(yáng)性。,1.4 血清G試驗(yàn)假陽(yáng)性的情況,7,隱球菌具有厚壁包膜，生長(zhǎng)緩慢，導(dǎo)致假陰性； 局灶性曲菌病，BG很少釋放入血； 抗真菌藥物的使用。,1.5 血清G試驗(yàn)假陰性的情況,8,優(yōu)勢(shì)： 鑒別侵襲性感染與定植； 不受機(jī)體免疫狀態(tài)影響，早于臨床診斷平均4天；是早期真 菌感染的敏感生物標(biāo)志。 局限： 不能區(qū)分真菌的種類(lèi)。,1.6 血清G試驗(yàn)的優(yōu)勢(shì)和局限,9,

4、血清GM試驗(yàn)原理 血清GM試驗(yàn)的臨床價(jià)值 血清GM試驗(yàn)檢測(cè)方法 血清GM試驗(yàn)假陽(yáng)性的情況 血清GM試驗(yàn)假陰性的情況 血清GM試驗(yàn)的優(yōu)勢(shì)和局限,二、血清GM試驗(yàn),10,GM試驗(yàn)檢測(cè)的是半乳甘露聚糖（glactomannan，GM），主要適于侵襲性曲霉菌感染的早期診斷； 半乳甘露聚糖是廣泛存在于曲霉和青霉細(xì)胞壁的一種多糖，菌細(xì)胞壁表面菌絲生長(zhǎng)時(shí)，半乳甘露聚糖從薄弱的菌絲頂端釋放，是最早釋放的抗原； 檢測(cè)法是一種微孔板雙抗體夾心法，采用小鼠單克隆抗體EBA-2，檢測(cè)人血清中的曲霉菌半乳甘露聚糖。,2.1 血清GM試驗(yàn)的原理,11,曲菌定植時(shí)極少釋放入血，因此有助于鑒別侵襲與定植； GM釋放量與菌量成

5、正比，可以反映感染程度； 連續(xù)檢測(cè)GM可作為治療療效的監(jiān)測(cè)； 在造血干細(xì)胞移植患者中的診斷敏感性高； 參考值：I0.5為陽(yáng)性。,2.2 血清GM試驗(yàn)的臨床價(jià)值,12,使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦； 新生兒和兒童（雙歧桿菌定植、食用乳制品）； 血液透析； 自身免疫性肝炎等； 食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物。,2.3 血清GM試驗(yàn)假陽(yáng)性的情況,13,釋放入血循環(huán)中的曲霉GM并不持續(xù)存在而是會(huì)很快清除； 以前使用了抗真菌藥物； 病情不嚴(yán)重； 非粒細(xì)胞缺乏的患者。,2.4GM試驗(yàn)假陰性的情況,14,優(yōu)勢(shì)： 鑒別曲霉菌侵襲性感染與定植； 早于臨床癥狀和影像學(xué)異常1周； GM診斷侵襲性曲霉

6、感染的敏感度高于G試驗(yàn)； 血清中存在時(shí)間較短，可作為療效監(jiān)測(cè)。 局限： 不能區(qū)分曲霉菌的種類(lèi)。,2.5 血清GM試驗(yàn)的優(yōu)勢(shì)和局限,15,G試驗(yàn)和GM試驗(yàn)的聯(lián)合使用,同時(shí)測(cè)定G試驗(yàn)和GM試驗(yàn)有助于早期診斷侵襲性真菌感染！,16,血液病患者中IPA診斷價(jià)值（回顧性、前瞻性）； 重癥COPD患者合并IPA的診斷價(jià)值； 綜合ICU中重癥患者IPA的診斷價(jià)值。,三、肺泡灌洗液（BAL）的GM試驗(yàn),17,回顧性分析99名血液病患者，其中58名確診或臨床診斷IPA者。所有患者的BALF樣本均用Platelia（雙夾心酶聯(lián)免疫吸附的方法檢測(cè)GM水平的試劑盒）檢測(cè)。 結(jié)果顯示，與培養(yǎng)法（50%）和顯微鏡法（53

7、.3%）相比，BALF的GM檢測(cè)法敏感性更高91.3%，光密度（OD）臨界值1.0，陽(yáng)性、陰性預(yù)測(cè)值分別為76%和96%（OD臨界值1.0）。 中性粒細(xì)胞減少患者和未見(jiàn)減少者的平均OD臨界值無(wú)差異。 在接受預(yù)防性抗真菌治療的患者中，GM檢測(cè)法敏感性下降顯著。,Bronchoalveolar lavage fluid galactomannan for the diagnosis of invasive pulmonary aspergillosis in patients with hematologic diseases,Clin Infect Dis. 2009 Dec 1;49(11):

8、1688-93.,3.1 文獻(xiàn)一,18,3.1 文獻(xiàn)一：研究結(jié)果,19,目的：前瞻性的病例對(duì)照研究，以確診或臨床診斷的侵襲性肺曲霉菌?。↖PA）血液病患者VS 不符合確診或者擬診IPA診斷標(biāo)準(zhǔn)的血液病患者組以及無(wú)曲霉感染證據(jù)的非血液病患者組。 結(jié)果：10例病例組VS 52例對(duì)照組，病例組BAL的GM試驗(yàn)OD值明顯高于對(duì)照組，通過(guò)ROC分析，合適的OD界值點(diǎn)為1.1，具有98.1%的特異性和100%的敏感性。,Galactomannan testing of bronchoalveolar lavage fluid is useful for diagnosis of invasive pulm

9、onary aspergillosis in hematology patients.,BMC Infect Dis. 2010 Mar 3;10:44.,3.1 文獻(xiàn)二,20,明確肺泡灌洗液中GM檢測(cè)在重癥慢性阻塞性肺疾病（COPD）合并侵襲性肺曲霉菌病中的臨床價(jià)值。 結(jié)果:(1) 50例重癥COPD患者中有34例行纖維支氣管鏡檢查并獲取BALF標(biāo)本，IPA臨床診斷9例，疑診6例，定植2例，對(duì)照組17例；(2)根據(jù)ROC曲線(xiàn)，當(dāng)BALF中GM分光光度比值以0.795為界值時(shí)其IPA診斷靈敏度為88.9%，特異度為95.1%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為100%，陰性預(yù)測(cè)值為93.7%。,支氣管肺泡灌洗液半乳

10、甘露聚糖檢測(cè)在重癥COPD合并侵襲性肺曲霉菌病中的臨床價(jià)值,2010年危重癥醫(yī)院全國(guó)會(huì)議,3.2 文獻(xiàn)三,21,目的：比較肺泡灌洗液GM試驗(yàn)和血清GM試驗(yàn)及G試驗(yàn)對(duì)重癥患者肺侵襲性曲霉菌病的診斷效度。 入組：51人納入研究，9例侵襲性曲霉菌病（IA）（4例確診，5例臨床診斷），3例肺孢子菌肺炎（PJP），1例混合IA和PJP。,A prospective comparison of galactomannan in bronchoalveolar lavage fluid for the diagnosis of pulmonary invasive aspergillosis in medical patients under intensive care: comparison with the diagnostic performance of galactomannan and of (1 3) d-glucan chromogenic assay in serum samples,Clin Microbiol Infect 2011; 17: 10531060,3.3 文獻(xiàn)四,22,3.3 文獻(xiàn)四：研究結(jié)果,23,All IA,Proven IA,All IF