甲醛殘留測定方法驗證

1、. 精品 甲醛殘留檢測方法驗證方案甲醛殘留檢測方法驗證方案 validation protocol for residue analytical test method of formaldehyde 驗證方案的審批驗證方案的審批 review and approve 姓名姓名 （name） 部門部門/ /職位職位 （dep./post） 簽名簽名 （signature） 日期日期 （date） 起草人起草人 （prepared by） 陳 蕊化驗組長 審核人審核人 (reviewed by) 張京偉qa 經(jīng)理 審核人審核人 (reviewed by) 齊雁鴻qc 經(jīng)理 批準(zhǔn)人批準(zhǔn)人 (app

2、roved by) 姚 兵副總經(jīng)理 驗證方案修訂歷史驗證方案修訂歷史 historyhistory ofof revisionrevision . 精品 版版本本號號 v ve er rs si io on n n no o. . 日日期期 d da at te e 修修訂訂原原因因 r re ea as so on n 簽簽名名 s si ig gn na at tu ur re e 00 原始版本 目目 錄錄 indexindex ofof contentscontents 1.目的（目的（objective）.4 2.范圍（范圍（scope）.4 3.職責(zé)（職責(zé)（responsibili

3、ties）.4 . 精品 4.參考文件（參考文件（references）.4 5.術(shù)語與縮寫（術(shù)語與縮寫（glossary and abbreviation）.4 6.概述（概述（summary）.5 7.驗證前提（驗證前提（qualification prerequisite）.7 8.驗證內(nèi)容及接受標(biāo)準(zhǔn)（驗證內(nèi)容及接受標(biāo)準(zhǔn)（contents of validation and acceptance criteria）.7 9.偏差（偏差（deviation）.11 10.變更及再驗證（變更及再驗證（change and revalidation） .11 11.附件（附件（appendix

4、） .11 附件 1：培訓(xùn)確認(rèn)報告 .11 附件 2：主要儀器設(shè)備相關(guān)信息確認(rèn)報告 .14 附件 3：線性和范圍測試報告 .15 附件 4：準(zhǔn)確度測試報告 .16 附件 5：方法精密度測試報告 .18 附件 6：耐用性測試報告 .21 附件 17：偏差記錄 .24 . 精品 1.目的目的（objectiveobjective） 目前制藥廠房仍普遍使用甲醛作為環(huán)境的消毒方式，但在廠房設(shè)施及設(shè)備表面的 甲醛殘留會對產(chǎn)品質(zhì)量及人員安全造成危害。因此，需要有一個切實可行的方法對其 殘留量進(jìn)行測定。通過查閱資料及反復(fù)試驗，確定使用紫外分光光度法進(jìn)行測定。現(xiàn) 將該方法的驗證思路及過程進(jìn)行記錄，以證明方法的

5、可行性。 2.范圍（范圍（scopescope） 該方法適用于本公司潔凈區(qū)甲醛殘留量的測定。 3.職責(zé)職責(zé)（responsibilitiesresponsibilities） 3.13.1 質(zhì)量檢驗部質(zhì)量檢驗部 3.1.1 起草、審核并批準(zhǔn)驗證方案。 3.1.2 按照方案執(zhí)行驗證，并整理收集驗證數(shù)據(jù)。 3.1.3 編制、審核并批準(zhǔn)驗證報告。 3.23.2 質(zhì)量保證部質(zhì)量保證部 3.2.13.2.1 審核驗證方案和驗證報告 3.33.3 計量中心計量中心 3.3.1 建立儀器、儀表校準(zhǔn)程序和時間表。 3.3.2 負(fù)責(zé)儀器儀表的日常維護(hù)。 3.43.4 主管質(zhì)量領(lǐng)導(dǎo)主管質(zhì)量領(lǐng)導(dǎo) 3.4.1 負(fù)責(zé)批

6、準(zhǔn)驗證方案和報告。 4.參考文件（參考文件（referencesreferences） 本驗證方案參考文件如下： 藥品生產(chǎn)驗證指南 2003 版 5.術(shù)語與縮寫（術(shù)語與縮寫（glossaryglossary andand abbreviationabbreviation） 本方案涉及術(shù)語本方案涉及術(shù)語： 線性（線性（linearitylinearity）：）：系指在設(shè)計的范圍內(nèi)，測試結(jié)果與試樣中被測物濃度直接呈正比 關(guān)系的程度。 準(zhǔn)確度（準(zhǔn)確度（accuracyaccuracy）：）：系指用該方法測定的結(jié)果與真實值或參考值接近的程度，一般 用回收率（）表示。 精密度（精密度（precision

7、precision）：）：系指在規(guī)定的測試條件下，同一個均勻供試品，經(jīng)多次取樣測 定所得結(jié)果之間的接近程度。精密度一般用偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。 耐用性（耐用性（robustnessrobustness）：）：是指在測定條件有小的波動時，測定結(jié)果不受影響的承受程 度，為使方法可用于提供常規(guī)檢驗依據(jù)。開始研究分析方法時，就應(yīng)考慮其耐受性。 . 精品 如測試條件要求苛刻，則應(yīng)在方法中寫明。 . 精品 6.概述概述（summarysummary） 6.16.1 方法描述方法描述 ahmt 在堿性條件下，與甲醛發(fā)生縮合反應(yīng)生成產(chǎn)物 ii 和一分子水；之后再用 高碘酸鈉進(jìn)行氧化脫氫，生成 6-

8、巰基-5-三氮雜茂（4,3-b）-s-四氮雜苯。該物質(zhì)為紫紅 色化合物，可以用于分光光度法的定量檢測。 6.1.1.6.1.1.儀器與材料儀器與材料 儀器型號波長準(zhǔn)確度檢測波長比色皿寬度 shimadzu uv2450 可 見紫外分光光度計 0.1nm550nm5cm 6.1.2.6.1.2.試劑和試液試劑和試液 試劑名稱試劑名稱生產(chǎn)廠家生產(chǎn)廠家批號批號有效期至有效期至 甲醛甲醛 氫氧化鈉氫氧化鈉 ahmt 高碘酸鈉 6.1.2.1 甲醛稀釋液的制備： 精密量取分析純甲醛溶液 5ml 至 1000ml 容量瓶中，用純化水稀釋至刻度后搖勻，配 制成甲醛稀溶液。 6.1.2.2 甲醛稀釋液的標(biāo)定：

9、精密量取甲醛稀溶液 10ml，精確加入 0.1mol/l 碘液 50ml，1mol/l 氫氧化鋰 20ml。避光放置 15min，加 10%硫酸 15ml，用 0.1mol/l 硫代 硫酸鈉滴定液（0.1mol/l）滴定至終點。 6.1.2.3 空白對照的滴定：精密量取純化水 10ml，重復(fù)上述步驟，作為空白進(jìn)行對照。 6.1.2.4 甲醛濃度計算： . 精品 ）甲醛稀釋液取樣量（ ）相對甲醛的量（碘液（ ）硫代硫酸鈉液量（空白試驗消耗 ）硫代硫酸鈉液量（甲醛稀釋液消耗 （甲醛稀釋液中甲醛濃度 ml mlmolml mllmolvb mllmolva vbva mlmg 10 g/1 . 01

10、5013 . 1 /1 . 0 /1 . 0 10 5013 . 1 )( )/ 6.1.3 甲醛標(biāo)準(zhǔn)液的制備：精密量取 5ml 甲醛稀釋液至 200ml 容量瓶中，加純化水稀 釋定容，振搖均勻，從中精密量取 5ml 至 250ml 容量瓶中，用純化水稀釋定容，振搖 均勻 6.1.4 ahmt 試液的制備：稱取 ahmt 0.5g，加 0.2mol/l 鹽酸使溶解成 100ml，避光 保存。 6.1.5 5mol/l 氫氧化鈉試液的制備：稱取 200g 氫氧化鈉，加純化水使溶解成 1000ml 至，即可。 6.1.6 0.1mol/l 高碘酸鈉試液的制備：稱取 2.14g 高碘酸鈉，加純化水使

11、溶解成 100ml，即可。 7.驗證前提（驗證前提（qualificationqualification prerequisiteprerequisite） 7.17.1 人員確認(rèn)人員確認(rèn) 本驗證小組所有成員在驗證之前應(yīng)接受相關(guān)的培訓(xùn)，如驗證方案、檢驗操作 sop 等，并有記錄。培訓(xùn)記錄見附件 1。 姓名姓名在驗證小組中職務(wù)在驗證小組中職務(wù)職責(zé)職責(zé) 齊雁鴻組長組織實施驗證工作，并對方案和報告進(jìn)行審核 孫新蕊組員按驗證方案開展驗證實驗，并完成報告 組員按驗證方案開展驗證實驗，并完成報告 組員按驗證方案開展驗證實驗，并完成報告 7.27.2 儀器確認(rèn)儀器確認(rèn) 進(jìn)行分析方法驗證之前，相關(guān)檢測設(shè)備應(yīng)經(jīng)

12、過確認(rèn)，見附件 2。 8.驗證內(nèi)容驗證內(nèi)容及接受標(biāo)準(zhǔn)（及接受標(biāo)準(zhǔn)（contentscontents ofof validationvalidation andand acceptanceacceptance criteriacriteria） 8.1.8.1. 線性線性 . 精品 8.1.1.測試方法 8.1.1.1 取編號 1-5 的比色管 5 支，分別加入 5mol/l 氫氧化鈉溶液 2ml，及 ahmt 試 液 2ml。 8.1.1.2 分別取甲醛標(biāo)準(zhǔn)液 0.0、0.5、1.0、1.5 和 2.0ml 于上述比色管中，并分別加純化 水稀釋成 2ml（如標(biāo)準(zhǔn)液為 2.0ml，可不再進(jìn)行稀釋

13、） ，移取、稀釋過程注意及時蓋蓋。 加入后輕搖混勻。于室溫下放置 20min。之后分別加入 0.1mol/l 高碘酸鈉試液 2ml， 搖 2-5min 至無氣流生成為止。 8.1.1.3 將制得的供試品在波長 550nm 處，用 5cm 比色皿以 1 號管內(nèi)溶液為空白進(jìn)行自 動校準(zhǔn)后依次測定 25 號管的吸光度。 8.1.1.4 以濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，求出相關(guān)系數(shù)。 8.1.2 接受標(biāo)準(zhǔn)：相關(guān)系數(shù) r0.99。 8.1.3 測試結(jié)果 見附件 3 8.2.8.2.準(zhǔn)確度試驗準(zhǔn)確度試驗 8.2.1 測試方法 8.2.1.1 以 0.45ppm 濃度的甲醛溶液為對照品溶液，分別

14、配制 0.36ppm、0.45ppm、0.54ppm 甲醛溶液各 3 份。 8.2.1.2 空白溶液制備：在比色管種中依次加入 5mol/l 氫氧化鈉 2ml、 ahmt 試液 2ml 及純化 水 2ml。輕搖混勻后于室溫下放置 20min。之后分別加入 0.1mol/l 高碘酸鈉試劑 2ml， 搖 2-5min 至無氣流生成為止，以此作空白溶液。 8.2.1.2 供試品溶液制備：在比色管種中依次加入 5mol/l 氫氧化鈉 2ml、 ahmt 試液 2ml、0.36ppm 甲醛溶液 1.0ml及純化水 1ml。輕搖混勻后于室溫下放置 20min。之后分 別加入 0.1mol/l 高碘酸鈉試劑

15、 2ml，搖 2-5min 至無氣流生成為止。 8.2.1.3 結(jié)果測定：在 550nm 處，以空白溶液將可見紫外分光光度計進(jìn)行自動校準(zhǔn)后，測量供試 品溶液的濃度。 8.2.1.4 同法測定 0.45ppm、0.54ppm 甲醛溶液的實際檢測濃度。記錄結(jié)果，計算回收率。 8.2.2 接受標(biāo)準(zhǔn)：80%120%。 8.2.3 測試結(jié)果 見附件 5 8.38.3 精密度試驗精密度試驗 . 精品 8.3.18.3.1 方法精密度方法精密度 8.3.1.1 配制 6 份 0.36ppm 的甲醛溶液，按 8.2.1.18.2.1.3 的方法檢測其濃度，計算 6 次 結(jié)果的 rsd 值。 8.3.1.2 接

16、受標(biāo)準(zhǔn) rsd10%。 8.3.1.3 測試結(jié)果 見附件 6. 8.48.4 耐用性耐用性 8.4.1.8.4.1.供試品溶液穩(wěn)定性試驗供試品溶液穩(wěn)定性試驗 8.4.1.1 測試方法 按 8.1.1.18.1.1.4 的方法分別配制 5 支 1.0ml 甲醛標(biāo)準(zhǔn)液稀釋至 2.0ml 的待測樣品，將 制備的待測樣品放置于室溫下，每支樣品的放置時間分別為 0min、10min、20min、30min、40min，放置結(jié)束后加入 0.1mol/l 高碘酸鈉試劑 2ml， 在同樣波長下分別檢測其濃度,確定供試品反應(yīng)時間； 8.4.1.2 接受標(biāo)準(zhǔn)10.0%。 8.4.1.3 測試結(jié)果 見附件 7 9.

17、偏差偏差（deviationdeviation） 驗證執(zhí)行過程中所有偏差均要進(jìn)行記錄，并分析原因和采取適當(dāng)?shù)拇胧?；偏差?錄見附件 12。 10. 變更及再驗證（變更及再驗證（changechange andand revalidationrevalidation） 在不發(fā)生變更的情況下，不對分析方法定期再驗證；當(dāng)發(fā)生以下變更時，需要再 驗證： a、 樣品生產(chǎn)工藝變更； b、 原分析方法改變； 11. 附件（附件（appendixappendix） 在測試報告中記錄所有附在本方案中的文件； 附件清單附件清單 附件附件名稱名稱 . 精品 1培訓(xùn)確認(rèn)報告 2儀器設(shè)備確認(rèn)報告 3線性和范圍測試報告

18、4準(zhǔn)確度測試報告 5精密度測試報告 6耐用性測試報告 7偏差記錄 附件附件 1 1：培訓(xùn)確認(rèn)報告：培訓(xùn)確認(rèn)報告 培訓(xùn)確認(rèn)報告培訓(xùn)確認(rèn)報告 姓名姓名驗證職責(zé)驗證職責(zé)部門部門是否經(jīng)過培訓(xùn)是否經(jīng)過培訓(xùn)簽名簽名日期日期 齊雁鴻 組織實施驗證 方案并完成驗 證報告 qc 孫新蕊 實施驗證qa 實施驗證qa 實施驗證qa 確認(rèn)內(nèi)容確認(rèn)內(nèi)容 該驗證所有參與成員均經(jīng)過了驗證方案的培訓(xùn) 是 否 . 精品 該驗證所有參與成員均經(jīng)過了相關(guān)儀器設(shè)備使用及 安全培訓(xùn) 是 否 備注： 確認(rèn)人：確認(rèn)人： 日期：日期： 附件附件 2 2：主要儀器設(shè)備相關(guān)信息確認(rèn)報告：主要儀器設(shè)備相關(guān)信息確認(rèn)報告 序號序號儀器設(shè)備名稱儀器設(shè)備

19、名稱型號型號編號編號精度精度有效期至有效期至 1分光光度計uv-2450a10834033090cs2012-10-11 確認(rèn)內(nèi)容確認(rèn)內(nèi)容 使用到的主要儀器設(shè)備均經(jīng)過校驗，并在有效期之 內(nèi) 是 否 備注：備注： . 精品 確認(rèn)人：確認(rèn)人： 日期：日期： 附件附件 4 4：線性測試報告：線性測試報告 附件附件 5 5：準(zhǔn)確度測試報告：準(zhǔn)確度測試報告 實驗條件實驗條件 紫外分光光度計有效期至有效期至 實驗結(jié)果實驗結(jié)果 序號序號濃度（濃度（ppmppm）吸光度吸光度 1 10 00 0 2 20.2260.2260.2520.252 3 30.4520.4520.4750.475 4 40.6790

20、.6790.7140.714 5 50.9010.9010.9460.946 回歸方程回歸方程y=0.9791x-0.0097y=0.9791x-0.0097 相關(guān)系數(shù)相關(guān)系數(shù)0.99950.9995 標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)r0.99r0.99 結(jié)論結(jié)論 實驗人實驗人日期日期 復(fù)核人復(fù)核人日期日期 . 精品 附件附件 6 6：方法精密度測試報告：方法精密度測試報告 實驗條件實驗條件 分光光度計編號分光光度計編號有效期至有效期至 實驗結(jié)果實驗結(jié)果 配制濃度（配制濃度（ppmppm）檢測濃度（檢測濃度（ppmppm） 回收率回收率 （%） 0.360.360.3530.35398.0598.05 0.360.360.3500.35097.2297.22供試品供試品 1 1 0.360.360.3440.34495.5695.56 0.450.450.4440.44498.6798.67 0.450.450.4500.450100100供試品供試品 2 2 0.450.450.4400.44097.7897.78 0.540.540.5510.551102.04102.04 0.540.540.5550.555102.78102.78供試品供試品 3 3 0.540.540.5450.545100.93100.93 平均回收率平均回收率99.22