GB 5009.82-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中維生素A、D、E的測定

016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中維生素A、D、016 前 言本標(biāo)準(zhǔn)代替003食品中維生素010食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 嬰幼兒食品和乳品中維生素A、D、008肉與肉制品 維生素008肉與肉制品 維生素15982008食用植物油中維生素效液相色譜法。本標(biāo)準(zhǔn)與003相比,主要變化如下:標(biāo)準(zhǔn)名稱修改為“食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中維生素A、D、增加了“食品中維生素相高效液相色譜法”;增加了“食品中維生素相色譜增加了“食品中維生素效液相色譜法”;修改了“食品中維生素相高效液相色譜法”;修改了維生素同時(shí)分離測定4種生育酚異構(gòu)體;刪除了苯并芘內(nèi)標(biāo)定量法,改用外標(biāo)法定量;刪除了“比色法”測定維生素A。0161 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中維生素A、D、圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中維生素A、維生素標(biāo)準(zhǔn)第一法適用于食品中維生素標(biāo)準(zhǔn)第二法適用于食用油、堅(jiān)果、豆類和辣椒粉等食物中維生素標(biāo)準(zhǔn)第三法適用于食品中維生素標(biāo)準(zhǔn)第四法適用于配方食品中維生素一法 食品中維生素相高效液相色譜法2 原理試樣中的維生素淀粉先用淀粉酶酶解)、提取、凈化、濃縮后,外檢測器或熒光檢測器檢測,外標(biāo)法定量。3 試劑和材料除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純,水為6682規(guī)定的一級(jí)水。水乙醇(經(jīng)檢查不含醛類物質(zhì), 抗壞血酸(氧化鉀(醚(O:經(jīng)檢查不含過氧化物, 石油醚(沸程為3060。水硫酸鈉( 4)。醇(色譜純。粉酶:活力單位100U/0 2,615簡稱氧化鉀溶液(50g/100g):稱取50入50卻后,儲(chǔ)存于聚乙烯瓶中。油醚+1):量取200入200勻。0162 機(jī)系過濾頭(生素208純度95%,或經(jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。290191純度95%,或經(jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。2848純度95%,或經(jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。284純度95%,或經(jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。2719純度95%,或經(jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。生素?zé)o水乙醇溶解后,轉(zhuǎn)移入50容至刻度,溶液轉(zhuǎn)移至棕色試劑瓶中,密封后,在避光保存,有效期1個(gè)月。臨用前將溶液回溫至20,并進(jìn)行濃度校正(校正方法參見附錄B)。生素分別準(zhǔn)確稱取無水乙醇溶解后,轉(zhuǎn)移入50容至刻度,溶液轉(zhuǎn)移至棕色試劑瓶中,密封后,在避光保存,有效期6個(gè)月。臨用前將溶液回溫至20,并進(jìn)行濃度校正(校正方法參見附錄B)。生素甲醇定容至刻度,生素避光保存,有效期半個(gè)月。生素甲醇定容至刻度,用前配制。4 析天平:溫水浴振蕩器。轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。吹儀。外分光光度計(jì)。液漏斗萃取凈化振蕩器。0163 效液相色譜儀:帶紫外檢測器或二極管陣列檢測器或熒光檢測器。5 樣制備將一定數(shù)量的樣品按要求經(jīng)過縮分、粉碎均質(zhì)后,儲(chǔ)存于樣品瓶中,避光冷藏,盡快測定。樣處理警示:使用的所有器皿不得含有氧化性物質(zhì);分液漏斗活塞玻璃表面不得涂油;處理過程應(yīng)避免紫外光照,盡可能避光操作;提取過程應(yīng)在通風(fēng)柜中操作。含淀粉樣品稱取2g5g(均質(zhì)處理的固體試樣或50g(體試樣于150體試樣需加入約20勻,勻,加入30入100加邊振搖,混勻后于80恒溫水浴震蕩皂化30化后立即用冷水冷卻至室溫。注:皂化時(shí)間一般為30皂化液冷卻后,液面有浮油,需要加入適量氫氧化鉀溶液,并適當(dāng)延長皂化時(shí)間。淀粉樣品稱取2g5g(均質(zhì)處理的固體試樣或50g(體樣品于150體試樣需用約20入60水浴避光恒溫振蕩30出,勻,加入3000加邊振搖,混勻后于80恒溫水浴振蕩皂化30化后立即用冷水冷卻至室溫。取將皂化液用30入50蕩萃取5下層溶液轉(zhuǎn)移至另一250入50并醚層。注:如只測維生素用石油醚作提取劑。滌用約100需重復(fù)3次,直至將醚層洗至中性(可用去除下層水相?？s將洗滌后的醚層經(jīng)無水硫酸鈉(約3g)濾入250約15入蒸發(fā)瓶內(nèi),并將其接在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀或氣體濃縮儀上,于40水浴中減壓蒸餾或氣流濃縮,待瓶中醚液剩下約2下蒸發(fā)瓶,立即用氮?dú)獯抵两?。用甲醇分次將蒸發(fā)瓶中殘留物溶解并轉(zhuǎn)移至10容至刻度。0164 譜參考條件色譜參考條件列出如下:a) 色譜柱:長250徑3m),或相當(dāng)者;b) 柱溫:20;c) 流動(dòng)相:A:水;B:甲醇,洗脫梯度見表1;d) 流速:e) 紫外檢測波長:維生素生素f) 進(jìn)樣量:10L;g) 1:如難以將柱溫控制在202,可改用動(dòng)相為水和甲醇梯度洗脫。注2:如樣品中只含需分離選用動(dòng)相為甲醇。注3:如有熒光檢測器,可選用熒光檢測器檢測,對生育酚的檢測有更高的靈敏度和選擇性,可按以下檢測波長檢測:維生素射波長440生素射波長3281 動(dòng)相B%流速mL/準(zhǔn)曲線的制作本法采用外標(biāo)法定量。將維生素定相應(yīng)的峰面積,以峰面積為縱坐標(biāo),以標(biāo)準(zhǔn)測定液濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算直線回歸方程。品測定試樣液經(jīng)高效液相色譜儀分析,測得峰面積,采用外標(biāo)法通過上述標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算其濃度。在測定過程中,建議每測定10個(gè)樣品用同一份標(biāo)準(zhǔn)溶液或標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)檢查儀器的穩(wěn)定性。6 分析結(jié)果的表述試樣中維生素)計(jì)算:X=Vf100m(1)式中:X 試樣中維生素生素g/100g),維生素00g);根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得到的試樣中維生素位為微克每毫升(g/0165 V定容體積,單位為毫升(f換算因子(維生素A:f=1;維生素E:f=100試樣中量以每100克計(jì)算的換算系數(shù);m試樣的稱樣量,單位為克(g)。計(jì)算結(jié)果保留三位有效數(shù)字。注:如維生素示,可按下式計(jì)算:維生素E(00g)=00g)+00g)00g)00g) 精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。8 其他當(dāng)取樣量為5g,定容10生素00g,定量限為30g/100g;生育酚的紫外檢出限為40g/100g,定量限為120g/100g。第二法 食品中維生素相高效液相色譜法9 原理試樣中的維生素縮后,用高效液相色譜酰氨基柱或硅膠柱分離,經(jīng)熒光檢測器檢測,外標(biāo)法定量。10 試劑和材料除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純。水為6682規(guī)定的一級(jí)水。水乙醇(色譜純,經(jīng)檢驗(yàn)不含醛類物質(zhì),醚(O:分析純,經(jīng)檢驗(yàn)不含氧化物,油醚(沸程為3060。水硫酸鈉(己烷(色譜純。丙醇(色譜純。丁基甲基醚:色譜純。醇(色譜純。氫呋喃(色譜純。,44色譜純。,615簡稱機(jī)系過濾頭(0166 油醚+1):量取200入200勻,臨用前配制。動(dòng)相:正己烷+叔丁基甲基醚0+1+=90+10,臨用前配制。290191純度95%,或經(jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì);2848純度95%,或經(jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì);284純度95%,或經(jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì);2719純度95%,或經(jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。生素用無水乙醇溶解于50容至刻度,溶液轉(zhuǎn)移至棕色試劑瓶中,密封后,在避光保存,有效期6個(gè)月。臨用前將溶液回溫至20,并進(jìn)行濃度校正(校正方法參見附錄B)。生素氮?dú)獯党掖己?用流動(dòng)相定容至刻度,封后,在避光保存,有效期半個(gè)月。生素流動(dòng)相定容至刻度,1 儀器和設(shè)備 析天平:溫水浴振蕩器。轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。吹儀。外分光光度計(jì)。氏脂肪抽提儀或加速溶劑萃取儀。效液相色譜儀,帶熒光檢測器或紫外檢測器。12 樣制備將一定數(shù)量的樣品按要求經(jīng)過縮分、粉碎、均質(zhì)后,儲(chǔ)存于樣品瓶中,避光冷藏,盡快測定。0167 樣處理警示:使用的所有器皿不得含有氧化性物質(zhì);分液漏斗活塞玻璃表面不得涂油;處理過程應(yīng)避免紫外光照,盡可能避光操作。25入10流動(dòng)相定容至刻度,搖勻。進(jìn)樣。油、黃油稱取2g5505水浴融化,加入5旋1勻,加入25心,將上清液轉(zhuǎn)移至濃縮瓶中,再用20并上清液至濃縮瓶,在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器或氣體濃縮儀上,于45水浴中減壓蒸餾或氣流濃縮,待瓶中醚剩下約2下蒸發(fā)瓶,立即用氮?dú)獯蹈?。用流?dòng)相將濃縮瓶中殘留物溶解并轉(zhuǎn)移至10容至刻度,搖勻。果、豆類、辣椒粉等干基植物樣品稱取2g5用索氏提取儀或加速溶劑萃取儀提取其中的植物油脂,將含油脂的提取溶劑轉(zhuǎn)移至25040水浴中減壓蒸餾或氣流濃縮至干,取下蒸發(fā)瓶,用10聲或渦旋振蕩溶解后,用流動(dòng)相定容至刻度,搖勻。進(jìn)樣。譜參考條件色譜參考條件列出如下:a) 色譜柱:酰氨基柱(柱長150相當(dāng)者;b) 柱溫:30;c) 流動(dòng)相:正己烷+叔丁基甲基醚0+1+=90+10;d) 流速:e) 熒光檢測波長:激發(fā)波長294射波長328nm;f) 進(jìn)樣量:10L。注:可用長250徑5m)分離4種生育酚異構(gòu)體,推薦流動(dòng)相為正己烷與1,45+5)的比例混合。準(zhǔn)曲線的制作本法采用外標(biāo)法定量。將維生素定相應(yīng)的峰面積。以峰面積為縱坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算直線回歸方程。品測定試樣液經(jīng)高效液相色譜儀分析,測得峰面積,采用外標(biāo)法通過上述標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算其濃度。在測定過程中,建議每測定10個(gè)樣品用同一份標(biāo)準(zhǔn)溶液或標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)檢查儀器的穩(wěn)定性。0168 13 分析結(jié)果的表述試樣中)計(jì)算:X=Vf100m(2)式中:X 試樣中位為毫克每百克(00g);根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得到的試樣中位為微克每毫升(g/V定容體積,單位為毫升(f換算因子(f=100試樣中量以每百克計(jì)算的換算系數(shù);m試樣的稱樣量,單位為克(g)。計(jì)算結(jié)果保留三位有效數(shù)字。注:如維生素示,可按下式計(jì)算:維生素E(00g)=00g)+00g)00g)00g)4 精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。15 其他當(dāng)取樣量為2g,定容25生育酚的檢出限為50g/100g,定量限為150g/100g。第三法 食品中維生素相色譜理試樣中加入維生素氫氧化鉀乙醇溶液皂化(含淀粉試樣先用淀粉酶酶解)、提取、硅膠固相萃取柱凈化、濃縮后,反相高效液相色譜聯(lián)質(zhì)譜法檢測,內(nèi)標(biāo)法定量。17 試劑和材料除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純。水為6682規(guī)定的一級(jí)水。水乙醇(色譜純,經(jīng)檢驗(yàn)不含醛類物質(zhì),壞血酸(,615簡稱0169 粉酶:活力單位100U/氧化鉀(酸乙酯(色譜純。己烷(色譜純。水硫酸鈉( 4)。相萃取柱(硅膠):600醇(色譜純。酸(色譜純。酸銨(色譜純。氧化鉀溶液(50g/100g):50入50卻后儲(chǔ)存于聚乙烯瓶中。酸乙酯+95):量取5勻。酸乙酯5+85):量取15勻。酸甲酸銨溶液:000聲混勻。酸甲酸銨甲醇溶液:000聲混勻。生素化醇(0純度98%,或經(jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。生素鈣化醇(11純度98%,或經(jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。生素28100g/生素27100g/生素色譜純無水乙醇溶解并定容至100其濃度約為100g/移至棕色試劑瓶中,于箱中密封保存,有效期3個(gè)月。臨用前用紫外分光光度法校正其濃度(校正方法見附錄B)。生素色譜純無水乙醇溶解并定容至10其濃度約為100g/移至100箱中密封保存,有效期3個(gè)月。臨用前用紫外分光光度法校正其濃度(校正方法見附錄B)。生素流動(dòng)相稀釋并定容至100效期1個(gè)月。準(zhǔn)確濃度按校正后的濃度折算。生素流動(dòng)相稀釋并定容至100效期1個(gè)月。準(zhǔn)確濃度按校正后的濃度折算。生素流動(dòng)相稀釋并定容至100效期1個(gè)月。生素別量取100甲醇定容,配制成1g/01610 期1個(gè)月。甲醇定容至刻度,混勻。、100g/L、150g/L、200g/L。18 儀器和設(shè)備注:使用的所有器皿不得含有氧化性物質(zhì)。分液漏斗活塞玻璃表面不得涂油。析天平:力攪拌器或恒溫振蕩水浴:帶加熱和控溫功能。轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。吹儀。外分光光度計(jì)。取凈化振蕩器。功能渦旋振蕩器。速冷凍離心機(jī):轉(zhuǎn)速6000r/效液相色譜電噴霧離子源。19 樣制備將一定數(shù)量的樣品按要求經(jīng)過縮分、粉碎、均質(zhì)后,儲(chǔ)存于樣品瓶中,避光冷藏,盡快測定。樣處理注:處理過程應(yīng)避免紫外光照,盡可能避光操作。含淀粉樣品稱取2g(均質(zhì)處理的試樣于50入6水,渦旋1入12旋30s,再加入6旋300避光恒溫水浴振蕩30樣品組織較為緊密,可每隔5取出放入冷水浴降溫。注:一般皂化時(shí)間為30皂化液冷卻后,液面有浮油,需要加入適量氫氧化鉀溶液,并適當(dāng)延長皂化時(shí)間。淀粉樣品稱取2g(均質(zhì)處理的試樣于50入10水,放入恒溫振蕩器中,60避光恒溫振蕩30出放入冷水浴降溫,2旋30s,再加入6旋3001611 取向冷卻后的皂化液中加入20旋提取3000r/移上層清液到50入25微晃動(dòng)30次,在6000r/上層有機(jī)相備用?；瘜⒐枘z固相萃取柱依次用8備用液全部過柱,再用6+95)淋洗,用65+85)洗脫。洗脫液在40下氮?dú)獯蹈?旋30s,譜參考條件色譜參考條件列出如下:a) 長100或相當(dāng)者;b) 柱溫:40;c) 流動(dòng)相A:酸甲酸銨溶液;流動(dòng)相B:酸甲酸銨甲醇溶液;流動(dòng)相洗脫梯度見表2;d) 流速:e) 進(jìn)樣量:10L。表2 流動(dòng)相洗脫梯度時(shí)間動(dòng)相B%流速(mL/譜參考條件質(zhì)譜參考條件列出如下:a) 電離方式:b) 鞘氣溫度:375;c) 鞘氣流速:12L/01612 d) 噴嘴電壓:500V;e) 霧化器壓力:172f) 毛細(xì)管電壓:4500V;g) 干燥氣溫度:325;h) 干燥氣流速:10L/i) 多反應(yīng)監(jiān)測(式。錐孔電壓和碰撞能量見表3,3 維生素m/z)定性子離子(m/z)碰撞電壓m/z)準(zhǔn)曲線的制作分別將維生素維生素生素維生素生素生素品測定將待測樣液依次進(jìn)樣,得到待測物與內(nèi)標(biāo)物的峰面積比值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到測定液中維生素生素測樣液中的響應(yīng)值應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍內(nèi),0 分析結(jié)果的表述試樣中維生素生素)計(jì)算:X=Vf100m(3)式中:X 試樣中維生素維生素含量,單位為微克每百克(g/100g);根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得到的試樣中維生素維生素濃度,單位為微克每毫升(g/V定容體積,單位為毫升(f稀釋倍數(shù);100試樣中量以每100克計(jì)算的換算系數(shù);01613 m試樣的稱樣量,單位為克(g)。計(jì)算結(jié)果保留三位有效數(shù)字。注:如試樣中同時(shí)含有維生素生素1 精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的15%。22 其他當(dāng)取樣量為2生素00g,定量限為3g/100g;00g;00g。第四法 食品中維生素效液相色譜法23 原理試樣中的維生素淀粉試樣先用淀粉酶酶解)、提取、凈化、濃縮后,用正相高效液相色譜半制備,反相高效液相色譜紫外或二極管陣列檢測器檢測,內(nèi)標(biāo)法(或外標(biāo)法)定量。如測定維生素用維生素測定維生素用維生素4 試劑和材料除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純。水為6682規(guī)定的一級(jí)水。水乙醇(色譜純,經(jīng)檢驗(yàn)不含醛類物質(zhì),壞血酸(,615簡稱氧化鉀(己烷(油醚(沸程為3060。水硫酸鈉( 4)。醇:色譜純。粉酶:活力單位100U/氧化鉀溶液:50入50卻后儲(chǔ)存于聚乙烯瓶中,臨用前配制。己烷+1):量取8勻,超聲脫氣,備用。醇5+1):量取50勻,超聲脫氣,備用。01614 生素化醇(0純度98%,或經(jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。生素鈣化醇(11純度98%,或經(jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。生素色譜純無水乙醇溶解并定容至100其濃度約為100g/移至棕色試劑瓶中,于箱中密封保存,有效期3個(gè)月。臨用前用紫外分光光度法校正其濃度(校正方法參見附錄B)。生素色譜純無水乙醇溶解并定容至100其濃度約為100g/移至100箱中密封保存,有效期3個(gè)月。臨用前用紫外分光光度法校正其濃度(校正方法參見附錄B)。生素流動(dòng)相稀釋并定容至100效期1個(gè)月,準(zhǔn)確濃度按校正后的濃度折算。生素流動(dòng)相稀釋并定容至100效期3個(gè)月,準(zhǔn)確濃度按校正后的濃度折算。生素流動(dòng)相稀釋并定容至100確濃度按校正后的濃度折算。生素流動(dòng)相稀釋并定容至100確濃度按校正后的濃度折算。準(zhǔn)系列溶液的配制:用維生素甲醇定容至刻度混勻。用維生素甲醇定容至刻度,混勻。5 儀器和設(shè)備注:使用的所有器皿不得含有氧化性物質(zhì)。分液漏斗活塞玻璃表面不得涂油。析天平:力攪拌器:帶加熱、控溫功能。轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。吹儀。外分光光度計(jì)。取凈化振蕩器。制備正相高效液相色譜儀:帶紫外或二極管陣列檢測器,進(jìn)樣器配500相高效液相色譜分析儀:帶紫外或二極管陣列檢測器,進(jìn)樣器配10001615 26 樣制備將一定數(shù)量的樣品按要求經(jīng)過縮分、粉碎、均質(zhì)后,儲(chǔ)存于樣品瓶中,避光冷藏,盡快測定。樣處理處理過程應(yīng)避免紫外光照,盡可能避光操作。如樣品中只含有維生素用維生素只含有維生素用維生素則,用外標(biāo)法定量,但需要驗(yàn)證回收率能滿足檢測要求。含淀粉樣品稱取5g10g(均質(zhì)處理的固體試樣或50g(體樣品于150體試樣需加入200測定維生素維生素測定維生素維生素,勻。加入30入100加邊振搖,混勻后于恒溫磁力攪拌器上80回流皂化30化后立即用冷水冷卻至室溫。注:一般皂化時(shí)間為30皂化液冷卻后,液面有浮油,需要加入適量氫氧化鉀乙醇溶液,并適當(dāng)延長皂化時(shí)間。淀粉樣品稱取5g10g(均質(zhì)處理的固體試樣或50g(體樣品于150體試樣需加入約20測定維生素維生素測定維生素維生素1入60恒溫水浴振蕩30勻。加入3000加邊振搖,混勻后于恒溫磁力攪拌器上80回流皂化30化后立即用冷水冷卻至室溫。取將皂化液用30入50蕩萃取5下層溶液轉(zhuǎn)移至另一250入50并醚層。滌用約150需重復(fù)3次,直至將醚層洗至中性(可用去除下層水相?？s將洗滌后的醚層經(jīng)無水硫酸鈉(約3g)濾入250約15入蒸發(fā)瓶內(nèi),并將其接在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器或氣體濃縮儀上,于40水浴中減壓蒸餾或氣流濃縮,待瓶中醚剩下約2下蒸發(fā)瓶,氮吹至干,用正己烷定容至2化待測液。01616 制備正相高效液相色譜參考條件半制備正相高效液相色譜參考條件列出如下:a) 色譜柱:硅膠柱,柱長250徑5m,或具同等性能的色譜柱;b) 流動(dòng)相:環(huán)己烷+正己烷(1+1),入異丙醇;c) 流速:1mL/d) 波長:264nm;e) 柱溫:351;f) 進(jìn)樣體積:500L。402的氮吹儀上吹干。殘?jiān)?0該溶液100定維生素后將500據(jù)維生素試管置于40水浴氮?dú)獯蹈?渣振蕩溶解,即為維生素相液相色譜參考條件反相液相色譜參考條件列出如下:a) 色譜柱:長250徑5m,或具同等性能的色譜柱;b) 流動(dòng)相:甲醇+水=95+5;c) 流速:1mL/d) 檢測波長:264nm;e) 柱溫:351;f) 進(jìn)樣量:100L。準(zhǔn)曲線的制作分別將維生素到維生素兩者峰面積比為縱坐標(biāo),以維生素品測定吸取維生素到待測物與內(nèi)標(biāo)物的峰面積比值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到待測液中維生素維生素濃度。27 分析結(jié)果的表述試樣中維生素維生素含量按式(4)計(jì)算:X=Vf100m(4)01617 式中:X 試樣中維生素維生素含量,單位為微克每百克(g/100g);根據(jù)