【畢業(yè)學(xué)位論文】（Word原稿）馬鈴薯抗病毒親本育種價(jià)值及其家系主要性狀綜合評(píng)價(jià)蔬菜學(xué)碩士論文

I 密級(jí) ： 論文編號(hào)： 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 學(xué)位論文 馬鈴薯抗病毒親本育種價(jià)值及其家系 主要性狀綜合評(píng)價(jià) on of of in F on of of in 摘要 從國(guó)際馬鈴薯中心（ 進(jìn)的資源多適應(yīng)短日照的氣候條件，在我國(guó)長(zhǎng)日照條件下表現(xiàn)出一些不利性狀，但這些資源具有豐富的優(yōu)良基因并與國(guó)內(nèi)育種資源親緣關(guān)系較遠(yuǎn)，利用這些資源將有利于我國(guó)馬鈴薯育種資源改良并育成新品種。對(duì)這些資源進(jìn)行評(píng)價(jià)，對(duì)親本的育種價(jià)值、后代家系的綜合性狀評(píng)價(jià)，將為更好地利用這些資源提供理論依據(jù)。 本試驗(yàn)引進(jìn)了國(guó)際馬鈴薯中心的 24 個(gè)組合的 1440 個(gè)基因型并在國(guó)內(nèi)進(jìn)行了兩年兩點(diǎn)試驗(yàn)，在長(zhǎng)日照條件下通過(guò)對(duì)后代的病毒病抗性、單株產(chǎn)量、塊莖淀粉含量、商品薯率、炸片顏色等農(nóng)藝性狀的研究，評(píng)價(jià)了親本的育種價(jià)值，同時(shí)研究了馬鈴薯主 要性狀的相互關(guān)系和基因型與環(huán)境互作。經(jīng)親本和組合育種價(jià)值評(píng)價(jià)，篩選出了 13 個(gè)具有抗病毒利用價(jià)值的家系和 5 個(gè)抗病毒育種親本、 10 個(gè)具有產(chǎn)量、淀粉、商品薯率育種利用價(jià)值的家系。 基因型與環(huán)境互作研究結(jié)果表明：家系間的遺傳差異是造成表現(xiàn)型不同的主要因素；環(huán)境的作用對(duì)平均單塊薯重、單株薯塊數(shù)的表現(xiàn)有較大的影響；單株產(chǎn)量和炸片顏色在不同環(huán)境中的表現(xiàn)相對(duì)穩(wěn)定。在不考慮基 因型與環(huán)境互作時(shí)，易對(duì)基因型的表現(xiàn)產(chǎn)生誤判，在育種工作中利用多套家系進(jìn)行多地點(diǎn)育種是有意義的。 主成分分析結(jié)果表明：不同因子對(duì)方差貢獻(xiàn)率大小依次為商品因子（商品薯率、平均單塊薯重）產(chǎn)量因子（單株產(chǎn)量、單株薯塊數(shù)）病毒因子 (炸片顏色、卷葉感病率 )植株高度因子（植株高度）淀粉因子（淀粉含量）；對(duì)高產(chǎn)家系單株薯塊數(shù)估算后，可將平均單塊薯重、商品薯率合并到產(chǎn)量因子的選擇中來(lái)，田間只選擇單株產(chǎn)量和單株薯塊數(shù)。在育種工作中可以先選擇無(wú)病的單株，然后收獲時(shí)對(duì)無(wú)病單株的產(chǎn)量和單株薯塊數(shù)進(jìn)行選擇，最后在室內(nèi)對(duì)入選的材料 進(jìn)行淀粉含量、炸片顏色等的測(cè)定，從而獲得優(yōu)良的材料。 篩選出 1046 份優(yōu)良單株無(wú)性系，將進(jìn)一步利用于品種選育中。 關(guān)鍵詞： 馬鈴薯，育種價(jià)值，基因型與環(huán)境互作，主成分分析 of IP to It be to to by of be 440 4 at of In of 13 to 0 of by in of it be to in of It is to at in of to in , , of be in be in be by in of in 046 in 目錄 1 前言 1 鈴薯抗病毒病育種研究進(jìn)展 1 病毒病育種的意義 1 病毒病育種技術(shù) 2 國(guó) 馬鈴薯遺傳規(guī)律研究進(jìn)展 7 株性狀的遺傳規(guī)律 7 莖性狀的遺傳規(guī)律 8 鈴薯抗病、抗逆遺傳規(guī)律的研究 9 望 9 研究的目的和意義 10 2 材料與方法 11 料 11 試材料來(lái)源 11 試材料名稱 11 試材料介紹 12 法 13 驗(yàn)設(shè)計(jì) 13 驗(yàn)地點(diǎn) 13 系的獲得 13 田實(shí)驗(yàn)的種植與管理 14 V 查記載項(xiàng)目與標(biāo) 準(zhǔn) 14 分分析指標(biāo)的計(jì)算公式 15 析方法 16 3 結(jié)果與分析 17 系抗病毒病能力及親本抗病毒育種價(jià)值的評(píng)價(jià) 17 系抗病毒病能力的評(píng)價(jià) 17 合的育種潛力和親本的育種價(jià)值 21 組合的產(chǎn)量育種潛力 21 組合的淀粉育種潛力 23 組合的油炸食品加工育種潛力 各組合的商品薯率育種潛力 26 組合的綜合評(píng)價(jià) 26 本的育種價(jià)值評(píng)價(jià) 30 因型與環(huán)境的交互作用 31 家系性狀的主成分分析 34 4 問(wèn)題與討論 38 系抗病毒病能力及抗病毒病親本育種價(jià)值的評(píng)價(jià) 38 因型與環(huán)境交 互作用 38 成分分析 38 育種工作的指導(dǎo)意義 39 據(jù)的準(zhǔn)確性和完整性 39 續(xù)工作 40 5 結(jié)論 41 參考文獻(xiàn) 43 附錄 47 致謝 50 作者簡(jiǎn)歷 51 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所 前言 1 1前言 馬鈴薯是世界上繼小麥、玉米、水稻之后的第四大糧食作物，其單位面積和單位時(shí)間的產(chǎn)量高于其它作物。我國(guó)是世界第一大馬鈴薯生產(chǎn)國(guó)，據(jù)統(tǒng)計(jì)， 2003 年栽培面積為 470 多萬(wàn) 全球播種面積的 25%，占亞洲的 60%。馬鈴薯含有人體必需的多種氨基酸和維生素 C，大部分營(yíng)養(yǎng)成分遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其它蔬菜 ，并且具有產(chǎn)量高、生育期短、適應(yīng)性強(qiáng)、營(yíng)養(yǎng)豐富、用途廣泛等特點(diǎn)，是世界性重要的農(nóng)業(yè)資源和多種工業(yè)加工產(chǎn)品的原料。馬鈴薯病毒在植株體內(nèi)不斷增殖擴(kuò)大危害，使馬鈴薯植株矮小，葉片呈現(xiàn)花葉、皺縮、卷葉等現(xiàn)象，葉綠素受到破壞，光合生產(chǎn)率降低，塊莖變小或畸形，產(chǎn)量大幅度下降并影響馬鈴薯品質(zhì)，是影響馬鈴薯產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要因素之一，因此 解決馬鈴薯病毒病的危害是保證 馬鈴薯產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的必要條件。馬鈴薯 抗病毒育種能有效控制病毒對(duì)馬鈴薯的危害， 是 解決馬鈴薯病毒病危害、保證馬鈴薯產(chǎn)業(yè) 健康 發(fā)展的有效手段。 馬鈴薯受病毒侵染后發(fā)生退化，造成產(chǎn)量降低、品質(zhì)下降，每年世界上由馬鈴薯病毒 病 造成的減產(chǎn)至少為 20%。 20032004 年全國(guó)馬鈴薯產(chǎn)品質(zhì)量安全普查發(fā)現(xiàn)病毒病仍是造成脫毒種薯不合格的重要原因之一。危害馬鈴薯的病毒有 30 余種，其中在我國(guó)普遍存在而且危害嚴(yán)重的有 7種，見表 1金黎平等， 2002。 表 1 我國(guó)馬鈴薯主要病毒病及對(duì)產(chǎn)量造成的影響 to 毒 對(duì)產(chǎn)量造成的 影響 馬鈴薯卷葉病毒（ 40%60% 馬鈴薯 Y 病毒（ 50%左右 馬鈴薯 Y 病毒（ +馬鈴薯 A 病毒（ 80%左右 馬鈴薯 X 病毒（ 10%50% 馬鈴薯 A 病毒（ 與 合侵染造成嚴(yán)重危害 馬鈴薯 S 病毒（ 10%20% 馬鈴薯類病毒 0%35%嚴(yán)重時(shí) 60% 病毒在影響馬鈴薯產(chǎn)量的同時(shí)也影響其質(zhì)量，造成塊莖品質(zhì)下降，如高感 馬鈴薯塊莖薯肉中會(huì)有明顯的壞死組織；感 株所結(jié)塊莖細(xì)長(zhǎng)、兩端略尖、形同 紡錘； 一些株系造成在塊莖上產(chǎn)生環(huán)斑壞死或淡褐色環(huán)。馬鈴薯常規(guī)育種過(guò)程中，育成一個(gè)品種需要 810年，在此期間由于病毒侵染的影響，造成對(duì)品系的評(píng)價(jià)產(chǎn)生誤差，從而影響到育種工作效率。 莖尖脫毒組織培養(yǎng)技術(shù)使生產(chǎn)無(wú)病毒種薯成為可能，在嚴(yán)格的生產(chǎn)管理?xiàng)l件下，由脫毒苗可以生產(chǎn)無(wú)病毒種薯。但莖尖脫毒組織培養(yǎng)技術(shù)本身也有以下局限性： 1）成本高，需要脫毒組培設(shè)備、器具，獨(dú)立清潔的環(huán)境，而且對(duì)人員也有較高的要求。 2）受脫毒技術(shù)和病毒檢測(cè)技術(shù)的影響，經(jīng)檢測(cè)合格的脫毒苗未必真正沒有病毒，如脫毒苗帶病毒，病毒會(huì)在脫毒苗的繼 代過(guò)程中增殖，中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所 前言 2 造成脫毒苗的退化。 3）脫毒后的種薯易在栽培過(guò)程中受耕作措施及蚜蟲的侵染而重新感染病毒。4）脫毒易造成品種的變異，且在繼代過(guò)程中可能發(fā)生機(jī)械混雜。 5）受經(jīng)濟(jì)、認(rèn)知、良種繁育推廣體系等條件的影響，馬鈴薯脫毒種薯技術(shù)尚未全面應(yīng)用于生產(chǎn)。 馬鈴薯實(shí)生種子雖成本低廉且有摒除自身病毒的作用，但仍可傳播 馬鈴薯 T 病毒，同時(shí)產(chǎn)量低、產(chǎn)品質(zhì)量不一致，只適用于一些經(jīng)濟(jì)、交通落后，對(duì)馬鈴薯商品質(zhì)量要求不高的地區(qū)。 馬鈴薯組織培養(yǎng)莖尖脫毒技術(shù)和馬鈴薯實(shí)生種子的應(yīng)用雖可有效降低病毒的危害，但鑒于我國(guó)目前的馬鈴 薯種薯質(zhì)量水平及經(jīng)濟(jì)、認(rèn)知、良種繁育推廣體系等條件的影響，選育和種植抗病毒品種仍是目前減少病毒病危害較經(jīng)濟(jì)有效的途徑。 病毒病育種技術(shù) 抗病毒育種是為了獲得抗病毒的基因型并使其穩(wěn)定遺傳 。 自然界存在從二倍體到六倍體的各種倍性的馬鈴薯 ,在所有能夠結(jié)薯的種中約有 74%為二倍體，四倍體占 二倍體中普遍存在抗性基因，其中包括抗病毒基因，四倍體栽培種經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的自然選擇和人工選擇，某些品種也含有抗病毒基因，因此，就利用植物性抗源可分為常規(guī)育種和倍性育種。隨著生物技術(shù)的興起，可以人為的創(chuàng)造抗性資 源并運(yùn)用到抗病毒育種中來(lái)，稱其為生物工程育種。 縱觀現(xiàn)代各國(guó)的馬鈴薯育種，除了在規(guī)模和所應(yīng)用的技術(shù)略有差別外，雜交育種的基本方法幾乎沒有任何實(shí)質(zhì)性的改變，還是根據(jù)經(jīng)驗(yàn)和簡(jiǎn)單性狀遺傳，以及無(wú)性系的表現(xiàn)型來(lái)進(jìn)行多種方式的選擇，習(xí)慣上稱為常規(guī)育種 。有許多育種材料經(jīng)過(guò)深入的遺傳和應(yīng)用研究，證明具有抗病毒特性。在 1983 年出版的馬鈴薯品種資源編目中記載，有一批材料具有抗病毒病的特性，表 2列出其中部分材料 楊鴻祖等， 1983。利用這些材料與其它四倍體栽培種雜交，后代通過(guò)相應(yīng)的病毒選擇壓選擇 抗病毒病的后代，實(shí)現(xiàn)抗病毒目的基因的轉(zhuǎn)入，從而獲得抗病毒病的品系（種）。如春薯 2 號(hào)抗卷葉，由高原 7 號(hào)卡它丁育成，母本高原 7 號(hào)抗卷葉，耐束頂，父本卡它丁對(duì)輕花葉、重花葉、網(wǎng)紋壞死和卷葉均有較強(qiáng)的抵抗力。豐收白抗重花葉病毒，由小葉子疫不加育成，母本小葉子抗重花葉病毒，父本疫不加抗重花葉，不感皺縮花葉，較耐卷葉病毒。 一些遺傳規(guī)律的研究為抗病毒育種提供了高效的途徑，如尹江等在馬鈴薯抗 種的家系遺傳分析中指出：在抗 種中，應(yīng)選擇一般配合力負(fù)值高的材料作母本，特殊配合力負(fù)值高的材料作父本 尹江等 ， 2001。在抗性篩選方面，以連續(xù)多年種植的各品系 (種 )相鄰年度病毒病侵染率均值與病指增長(zhǎng)百分率均值的乘積 (作為主要評(píng)判指標(biāo)，以主要經(jīng)濟(jì)性狀和產(chǎn)量的相鄰年度遞變百分率代數(shù)和作為參考值，可對(duì)新育品種對(duì)病毒病的水平動(dòng)態(tài)抗性給予評(píng)判，以利提高早代選擇的準(zhǔn)確性，以期選出對(duì)病毒病水平動(dòng)態(tài)抗性較高的品種 孟兆軍等， 1999。在抗種中，栽培品種中對(duì) 個(gè)株系具有過(guò)敏性的類型較少，但許多品種具有受多基因控制的田間抗性，如燕子（ 育種實(shí)踐證明，利用燕子作為親本之一的組合 所獲得的雜交后代對(duì) 有較強(qiáng)的田間抗性。內(nèi)蒙古大學(xué)和內(nèi)蒙古自治區(qū)烏蘭察布盟農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所對(duì)燕子卡它丁組合的 75 株系 生苗進(jìn)行接種篩選，結(jié)果無(wú)病毒癥狀的 29 株，占總數(shù)的 1 個(gè)月后，對(duì)無(wú)癥狀的實(shí)生苗重復(fù)接種，仍有 個(gè)體對(duì) 有較高水平的中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所 前言 3 抗性 孫慧生， 2003。 表 2馬鈴薯品種資源編目中部分材料對(duì)病毒病的抗性 品種（品系）名稱 對(duì)病毒病的抗性 小葉子 抗 薯一號(hào) 抗 六一 抗 盟 691 抗束頂 豐收白 抗 農(nóng) 303 高抗花葉 北薯一號(hào) 高抗花葉 克新一號(hào) 高抗 雜 15 號(hào) 抗 峽 抗 薯 9 號(hào) 抗 薯二號(hào) 抗 薯一號(hào) 抗 束頂 內(nèi)薯二號(hào) 抗 百萬(wàn) 抗 瑪 抗 他丁 抗 北果 對(duì) 疫 疫不加 抗 畏他 抗 第斯栽培種遺傳變異類型較多，能夠分離出多種抗源，如對(duì) 病毒的抗性。國(guó)際馬鈴薯中心（ 二十世紀(jì) 80 年代對(duì)其保存的安第斯栽培種資源進(jìn)行了評(píng)估，表 3 列出了統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù) 孫慧生， 2003。二十世紀(jì) 60 年代前期 秘魯、玻利維亞及哥倫比亞等地廣泛搜集適應(yīng)短日照的安第斯亞種的許多類型，種植在長(zhǎng)日照條件下進(jìn)行輪回選擇，經(jīng)過(guò) 5 個(gè)輪次，選出適應(yīng)長(zhǎng)日照結(jié)薯的新型栽培種 孫慧生， 2003 。與普通栽培種相比，新型栽培種仍有許多不良性狀， 如植株高大、成熟期遲、地上分枝多、地下匍匐莖長(zhǎng)、單株塊莖數(shù)多而小、薯形不規(guī)則、芽眼深等，很難在常規(guī)育種中直接利用。為此，我國(guó)根據(jù)不同緯度、不同生態(tài)條件對(duì) 1974 年引進(jìn)的新型栽培種進(jìn)行了多次輪回選擇。經(jīng)過(guò)改良后的新型栽培種群體，與普通栽培種群體相比，在主要農(nóng)藝性狀上都十分相近，為直接利用創(chuàng)造了良好的條件。輪回選擇表明，在改良后的新型栽培種群體中，篩選出了一些高淀粉、高蛋白、高維 C、低還原糖的無(wú)性系，另外，在新型栽培種中普遍保持莖葉田間抗晚疫病的基礎(chǔ)上，又獲得了一批抗青枯病及主要病毒?。?無(wú)性系。近年來(lái)，一些單位利用選育出含有新型栽培種血緣的雜種無(wú)性系作親本，比直接利用新型栽培種作親本在育種中取得了更好的效果。在二十多年的時(shí)間里，利用新型栽培種共育成 19 個(gè)品種 陳伊里等， 2003，這些新品種均比當(dāng)?shù)刂髟云贩N增產(chǎn) 10%以上，中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所 前言 4 對(duì)晚疫病、青枯病、主要病毒病的抗性增強(qiáng)。選育出一些抗病毒病品種如中薯 4 號(hào)（抗 川芋 2 號(hào)（抗 克新 11 號(hào)（較抗 表 3 國(guó)際馬鈴薯中心對(duì)安第斯栽培種資源材料的評(píng)估 of . 價(jià)的性狀 參加評(píng)估材料數(shù)量 具有抗性基因的材料 數(shù)量 % 27 181 01 41 112 27 性育種 野生種和原始栽培種的資源相當(dāng)豐富，具有抗逆、抗病、低還原糖等許多優(yōu)良性狀，將它們的有利基因轉(zhuǎn)育到栽培種中，克服普通栽培種遺傳基礎(chǔ)狹窄的問(wèn)題，具有重要意義?？共《静〉幕驈V泛 存在于許多野生種和原始栽培種中，見表 4孫慧生， 2003。 表 4 部分對(duì)病毒病有抗性的種 病毒種類 種 . S. S. S. S. S S. S. . S. S. S. S. S. S. S. S. S. 自秘魯，有較好的抗性 )， S. S. 但野生種和原始栽培種大多是二倍體，由于胚乳平衡數(shù)不同與普通栽培種存在著雜交障礙，限制著二倍體資源的利用，通過(guò)倍性操作可以把二倍體資源中有利基因?qū)氲剿谋扼w中。 倍體水平 上病毒病抗性的遺傳改良 利用二倍體中篩選的“誘導(dǎo)者”作父本與普通栽培種雜交，誘導(dǎo)四倍體普通栽培品種孤雌生殖產(chǎn)生雙單倍體（ 2X），或通過(guò)普通栽培種花藥的離體培養(yǎng)，利用植物花粉潛在的全能性誘導(dǎo)單倍體產(chǎn)生雙單倍體（ 2X）。將獲得的這些雙單倍體材料與二倍體野生種和原始栽培種資源雜交，獲得二倍體種間雜種，并應(yīng)用輪回選擇、回交、復(fù)交等育種技術(shù)在二倍體水平上對(duì)群體進(jìn)行遺傳改良，富集更多的優(yōu)良基因，獲得免疫或高抗多種馬鈴薯病毒病的二倍體育種材料，并擴(kuò)大遺傳背景，加強(qiáng)雜種優(yōu)勢(shì)，獲得更優(yōu)異的馬鈴薯雜種群體。 用 2n 配子將二倍體的抗性轉(zhuǎn)育到四倍體中 在高等植物中， 2n 配子的發(fā)生是一種比較普遍的生物學(xué)現(xiàn)象，已經(jīng)先后在曼佗羅、玉米、大麥、馬鈴薯、苜蓿等作物中發(fā)現(xiàn) 2n 配子存在 郜剛等， 1998。這種現(xiàn)象由減數(shù)分裂行為異常造成，分裂后的配子具有與原體細(xì)胞相同的染色體數(shù)。利用這些二倍體產(chǎn)生的 2n 配子（ 2n=2x=24）與四倍體栽培種（其配子 n=2x=24）雜交，得到四倍體雜種后代，將二倍體的優(yōu)良性狀轉(zhuǎn)育到栽培中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所 前言 5 種四倍體中，在四倍體水平上利用雜交后代中的二倍體的優(yōu)良基因，并進(jìn)一步進(jìn)行遺傳改良，這稱為單向有性多倍化；也可用雙 向有性多倍化，即用二倍體產(chǎn)生 2n 卵子和 2n 花粉的能力，進(jìn)行二倍體間雜交產(chǎn)生四倍體后代，再用它與四倍體栽培種雜交，從而在四倍體水平上利用雜交后代中二倍體親本的優(yōu)良基因。 目前應(yīng)用于實(shí)際育種研究的 2n 配子材料大多從 S. S. S. . S. S. 種或這些種與普通四倍體雙單倍體的雜種中選育而成，其中最著名的材料有 77剛等， 1998。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)許多二倍體野生種和近緣栽培種以及他們與普通栽培種的雙單倍體雜交產(chǎn)生的 種可以產(chǎn)生 2n 配子 屈冬玉等， 1995，從 20 世紀(jì) 80 年代中期以來(lái)，中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所已篩選出了一批農(nóng)藝性狀優(yōu)良、穩(wěn)定地高頻率產(chǎn)生 2n 花粉的材料，包括 ，內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院通過(guò)選擇獲得了 4 份優(yōu)良的孤雌生殖誘導(dǎo)材料，并進(jìn)行4種的創(chuàng)新，實(shí)現(xiàn)了野生種優(yōu)良基因（抗 轉(zhuǎn)移 郜剛等， 1998。 倍體資源通過(guò)化學(xué)方法加倍獲得四倍體，與普通栽培種雜交轉(zhuǎn)育抗病基因。 黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院馬鈴薯研究所采用秋水仙素加倍的方法，加倍野生種 S. S. S. S. 將抗病基因轉(zhuǎn)育到四倍體栽培種中，并經(jīng) 3輪回選擇，選育出抗 料 40 份，抗 料 35 份 夏平， 2000。 物技術(shù)育種 因工程 P 基因的利用 1929 年， 現(xiàn)感染了溫和病毒株的植物能夠抵抗同種或相關(guān)的烈性病毒株的感染，這種現(xiàn)象叫做交叉保護(hù)作用。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)表達(dá)正鏈 毒外殼蛋白基因的轉(zhuǎn)基因植株中，也觀察到類似的保護(hù)作用，并自 1986 年來(lái)，病毒外殼蛋白介導(dǎo)的抗病性已成為植物抗病毒基因工程的一條成功途徑。 宋艷茹等將 殼蛋白基因通過(guò)致瘤農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化馬鈴薯品種 頭和克新 4號(hào)。試驗(yàn)結(jié)果表明轉(zhuǎn)基因馬鈴薯植株染色體上整合有 P 基因，并且轉(zhuǎn)基因馬鈴薯植株中殖情況較未轉(zhuǎn)錄基因的對(duì)照有所降低，同時(shí)轉(zhuǎn)基因馬鈴薯生長(zhǎng)發(fā)育正常， 部分植株單株產(chǎn)量高于未轉(zhuǎn)基因的馬鈴薯 宋艷茹等， 1996。 崔曉江等得到 3 個(gè)單價(jià)抗病毒植物表達(dá)載體，以 虎頭為供試品種，轉(zhuǎn)化后的馬鈴薯以 法檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)有些轉(zhuǎn)基因馬鈴薯只含有 2 個(gè) 因（ 甚至 1 個(gè)（ 虎頭的 3 價(jià)轉(zhuǎn)化率都在 20%左右 崔曉江等， 1994。 用缺損的復(fù)制酶基因介導(dǎo)的抗病性 研究表明，向植物體內(nèi)轉(zhuǎn)入缺損的病毒復(fù)制酶基因，表達(dá)出的無(wú)功能的缺損復(fù)制酶可以與有功能的復(fù)制酶相互競(jìng)爭(zhēng)，從而干擾病毒的正常復(fù)制。 以馬鈴 薯 Y 病毒中國(guó)分離株 ( 為模板獲得了 核內(nèi)含體 b(長(zhǎng) 隆 項(xiàng)瑜等， 1996。在對(duì)其進(jìn)行全序列分析的基礎(chǔ)上，構(gòu)建了 因全長(zhǎng)， 5端缺失 381 個(gè)堿基和 義 種不同形式高等植物表達(dá)載體。在土壤農(nóng)桿菌的介導(dǎo)下，轉(zhuǎn)化煙草生產(chǎn)品種 得了所有三種表達(dá)載體的轉(zhuǎn)基因植株。通過(guò)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)不同形式的 病毒表現(xiàn)不同程度的抗性。其中，以 5端缺失的 基因轉(zhuǎn)中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所 前言 6 化植株表現(xiàn)最好，從總共 20 個(gè)這類轉(zhuǎn)化株系中篩選到 4 個(gè) 株系至少在 100g種濃度下，表現(xiàn)完全的抗病效果。從總共 39 個(gè)全長(zhǎng) 因轉(zhuǎn)化株系中，僅有一個(gè)株系，在 100g攻毒接種下具有完全的抗病性。所有 33 個(gè) 因反義 轉(zhuǎn)化植株中，無(wú)一株系表現(xiàn)完全的抗病效果，但是有部分株系能不同程度地延緩或減輕發(fā)病程度，并有部分植株在發(fā)病后 50 d 左右有恢復(fù)健康的趨勢(shì)。 擾運(yùn)動(dòng)蛋白 病毒在植物體內(nèi)的傳播主要依賴于蛋白運(yùn)動(dòng)，運(yùn)動(dòng)蛋白可與胞間連絲相互作用，促進(jìn)病毒在細(xì)胞間的轉(zhuǎn)移。如果能夠干擾或阻礙運(yùn)動(dòng) 蛋白與胞間連絲的結(jié)合，就可以阻止病毒在植物體內(nèi)的擴(kuò)散，將已侵入植物體內(nèi)的病毒局限在最初的侵染部位，從而達(dá)到抗病毒的目的。 研究證明 趙慧等， 1999馬鈴薯 毒屬病毒基因組編碼的 白（蚜傳輔助因子）具有多種功能，在病毒生活史各個(gè)環(huán)節(jié)起重要作用。 白具有蛋白酶活性，作為蚜傳輔助因子參與病毒蚜傳過(guò)程，調(diào)節(jié)病毒在宿主體內(nèi)的轉(zhuǎn)移，并在病毒復(fù)制、宿主癥狀表達(dá)及增強(qiáng)異源病毒復(fù)制方面發(fā)揮作用。由此可根據(jù)其特性設(shè)計(jì)新的抗病毒策略。 反義 導(dǎo)的抗性 研究證明 用非翻譯的序列轉(zhuǎn)化植株也能產(chǎn)生抗性， 反義 化阻礙翻譯的進(jìn)行，導(dǎo)致基因產(chǎn)物減少。馬鈴薯 正鏈 毒，基因組全長(zhǎng) 個(gè)基因組分為 5端編碼區(qū)和 3端編碼區(qū)，中間一段為長(zhǎng) 197非編碼區(qū)，稱為基因隔區(qū) 麗江等 董麗江等， 1996合成克隆 S 序列 正向和反向兩種方式分別構(gòu)建到植物轉(zhuǎn)化載體 ，轉(zhuǎn)化了馬鈴薯獲得轉(zhuǎn)基因植株，并以帶毒桃蚜接種測(cè)試。實(shí)驗(yàn)表明，表達(dá) 正義和反義的轉(zhuǎn)基因植株，接種病毒后無(wú)癥狀，或癥狀較輕。用 定轉(zhuǎn)基 因植株中 度，均較未轉(zhuǎn)基因?qū)φ罩仓甑汀１磉_(dá)正義 轉(zhuǎn)基因植株 度降低 43%表達(dá)反義 轉(zhuǎn)基因