革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌抗生素耐藥檢測(cè)課件

1、革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌抗生素耐藥檢測(cè)1 抗生素耐藥的檢測(cè)和報(bào)告抗生素耐藥的檢測(cè)和報(bào)告 （MRSA，VISA，VRSA，VRE，肺炎鏈，肺炎鏈 球菌）球菌） Janet Hindler, MCLS MT(ASCP) UCLA Medical Center Los Angeles, California 革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌抗生素耐藥檢測(cè)2 革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌抗生素耐藥檢測(cè)3 金葡菌中mecA介導(dǎo)的苯唑西林耐藥檢測(cè) 表型試驗(yàn)表型試驗(yàn) 紙片擴(kuò)散法或紙片擴(kuò)散法或MIC法法 頭孢西丁為替代物頭孢西丁為替代物 報(bào)告為苯唑西林的結(jié)果報(bào)告為苯唑西林的結(jié)果,不是頭孢西丁不是頭孢西丁 苯唑西林苯唑西林 苯唑西林苯唑西林-鹽平板篩選

2、金葡菌鹽平板篩選金葡菌 基因或基因產(chǎn)物的檢測(cè)基因或基因產(chǎn)物的檢測(cè) 基因基因=mecA 基因產(chǎn)物基因產(chǎn)物=青霉素結(jié)合蛋白青霉素結(jié)合蛋白(PBP) 2a 革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌抗生素耐藥檢測(cè)4 金葡菌和路登葡萄球菌的解釋標(biāo)準(zhǔn) 菌菌紙片含量紙片含量 抑菌圈抑菌圈 (mm)MIC (g/ml) SIRSIR 金葡菌金葡菌苯唑西林苯唑西林(1 g) 1311-12102-4 路登葡萄球菌路登葡萄球菌苯唑西林苯唑西林(1 g) -2-4 金葡菌金葡菌 borderline oxacillin resistance is rare in S. aureus and has not been reported in

3、CoNS. 用頭孢西丁試驗(yàn)可能會(huì)漏檢苯唑西林邊介耐藥金葡菌；苯用頭孢西丁試驗(yàn)可能會(huì)漏檢苯唑西林邊介耐藥金葡菌；苯 唑西林邊介耐藥在金葡菌中很少見，在凝固酶陰性葡萄球唑西林邊介耐藥在金葡菌中很少見，在凝固酶陰性葡萄球 菌中還未報(bào)道。菌中還未報(bào)道。 Borderline oxacillin resistant S. aureus may not be clinically significant. 苯唑西林 邊介耐藥的金葡菌可能沒有臨床意義。 VISA are often slow growing, may have colonies with morphology inconsistent wi

4、th S. aureus and may therefore be easily missed. VISA常生長(zhǎng)緩慢且菌落常生長(zhǎng)緩慢且菌落 形態(tài)與金葡菌不一致，易被漏檢。形態(tài)與金葡菌不一致，易被漏檢。 革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌抗生素耐藥檢測(cè)34 Staphylococcus - Summary (2)葡 萄球菌-總結(jié)（2） VRSA are uncommon (9 to date in USA) and are likely to be detected with most AST systems.VRSA不常見（美國(guó)至今報(bào)道常見（美國(guó)至今報(bào)道9例），大例），大 多數(shù)藥敏系統(tǒng)均可檢測(cè)出。多數(shù)藥敏系統(tǒng)均可

5、檢測(cè)出。 There are currently no CLSI or other standard recommendations for testing for hVISA.目前沒有目前沒有CLSI或其他標(biāo)準(zhǔn)推薦來檢測(cè)或其他標(biāo)準(zhǔn)推薦來檢測(cè)hVISA。 Infections due to MRSA with vancomycin susceptible MICs of 2 g/ml may require higher doses of vancomycin or use of alternative agents.由萬古霉萬古霉 素素MIC為為2 g/ml 的的MRSA引起的感染可能需要更

6、引起的感染可能需要更 高劑量的萬古霉素進(jìn)行治療或使用其他藥物。高劑量的萬古霉素進(jìn)行治療或使用其他藥物。 Vancomycin disk diffusion test should only be used to rule out VRSA; it cannot distinguish VISA from VSSA.萬古霉素紙片擴(kuò)散法試驗(yàn)萬古霉素紙片擴(kuò)散法試驗(yàn) 只能用于篩除只能用于篩除VRSA；它不能區(qū)分；它不能區(qū)分VISA和和VSSA。 革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌抗生素耐藥檢測(cè)35 Staphylococcus - Summary (3)葡 萄球菌-總結(jié)（3） Erythromycin-R and cli

7、ndamycin-S staphylococci should NOT be reported as clindamycin-S without performance of a test for inducible clindamycin resistance (e.g., D zone test).對(duì)于紅對(duì)于紅 霉素耐藥且克林霉素敏感的葡萄球菌，若未進(jìn)行誘導(dǎo)性克林霉素耐霉素耐藥且克林霉素敏感的葡萄球菌，若未進(jìn)行誘導(dǎo)性克林霉素耐 藥試驗(yàn)（如藥試驗(yàn)（如D試驗(yàn)），不能報(bào)告克林霉素敏感。試驗(yàn)），不能報(bào)告克林霉素敏感。 Oxacillin disk diffusion test was elimin

8、ated for CoNS in 2009. 在在2009年中，苯唑年中，苯唑 西林紙片擴(kuò)散法試驗(yàn)不能用于檢測(cè)凝固酶陰性葡萄球菌。西林紙片擴(kuò)散法試驗(yàn)不能用于檢測(cè)凝固酶陰性葡萄球菌。 Oxacillin MIC tests work well for S. epidermidis but can overcall oxacillin-R in other CoNS that lack mecA. The cefoxitin disk diffusion test is better. 苯唑西林苯唑西林MIC試驗(yàn)適用于試驗(yàn)適用于 表皮葡萄球菌但可能高估了其他表皮葡萄球菌但可能高估了其他mecA陰性

9、凝固酶陰性葡陰性凝固酶陰性葡 萄球菌的苯唑西林耐藥性。比較而言，頭孢西丁紙片擴(kuò)萄球菌的苯唑西林耐藥性。比較而言，頭孢西丁紙片擴(kuò) 散法更好。散法更好。 S. epidermidis is the most common species of CoNS causing serious infections.表皮葡表皮葡 萄球菌是引起嚴(yán)重感染的最常見凝固酶陰性葡萄萄球菌是引起嚴(yán)重感染的最常見凝固酶陰性葡萄 球菌。球菌。 革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌抗生素耐藥檢測(cè)36 Staphylococcus - Summary (4)葡 萄球菌-總結(jié)（4） Most S. lugdunensis are mecA negat

10、ive and more than 75% are -lactamase negative.大部分路登葡萄球菌 mecA陰性且75%以上菌株不產(chǎn)-內(nèi)酰胺酶。 S. saprophyticus are predictably susceptible to drugs commonly used to treat UTIs; susceptibility testing of S. saprophyticus from urine is not needed. 腐生葡萄球菌 對(duì)常用的治療尿路感染藥物是可預(yù)測(cè)的敏感；尿分離的 腐生葡萄球菌不必做藥敏試驗(yàn)。 Species of CoNS other

11、than S. saprophyticus rarely cause UTIs.除了腐生葡萄球菌，其他凝固酶除了腐生葡萄球菌，其他凝固酶 陰性葡萄球菌很少引起尿路感染。陰性葡萄球菌很少引起尿路感染。 革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌抗生素耐藥檢測(cè)37 六.Enterococcus spp.腸球菌 心內(nèi)膜炎心內(nèi)膜炎 青霉素青霉素 或氨芐西林或氨芐西林 萬古霉素萬古霉素 + 慶大霉素慶大霉素 + 慶大霉素慶大霉素 不復(fù)雜的不復(fù)雜的 氨芐西林或阿莫西林氨芐西林或阿莫西林 呋喃妥因呋喃妥因; 尿路感染尿路感染 磷霉素磷霉素 首選藥物首選藥物 替代藥物替代藥物 The Sanford Guide to Antimicro

12、bial Therapy. 39th ed. 2009 革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌抗生素耐藥檢測(cè)38 苯唑西林紙片作為檢測(cè)肺炎鏈球菌對(duì)青霉素敏感性的替代 紙片 革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌抗生素耐藥檢測(cè)39 什么時(shí)候需測(cè)定青霉素的MIC？- 對(duì)腦脊液菌株需盡快檢測(cè)對(duì)腦脊液菌株需盡快檢測(cè) - 當(dāng)苯唑西林抑菌圈當(dāng)苯唑西林抑菌圈19 mm 假如苯唑西林抑菌圈19 mm, 可以 報(bào)告青霉素嗎？ 不，苯唑西林抑菌圈不，苯唑西林抑菌圈19 mm時(shí)，青霉素的時(shí)，青霉素的MIC可能位可能位 于敏感，中介或耐藥區(qū)間，所以需加做青霉素于敏感，中介或耐藥區(qū)間，所以需加做青霉素MIC實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)。 我們需要測(cè)定苯唑西林MIC嗎？不，苯唑西林紙片

13、擴(kuò)散法是用來預(yù)測(cè)青霉素敏感性的，不，苯唑西林紙片擴(kuò)散法是用來預(yù)測(cè)青霉素敏感性的， 但苯唑西林但苯唑西林MIC無價(jià)值。無價(jià)值。 如果苯唑西林肺炎鏈球菌 ATCC49619的抑菌圈直徑遠(yuǎn)大于可 接受范圍，最有可能是什么原因？ - 接種物太老接種物太老 - 接種物沒有標(biāo)準(zhǔn)化接種物沒有標(biāo)準(zhǔn)化 - 接種物在液體稀釋液中放置太久導(dǎo)致自溶和存活細(xì)接種物在液體稀釋液中放置太久導(dǎo)致自溶和存活細(xì) 菌數(shù)量的減少。菌數(shù)量的減少。 一些問題一些問題&解答解答 肺炎鏈球菌和青霉素肺炎鏈球菌和青霉素 革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌抗生素耐藥檢測(cè)40 腸球菌腸球菌/肺炎鏈球菌總結(jié)（肺炎鏈球菌總結(jié)（1） 檢測(cè)高水平氨基糖苷類藥物耐藥對(duì)腸球菌 感染（如心內(nèi)膜炎）的聯(lián)合治療是很有幫 助的。 腸球菌高水平慶大霉素耐藥提示菌株對(duì)妥 布霉素和阿米卡星也高水平耐藥。 糞腸球菌對(duì)氨芐西林和青霉素“敏感”； 多數(shù)屎腸球菌對(duì)這些藥“耐藥”。 革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌抗生素耐藥檢測(cè)41 腸球菌腸球菌/肺炎鏈球菌總結(jié)（肺炎鏈球菌總結(jié)（2