醫(yī)院感染管理科工作制度

1、第六章 醫(yī)院感染管理科工作規(guī)程醫(yī)院感染管理科是醫(yī)院感染控制的重點(diǎn)科室，規(guī)范的操作規(guī)程是做好醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)、控制、 管理工作的基礎(chǔ)第一節(jié) 醫(yī)院感染病例監(jiān)測(cè)規(guī)程一、感染病例的資料收集1、每日到各病區(qū)詢問(wèn)了解使用抗菌藥物及發(fā)熱病人的情況，追蹤了解發(fā)熱和使用抗菌藥物原因，對(duì)可疑醫(yī)院感染病例進(jìn)行調(diào)查取證。2、每日到臨檢中心收集了解申請(qǐng)細(xì)菌培養(yǎng)病例， 對(duì)可疑醫(yī)院感染病例進(jìn)行調(diào)查取證， 對(duì) 多重耐藥病例， 根據(jù)具體情況制定相應(yīng)的隔離和消毒措施， 協(xié)助臨床醫(yī)師有效控制院 內(nèi)耐藥菌株交叉感染。3、查看住院病歷，從入院診斷、確定診斷、感染情況、病程、細(xì)菌培養(yǎng)及輔助檢查情況 等幾方面了解有無(wú)醫(yī)院感染的發(fā)生。4、發(fā)現(xiàn)可

2、疑醫(yī)院感染病例和臨床醫(yī)師共同探討， 意見(jiàn)不統(tǒng)一時(shí)， 由醫(yī)院感染管理小組討 論決定，一旦確定為醫(yī)院感染，立即采取相應(yīng)措施并填寫(xiě)醫(yī)院感染病例登記表，有效 控制醫(yī)院交叉感染的發(fā)生。5、監(jiān)督臨床醫(yī)師填寫(xiě)醫(yī)院感染病例登記本， 以便臨床科室及時(shí)了解本科室的醫(yī)院感染動(dòng) 態(tài)。6、監(jiān)督臨床醫(yī)師抗菌藥物使用情況，促進(jìn)臨床科室合理使用抗菌藥物。二、監(jiān)測(cè)資料匯總及反饋1、每月對(duì)醫(yī)院感染病例資料進(jìn)行分析匯總， 總結(jié)全院及各科室醫(yī)院感染發(fā)生率、 部位發(fā) 病率、細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性情況、病原菌藥物敏感情況。2、每月 25 日前將醫(yī)院感染病例匯總資料上報(bào)科主任和院長(zhǎng)。3、每季度第一個(gè)月 20 日前將醫(yī)院感染病例上報(bào)衛(wèi)生部全國(guó)醫(yī)院感染

3、監(jiān)測(cè)網(wǎng)。4、每季度對(duì)醫(yī)院感染病例資料進(jìn)行分析匯總，總結(jié)全院及各科室醫(yī)院感染發(fā)生率、 部位發(fā)病率、細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性情況、病原菌藥物敏感情況，并將匯總結(jié)果以院感通訊或其他 方式通報(bào)全院各科室，使其及時(shí)了解醫(yī)院感染動(dòng)態(tài)。第二節(jié) 醫(yī)院感染流行趨勢(shì)調(diào)研程序 醫(yī)院感染多為散發(fā)型，有時(shí)出現(xiàn)爆發(fā)流行。暴發(fā)是指在短時(shí)間內(nèi)某一病人群體中（醫(yī) 院、科室）突然發(fā)生數(shù)例（ 3 例以上）同種同源病原體引起的感染，也稱病例聚集性發(fā)生。 暴發(fā)是醫(yī)院感染流行的一種方式。無(wú)論散發(fā)還是爆發(fā)，進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查非常重要。 一、暴發(fā)的調(diào)查目的1、及時(shí)發(fā)現(xiàn)暴發(fā)的原因，以便采取有效措施，控制疾病的蔓延。2、確證暴發(fā)是否發(fā)生3、對(duì)調(diào)查暴發(fā)的結(jié)果加

4、以分析，查明引起暴發(fā)的原因，傳播途徑并檢驗(yàn)控制措施效果， 總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，防止類(lèi)似事件再次發(fā)生。二、調(diào)查方法 調(diào)查暴發(fā)的基本原則是邊調(diào)查邊采取控制措施。1、深入現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行初步調(diào)查 ，了解基本感染情況，以便及時(shí)向醫(yī)院感染管理委員會(huì)報(bào)告病 例的分布特征。（1）發(fā)生醫(yī)院感染的時(shí)間。（2）發(fā)生醫(yī)院感染的范圍和時(shí)間，具體到各科室（可以提示病例的聚集現(xiàn)象） 。（3）發(fā)生醫(yī)院感染的人群特點(diǎn)，包括年齡、性別、習(xí)慣、疾病類(lèi)型、免疫力、抗菌藥物 或免疫抑制劑的使用情況、暴露因素、與他人和環(huán)境的接觸機(jī)會(huì)等。2、采集標(biāo)本，積極查找感染源。兌換病的病人、接觸者、可疑傳染源、環(huán)境物品、醫(yī)務(wù) 人員及陪護(hù)人員等，進(jìn)行病原學(xué)檢驗(yàn)。3、

5、核實(shí)診斷，證實(shí)暴發(fā)。醫(yī)院感染管理專職人員與臨床醫(yī)學(xué)專家一起，根據(jù)流行病學(xué)資 料、實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)及其他輔助檢查結(jié)果，對(duì)可疑感染病例進(jìn)行確診，并計(jì)算其罹患者，若罹患率大于該科室或病區(qū)以往的發(fā)病率，則認(rèn)為有某病的流行或暴發(fā)。 罹患率：是一種特殊的發(fā)病率，多用在暴發(fā)流行中，一般一百以分率表示。罹患率（%）=某時(shí)期發(fā)生某種感染病人數(shù)（觀察期間新發(fā)病例數(shù)）X=100%同時(shí)期處于危險(xiǎn)中病人數(shù)（觀察期間的暴露人數(shù)）4、提出初步控制措施（1）根據(jù)初步調(diào)查結(jié)果，采取必要的消毒隔離措施。（2）對(duì)病人做適當(dāng)治療，需要隔離的病人及時(shí)隔離，必要時(shí)暫停接受病人。5、 根據(jù)分布特征提出假設(shè)根據(jù)調(diào)查所得的分布特征，提出導(dǎo)致感染的的

6、可能原因，在 提出假設(shè)時(shí)，不僅要說(shuō)明某些病人為什么發(fā)生醫(yī)院感染，還應(yīng)說(shuō)明其他病人為什么沒(méi) 有發(fā)生醫(yī)院感染。6、深入調(diào)查 調(diào)查的方法多種多樣，主要根據(jù)暴露的接觸史進(jìn)行調(diào)查，例如按暴露因素 來(lái)分組進(jìn)行調(diào)查，分析暴露組和非暴露組的罹患率以及發(fā)病組與對(duì)照的暴露史的比例。 通過(guò)深入調(diào)查，以查明傳染源（感染源和儲(chǔ)菌所）和傳播途徑，從而采取有效的控制 措施。常用的調(diào)查方法包括：（1） 病例對(duì)照研究：將醫(yī)院感染的病例組與未感染的對(duì)照進(jìn)行感染情況的比較，將比較的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，如果兩組之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可初步確定感染的原因。具體步驟如下。1）確定發(fā)生醫(yī)院感染的危險(xiǎn)因素。2）按照醫(yī)院感染診斷標(biāo)準(zhǔn)確定發(fā)生醫(yī)

7、院感染的病例。3）選擇對(duì)照人群：在未發(fā)生醫(yī)院感染的人群中找出與發(fā)生醫(yī)院感染的病例在非危險(xiǎn)因素方面盡可能一致的病例，病例組合對(duì)照組的人數(shù)比例為1:1或1:2，最多1:4,如果是感染暴發(fā)，可以設(shè)兩個(gè)對(duì)照組，第一個(gè)對(duì)照組，取在爆發(fā)前后住院而未受到感染的病 人。第二個(gè)對(duì)照組，取暴發(fā)期間未受到感染的病人。4）配比樣本：要求每例發(fā)生醫(yī)院感染的病人與一例或一例以上未發(fā)生醫(yī)院感染的病人， 按照特定的配比特性配對(duì)，須遵循隨機(jī)化原則。5）收集統(tǒng)計(jì)醫(yī)院感染病例的對(duì)照組病例資料，進(jìn)行研究分析，得出結(jié)論。（2）隊(duì)列研究：最常用的方法是橫斷面研究，又稱現(xiàn)況研究，是隊(duì)列研究的一種。在醫(yī)院感染發(fā)生的某一時(shí)點(diǎn)或在短暫時(shí)間內(nèi)研究

8、一些因素與醫(yī)院感染之間的關(guān)系。通過(guò)分析醫(yī)院感染在時(shí)間、地點(diǎn)、人群中的分布，闡明發(fā)生醫(yī)院感染的頻率的特點(diǎn)。發(fā)病率（%）=（特定的一段時(shí)間內(nèi)）發(fā)生感染的病人數(shù)X100%（特定的一段時(shí)間內(nèi)）受到感染威脅的病人數(shù)時(shí)點(diǎn)患病率（%）=某時(shí)點(diǎn)（某日的 24h內(nèi)）發(fā)生感染的新舊病人數(shù) X100%同時(shí)點(diǎn)內(nèi)的住院人數(shù)期間患病率（%）=某期間（周、月、年）發(fā)生感染的新舊病人數(shù)X100%同期間內(nèi)的住院人數(shù)（3）前瞻性研究： 對(duì)發(fā)生某種或某部位感染的特定人群進(jìn)行一定時(shí)間的隨訪觀察， 去的 完整可靠的資料可采用這種方法。 對(duì)一組暴露于某因素的人群進(jìn)行前瞻性觀察， 并 設(shè)有未暴露于該因素的人群組成對(duì)照組， 經(jīng)過(guò)一定的時(shí)間后

9、， 進(jìn)行兩組人群發(fā)病率 的比較， 得出他們之間發(fā)病率的差異， 優(yōu)點(diǎn)是可以獲得第一資料， 資料的偏差行小。（4）說(shuō)明1）調(diào)查結(jié)果是說(shuō)明感染與某種因素有聯(lián)系，但不一定是病因。2）不能認(rèn)為每一個(gè)感染病人都有引起疾病的暴露因素。3）以上僅僅是醫(yī)院感染流行調(diào)查研究的一些主要的辦法，具體研究方法需根據(jù)具體情而定。4）對(duì)培養(yǎng)出的微生物進(jìn)行分型，如細(xì)菌按耐藥譜分型、細(xì)菌素分型、嗜菌性分型、血清 學(xué)分型、質(zhì)粒分型及核酸指紋分型等。三、爆發(fā)調(diào)查結(jié)果的分析（一）描述病例的分布1、地區(qū)分布 按科室（病區(qū)）或病室，外科可按手術(shù)室等來(lái)分析，觀察病例是否集中于 某地方，計(jì)算并比較不同單位的罹患率。2、人群分布 主要是計(jì)算和

10、比較有無(wú)暴露史的兩組病人的罹患率，例如外科可按不同的 手術(shù)醫(yī)生或某一操作來(lái)描述人群分布3、時(shí)間分布 根據(jù)病例發(fā)生的情況計(jì)算單位時(shí)間內(nèi)的發(fā)病人的罹患率，單位時(shí)間可以小 時(shí)、天、月來(lái)計(jì)算，可繪制成直條圖。（二）暴發(fā)因素的分析 根據(jù)上述分析和比較，來(lái)推測(cè)可能的傳染源、傳播途徑或因素，結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果及采 取措施的效果作出綜合判斷四、完善控制方案 醫(yī)院感染管理委員會(huì)保證感染控制工作中所需的財(cái)力、物力和人力的支持（成立應(yīng)急領(lǐng)導(dǎo)小組）。醫(yī)院感染管理科監(jiān)督執(zhí)行控制方案的實(shí)施。五、追蹤監(jiān)測(cè) 醫(yī)院感染管理科檢驗(yàn)組檢驗(yàn)控制效果，追蹤調(diào)查有無(wú)再發(fā)病例，并評(píng)價(jià)控制措施。六、結(jié)論 寫(xiě)出調(diào)查報(bào)告，總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，防止類(lèi)似事件

11、再次發(fā)生。1、將調(diào)查結(jié)果反饋相應(yīng)科室和醫(yī)院感染管理委員會(huì)。2、根據(jù)感染聚集發(fā)生事件提出醫(yī)院感染控制的長(zhǎng)效措施3、醫(yī)院感染管理委員會(huì)根據(jù)調(diào)查報(bào)告和醫(yī)院感染控制方案組織討論，以便健全制度，加 強(qiáng)培訓(xùn)，改善醫(yī)院硬件條件等。4、將總結(jié)報(bào)告記錄歸檔。第三節(jié) 消毒滅菌效果檢驗(yàn)操作常規(guī) 一、空氣微生物污染采樣及檢測(cè)方法（一）采樣時(shí)間 選擇消毒處理后并進(jìn)行醫(yī)療活動(dòng)之前采樣。（二）采樣高度與地面垂直高度 80150cm（三）布點(diǎn)方法室內(nèi)面積w 30m2，設(shè)一條對(duì)角線上取 3點(diǎn)，即中心一點(diǎn)、兩端各距墻1m處各取一點(diǎn)；室內(nèi)面積30m2，設(shè)東、西、南、北、中 5點(diǎn)，其中東、西、南、北點(diǎn)均距墻1m。（四）采樣方法用直徑

12、為9cm的普通營(yíng)養(yǎng) 平板放在室內(nèi)各采點(diǎn)，將平板蓋打開(kāi)，扣放于平皿旁暴露 5min , 蓋好立即送檢培養(yǎng)（五）細(xì)菌菌落總數(shù)計(jì)算方法50000N空氣細(xì)菌菌落總數(shù)（cfu/m ）=AT式中；A 平板面積，cm2T 平板暴露時(shí)間，min;N 平板菌落數(shù)，cfu/平皿。二、層流手術(shù)室空氣污染采樣及檢測(cè)方法（一）層流手術(shù)室常規(guī)空氣采樣及檢驗(yàn)方法參照中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（GB15982 1995）1、采樣時(shí)間 選擇消毒處理后并進(jìn)行醫(yī)療活動(dòng)之前采樣。2、 采樣高度 采樣點(diǎn)可布置在地面垂直高度80150cm的高度上。3、 采樣方法用直徑為9cm的普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平皿放在室內(nèi)各采樣點(diǎn)，將平皿蓋打開(kāi)，扣放 于平皿旁暴

13、露5min，蓋好立即置于 37C培養(yǎng)箱，培養(yǎng) 48h,然后計(jì)數(shù)生長(zhǎng)的菌落數(shù)。 布點(diǎn)方法如圖2-6-1所示O西O中O東4、結(jié)果報(bào)告 層流潔凈手術(shù)室w 10cfu/m5、檢測(cè)時(shí)間每月一次二、物體表面微生物污染采樣及檢測(cè)方法（一）采樣時(shí)間選擇消毒處理后4h內(nèi)進(jìn)行采樣（二）采樣面積被采表面v 100cm2，取全部表面；被采面積 100cm2，取100cn2（三）采樣方法用5cm X 5cm的標(biāo)準(zhǔn)滅菌規(guī)格板，放在被檢物體表面，用浸有無(wú)菌生理鹽水采樣液的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返各涂抹5次，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)棉拭子，連續(xù)采樣14各規(guī)格板面積，剪去手接觸部分，將棉拭子放入裝有10ml采樣液的試管中送檢。門(mén)把手等

14、小型物體則采用棉拭子直接涂抹物體表面的方法采樣。（四）檢測(cè)方法將采樣管在混均器上震蕩 20s或用力振打80次，用無(wú)菌吸管吸取1.0ml待檢樣品接種于 滅菌平皿，每一樣本接種 2個(gè)平皿，內(nèi)加入 4548C的普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂 1518ml，邊傾注邊 搖均，待瓊脂凝固，置 36 1C恒溫箱培養(yǎng)48h，計(jì)數(shù)菌落數(shù)。（四）結(jié)果計(jì)算平皿上菌落的平均數(shù)X采樣液稀釋倍數(shù)物體表面細(xì)菌菌落總數(shù)（cfu/cm 2）=采樣面積四、醫(yī)護(hù)人員手微生物采樣及檢測(cè)方法（一）采樣時(shí)間在接觸病人、從事醫(yī)療活動(dòng)前進(jìn)行采樣（二）采樣面積及方法被檢人五指并攏，將浸有無(wú)菌生理鹽水采樣液的棉拭子一支在雙手指曲面從指根到指端 來(lái)回涂擦各兩次（一

15、只手涂擦面積約30cm2 ）并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)采樣棉拭子，剪去手接觸部位，將棉拭子放入裝有10ml采樣液的試管內(nèi)送檢。采樣面積按平方厘米（cm2）計(jì)算。（三）檢測(cè)方法將采樣管在混勻器上震蕩20s或用力振打80次，用無(wú)菌吸管吸取1.0ml待檢樣品接種于滅菌平皿，每一樣本接種2個(gè)平皿，內(nèi)加入已滅菌的 45C 48C的普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂 1518ml,邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，置36 1C溫箱培養(yǎng)48h，計(jì)數(shù)菌落數(shù)。（四）結(jié)果計(jì)數(shù)平皿上菌落的平均數(shù)X采樣液稀釋倍數(shù)手細(xì)菌菌落總數(shù)（cfu/cm 2）=30 X 2五、沙門(mén)菌污染檢測(cè)（一）采樣方法對(duì)物體表面采樣時(shí)，用浸有滅菌生理鹽水的棉拭子進(jìn)行涂抹采樣，采樣面積不限，

16、但 每件樣品不得小于100cm2;對(duì)醫(yī)護(hù)人員手采樣時(shí)，用浸有滅菌生理鹽水的棉拭子在10個(gè)手指每個(gè)掌面往返涂抹采樣一次。采樣完畢后，將棉拭子放入膽鹽乳糖采樣管， 帶回實(shí)驗(yàn)室。（二）檢驗(yàn)程序（三）將裝有采樣棉拭子的膽鹽乳糖放入37C恒溫箱培養(yǎng)1824小時(shí)，然后接種ss或酸性亞甲藍(lán)瓊脂平板，置于37 C恒溫箱培養(yǎng)1824小時(shí)，挑去無(wú)色透明或半透明、圓形、邊緣整齊、表面光滑、濕潤(rùn)菌落接種三糖鐵瓊脂斜面培養(yǎng)基中， 置于37C恒溫箱中培養(yǎng)1824h后挑取5個(gè)以上的可疑病原菌菌落，經(jīng)細(xì)菌檢定儀鑒定。六、壓力蒸汽滅菌器滅菌效果檢測(cè)（一）檢測(cè)用試劑1、 2%溴甲酚紫乙醇溶液，取溴甲酚紫2.0g，溶于100ml9

17、5%乙醇中。2、 溴甲酚紫蛋白胨水培養(yǎng)既配制，蛋白胨10.0g，葡萄糖5.0g，溶于1000ml蒸餾水中，調(diào)ph6.87.0，然后再加2%溴甲酚紫乙醇溶液 0.6ml，搖勻后，按 5ml/管， 分裝封口，置壓力蒸汽滅菌器中，于115C滅菌20min后備用。（二）操作方法將兩個(gè)菌片分別放入滅菌小紙袋或平皿內(nèi)。置于標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包（下排氣25cmx 30cmX30cm;預(yù)真空23cmX 23cmX 15cm；手提式通氣儲(chǔ)物盒 22cmX 13cmx 6cm）中心部位。 分別放入滅菌柜室內(nèi)，上、中層中央和排氣口上方處各放置一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包；手提 壓力蒸汽滅菌器用通氣貯物盒，盒內(nèi)盛滿中試管，指示菌片放于中心部

18、位兩只滅菌 試管內(nèi)（試管口滅菌牛皮紙包封） ，將盒平放手提壓力蒸汽滅菌器底部。經(jīng)一個(gè)滅菌 周期后，在無(wú)菌條件下取出菌片，投入溴甲酚紫蛋白胨水中，于56C培養(yǎng)7天后（自含式生物指示物按說(shuō)明書(shū)執(zhí)行）根據(jù)其顏色變化判斷滅菌效果。（三）判斷方法 若培養(yǎng)基全部不變色，判定為滅菌合格。若培養(yǎng)基由紫色變成黃色，判定為滅菌不 合格。（四）注意事項(xiàng) 監(jiān)測(cè)所以菌片須經(jīng)衛(wèi)生部認(rèn)可，并在有效內(nèi)使用。生物指示物監(jiān)測(cè)，每月一次（五）快速生物監(jiān)測(cè)自動(dòng)閱讀器：（藍(lán)帽）用于監(jiān)測(cè)132C下排氣鍋和（棕色帽）用于檢測(cè)121 C下排氣和132 C預(yù)真空鍋?zhàn)詣?dòng)閱讀器閱讀由陽(yáng)性的快速生物指示劑產(chǎn)生的熒光以提示滅菌過(guò)程失敗。一旦發(fā)現(xiàn) 結(jié)果

19、陽(yáng)性（ +）會(huì)即時(shí)顯示。陰性（ - ）結(jié)果顯示需要整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程。七、過(guò)氧化氫低溫等離子滅菌裝置消毒效果監(jiān)測(cè)（一）物理監(jiān)測(cè) 滅菌器顯示屏及最后打印結(jié)果所顯示的數(shù)據(jù)監(jiān)測(cè);時(shí)間、溫度、壓力等。（二）化學(xué)監(jiān)測(cè) 通過(guò)化學(xué)指示劑顏色的改變來(lái)判斷滅菌參數(shù)是否達(dá)標(biāo)。1、過(guò)氧化氫指示膠帶（包外指示）2、過(guò)氧化氫指示卡（包內(nèi)指示）（三）生物監(jiān)測(cè) 使用標(biāo)準(zhǔn)菌滅菌處理后進(jìn)行培養(yǎng)，觀察結(jié)果判斷滅菌是否合格。1 、 指示菌種和培養(yǎng)基 指示菌為嗜熱脂肪肝菌芽孢 2.06 x 10cfu/ 片。培養(yǎng)基為胰蛋白 酶大豆肉湯。2、生物測(cè)試劑 自含式菌種包裝， 避免了培養(yǎng)操作中的污染。 將生物測(cè)試劑置入 75mmx 200mm或

20、100mnX 260mm或 150mnX 320mm的特衛(wèi)強(qiáng)滅菌袋內(nèi)。在使用生物測(cè)試劑 前，先檢查其有效期。3、測(cè)試方法 將內(nèi)附生物測(cè)試劑的特衛(wèi)強(qiáng)滅菌袋面朝上，置于滅菌艙下層內(nèi)角（與每天第一鍋物品同時(shí)滅菌） 。4、滅菌循環(huán)結(jié)束后從滅菌鍋內(nèi)取出滅菌袋，在拆除外包裝前，將測(cè)試劑完全下壓。 從袋中取出測(cè)試劑，檢驗(yàn)證實(shí)頂蓋顯現(xiàn)金黃色。5、保持生物測(cè)試劑垂直，置于試管夾內(nèi)用力擠壓，直至其內(nèi)部的培養(yǎng)基小瓶壓碎。將滅菌處理后的生物測(cè)試劑置入5560C的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)48h同時(shí)取一個(gè)未處理的生物測(cè)試劑做陽(yáng)性對(duì)照。6、結(jié)果顯示 滅菌處理后的生物監(jiān)測(cè)試劑黃色頂蓋和紫色內(nèi)容物，表明結(jié)果為陰性。 未經(jīng)滅菌處理的生

21、物測(cè)試劑應(yīng)為紅色頂蓋、黃色或混濁的內(nèi)容物，表明結(jié)果為陰性。 48h 讀出結(jié)果后立即將生物測(cè)試劑丟棄于危害物處理箱內(nèi)。呈陽(yáng)性的對(duì)照組合任何陽(yáng)性反應(yīng)的生物指示劑在丟棄前可以用121 C高壓蒸汽消毒30min或者焚燒、7、禁忌裝載物品 布類(lèi)，如紗布、醫(yī)用膠布、醫(yī)用絲線、棉球；紙類(lèi)，如脫敏膠布、 化驗(yàn)單、手術(shù)貼膜、紙類(lèi)器械、目錄、紙類(lèi)日期標(biāo)簽；油類(lèi)，如石蠟油、國(guó)產(chǎn)動(dòng) 力系統(tǒng)的電池（內(nèi)含較多油類(lèi)物質(zhì)，如需滅菌請(qǐng)與服務(wù)人員聯(lián)絡(luò)） ；水分，如未進(jìn) 行徹底干燥處理器械、管道內(nèi)外的水分；粉劑，如滑石粉、粉針劑藥品；木類(lèi)， 如壓舌板等。十、食堂餐具消毒效果檢測(cè) 大腸菌群紙片檢測(cè)法：依據(jù)中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食（飲

22、）具消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn) GB14934-94.（一）紙片法采樣與檢驗(yàn) 食（炊）具消毒采用專用的大腸菌群快速檢驗(yàn)紙片。 隨機(jī)抽取消毒后備用的各類(lèi)食具（碗、盤(pán)、杯等）每次采樣 610 件，每件貼紙片 2張，每張紙片面積 25cm2 （ 5cmx 5cm）用無(wú)菌生理鹽水濕潤(rùn)大腸菌群檢測(cè)用紙片后， 立即貼于食具內(nèi)側(cè)表面， 30s 后取下，置于無(wú)菌塑料袋內(nèi)?？曜右?5 支為一件樣品，用毛細(xì)吸管取無(wú)菌生理鹽水濕潤(rùn)紙片后，立即將筷子進(jìn)口端（約5cm）抹拭紙片，每件樣品抹試 2張，放入無(wú)菌塑料袋內(nèi)。將已采樣的紙片置 37C培養(yǎng)1518h，若紙片保持紫藍(lán)色不變?yōu)榇竽c菌群陰性，紙片變黃并在黃色背景上呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn)或片狀紅

23、暈為陽(yáng)性。（二）結(jié)果報(bào)告檢驗(yàn)紙片兩片為一件（50cm2）報(bào)告結(jié)果為：50cm2檢出或未檢出大腸菌群。十一、內(nèi)鏡的消毒效果檢測(cè)（一）消毒效果生物學(xué)檢測(cè)方法1、采樣方法 監(jiān)測(cè)采樣部位為內(nèi)鏡的腔面。用無(wú)菌注射器抽取 10ml 含相應(yīng)中的和劑 緩沖液， 從待檢內(nèi)鏡活檢口注入， 用 15ml 無(wú)菌試驗(yàn)管從活檢出口收集， 及時(shí)送檢， 2h 內(nèi)檢。2、 菌落計(jì)數(shù) 將送檢液用旋渦器充分震蕩，分別取0.5ml，加入2塊直徑9cm無(wú)菌平皿， 每個(gè)平皿分別加入滅菌的營(yíng)養(yǎng)瓊脂1 51 8m l ，邊傾注邊搖勻， 待瓊脂凝固， 于36 1C培養(yǎng)48h后進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。結(jié)果判斷：菌落數(shù)/鏡=2個(gè)平皿菌落數(shù)平均值。3、 致病

24、菌檢測(cè) 將送檢液用于旋渦器充分震蕩，取0.2ml分別接種9cm血平皿、中國(guó) 蘭皿和ss平皿，均勻涂布，36 1C培養(yǎng)48h,觀察有無(wú)致病菌生長(zhǎng)。（二）衛(wèi)生學(xué)標(biāo)準(zhǔn)消毒后的內(nèi)鏡合格標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌總數(shù)v20cfu/件，不能檢出致病菌；滅菌后內(nèi)鏡合格標(biāo)準(zhǔn)：無(wú)菌檢測(cè)合格。（三）生物學(xué)檢測(cè)頻率 消毒后的內(nèi)鏡為每季度監(jiān)測(cè)一次，滅菌后的內(nèi)鏡每月監(jiān)測(cè)一次。 十二、污水消毒效果檢測(cè)（一） 總余氯的檢測(cè)1、 試劑配置 鄰聯(lián)甲苯胺溶液：稱取 1克鄰聯(lián)甲苯胺，溶于 5ml20%（容積/容積）鹽 酸中，將其調(diào)成糊狀，加入 150200ml 蒸餾水使其完全溶解，置于量筒中補(bǔ)加蒸 餾水至505ml，最后加入20%鹽酸496ml，

25、儲(chǔ)于棕色瓶中。2、測(cè)定步驟 在盛有 5ml 樣品的比色管內(nèi)滴加鄰聯(lián)甲苯溶液 2滴或 3滴， 混勻， 置暗 處15min,與余氯標(biāo)準(zhǔn)比色溶液比色測(cè)定 （比色時(shí)，眼睛從管口向下觀察或由前面 觀察）。檢測(cè)溫度應(yīng)控制在 1520 C；余氯過(guò)高會(huì)產(chǎn)生橘黃色，堿度過(guò)高或余氯很 低時(shí)可能會(huì)產(chǎn)生淡藍(lán)綠色或淡藍(lán)色，應(yīng)多加 1ml 1:2 的鹽酸或 1ml 鄰聯(lián)甲苯胺溶 液，即可產(chǎn)生正常的淡黃色進(jìn)行比色測(cè)定。3、 檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告 檢驗(yàn)結(jié)果以每升污水中含余氯的毫克數(shù)（mg/L ）（二） 大腸菌群數(shù)檢測(cè)：采用多管發(fā)酵法。1、采樣方法 用采樣器或其他滅菌容器采取污水樣 1000ml ，放入滅菌瓶?jī)?nèi)，加 1.5% 硫代硫酸

26、鈉溶液 5ml 中和余 lv2、多管發(fā)酵法 初發(fā)酵試驗(yàn)：將原液作 1:10 1:100 1:1000 稀釋。依次吸取 1:100 1:100 1:10及原液1ml，分別注入裝有10ml乳糖膽鹽培養(yǎng)液內(nèi)裝小發(fā)酵管的試管 中，將已接種的4支發(fā)酵管置于44C恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)24h平板分離：取經(jīng)培養(yǎng) 24h 后產(chǎn)酸產(chǎn)氣，以及只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣的發(fā)酵管中培養(yǎng)液，分別畫(huà) 線接種伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上，置37C恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)1824h,挑選符合下列特征的菌落，進(jìn)行涂片，革蘭氏染色，鏡檢。伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上的菌落色澤：深紫黑色，具有金屬光澤的菌落；紫黑色，不帶或略 帶金屬光澤的菌落；淡紫紅色，中心色較深的菌落。復(fù)發(fā)酵實(shí)驗(yàn)：上述涂

27、片鏡檢的菌落，如革蘭陰性無(wú)芽胞桿菌，再挑去該菌落接種于乳糖發(fā)酵管中（內(nèi)有倒管），置于44 C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,有產(chǎn)酸產(chǎn)氣者即證實(shí)有糞大腸菌群存在，按陽(yáng)性管數(shù)查表。（三）致病菌檢測(cè)檢測(cè)沙門(mén)菌屬和志賀菌屬1 、 污水取樣 取 250ml 污水，用無(wú)菌紗布或脫脂棉進(jìn)行初濾然后再用濾膜進(jìn)行抽濾。 將初濾，放入盛有100ml左右的單倍SF（GN增菌液的三角燒瓶中進(jìn)行增菌培養(yǎng)。 置于37 C恒溫培養(yǎng)箱，培養(yǎng) 24h （6-8h ）2、 平板分離取上述增菌培養(yǎng)液，分別接種SS平板和BS平板（SS平板和E、M B、 平板），置于37C恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng) 2448h。3、 挑選菌落 挑落在SS平板上呈無(wú)色透明

28、或中間有黑色，直徑12mm的菌落；挑選在BS平板上呈黑色有金屬光澤的菌落或灰綠色的菌落（挑取在SS和E、M B平板上呈無(wú)色透明，直徑 1-1.5mm 的菌落）。4、挑選 5 各以上的可疑病原菌菌落，經(jīng)細(xì)菌鑒定儀鑒定。5、結(jié)果報(bào)告 根據(jù)以上鑒別培養(yǎng)、細(xì)菌鑒定結(jié)果報(bào)告。注：括號(hào)內(nèi)為志賀菌屬的培養(yǎng)法。（四）檢測(cè)頻率1 、 檢測(cè)頻率（ 1 ） 總余氯： 醫(yī)療機(jī)構(gòu)經(jīng)過(guò)連續(xù)處理裝置消毒的污水， 總余氯至少檢測(cè) 2 次；經(jīng)過(guò) 間歇式處理裝置的污水，每次排放前均應(yīng)檢測(cè)。（ 2）糞大腸菌群：糞大腸菌群每月測(cè)不得少于 1 次。（3）致病菌： 醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水中致病菌， 每年檢測(cè)不得少于 2次。 主要檢測(cè)沙門(mén)菌核志賀菌

29、，結(jié)核病醫(yī)療機(jī)構(gòu)檢測(cè)結(jié)核桿菌。2、醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水排放標(biāo)準(zhǔn)糞大腸菌群w 900MPN/L;腸道致病菌不得檢出；總余氯（二氧化氯法）4.0mg/L第四節(jié) 消毒劑的有效濃度檢測(cè)一、有效氯含量測(cè)定 本方法可用于各種氯消毒劑的滴定（一） 試劑1、 配制 2mol/L 硫酸溶液 取 98ml 濃硫酸至蒸餾水中稀釋，最后用蒸餾水調(diào)至 500ml 刻度。2、 10%碘化鉀溶液 稱取碘化鉀10g加蒸餾水溶解，最后用蒸餾水調(diào)至100ml刻度。3、 0.5%淀粉溶液稱取可溶性淀粉 0.5g，用少量蒸餾水溶解，最后用蒸餾水調(diào)至100ml 刻度。4、配制并標(biāo)定0.1mol/L硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（二） 滴定方法1、 稱取消

30、毒劑 對(duì)液體含氯消毒劑，吸取1.0ml于容量瓶中，加蒸餾水至刻度，混勻；對(duì)固定含氯消毒劑，稱取1g（精確至0.001g ）置研缽研磨后以蒸餾水溶解，轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中，（溶水中無(wú)殘?jiān)呖擅庋心ィ?。稱量杯及研缽需用蒸餾水洗3次，洗液全部轉(zhuǎn)入容量瓶。2、 濃度滴定 向100ml碘瓶中加2mol硫酸10ml,10%碘化鉀溶液10ml和混勻的消毒劑稀 釋液10ml，此時(shí)溶液呈棕色。 蓋上蓋并振搖混勻后，加蒸餾水?dāng)?shù)低于碘量瓶蓋緣，置暗處5min。打開(kāi)蓋，讓蓋緣蒸餾水流入瓶?jī)?nèi)。用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（裝于25ml滴定管中）滴定游離碘，邊滴邊搖勻，待溶液呈淡黃色時(shí)加入0.5%淀粉溶液10滴，溶液立即變藍(lán)色

31、，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，記錄用去的硫代硫酸鈉溶液總量。重復(fù)測(cè)3次，取3次平均值進(jìn)行以下計(jì)算。3、 有效氯含量計(jì)算因1mol/l硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 1ml相當(dāng)于0.03545g，故可按下式計(jì) 算有效氯含量。有效氯含量=MxVx0.03545 x100%WM:硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度mol/l。V:滴定用去硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液毫升數(shù)W:碘量瓶中所含消毒齊U原藥克數(shù)（液體消毒劑則為毫升數(shù)）二、有效碘含量測(cè)定本方法可用于各種碘制劑的滴定。（一）試劑配制0.5%淀粉溶液，36%醋酸溶液，配制并標(biāo)定 0.1mol/L硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（二）滴定方法向100ml碘量憑著個(gè)精確加含碘消毒劑樣液5.0ml及醋酸1滴。

32、用0.1mol/L硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定（通常用 25ml滴定，若預(yù)計(jì)有效碘濃度 5%時(shí)用50ml滴定管），邊滴邊搖 勻，待溶液呈淡黃色時(shí)加入 0.5%淀粉溶液10滴，溶液立即變藍(lán)色，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失， 記錄用去的硫代硫酸鈉溶液總量。重復(fù)測(cè)2次，取3次平均值進(jìn)行以下計(jì)算。（三）有效碘含量計(jì)算由于1mol/L硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液1ml相當(dāng)于0.1269g有效碘，故可按下式計(jì)算有效碘含量。有效碘含量=MX VX 0.1269X 100%WM：硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度（mol/L ）V:滴定用去硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液毫升數(shù)。W碘量瓶中所含消毒齊U原藥克數(shù)（液體消毒劑則為毫升數(shù)）第五節(jié)使用中消毒劑微生物污染

33、檢測(cè)一、采樣時(shí)間常規(guī)采取使用中的消毒劑二、檢測(cè)方法1、 采樣 在無(wú)菌條件下，用無(wú)菌吸管取1ml被檢樣液，加入 9ml含相應(yīng)中和劑稀釋液中 混勻。對(duì)于醇類(lèi)與酚類(lèi)消毒劑，稀釋液用普通營(yíng)養(yǎng)肉湯或無(wú)菌生理鹽水即可；對(duì)于含氯消毒劑、過(guò)氧化物消毒劑， 需在肉湯中加入0.1%硫代硫酸鈉；對(duì)于醛類(lèi)消毒劑， 需 在肉湯中加入0.3%甘氨酸；對(duì)于含有表面活性劑的各種復(fù)方消毒劑，需在肉湯中加入0.3%（W/V吐溫80，以中被檢樣液的殘效作用。2、 檢測(cè)方法 分別取0.5ml放入2只滅菌平皿內(nèi)，加入滅菌的普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂 1518ml，邊 傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，一平皿置20C培養(yǎng)7天，觀察霉菌生長(zhǎng)情況； 另一平皿置 36 1C培養(yǎng)3天，計(jì)數(shù)菌落數(shù)，并檢測(cè)致病菌。（五）結(jié)果分析平皿上有菌生長(zhǎng)，證明被檢樣液有殘存活菌，若每個(gè)平皿菌落數(shù)在5個(gè)以下，并未檢出致病菌為合格，可用于消毒處理（但不能用于滅菌）若每個(gè)平皿菌落數(shù)超過(guò)5個(gè)（說(shuō)明每毫升被檢樣液含菌量已超過(guò)100個(gè)）