王巍令斑尾復(fù)蝦虎魚耳石成分研究

1、斑 尾 復(fù) 鰕 虎 魚耳 石 成 分 的 研 究學(xué)生：王巍令學(xué)生：王巍令 | 導(dǎo)師：葉振江導(dǎo)師：葉振江資源生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室資源生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室 2021-7-182021-7-18主要內(nèi)容主要內(nèi)容研 究 背 景材 料 方 法結(jié) 果 討 論小 結(jié)致 謝2021-7-18研究背景研究背景斑尾復(fù)鰕虎魚斑尾復(fù)鰕虎魚l斑尾復(fù)鰕虎魚斑尾復(fù)鰕虎魚(Synechogobius ommaturus)，青島地區(qū)俗稱，青島地區(qū)俗稱Gung魚，魚，隸屬鱸形目隸屬鱸形目(Perciformes)鰕虎魚科鰕虎魚科(Gobiidae)，是鰕虎魚科，是鰕虎魚科(Gobiidae)中的大型種類，分布很廣，從黃、渤海，東海，臺(tái)灣省以及朝

2、鮮，中的大型種類，分布很廣，從黃、渤海，東海，臺(tái)灣省以及朝鮮，日本直到印度尼西亞等地的近岸海區(qū)或咸淡水域均有分布。其肉質(zhì)日本直到印度尼西亞等地的近岸海區(qū)或咸淡水域均有分布。其肉質(zhì)鮮美，在沿海和河口的漁業(yè)中，有一定的經(jīng)濟(jì)意義。鮮美，在沿海和河口的漁業(yè)中，有一定的經(jīng)濟(jì)意義。斑尾復(fù)鰕虎魚斑尾復(fù)鰕虎魚2021-7-18研究背景研究背景斑尾復(fù)鰕虎魚斑尾復(fù)鰕虎魚l斑尾復(fù)鰕虎魚形態(tài)學(xué)分類特征為：背鰭斑尾復(fù)鰕虎魚形態(tài)學(xué)分類特征為：背鰭 , 1920；臀鰭；臀鰭, 1618；腹鰭；腹鰭, 5?？v裂鱗?？v裂鱗52-65。脊椎骨。脊椎骨4143。體長為體高的。體長為體高的5.27.8倍；為倍；為頭長的頭長的3.65

3、.8倍。頭長為吻長的倍。頭長為吻長的2.52.9倍；為眼徑的倍；為眼徑的5.18.1倍；為尾鰭倍；為尾鰭長的長的0.91.5倍。尾柄長為尾柄高的倍。尾柄長為尾柄高的1.84.5倍。倍。l斑尾復(fù)鰕虎魚屬多次產(chǎn)卵類型，在繁殖期間產(chǎn)兩次卵。產(chǎn)卵的早期為斑尾復(fù)鰕虎魚屬多次產(chǎn)卵類型，在繁殖期間產(chǎn)兩次卵。產(chǎn)卵的早期為3月，月，盛期為盛期為4-5月份。月份。斑尾復(fù)鰕虎魚斑尾復(fù)鰕虎魚2021-7-18研究背景研究背景耳石耳石l耳石，位于硬骨魚類內(nèi)耳膜迷路中，耳石，位于硬骨魚類內(nèi)耳膜迷路中，在膜迷路的橢圓囊、球狀囊和平狀在膜迷路的橢圓囊、球狀囊和平狀囊囊(聽壺聽壺)中各有微耳石、矢耳石和中各有微耳石、矢耳石和星

4、耳石一對(duì)，星耳石較小，微耳石星耳石一對(duì)，星耳石較小，微耳石側(cè)扁，矢耳石形狀有亞圓形、長圓側(cè)扁，矢耳石形狀有亞圓形、長圓形、盾形幾種，體積最大，因此更形、盾形幾種，體積最大，因此更多地被用來研究多地被用來研究(本研究同本研究同)。l耳石作用為聲音接收，平衡定位以耳石作用為聲音接收，平衡定位以及對(duì)外源性污染物進(jìn)行生物規(guī)避。及對(duì)外源性污染物進(jìn)行生物規(guī)避。硬骨魚類矢耳石位置示意圖硬骨魚類矢耳石位置示意圖2021-7-18研究背景研究背景耳石耳石l耳石的主要成分為耳石的主要成分為CaCO3，物相結(jié)構(gòu)為文石，物相結(jié)構(gòu)為文石(霰石霰石)或球文石或球文石(球霰石球霰石)；占；占3%-4%的有機(jī)的有機(jī)質(zhì)，對(duì)于質(zhì)

5、，對(duì)于CaCO3多型的選擇、取向、形態(tài)等多型的選擇、取向、形態(tài)等結(jié)晶習(xí)性具有控制作用。結(jié)晶習(xí)性具有控制作用。l耳石是魚類分類的重要形態(tài)學(xué)指標(biāo)，和鰭條、耳石是魚類分類的重要形態(tài)學(xué)指標(biāo)，和鰭條、鱗片、脊椎骨等相比，具有代謝惰性。因此，鱗片、脊椎骨等相比，具有代謝惰性。因此，不管是在形態(tài)上還是在成分組成上，耳石較不管是在形態(tài)上還是在成分組成上，耳石較其他組織更加穩(wěn)定。其他組織更加穩(wěn)定。l由于耳石在形成過程中，其形態(tài)結(jié)構(gòu)、輪紋由于耳石在形成過程中，其形態(tài)結(jié)構(gòu)、輪紋及化學(xué)組成都相當(dāng)穩(wěn)定，因此可以作為一種及化學(xué)組成都相當(dāng)穩(wěn)定，因此可以作為一種天然的生物標(biāo)簽而記錄魚類的生活史和生活天然的生物標(biāo)簽而記錄魚類的

6、生活史和生活環(huán)境的變化。環(huán)境的變化。 斑尾復(fù)鰕虎魚矢耳石斑尾復(fù)鰕虎魚矢耳石2021-7-18研究背景研究背景耳石耳石2004年，第三屆國際耳年，第三屆國際耳石學(xué)術(shù)會(huì)議。國內(nèi)亦開石學(xué)術(shù)會(huì)議。國內(nèi)亦開始對(duì)耳石微化學(xué)感興趣始對(duì)耳石微化學(xué)感興趣，但多為綜述性描述。，但多為綜述性描述。18991971198320041971年年P(guān)annella發(fā)發(fā)現(xiàn)耳石日輪?，F(xiàn)耳石日輪。1983年，質(zhì)譜儀首年，質(zhì)譜儀首次商業(yè)運(yùn)用。次商業(yè)運(yùn)用。1899年，年，Reibisch發(fā)發(fā)現(xiàn)耳石年輪?，F(xiàn)耳石年輪。2021-7-18研究背景研究背景耳石耳石美國、法國、德國、加拿大、美國、法國、德國、加拿大、澳大利亞、韓國、日本等對(duì)于

7、澳大利亞、韓國、日本等對(duì)于耳石都有研究，其中以加拿大耳石都有研究，其中以加拿大貝德福德海洋研究所貝德福德海洋研究所Campana成果最為顯著，其研究領(lǐng)域涉成果最為顯著，其研究領(lǐng)域涉及耳石成分、耳石形態(tài)、耳石及耳石成分、耳石形態(tài)、耳石微結(jié)構(gòu)甚至微結(jié)構(gòu)甚至3D結(jié)構(gòu)；研究方法結(jié)構(gòu)；研究方法包括了野生調(diào)查和室內(nèi)實(shí)驗(yàn)等；包括了野生調(diào)查和室內(nèi)實(shí)驗(yàn)等；研究手段涵蓋了所有的常見儀研究手段涵蓋了所有的常見儀器，并對(duì)各儀器性能、效果等器，并對(duì)各儀器性能、效果等進(jìn)行了詳細(xì)比較。進(jìn)行了詳細(xì)比較。 國際國際與國外相比，國內(nèi)在基礎(chǔ)數(shù)據(jù)與國外相比，國內(nèi)在基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和實(shí)驗(yàn)方法上都有很大差距。和實(shí)驗(yàn)方法上都有很大差距。目前國內(nèi)對(duì)

8、耳石的研究主要集目前國內(nèi)對(duì)耳石的研究主要集中在耳石的形態(tài)、微結(jié)構(gòu)（年中在耳石的形態(tài)、微結(jié)構(gòu)（年輪、日輪、標(biāo)記輪以及它們與輪、日輪、標(biāo)記輪以及它們與生長發(fā)育的關(guān)系）等。對(duì)于微生長發(fā)育的關(guān)系）等。對(duì)于微化學(xué)的研究，除綜述性文獻(xiàn)外，化學(xué)的研究，除綜述性文獻(xiàn)外，僅有地質(zhì)大學(xué)李勝榮、水生所僅有地質(zhì)大學(xué)李勝榮、水生所張國華等有所涉及。且均為對(duì)張國華等有所涉及。且均為對(duì)淡水魚的研究。淡水魚的研究。國內(nèi)國內(nèi)研究背景研究背景耳石耳石耳石微結(jié)構(gòu)研究耳石微結(jié)構(gòu)研究1.年輪年輪2.日輪日輪3.標(biāo)記輪標(biāo)記輪4.結(jié)晶方式結(jié)晶方式耳石微化學(xué)研究耳石微化學(xué)研究1.Sr/Ca研究研究2.Ba/Ca研究研究3.其他元素研究其他元

9、素研究4.同位素研究同位素研究耳石形態(tài)學(xué)研究耳石形態(tài)學(xué)研究1.1.傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)方法傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)方法2.2.傅里葉分析方法傅里葉分析方法2021-7-18研究背景研究背景耳石耳石與溫度有關(guān)與溫度有關(guān)水溫水溫，較準(zhǔn)確較準(zhǔn)確“海洋溫度計(jì)海洋溫度計(jì)”與食物有關(guān)與食物有關(guān)一般用于確定一般用于確定營養(yǎng)級(jí)營養(yǎng)級(jí)與食物有關(guān)與食物有關(guān)一般用于確定一般用于確定營養(yǎng)級(jí)營養(yǎng)級(jí)耳石的同位素研究耳石的同位素研究2021-7-18研究背景研究背景耳石耳石其他種群生活史環(huán)境種群和群體的識(shí)別種群和群體的識(shí)別養(yǎng)殖魚與野生魚的區(qū)分養(yǎng)殖魚與野生魚的區(qū)分考古學(xué)考古學(xué)蛋白質(zhì)對(duì)蛋白質(zhì)對(duì)CaCO3的調(diào)控的調(diào)控環(huán)境監(jiān)測環(huán)境監(jiān)測推斷海洋環(huán)境變化推斷

10、海洋環(huán)境變化生活史的重建生活史的重建產(chǎn)卵場和產(chǎn)卵期的確定產(chǎn)卵場和產(chǎn)卵期的確定高齡魚年齡的確定高齡魚年齡的確定耳石微化學(xué)研究應(yīng)用耳石微化學(xué)研究應(yīng)用各方向之間聯(lián)系密切，往往很難界定。各方向之間聯(lián)系密切，往往很難界定。2021-7-18研究背景研究背景化學(xué)分析儀器化學(xué)分析儀器 電感耦合等離子質(zhì)譜儀電感耦合等離子質(zhì)譜儀01 電子微探針電子微探針02激光熔融電感耦合等離子質(zhì)譜儀激光熔融電感耦合等離子質(zhì)譜儀03 耳石微取樣儀器耳石微取樣儀器042021-7-18材料方法材料方法樣本采集樣本采集116.00118.00120.00122.00124.00126.0022.0024.0026.0028.003

11、0.0032.0034.0036.0038.0040.00DDTJDYWHQDGYXMDL樣本采集方法樣本采集方法l樣本魚采自丹東、大連、天津、樣本魚采自丹東、大連、天津、東營、威海、青島、贛榆和廈門東營、威海、青島、贛榆和廈門八個(gè)站點(diǎn)。八個(gè)站點(diǎn)。l采集過程中確保知道樣本魚的準(zhǔn)采集過程中確保知道樣本魚的準(zhǔn)確采集地點(diǎn)和采集時(shí)間。確采集地點(diǎn)和采集時(shí)間。l采集完成后，冰儲(chǔ)運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室，采集完成后，冰儲(chǔ)運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室，確保無腐無臭，樣本新鮮。確保無腐無臭，樣本新鮮。l大連標(biāo)本采自于蝦池，其他均為大連標(biāo)本采自于蝦池，其他均為野生。野生。 2021-7-18l在實(shí)驗(yàn)室中，對(duì)每條魚的體長在實(shí)驗(yàn)室中，對(duì)每條魚的體長

12、和體重進(jìn)行測量，體長精確到和體重進(jìn)行測量，體長精確到毫米，體重精確到毫克。毫米，體重精確到毫克。l在摘取耳石之前，對(duì)部分實(shí)驗(yàn)在摘取耳石之前，對(duì)部分實(shí)驗(yàn)用魚用魚(天津、青島、贛榆的天津、青島、贛榆的26尾尾魚魚)的雌雄進(jìn)行了確定，以檢驗(yàn)的雌雄進(jìn)行了確定，以檢驗(yàn)雌雄魚在耳石成分上是否有顯雌雄魚在耳石成分上是否有顯著差異。著差異。 l耳石標(biāo)本取出后用去離子水清耳石標(biāo)本取出后用去離子水清洗，然后置入潔凈的離心管中。洗，然后置入潔凈的離心管中。材料方法材料方法魚體處理魚體處理Agilent 7500A ICPMS地點(diǎn)地點(diǎn)采集時(shí)間采集時(shí)間數(shù)量數(shù)量體長范圍體長范圍(mm)性比性比(雌：雄雌：雄)丹東丹東20

13、07099158-175大連大連2007119190-225天津天津2007099190-2174:5東營東營2007059190-222威海威海2007039230-251青島青島2007118190-2233:5贛榆贛榆200704 9191-2244:5廈門廈門2007129191-224材料方法材料方法耳石處理耳石處理用超純水清洗三遍然后放用超純水清洗三遍然后放在酸洗過的玻璃片上，置在酸洗過的玻璃片上，置于層流罩（層流閣室）中于層流罩（層流閣室）中36h晾干。晾干。 將耳石樣品用超純水浸將耳石樣品用超純水浸泡過夜泡過夜（24h）將浸泡過的耳石樣品置于純將浸泡過的耳石樣品置于純雙氧水中浸

14、泡約雙氧水中浸泡約5min，并，并用玻璃針剔除所有的粘連組用玻璃針剔除所有的粘連組織?？棥７Q重（精度稱重（精度 0.01mg），），稱重過程中應(yīng)該保證耳石稱重過程中應(yīng)該保證耳石只接觸酸洗過的塑料或者只接觸酸洗過的塑料或者玻璃制品。玻璃制品。 稱重完畢后放入酸洗過的稱重完畢后放入酸洗過的聚乙烯管中以待測量。聚乙烯管中以待測量。2021-7-18材料方法材料方法測試分析測試分析測試分析測試分析l在酸洗過的盛有耳石的聚乙烯管中在酸洗過的盛有耳石的聚乙烯管中倒入純濃硝酸（羅米爾純）倒入純濃硝酸（羅米爾純）0.1ml，過夜、溶解（對(duì)于空白樣品進(jìn)行同過夜、溶解（對(duì)于空白樣品進(jìn)行同樣處理，但是不加入耳石，以

15、方便樣處理，但是不加入耳石，以方便做校檢和確定檢出最低限，下同）。做校檢和確定檢出最低限，下同）。 l將溶解液倒入大瓶并定重至將溶解液倒入大瓶并定重至10g（也（也就是體積上的就是體積上的10ml）。）。l將定重后的溶液用將定重后的溶液用Agilent 7500A ICP-MS進(jìn)行分析，測定進(jìn)行分析，測定K, Ca, Na, Mg, Sr, Pb, Ba, Mn, Co, Zn等等10種元種元素。）素。）Agilent 7500A ICPMS2021-7-18材料方法材料方法測試分析測試分析Agilent 7500A ICPMS測試分析測試分析l在使用前在使用前15分鐘即對(duì)分鐘即對(duì)ICP進(jìn)行預(yù)

16、熱，進(jìn)行預(yù)熱，以保持儀器的穩(wěn)定性。以保持儀器的穩(wěn)定性。l對(duì)設(shè)備采用對(duì)設(shè)備采用7Li、89Y、140Ce、205Tl(10gL-1)進(jìn)行校準(zhǔn)以達(dá)到最進(jìn)行校準(zhǔn)以達(dá)到最佳測試效果。佳測試效果。l測試中對(duì)所有樣品進(jìn)行隨機(jī)亂序，測試中對(duì)所有樣品進(jìn)行隨機(jī)亂序，以減小由于儀器產(chǎn)生的誤差。以減小由于儀器產(chǎn)生的誤差。l每測試每測試9個(gè)樣品便重新用標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行個(gè)樣品便重新用標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行校檢，以減小誤差。校檢，以減小誤差。 采用采用 SPSS 16.0對(duì)測試結(jié)果進(jìn)行系列分析對(duì)測試結(jié)果進(jìn)行系列分析材料方法材料方法統(tǒng)計(jì)分析統(tǒng)計(jì)分析 耳石重量和耳石元素濃度耳石重量和耳石元素濃度 雌雄個(gè)體之間雌雄個(gè)體之間 不同站點(diǎn)之間不同站點(diǎn)

17、之間 不同站點(diǎn)之間不同站點(diǎn)之間 不同站點(diǎn)之間不同站點(diǎn)之間 回歸分析回歸分析 方差分析方差分析 方差分析方差分析 聚類分析聚類分析 判別分析判別分析結(jié)果討論結(jié)果討論 分布廣分布廣 樣本獲得容易，成本低樣本獲得容易，成本低 定居性強(qiáng)，適合做初步研究定居性強(qiáng)，適合做初步研究 應(yīng)用價(jià)值較大應(yīng)用價(jià)值較大 國內(nèi)研究空缺國內(nèi)研究空缺 檢測范圍廣檢測范圍廣 誤差較小誤差較小 相比相比LA-ICP-MS成本低成本低 可滿足定居魚類研究需求可滿足定居魚類研究需求 操作簡單，可控性強(qiáng)操作簡單，可控性強(qiáng)2021-7-18研究背景研究背景化學(xué)分析儀器化學(xué)分析儀器l電感耦合等離子質(zhì)譜儀電感耦合等離子質(zhì)譜儀lInducti

18、vely Coupled Plasma Mass Spectrometry l簡稱：簡稱：ICP-MS，Solution-based ICP-MSl工作原理：在真空條件下將待測液體原子工作原理：在真空條件下將待測液體原子化，將原子化之后的大部分原子離子化，化，將原子化之后的大部分原子離子化，離子按質(zhì)荷比分離，計(jì)算各種離子數(shù)目。離子按質(zhì)荷比分離，計(jì)算各種離子數(shù)目。l優(yōu)點(diǎn)：快速，精確，元素質(zhì)譜簡單，不受優(yōu)點(diǎn)：快速，精確，元素質(zhì)譜簡單，不受化學(xué)和物理因素的干擾化學(xué)和物理因素的干擾 ；樣本量易滿足。；樣本量易滿足。l缺點(diǎn)：只能對(duì)樣本整體分析，無法體現(xiàn)樣缺點(diǎn)：只能對(duì)樣本整體分析，無法體現(xiàn)樣本內(nèi)部差異。本

19、內(nèi)部差異。ICP-MS離子源系統(tǒng)離子源系統(tǒng)2021-7-18研究背景研究背景化學(xué)分析儀器化學(xué)分析儀器l同位素稀釋和比值測定的技術(shù)同位素稀釋和比值測定的技術(shù)方法，目前已經(jīng)成為方法，目前已經(jīng)成為ICPMS研研究的重點(diǎn)之一。究的重點(diǎn)之一。l同位素電感耦合等離子質(zhì)譜儀同位素電感耦合等離子質(zhì)譜儀(ID-ICP-MS, Isotope Dilution ICP-MS)目前在耳石微化學(xué)分目前在耳石微化學(xué)分析中也已得到了廣泛應(yīng)用。析中也已得到了廣泛應(yīng)用。 ICP-MS離子源系統(tǒng)離子源系統(tǒng)2021-7-18研究背景研究背景化學(xué)分析儀器化學(xué)分析儀器l電子微探針（電子探針微區(qū)分析）電子微探針（電子探針微區(qū)分析）lE

20、lectron Probe Micro Analysisl簡稱：簡稱： EPMAl工作原理：是工作原理：是X射線光譜分析和電子顯微射線光譜分析和電子顯微鏡兩者的組合，利用電子槍發(fā)射的高能鏡兩者的組合，利用電子槍發(fā)射的高能量電子流通過磁透鏡，聚焦成直徑約量電子流通過磁透鏡，聚焦成直徑約0.1-1m的電子探針，在測試切面的微小區(qū)域的電子探針，在測試切面的微小區(qū)域進(jìn)行轟擊，通過波譜儀或者能譜儀測量進(jìn)行轟擊，通過波譜儀或者能譜儀測量發(fā)射出來的各種信號(hào)得到有關(guān)表面的信發(fā)射出來的各種信號(hào)得到有關(guān)表面的信息。息。EPMA中中X射線的形成射線的形成2021-7-18研究背景研究背景化學(xué)分析儀器化學(xué)分析儀器l優(yōu)

21、點(diǎn)：探針優(yōu)點(diǎn)：探針(電子束半徑電子束半徑)小不受化學(xué)小不受化學(xué)和物理因素及分析方法的系統(tǒng)誤差干擾和物理因素及分析方法的系統(tǒng)誤差干擾可用于元素的形態(tài)分析可以測得日輪可用于元素的形態(tài)分析可以測得日輪上的元素，形成日輪元素指紋不污染上的元素，形成日輪元素指紋不污染樣品對(duì)于樣本損壞較小，同一切片在樣品對(duì)于樣本損壞較小，同一切片在EPMA分析后經(jīng)過除碳、酸蝕、涂金后可分析后經(jīng)過除碳、酸蝕、涂金后可直接用于直接用于SEM顯微結(jié)構(gòu)分析。顯微結(jié)構(gòu)分析。l缺點(diǎn)：元素的檢出限高，大約為缺點(diǎn)：元素的檢出限高，大約為100g/ g，不適于痕量元素的檢測。不適于痕量元素的檢測。l樣本制作步驟：清洗樣本制作步驟：清洗干燥

22、干燥樹脂包埋樹脂包埋切割切割研磨研磨干燥干燥真空涂碳真空涂碳(一般涂一般涂500A)。 EPMA分析操作流程圖分析操作流程圖2021-7-18研究背景研究背景化學(xué)分析儀器化學(xué)分析儀器l激光剝蝕（熔融）電感耦合等離子質(zhì)譜儀激光剝蝕（熔融）電感耦合等離子質(zhì)譜儀lLaser Ablation Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry l簡稱：簡稱：LA-ICP-MSl工作原理：利用高能量的激光照射在固態(tài)工作原理：利用高能量的激光照射在固態(tài)樣品表面，產(chǎn)生加熱，氣化，融化，離子樣品表面，產(chǎn)生加熱，氣化，融化，離子原子、分子及樣品碎片的濺散，電漿，氣原子、分

23、子及樣品碎片的濺散，電漿，氣體的震波等各種現(xiàn)象，氣化產(chǎn)生的氣體由體的震波等各種現(xiàn)象，氣化產(chǎn)生的氣體由惰性氣體氬氣攜帶進(jìn)入惰性氣體氬氣攜帶進(jìn)入ICP-MS系統(tǒng)。系統(tǒng)。l優(yōu)點(diǎn)：檢測范圍較優(yōu)點(diǎn)：檢測范圍較EPMA廣，固態(tài)檢驗(yàn)。廣，固態(tài)檢驗(yàn)。l缺點(diǎn)：檢測范圍較缺點(diǎn)：檢測范圍較ICP-MS窄，和窄，和EPMA相比對(duì)樣品損害大，通常不能檢測日輪。相比對(duì)樣品損害大，通常不能檢測日輪。激光熔融系統(tǒng)示意圖激光熔融系統(tǒng)示意圖2021-7-18研究背景研究背景化學(xué)分析儀器化學(xué)分析儀器DM-2800中分辨率，即用于評(píng)價(jià)相對(duì)較中分辨率，即用于評(píng)價(jià)相對(duì)較長期的年與年或季與季之間的長期的年與年或季與季之間的同位素成分變化。

24、同位素成分變化。耳石微取樣儀耳石微取樣儀Microsampler高分辨率，即分辨率為高分辨率，即分辨率為20-40m間間隔，可評(píng)價(jià)耳石月輪或更細(xì)微的變隔，可評(píng)價(jià)耳石月輪或更細(xì)微的變化。方法是用計(jì)算機(jī)控制的操作系化。方法是用計(jì)算機(jī)控制的操作系統(tǒng)平臺(tái)將耳石的生長輪數(shù)字化，然統(tǒng)平臺(tái)將耳石的生長輪數(shù)字化，然后計(jì)算出各序列區(qū)如年輪、季輪等后計(jì)算出各序列區(qū)如年輪、季輪等磨具的路徑并用一個(gè)金剛石齒形磨磨具的路徑并用一個(gè)金剛石齒形磨具研磨出能反映時(shí)間系列的碳酸鹽具研磨出能反映時(shí)間系列的碳酸鹽小樣小樣。結(jié)果討論結(jié)果討論耳石元素濃度值耳石元素濃度值結(jié)果討論結(jié)果討論耳石元素濃度值耳石元素濃度值l贛榆個(gè)體的贛榆個(gè)體的

25、Mg、K、Sr、Mn、Co的值均較低，但是的值均較低，但是Ba和和Pb的值較高，大連個(gè)的值較高，大連個(gè)體體Zn和和Mn的值較高，廈門的值較高，廈門個(gè)體的個(gè)體的Mg值顯著高于其他，值顯著高于其他，東營個(gè)體的東營個(gè)體的K和和Co值較高，值較高，威海個(gè)體的威海個(gè)體的Sr值較高。值較高。 結(jié)果討論結(jié)果討論耳石重與耳石元素濃度的回歸分析耳石重與耳石元素濃度的回歸分析結(jié)果討論結(jié)果討論耳石重與耳石元素濃度的回歸分析耳石重與耳石元素濃度的回歸分析結(jié)果討論結(jié)果討論雌雄個(gè)體間方差分析雌雄個(gè)體間方差分析元素元素均方均方FP值值Na0.0990.3400.565Mg0.0000.0020.964K0.0000.411

26、0.527Ca141.2423.2140.086Sr0.0340.7550.394Mn0.4030.2920.594Co0.0010.9590.337Zn7.8281.1490.294Ba0.0440.0020.963Pb0.0012.7790.109Sr/Ca0.0000.0230.882l雌雄間生理狀況差異不會(huì)雌雄間生理狀況差異不會(huì)造成的元素吸收的差異，造成的元素吸收的差異，或者造成的這種差異和水或者造成的這種差異和水體環(huán)境元素本身的差異相體環(huán)境元素本身的差異相比較小。比較小。 結(jié)果討論結(jié)果討論站點(diǎn)間方差分析站點(diǎn)間方差分析元素元素均方和均方和均方均方FP23Na1.2260.1751.22

27、30.30424Mg0.0120.0020.7960.59439K0.0740.0118.8700.000Regress of K0.0550.0086.3710.00043Ca80.28011.4690.4040.89788Sr2.1290.30413.4050.00055Mn376.45253.77918.7500.000Regress of Mn3.1480.45019.8550.00059Co0.1310.01932.2420.00066Zn30.8774.4111.5010.183137Ba520.02774.29021.3840.000208Pb0.0110.0024.0600.0

28、01Sr/Ca0.0000.00013.7050.000Ca、Na、Mg、Zn在各站點(diǎn)間無顯著在各站點(diǎn)間無顯著性差異，性差異，K、Sr、Mn、Co、Pb有顯著有顯著性差異。大連樣本的性差異。大連樣本的Mn元素的值顯著元素的值顯著高于其他站點(diǎn)，這可能是因?yàn)榇筮B樣高于其他站點(diǎn)，這可能是因?yàn)榇筮B樣本取自于養(yǎng)殖蝦池，養(yǎng)殖水體消毒過本取自于養(yǎng)殖蝦池，養(yǎng)殖水體消毒過程中高錳酸鉀的使用可能導(dǎo)致程中高錳酸鉀的使用可能導(dǎo)致Mn元素元素的升高。而的升高。而K沒有這種顯著差異，這可沒有這種顯著差異，這可能是因?yàn)椋耗苁且驗(yàn)椋篕與與Mn在在CaCO3中的占位中的占位方式不同，與方式不同，與K相比，相比，Mn更容易受到更

29、容易受到水體環(huán)境的影響。水體環(huán)境的影響。大連和青島樣本中的大連和青島樣本中的Zn元素濃度元素濃度值高于其他站點(diǎn)。東營樣本中值高于其他站點(diǎn)。東營樣本中K和和Co的濃度值高于其他站點(diǎn)。在所的濃度值高于其他站點(diǎn)。在所有站點(diǎn)中，威海樣本的有站點(diǎn)中，威海樣本的Sr元素濃度元素濃度最高，但是最高，但是Pb元素濃度最低。青島元素濃度最低。青島個(gè)體的個(gè)體的Ba元素濃度最低。元素濃度最低。Sr/Ca同同樣有顯著性差異，樣有顯著性差異，贛榆最低，廈門、贛榆最低，廈門、東營次之，這種差異不足以解釋溫東營次之，這種差異不足以解釋溫度或者鹽度的單獨(dú)差異，有可能是度或者鹽度的單獨(dú)差異，有可能是多種因素綜合的結(jié)果，還可能受

30、到多種因素綜合的結(jié)果，還可能受到食物的影響。食物的影響。 2021-7-18結(jié)果討論結(jié)果討論lSr和和Ca為同族元素，和為同族元素，和Ca具有相似具有相似生物功能，生物功能，Sr在在CaCO3沉淀中可代替沉淀中可代替Ca。lSr/Ca可以較準(zhǔn)確反映水體鹽度的大可以較準(zhǔn)確反映水體鹽度的大幅變化，因此幅變化，因此Sr/Ca往往用于確定洄往往用于確定洄游性魚類生活史；也有研究表明在鹽游性魚類生活史；也有研究表明在鹽度相差不大的海水中，度相差不大的海水中，Sr/Ca亦能反亦能反映鹽度的微小變化。映鹽度的微小變化。lSr/Ca對(duì)溫度的指示作用爭議較大，對(duì)溫度的指示作用爭議較大，目前幾種觀點(diǎn)共存：正相關(guān)負(fù)

31、相目前幾種觀點(diǎn)共存：正相關(guān)負(fù)相關(guān)不相關(guān)關(guān)不相關(guān)20，；Mn Sr Se Fe As Ba K Co Au Na Cr。 2021-7-18結(jié)果討論結(jié)果討論站點(diǎn)間聚類分析站點(diǎn)間聚類分析l聚類分析結(jié)果顯示，青島和丹東的相似度最強(qiáng)，其次是天津和威海。聚類分析結(jié)果顯示，青島和丹東的相似度最強(qiáng)，其次是天津和威海。大連和各群體的相似度均比較差，這可能是因?yàn)榇筮B取自于養(yǎng)殖池，大連和各群體的相似度均比較差，這可能是因?yàn)榇筮B取自于養(yǎng)殖池，養(yǎng)殖池的水環(huán)境與野生環(huán)境不同，直接造成耳石濃度的差異，也可養(yǎng)殖池的水環(huán)境與野生環(huán)境不同，直接造成耳石濃度的差異，也可能這種不同首先造成魚體生理狀況不同，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)對(duì)微量元能

32、這種不同首先造成魚體生理狀況不同，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)對(duì)微量元素沉積的調(diào)控不同，間接造成耳石成分的差異。素沉積的調(diào)控不同，間接造成耳石成分的差異。 聚類分析結(jié)果聚類分析結(jié)果結(jié)果討論結(jié)果討論站點(diǎn)間判別分析站點(diǎn)間判別分析l在判別分析中均使用耳石的標(biāo)準(zhǔn)在判別分析中均使用耳石的標(biāo)準(zhǔn)化變量，結(jié)果顯示，對(duì)所有樣本化變量，結(jié)果顯示，對(duì)所有樣本的總體識(shí)別率為的總體識(shí)別率為80.3%，對(duì)各個(gè)，對(duì)各個(gè)站點(diǎn)間識(shí)別的成功率從站點(diǎn)間識(shí)別的成功率從44.4%到到100%不等，其中青島和丹東較不等，其中青島和丹東較容易混群，即青島個(gè)體中有容易混群，即青島個(gè)體中有37.5%誤判為丹東個(gè)體，而丹東誤判為丹東個(gè)體，而丹東個(gè)體中有個(gè)體中

33、有44.4%誤判為青島個(gè)體。誤判為青島個(gè)體。廈門和威海個(gè)體的識(shí)別率最高，廈門和威海個(gè)體的識(shí)別率最高，為為100%。 結(jié)果討論結(jié)果討論站點(diǎn)間判別分析站點(diǎn)間判別分析分組分組Count合計(jì)合計(jì)青島青島大連大連天津天津贛榆贛榆廈門廈門丹東丹東威海威海東營東營青島青島5(62.5%)0(0%)0(0%)0(0%)0(0%)3(37.5%)0(0%)0(0%)8大連大連0(0%)8(88.9%)0(0%)0(0%)0(0%)0(0%)1(11.1%)0(0%)9天津天津0(0%)0(0%)8(88.9%)0(0%)0(0%)1(11.1%)0(0%)0(0%)9贛榆贛榆0(0%)0(0%)1(11.1%)6(66.7%)2(22.2%)0(0%)0(0%)0(0%)9廈門廈門0(0%)0(0%)0(0%)0(0%)9(100%)0(0%)0(0%)0(0%)9丹東丹東4(44.4%)0(0%)0(0%)0(0%)1(11.1%)4(44.4%)0(0%)0(0%)9威海威海0(0%)0(0%)0(0%)0(0%)0(0%)0(0%)9(100%)0(0%)9東營東營0(0%)0(0%)0(0%)0(0%)0(0%)0(0%)