07級滅菌制劑與無菌new

1、第三章 滅菌制劑與無菌制劑中山大學(xué)藥學(xué)院中山大學(xué)藥學(xué)院 胡海燕胡海燕 Phone: 39943118 Address: Room120, SPS Building Email: 第一節(jié) 概述l概念與分類l滅菌與無菌技術(shù)l空氣潔凈技術(shù)l冷凍干燥技術(shù)主要內(nèi)容滅菌法 指采用熱力或其它適宜方法殺滅或除去所有微生物繁殖體和芽孢的方法。微生物包括細菌、真菌和病毒。滅菌 sterilization 用物理或化學(xué)方法將所有致病和非致病微生物的芽孢全部殺滅。防腐 antisepsis 采用低溫或化學(xué)藥品防止微生物的生長繁殖消毒 disinfection 用物理和化學(xué)方法將病源微生物殺死概念與分類無菌 steri

2、lity 不存在活的微生物無菌操作 aseptic technique 整個個過程中使產(chǎn)品避免污染滅菌制劑 殺滅或除去所有活的微生物繁殖體和芽胞無菌制劑 用無菌操作法制備的不含活的概念與分類 干熱滅菌法 物理滅菌法 濕熱滅菌法 過濾滅菌法 滅菌法 射線滅菌法 化學(xué)滅菌法 無菌操作法 滅菌與無菌技術(shù)l 干熱滅菌法原理：加熱導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性或凝固、核酸破壞，酶失活。細菌芽胞較繁殖體耐熱，以殺滅芽孢為主。1）火焰：將滅菌物品通過火焰3-4次，每次20秒以上。適用于物品與用具的滅菌，不適合藥品的滅菌。2）干熱空氣：干燥狀態(tài)下微生物有較強的耐熱性，熱空氣穿透率較弱，溫度不夠均勻，滅菌溫度高，時間長。適用于

3、耐高溫玻璃與金屬制品及藥品滅菌法/物理滅菌法l 過濾滅菌法(機械除菌) 用濾過除去溶液中活的或死的微生物的方法。微生物繁殖體1.0m，芽胞繁殖體衰老體 初始微生物數(shù)量：多則滅菌時間不夠，增大出現(xiàn)耐熱個體的幾率。尸體多也會引起臨床不良反應(yīng)。2）蒸氣性質(zhì) 飽和蒸氣(濕、過熱) 除去空氣3）滅菌時間 藥品穩(wěn)定性4）注射液性質(zhì) pH環(huán)境（中性堿性酸性）、介質(zhì)營養(yǎng)成分滅菌法/物理滅菌法結(jié)構(gòu)：夾套和滅菌柜/兩個壓力表和一個溫度表l 對夾套進行加熱l 將待滅菌物品排列于柜室l 抽空氣通蒸氣，鍋內(nèi)壓力達到后記錄滅菌時間l 完畢，關(guān)閉進氣閥，打開排氣閥l 待壓力表指針為零時，開啟柜門滅菌法/物理滅菌法熱壓滅菌鍋

4、注意事項： 1)用飽和蒸氣 濕飽和蒸氣含水滴，使蒸氣穿透力下降；過熱蒸氣相當于干熱空氣 2)必須將滅菌器內(nèi)的空氣排出。如果滅菌器內(nèi)的空氣存在，則壓力表達到規(guī)定值時，溫度達不到。同時由于水蒸氣被空氣稀釋，妨礙了水蒸氣與滅菌物品的充分接觸，降低了水蒸氣的滅菌效果。因此若溫度表與壓力表指示不一致時，則有可能空氣沒有排盡，也可能壓力表失靈，也可能不是飽和蒸氣。 3)開始計時的溫度 注意預(yù)熱溫度，用溫度指示劑 4)操作安全 內(nèi)外壓力相等后，再等10-15min。滅菌法/物理滅菌法l 化學(xué)滅菌法 1）氣體滅菌法 殘留問題 環(huán)氧乙烷/氣態(tài)過氧化氫/甲醛/臭氧 與80-90%的惰性氣體混合使用 2）藥液滅菌法

5、 75%乙醇/1%聚維酮碘溶液/0.1-0.2%苯扎溴銨/煤酚皂溶液 滅菌法/化學(xué)滅菌法無菌操作法 無菌控制條件下生產(chǎn)無菌制劑的方法。 按無菌操作法制備的產(chǎn)品，一般不再滅菌；最終采用滅菌的產(chǎn)品，其生產(chǎn)過程一般采用避菌操作（避免微生物污染）。 無菌操作法無菌操作法1）操作室的滅菌 a）甲醛溶液加熱熏蒸 經(jīng)風道連續(xù)3h，關(guān)閉熏蒸12-24h, 注意溫度濕度；25%氨水加熱 b）紫外線 操作前和間歇開啟； c）液體滅菌2）無菌操作 物品、器具、環(huán)境(無菌操作室、層流潔凈臺、無菌操作柜 )、人無菌操作法知識回顧1滅菌 sterilization 全部殺滅微生物的芽孢。防腐 antisepsis 防止微

6、生物的生長繁殖消毒 disinfection 將病源微生物殺死 干熱滅菌法(火焰/干熱空氣/F值) 物理滅菌法 濕熱滅菌法(流通/煮沸/低溫間歇/熱壓) 過濾滅菌法(表面) 滅菌法 射線滅菌法(輻射/紫外/微波) 化學(xué)滅菌法(氣體/蒸汽) 無菌操作 無菌室滅菌(甲醛/氨水,紫外,藥液) 無菌操作管理(物/器皿/環(huán)境人/)影響熱壓滅菌的因素：1）微生物的數(shù)量和種類 耐熱壓：芽胞繁殖體衰老體 初始微生物數(shù)量影響耐熱菌的生產(chǎn),尸體多引起不良反應(yīng)。2）蒸氣性質(zhì) 飽和蒸氣(濕、過熱) 除去空氣3）滅菌時間與藥品穩(wěn)定性的矛盾4）注射液性質(zhì) pH環(huán)境（中性堿性酸性）、介質(zhì)營養(yǎng)成分知識回顧2熱壓滅菌鍋注意事項

7、： 1)用飽和蒸氣 2)必須將滅菌器內(nèi)的空氣排出 3)升溫程序 4)操作安全 內(nèi)外壓力相等后，再等10-15min。知識回顧4l D值 意義：一定溫度下將微生物殺滅90（數(shù)量下降一個對數(shù)單位）所需時間。 D值因微生物種類/環(huán)境/滅菌溫度不同而異。滅菌參數(shù)(F值和F0值)l Z值 意義：滅菌時間減少到原來的10%，所需升高的溫度。(滅菌效果相當) 滅菌參數(shù)(F值和F0值)logDTl F值 干熱滅菌 在一定滅菌溫度T下，給定Z值所產(chǎn)生的滅菌效果與在參比溫度T0下給定Z值所產(chǎn)生的滅菌效果相同時所相當?shù)臅r間。l F0值 濕熱滅菌滅菌參數(shù)(F值和F0值)時間/min012345678-38溫度/100

8、102104106108110112114115時間/min3940414243 444546 溫度/114112110108106104102100 計算以下滅菌程序的F0值?滅菌參數(shù)(F值和F0值)影響F0值測定的因素： F0D121（lgNolgNt） 溫度 由于溫度的微小差別將使F0值發(fā)生顯著的變化，因此首先應(yīng)保證溫度測量的準確性 滅菌物品的數(shù)量與排布使各處溫度分布均勻，測得F0值更可靠 滅菌產(chǎn)品溶液粘度及容器充填量（環(huán)境/介質(zhì)D值） 滅菌產(chǎn)品微生物污染數(shù) 計算F0時，應(yīng)適當增加安全因素，一般增加50 滅菌參數(shù)(F值和F0值)100級最終滅菌的藥品：大體積注射劑的灌封。非最終滅菌的藥品

9、：灌裝前不需無菌濾過的產(chǎn)品的配制；注射劑的灌封、分裝、壓塞；直接接觸藥品的包裝材料最終處理后的暴露環(huán)境。 無菌制劑、注射原料藥的精制、烘干、分裝。10000級最終滅菌的藥品：注射液的稀配、濾過；小體積注射液的灌封；直接接觸藥品的包裝材料的最終處理。非最終滅菌的藥品：灌裝前需除菌濾過的藥液的配制。100000級最終滅菌的藥品：注射劑的濃配或采用密閉系統(tǒng)的稀配。非最終滅菌的藥品：扎蓋；直接接觸藥品的包裝材料最后一次精洗的最低要求。各種注射劑及工序?qū)崈舳鹊囊?l 概念 （空氣凈化、維護管理） 空氣凈化 以創(chuàng)造潔凈空氣為目的的空氣調(diào)節(jié)措施。 工業(yè)凈化 除去塵埃 生物凈化 除去塵埃、微生物-制藥工業(yè)

10、空氣凈化技術(shù)100100級級潔凈度級別塵粒最大允許數(shù)/m3微生物最大允許數(shù)0.5m5m浮游菌/ m3沉降菌/ m33 50005110 000級350 0002 0001003100 000級3 500 00020 00050010300 000級10 500 00060 0001 000151999年8月1日實施的新GMP潔凈度標準 5Pa,10Pa,18-26,40-60%空氣凈化技術(shù)l 空氣凈化技術(shù) 空氣凈化/管理維護 一般采用空氣過濾法。通過多孔過濾介質(zhì)，塵埃和微生物被截留、吸附。 1) 過濾機制 慣性作用(通過纖維的彎道) 擴散作用(圍繞纖維表面作布朗運用) 攔截作用(粒徑大于纖維間

11、隙) 靜電作用(摩擦產(chǎn)生靜電作用) 分子間范德華力(與纖維分子間作用力)空氣凈化技術(shù)l 空氣凈化技術(shù) 2)濾過方式 表面濾過/深層濾過 3)影響因素 塵粒粒徑 過濾風速（二次污染） 纖維直徑和密實性 附塵（定期清洗） 3) 空氣過濾器空氣凈化技術(shù)效率（%）0.1 0.5 粒徑(m)l 潔凈室的設(shè)計 1)凈化系統(tǒng)設(shè)計 初中高三級過濾，正壓狀態(tài)。 2)潔凈區(qū)的氣流要求 層流: 指空氣流線呈同各平行狀態(tài)，各流線間塵埃不易相互擴散。100級 亂流: 空氣流線呈不規(guī)則狀態(tài)，各流線間的塵埃易相互擴散。1000-10000級 空氣凈化技術(shù)空氣凈化技術(shù)高效空氣凈化系統(tǒng)初效高效或亞高效高效潔凈室風機新風排風l

12、潔凈室的設(shè)計 1)凈化系統(tǒng)設(shè)計 初中高三級過濾，正壓狀態(tài)。 2)潔凈區(qū)的氣流要求 層流: 指空氣流線呈同各平行狀態(tài)，各流線間塵埃不易相互擴散。100級 亂流: 空氣流線呈不規(guī)則狀態(tài)，各流線間的塵埃易相互擴散。10000級 空氣凈化技術(shù)3)潔凈區(qū)的基本布局 為滿足制劑要求，生產(chǎn)廠區(qū)被分為一般生產(chǎn)區(qū)、控制區(qū)、潔凈區(qū)、無菌區(qū)。 一般生產(chǎn)區(qū)無潔凈度要求，控制區(qū)要求達到10萬級，潔凈區(qū)要求達到10000級，無菌區(qū)達到100級。為消除人為污染，降低成本，可在10000級潔凈室內(nèi)放置100級超凈工作臺?？諝鈨艋夹g(shù)冷凍干燥freeze drying ：在低溫與真空下使冰直接升華，以水蒸氣形式除去的干燥技術(shù)。

13、1）干燥原理/曲線2）干燥設(shè)備冷凍干燥技術(shù)常見問題及解決辦法: 1) 含水量高 液層過厚/真空度不夠/熱量供給不足 2) 噴瓶 預(yù)凍溫度過高/凍結(jié)不實/供熱過快局部過熱 3) 產(chǎn)品外形不飽滿 外殼結(jié)構(gòu)致密/水蒸氣在干層停留時間過長(加入甘露醇等填充劑/反復(fù)預(yù)冷升華/改善結(jié)晶狀態(tài)和通氣性)冷凍干燥技術(shù)第二節(jié) 注射劑主要內(nèi)容l 概述l 溶劑與附加劑l 注射用水l 熱原l 安瓿的處理l 注射劑的制備l 注射劑的質(zhì)量評價l 舉例l 注射劑的試制l 定義injections 指藥物制成的供注入體內(nèi)的滅菌溶液、乳狀液、混懸液，以及供臨用前配成溶液或混懸液的無菌粉末或濃溶液。概述l 分類 按分散系統(tǒng)分 溶液

14、型(油、水) 無菌粉末 混懸型 乳劑型 (注意油溶液與混懸型只能做肌肉注射) 按體積分 注射液(1-50ml) 輸液(幾百到幾千毫升)概述l 特點 藥效迅速 劑量準確，作用可靠 適合不宜口服的藥物 適合不能口服給藥的病人 可以產(chǎn)生定位、靶向、長效作用 疼痛感 使用不便 制造過程復(fù)雜概述l 質(zhì)量要求 無菌無熱原澄明度pH穩(wěn)定性 滲透壓安全性降壓物質(zhì)概述l 溶劑 1)注射用油 2)注射用非水溶劑 3)注射用水溶劑與附加劑l 注射用油 水中難溶性藥物或為了長效的目的可選用注射用油做溶劑。 中國藥典2005年版收載的注射用油為大豆油，為淡黃色澄明液體，無臭味溫淡；密度為0.916-0.922 g/ml

15、，折光率1.472-1.476，酸值不大于0.1，皂化值為188-195，碘值為126-140。 溶劑與附加劑l 酸值 說明油中游離脂肪酸的多少并反映油酸敗的程度。酸敗的油產(chǎn)生低分子量的醛、酮等均能引起注射的刺激性，同時影響藥物穩(wěn)定性。l 皂化值 中和并皂化lg物質(zhì)所消耗的氫氧化鉀毫克數(shù)。皂化值愈高，說明脂肪酸分子量愈小，親水性較強，失去油脂的特性；皂化值愈低，則脂肪酸分子量愈大或含有較多的不皂化物，油脂接近固體，難以注射和吸收，所以注射用油需規(guī)定一定的皂化值范圍。 l 碘值 說明脂肪酸不飽和鍵的多少，碘值高，不飽和鍵多，油易氧化變質(zhì)。 溶劑與附加劑知識回顧1l如何根據(jù)滅菌程序計算F0值?l影

16、響F0測定的因素? 兩公式 F0D121（lgN0lgNt）l不同注射劑有不同的lgNt，生產(chǎn)環(huán)境不一樣 最終滅菌產(chǎn)品：輸液100級/小注射10000級l生產(chǎn)環(huán)境如何產(chǎn)生？ 空氣凈化技術(shù) 工業(yè)凈化 凈化 生物凈化 維護管理知識回顧2l空氣過濾機制5/影響過濾的因素4l空氣凈化一般采用初高中三級過濾器l層流/亂流l潔凈區(qū)的基本布局l冷凍干燥技術(shù) 原理/設(shè)備l注射劑的質(zhì)量要求 無菌無熱原澄明度pH穩(wěn)定性 滲透壓安全性降壓物質(zhì)l注射用油/注射用非水溶劑/注射用水初效高效或亞高效高效潔凈室風機新風排風l 酸值 說明油中游離脂肪酸的多少。l 皂化值 中和/皂化lg物質(zhì)所消耗氫氧化鉀毫克數(shù)。皂化值愈高脂肪

17、酸分子量愈小，親水性較強，失去油脂的特性；皂化值愈低，則脂肪酸分子量愈大或含有較多的不皂化物，油脂接近固體，難以注射和吸收l 碘值 說明脂肪酸不飽和鍵的多少，碘值高，不飽和鍵多，油易氧化變質(zhì)。 知識回顧3 注射用油的精制 一般的植物油含游離脂肪酸、各種色素和植物蛋白等，經(jīng)過精制才能供注射使用。 1)中和游離脂肪酸 先測定酸值，然后加入氫氧化鈉溶液，于60-70C皂化完全，靜置待形成的肥皂沉降后進行過濾，最后用水洗滌過量的氫氧化鈉。 2)脫色除臭 于80-90C在攪拌下加入白陶土及活性炭并繼續(xù)攪拌一段時間，然后過濾。 3)脫水 用CaCl2除去洗滌時混入的少量的水。 4)滅菌 150C干熱滅菌1

18、 h。溶劑與附加劑l 注射用非水溶劑 乙醇 與水、甘油、揮發(fā)油等可任意混合。供肌內(nèi)或靜脈注射濃度可高達50%。超過10%有溶血作用或疼痛感。 丙二醇 供注射用的為1,2-丙二醇與乙醇、甘油、水相混溶。能溶解許多水不溶性藥物，已廣泛用作注射劑的溶劑，可供肌內(nèi)及靜脈注射，在重金屬催化下易氧化變質(zhì)。 溶劑與附加劑l 注射用非水溶劑 聚乙二醇 注射用平均分子量300及400，能與水、乙醇混合。為無色粘稠液體，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，不水解。 甘油 與水、乙醇可任意混合。對許多藥物有較大溶解度，粘度大、刺激性強，不能單獨作為注射劑的溶劑，常與乙醇、丙二醇、水等混合應(yīng)用。 二甲基乙酰胺 澄明中性溶液，藥物溶解范圍大

19、 動物實驗LD50為數(shù)克至十幾克/kg 溶劑與附加劑l 注射用水 注射用水 制藥用水 純化水 滅菌用注射用水 原水（經(jīng)過濾、電滲析或反滲透） 一級純化水（經(jīng)陽離子樹脂、脫氣塔、陰離子樹脂、混合樹脂） 二級純化水 （經(jīng)蒸餾） 注射用水 注射用水原水處理（原水一級純化水）電滲析法/反滲透1) 電滲析法 依據(jù)在電場作用下離子定向遷移及交換膜的選擇透過性而設(shè)計的。 注射用水原水處理（原水一級純化水）電滲析法/反滲透2)反滲透法 不用酸堿處理，比離子交換法經(jīng)濟，比電阻低5-10 萬cm，高鹽含量。 注射用水一級純化水二級純化水 3)離子交換法 制得的純化水比電阻大于100萬cm ，化學(xué)純度高。用作普通制

20、劑的溶劑、供制備注射用水、注射劑包裝容器的中間洗滌。 陽離子樹脂 (脫氣) 陰離子樹脂 陰、陽混合樹脂。 注射用水二級純化水注射用水4）蒸餾法 塔式蒸餾水器 多效蒸餾水器 耗能低，產(chǎn)量高、質(zhì)量優(yōu) 檢查氯化物/重金屬/pH/銨鹽/熱原 貯放時間不超過12 80以上或滅菌后密封保存。 注射用水二級純化水注射用水4）蒸餾法 塔式蒸餾水器 多效蒸餾水器 耗能低，產(chǎn)量高、質(zhì)量優(yōu) 檢查氯化物/重金屬/pH/銨鹽/熱原 貯放時間不超過12 80以上或滅菌后密封保存。 注射用水l 概念 熱原pyrogens為微生物的代謝產(chǎn)物，大多數(shù)細菌都可以產(chǎn)生。以革蘭氏陰性菌產(chǎn)生的熱原致熱能力最強。l 組成 是由磷脂、脂多

21、糖及蛋白質(zhì)組成的有機高分子復(fù)合物，也稱內(nèi)毒素。其中脂多糖為內(nèi)毒素的主要成分。故可認為內(nèi)毒素=熱原=脂多糖 含有熱原的注射劑輸入體內(nèi)，會引起熱原反應(yīng)。熱原l 特點 耐熱 180 3-4小時 體積小 一般濾過器無法截留 水溶性 不揮發(fā)性 采用蒸餾法制備注射用水的依據(jù) 吸附性 能被強酸強堿強氧化劑超聲波破壞 致熱能力強/靜脈注射最強 0.01微克可產(chǎn)生效用 在生物種屬間有差別 人兔狗鳥 不同細菌不同培養(yǎng)環(huán)境產(chǎn)生的熱原致熱能力有差別熱原熱原l熱原的除去 1）容器上熱原的除去 高溫法或酸堿法 2）水中熱原的除去 離子交換法（含磷酸根） 3）溶液中熱原的除去 吸附法和超濾法 活性碳 * （0.1%-0.5

22、%） 超濾法 截留大分子雜質(zhì)以提高澄明度和除去熱原（MW 80萬-120萬）熱原l 熱原的檢查方法 家兔法 為各國藥典收載的方法，屬于體內(nèi)檢查法。根據(jù)熱原反應(yīng)引起高熱致溫度升高來設(shè)計的。將供試品靜脈注入合格的家兔體內(nèi)，然后在規(guī)定時間內(nèi)測定家兔體溫變化，以判斷供試品所含熱原限度是否符合規(guī)定。 鱟試劑法 為內(nèi)毒素的體外檢查法。利用鱟試劑與細菌內(nèi)毒素產(chǎn)生的膠凝反應(yīng)來判斷細菌內(nèi)毒素的限量是否符合規(guī)定。鱟試劑來源于鱟血液的變形細胞溶解物，含有凝固酶原、凝固蛋白原。 熱原l 特點 耐熱 180 3-4小時 體積小 一般濾過器無法截留 水溶性 不揮發(fā)性 采用蒸餾法制備注射用水的依據(jù) 吸附性 能被強酸強堿強氧

23、化劑超聲波破壞 致熱能力強/靜脈注射最強 0.01微克可產(chǎn)生效用 在生物種屬間有差別 人兔狗鳥 不同細菌不同培養(yǎng)環(huán)境產(chǎn)生的熱原致熱能力有差別熱原l 熱原的檢查方法 家兔法 為各國藥典收載的方法，屬于體內(nèi)檢查法。根據(jù)熱原反應(yīng)引起高熱致溫度升高來設(shè)計的。將供試品靜脈注入合格的家兔體內(nèi)，然后在規(guī)定時間內(nèi)測定家兔體溫變化，以判斷供試品所含熱原限度是否符合規(guī)定。 鱟試劑法 為內(nèi)毒素的體外檢查法。利用鱟試劑與細菌內(nèi)毒素產(chǎn)生的膠凝反應(yīng)來判斷細菌內(nèi)毒素的限量是否符合規(guī)定。鱟試劑來源于鱟血液的變形細胞溶解物，含有凝固酶原、凝固蛋白原。 熱原鱟細胞 (凝固酶原 凝固蛋白原) + + 內(nèi)毒素 熱原激活凝固酶凝固蛋白

24、(凝膠)注射劑+鱟試劑是否產(chǎn)生膠凝反應(yīng)? 判斷標準：將安瓿輕輕取出，緩緩倒轉(zhuǎn)180時 陽性（+）：管內(nèi)凝膠不變形，不從管壁脫落 陰性（-）：凝膠不能保持完整，或從脫滑者 2支供試品管均為（-）則認為供試品細菌內(nèi)毒素檢查合格，否則不合格。陽性對照管或供試品對照管為（-），陰性對照管為（+），則試驗無效。如2支供試品管1支為（+），1支為（-），則需按上述方法另取4支供試品進行復(fù)試，4支供試品中有1支為（+），則供試品細菌內(nèi)毒素檢查不合格。 具體操作：取裝有0.1 ml鱟試劑的安瓿5支： 2支+0.1 ml供試品溶液-供試管 1支+0.1 ml細菌內(nèi)毒素標準工作液-陽性對照管 1支+0.1 ml細

25、菌內(nèi)毒素檢查用水-陰性對照管 1支+0.1 ml供試品+細菌內(nèi)毒素標準液-供試陽性對照 將安瓿中溶液輕輕混勻后密封，垂直放于37C的恒溫器中，保溫60 min，然后觀察結(jié)果。熱原家兔法與鱟試驗法的比較1) 靈敏度相差10倍，鱟試驗法0.0001 g，而家兔法為0.001 g。 2) 鱟試驗法不能用家兔法檢測的品種，如放射性制劑及腫瘤抑制劑。 3) 鱟試驗法操作簡單、迅速，實驗費用少，適于生產(chǎn)過程中熱原的控制。4) 鱟試驗法對革蘭氏陰性菌以外的內(nèi)毒素不夠靈敏，不能完全取代家兔法。熱原l 制備流程P73 分為四個部分即四條主線(特別注意所屬區(qū)域) 1)水-注射用水 2)安瓿-割、洗、干燥、滅菌 3

26、)藥品-配制、過濾、灌、封、滅菌 4)成品質(zhì)檢包裝 注射劑的制備l 注射劑車間 1)位置選擇 空氣潔凈的地方，遠離塵量大的馬路煙囪安靜、開闊、光線充足，無泥土外露，可種植草坪，但不能種花。 2)房間布置 按工序可分為洗滌室、配濾室、灌封室、滅菌室、質(zhì)檢室等，按各工序?qū)崈舳鹊囊蟛煌?，為一般生產(chǎn)區(qū)、控制區(qū)及潔凈區(qū)。注射劑的制備l注射劑車間3）設(shè)計原則 人流物流分開 有足夠的緩沖間 人走向有衛(wèi)生設(shè)施 區(qū)分出生產(chǎn)區(qū)、控制區(qū)、潔凈區(qū) 控制區(qū) 18-28 50-65% 潔凈區(qū) 18-24 45-65% 3000lx 80分貝 潔凈度高的布置在內(nèi)側(cè)的中心位置 注射劑的制備l 注射劑車間4) 內(nèi)部結(jié)構(gòu) #

27、 電氣線路和管道全部嵌入墻內(nèi) # 內(nèi)表面平整光滑，無縫隙，接口嚴密，無顆粒脫落，耐受消毒與清洗。 # 墻壁與天花板連接處成弧形以減少灰塵積聚和便于清洗。注射劑的制備100級最終滅菌的藥品：大體積注射劑的灌封。非最終滅菌的藥品：灌裝前不需無菌濾過的產(chǎn)品的配制；注射劑的灌封、分裝、壓塞；直接接觸藥品的包裝材料最終處理后的暴露環(huán)境。 無菌制劑、注射原料藥的精制、烘干、分裝。10000級最終滅菌的藥品：注射液的稀配、濾過；小體積注射液的灌封；直接接觸藥品的包裝材料的最終處理。非最終滅菌的藥品：灌裝前需除菌濾過的藥液的配制。100000級最終滅菌的藥品：注射劑的濃配或采用密閉系統(tǒng)的稀配。非最終滅菌的藥品

28、：扎蓋；直接接觸藥品的包裝材料最后一次精洗的最低要求。5）各種注射劑對潔凈度的要求 注射劑的制備l GMP的明確規(guī)定禁止使用直頸安瓿。l 一般藥物使用無色容器，對光敏感藥物使用棕色瓶。l 對玻璃的基本要求：經(jīng)受高溫滅菌/長時間貯存，直接與不同性質(zhì)的藥液接觸，惰性。否則導(dǎo)致注射劑發(fā)生pH改變、沉淀、變色、脫片。注射劑的制備制安瓿的玻璃含鋯玻璃含鋇玻璃中性玻璃注射劑的制備低硼硅酸鹽，適用于中性或偏酸性藥液耐堿性能好，適用范圍于堿性藥液耐酸堿，適用于各類藥液安瓿的檢查物理檢查化學(xué)檢查外觀、尺寸、應(yīng)力、清潔度、熱穩(wěn)定性耐酸、耐堿性能、中性檢查裝藥試驗注射劑的制備證明藥液與容器之間無相互作用/對注射劑質(zhì)

29、量無影響安安 瓿瓿洗洗 滌滌干燥、滅菌干燥、滅菌冷冷 卻卻直接送入灌封間直接送入灌封間貯貯 存存安瓿安瓿 洗、灌、封洗、灌、封的聯(lián)動生產(chǎn)設(shè)備的聯(lián)動生產(chǎn)設(shè)備注射劑的制備l 安瓿的處理 熱處理洗滌干燥滅菌冷卻 熱處理 灌裝去離子水或0.5%的醋酸水溶液100 30 min蒸煮。使灰塵、砂粒等雜質(zhì)加熱浸泡后落入水中，容易洗滌；使微量的游離堿和金屬溶于水中；使玻璃表面形成硅酸膠保護膜延緩藥液對玻璃的浸蝕。 注射劑的制備l 安瓿的處理 洗滌1）甩水洗滌法（5ml） 灌水蒸煮甩水（反復(fù)三次）2）氣水噴射洗滌法(大安瓿) 氣-水-氣-水-氣（4-8次） 3）超聲波洗滌法 在生產(chǎn)上都采用洗、灌、封聯(lián)動裝置，中

30、途不需要人干預(yù)注射劑的制備干燥與滅菌 一般干燥溫度：120-140 無菌操作的安瓿180干熱滅菌1小時 設(shè)備：多采用隧道式干熱滅菌機安瓿在隧道內(nèi)的過程：安瓿在隧道內(nèi)的過程：預(yù)熱預(yù)熱高溫滅菌高溫滅菌降溫降溫注射劑的制備l 注射液的配制、濾過、灌注、封口 *原輔料質(zhì)量符合供注射用原輔料要求，“注射用規(guī)格”，大生產(chǎn)前進行小試 配制 稀配法 一次性配制成所需濃度，適用于質(zhì)量好的原料 濃配法 先配成濃溶液，加熱或冷藏過濾，再稀釋成所需濃度，適合于質(zhì)量稍差的原料。過濾時常用活性碳作助濾劑。注射劑的制備注意：使用活性碳時，要注意活性碳酸性環(huán)境中強烈的吸附作用和在堿性環(huán)境下脫吸附(反使溶液中的雜質(zhì)增加)。要通

31、過加碳前后藥物含量的變化，確定能否使用活性碳最好用酸處理并活化后使用。 知識回顧1一級純化水二級純化水原水注射用水熱原檢查知識回顧2熱原l 熱原的特點l 熱原的污染途徑l 熱原的除去l 熱原檢查法知識回顧3安瓿的類型玻璃的類型安瓿的處理注意四條線的相互關(guān)聯(lián)知識回顧4l 注射液的配制、濾過、灌注、封口 濾過 靜壓濾過 生產(chǎn)量不大，無加壓或減壓設(shè)備 減壓濾過 壓力不夠穩(wěn)定，易影響質(zhì)量 加壓濾過 壓力穩(wěn)定濾速快質(zhì)量好產(chǎn)量高。注射劑的制備1) 濾過機理 表面濾過 濾過介質(zhì)孔徑小于等濾物，攔截 深層濾過 濾過介質(zhì)孔徑大于等濾物，慣性/擴散/靜電/范德華力 介質(zhì)濾過 固體粒子被濾過介質(zhì)截留達到分離1%注射

32、劑的制備2) 濾過的影響因素 Poiseuile公式V液體的濾過體積，P操作壓力或濾床面上下壓差，r毛細管半徑，l濾層厚度，濾液粘度，t濾過時間。 注射劑的制備V/t3) 常用的助濾劑 助濾劑: 具有多孔性、不可壓縮性的濾過介質(zhì)，阻止沉淀接觸和堵塞濾過介質(zhì)孔眼。 硅藻土 二氧化硅，惰性和不溶性，常用 活性碳 吸附熱原、微生物、脫色 滑石粉 不溶性揮發(fā)油/色素/粘液樹脂多的液體 紙漿 助濾和脫色，處理難以濾清的藥液注射劑的制備4）常用過濾介質(zhì)濾紙、脫脂棉、織物介質(zhì)、多孔塑料、垂熔玻璃、多孔陶瓷、微乳濾膜 5）濾器種類與特點 粗濾 砂濾棒、板框式壓濾器精濾 垂熔玻璃濾器、微孔膜濾器、超濾膜濾器注射

33、劑的制備 使用前先用水抽洗，然后用重鉻酸鉀硫酸洗液浸泡處理，最后用水抽洗除去硫酸洗液并用注射用水洗至中性。用時在濾過介質(zhì)上墊稠布或濾紙，防堵塞。 3號（1540 m）多用于常壓濾過，4號（515 m）可用于減壓或加壓濾過，6號(2 m)作無菌濾過。 注射劑的制備 微孔濾膜濾器 微孔濾膜是用高分子材料制成的薄膜濾過介質(zhì)。在薄膜上分布有大量的穿透性微孔，孔徑從0.02514 m。特點： l孔徑小、均勻、截留能力強l質(zhì)地輕而薄(0.10.15 mm)而且孔隙率高(80%左右)，藥液通過薄膜時阻力小、濾速快（可快40倍）l濾過時無介質(zhì)脫落，不影響藥液的pH值l濾膜吸附性少，不滯留藥液l濾膜用后棄去，藥

34、液之間不會產(chǎn)生交叉污染等。 注射劑的制備 適用于注射劑的精濾或末端濾過、除菌濾過，細菌、癌細胞、寄生蟲等檢驗。 高分子材料不同，微孔濾膜、耐酸堿、耐溶劑 安裝前浸漬12小時以上。注射劑的制備l 注射液的配制、濾過、灌注、封口 注射劑的灌注、封口 1）環(huán)境 注射劑的灌注、封口應(yīng)在同一室進行，是影響質(zhì)量的關(guān)鍵區(qū)域，應(yīng)盡可能提高潔凈度。100級 2）要求 灌注要做到劑量準確，藥液不沾瓶，不受污染; 灌注量應(yīng)比標示量稍多以抵償使用時吸取不完 封口做到嚴密不漏氣,頸端圓整光潔無尖頭小泡注射劑的制備裝量易流動粘稠0.50.10.121.00.10.152.00.150.2050.30.50501.01.5

35、不同體積注射劑應(yīng)補償?shù)捏w積數(shù)（ml）注射劑的制備3）容易出現(xiàn)問題 劑量不準 封口不嚴 出現(xiàn)大頭、焦頭 澄明度不合格注射劑的制備4）通氣問題 對于不穩(wěn)定種類，要通入惰性氣體置換瓶中空氣，常用的有CO2，N2。純度差的要通過洗氣瓶去除某些雜質(zhì)。 N2：經(jīng)硫酸、堿性焦性沒食子酸、1%的高錳酸鉀溶液、注射用水。 氧濃度0.36ml/L CO2：濃硫酸、硫酸銅溶液，1%的高錳酸鉀溶液、50%甘油溶液、注射用水。 氧濃度0.05ml/L 注射劑的制備5）灌封方法 手工灌注 洗、灌、封聯(lián)動機注射劑的制備l 熱原l 無菌l pHl 滲透壓l 降壓物質(zhì)l 安全性l 穩(wěn)定性 生物學(xué) 物理 化學(xué)注射劑質(zhì)量控制/穩(wěn)定

36、性評價l 維C注射液 維生素C 104g 碳酸氫鈉 49g 依地酸二鈉 0.05g 亞硫酸氫鈉 2g 注射用水 至1000ml 寫出各成分的作用，并簡述制備過程。 1)強酸性-碳酸氫鈉 2)容易氧化-依地酸二鈉/亞硫酸氫鈉/煮沸通CO2 /CO2 灌封舉例氧氣pH金屬離子（Cu2+）舉例維生素C 碳酸氫鈉依地酸二鈉亞硫酸氫鈉 注射用水流通蒸氣滅菌15minl 氯霉素注射液 氯霉素 131.25g 丙二醇 881.5g亞硫酸氫鈉 1.0g 注射用水 加至1000ml寫出各成分的作用，并簡述制備過程。舉例流通蒸氣滅菌30min 氯霉素微溶于水，處方中加入丙二醇作為混合溶劑增加溶解度；氯霉素在pH

37、6最穩(wěn)定，強堿性溶液中迅速破壞，主要為酰胺水解和脫氯。應(yīng)控制pH在6.07.8之間；氯霉素含兩個羥基易氧化，除調(diào)節(jié)pH外，加入亞硫酸氫鈉作為抗氧劑。 舉例注射劑的試制藥物易水解重點應(yīng)考慮pH、溶劑易氧化主要考慮氧氣、光線、金屬離子、pH的影響混懸型/乳狀型主要關(guān)注物理穩(wěn)定性，如分層、沉降、聚集等。溶解度穩(wěn)定性分配系數(shù)pH-速率圖晶型等溶液/乳劑型/混懸型/粉針/凍干注射劑的試制l 西咪替丁注射液的試制 文獻查閱 通過查閱有關(guān)資料，得知西咪替丁的結(jié)構(gòu)如下： 其化學(xué)結(jié)構(gòu)是由咪唑五元環(huán)，含硫醚的四原子鏈和末端取代的胍三部分組成。注射劑的試制舉例(自學(xué))l 西咪替丁注射液的試制 溶解度試驗 西咪替丁含

38、胍基及多個氮原子，具有堿性，酸性條件下溶解，通過實驗測定溶解能。結(jié)果表明，西咪替丁在水中微溶，乙醇中溶解，稀鹽酸中溶解。 采用鹽酸來增加溶解度不會引入有機溶劑。關(guān)于鹽酸的用量，進行了系列試驗，鹽酸濃度過低不能完全溶解，過高又會析出結(jié)晶。試驗結(jié)果表明，1%的西咪替丁使用2 mol/L HCL 10ml，并用20% NaOH調(diào)節(jié)pH 4.26.0之間，既保證其溶解又能保證溶液的澄清，同時又符合注射劑對pH的要求。注射劑的試制舉例(自學(xué))l 西咪替丁注射液的試制 西咪替丁的穩(wěn)定性 根據(jù)西咪替丁的化學(xué)結(jié)構(gòu)，比較穩(wěn)定，不易水解或氧化，無須加入有關(guān)穩(wěn)定劑。 配制工藝研究 分別用室溫及85C注射用水加入鹽酸

39、，然后加入西咪替丁溶解，再用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH，并用注射用水稀釋至規(guī)定體積。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，使用85C注射用水，西咪替丁溶解迅速，操作方便，因此，配制溶液時，可采用85C注射用水。注射劑的試制舉例(自學(xué))l 西咪替丁注射液的試制 處方設(shè)計 西咪替丁注射液在前述工作的基礎(chǔ)上，處方設(shè)計及工藝如下： 西咪替丁 10g 2 mol/L HCL 10ml 20%NaOH 適量 注射用水 加至 1000ml 制法 將鹽酸加入總體積50%的85C注射用水中，加入西咪替丁攪拌溶解，再用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH 4.26.0，用注射用水稀釋至規(guī)定體積，用砂濾棒及微孔濾膜濾過，灌封于2 ml安瓿，100C 30 min滅菌即得。

40、注射劑的試制舉例(自學(xué))第三節(jié) 輸液l 定義 輸液infusion solution 指由靜脈滴注輸入體內(nèi)的大體積(一次給藥在100 ml以上)注射液。 l 輸液的特點 容量大 靜脈注射l 輸液的質(zhì)量要求 無菌 無熱原 澄明度要求更嚴 pH 等滲 不得添加抑菌劑概述l 分類 電解質(zhì)輸液 營養(yǎng)輸液 膠體輸液 含藥輸液 概述l 等滲與等張的重要意義(大劑量iv、脊注) 等滲溶液是指滲透壓與血漿相等的溶液，滲透壓是溶液的依數(shù)性之一，可用人造的理想半透膜以物理化學(xué)實驗方法求得。等滲是個物理化學(xué)概念。 等張溶液是指與紅細胞張力相等的溶液，在等張溶液中既不發(fā)生紅細胞體積改變，也不發(fā)生溶血，等張是個生物學(xué)概

41、念。 等滲溶液不一定是等張溶液。注射劑的等滲與等張 紅細胞膜對于許多藥物的水溶液來說可視為理想的半透膜，其只讓溶劑分子出入，而不讓溶質(zhì)分子通過。因此，許多藥物的等滲濃度與等張濃度相同或相近。如0.9%的氯化鈉溶液，既是等滲溶液又是等張溶液。但有些藥物如鹽酸普魯卡因、甘油、尿素等，能自由地通過細胞膜，促使細胞膜外水分也進入細胞，使紅細胞脹大，甚至破裂而引起溶血。加入適量氯化鈉或葡萄糖后即可避免溶血。 輸液必須進行溶血試驗，必要時加入等張調(diào)節(jié)劑，以防止溶血。 注射劑的等滲與等張l 滲透壓的計算 1)毫滲透壓摩爾 臨床上凡輸液的毫滲透壓摩爾濃度為298mOsmol/L(正常范圍280310mOsmo

42、l/L)，則認為與血液等滲。 n為溶質(zhì)分子溶解時生成的離子數(shù)，例如葡萄糖n=1，氯化鈉，硫酸鎂n=2，氯化鈣n=3，枸櫞酸鈉n=4。注射劑的等滲與等張1.制備等滲氯化鈉注射液1000ml，需要多少氯化鈉? 氯化鈉的摩爾質(zhì)量為58.8 g，溶解時，n=2，設(shè)需加入的氯化鈉為X， 得 X=9 g。 即1000ml溶液中含9g氯化鈉，與血漿等滲，故9g/L或0.9%(g/ml)的氯化鈉注射液，就是等滲溶液。 注射劑的等滲與等張 2)冰點下降法 血漿的冰點為-0.52，因此任何溶液,只要其冰點降低值為0.52，即與血漿等滲。 例2：配制100ml 1%鹽酸普魯卡因溶液，需要加多少氯化鈉，使成等滲溶液?

43、 即100 ml需增加0.69 g氯化鈉，可使1% 的鹽酸普魯卡因溶液成為等滲溶液 注射劑的等滲與等張 3)氯化鈉等滲當量法 與1g藥物呈等滲效應(yīng)的氯化鈉量 鹽酸麻黃堿的氯化鈉等滲當量為0.28，若配制2%的鹽酸麻黃堿溶液1000 ml，欲使其等滲，需加入氯化鈉多少克？ X=(0.9-0.282) 1000/100=3.4g注射劑的等滲與等張l 容器及處理（玻璃輸液瓶） 水洗法：適用于制瓶車間潔凈度高,瓶子出爐后立即密封的。用濾過注射用水沖洗即可。 酸洗法：適用于已存放一定時間的輸液瓶，用重鉻酸鉀清潔液蕩洗。有強力的消滅微生物及熱原的作用,對瓶壁游離堿起中和作用。但對設(shè)備腐蝕性大,操作不便,勞

44、動保護要求高。 堿洗法：2%氫氧化鈉溶液(60)或1%3%的碳酸鈉溶液沖洗。堿對玻璃有腐蝕作用,故堿液與玻璃接觸時間不宜過長(不超過數(shù)秒鐘)。堿洗法操作方便,易組織生產(chǎn)流水線,也能消除細菌與熱原。 輸液的制備l 容器及處理（塑料輸液袋） 采用聚氯乙烯或聚丙烯等無毒塑料制成。耐水腐蝕、機械強度高、化學(xué)穩(wěn)定性強、可以熱壓滅菌。但仍存在著濕氣和空氣可透過，影響貯存期。穩(wěn)定性和耐熱性較差,強裂振蕩,可產(chǎn)生輕度乳光等。 處理 先用水將袋面洗凈，然后灌入純化水蕩洗23次，再灌入約150 ml純化水，用玻璃塞塞緊袋口，熱壓滅菌（0.5 kg/cm2）30 min,臨用前將袋內(nèi)水倒掉，用濾過的注射用水蕩洗23

45、次，甩干后備用。 輸液的制備l 橡膠塞 橡膠塞對輸液澄明度影響很大, 質(zhì)量要求: -富于彈性及柔軟性，針頭刺入和拔出后應(yīng)立即閉合,并能耐受多次穿刺無碎屑脫落； -具耐溶性,不致增加藥液中的雜質(zhì)； -耐受高溫滅菌； -有高度化學(xué)穩(wěn)定性，不與藥物成分發(fā)生相互作用；-對藥液中藥物或附加劑的吸附作用應(yīng)達最低限度；無毒性及溶血作用。 很難達到，膠塞成分復(fù)雜-填充劑、硫化劑、塑化劑、促進劑、防老劑、潤滑劑、著色劑等。 加強橡膠塞的處理, 襯墊隔離膜 輸液的制備l 制備要點 a)車間潔凈度 大容量配液在10000級潔凈度下進行，對濾過及灌封等關(guān)鍵操作要求潔凈度達到100級。 b)配液 配液必須用新鮮注射用水（12 h以內(nèi)）；多采用濃配法，并且采用0.1-0.5%的活性炭吸附熱原、雜質(zhì)及色素。 c)濾過 采用加壓三級濾過裝置，即砂濾棒-垂熔玻璃濾球-微孔濾膜.末端濾過也可采用雙層微孔濾膜，第一層孔徑3 m，第二層孔徑0.8 m；或者在微孔濾膜后加上超濾，除去微生物及熱原，提高了輸液的質(zhì)量。輸液的制備d)灌封 輸液關(guān)鍵操作，由灌注、加薄膜、蓋橡膠塞、軋鋁蓋四步連續(xù)完成，除加膜外已實現(xiàn)了機械化聯(lián)動化。e)滅菌 為減少污染的機會，盡量使生產(chǎn)過程連貫進行，并