實(shí)驗(yàn)一、普通光學(xué)顯微鏡的使用及細(xì)菌形態(tài)的觀察

1、二、顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)及油鏡的工作原理普通光學(xué)顯微鏡基本構(gòu)造放大倍數(shù)放大倍數(shù)= =物鏡放大倍物鏡放大倍數(shù)數(shù)目鏡放目鏡放大倍數(shù)大倍數(shù) 在顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)中，在顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)中，物鏡的性能物鏡的性能最最為關(guān)鍵，它直接影響著顯微鏡的分辨率。而在普為關(guān)鍵，它直接影響著顯微鏡的分辨率。而在普通光學(xué)顯微鏡配置的幾種物鏡中，油鏡的放大倍通光學(xué)顯微鏡配置的幾種物鏡中，油鏡的放大倍數(shù)最大，對(duì)微生物學(xué)研究最為重要。與其他物鏡數(shù)最大，對(duì)微生物學(xué)研究最為重要。與其他物鏡相比，油鏡的使用比較特殊，需相比，油鏡的使用比較特殊，需在載玻片和鏡頭在載玻片和鏡頭之間加滴鏡油之間加滴鏡油。二、顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)及油鏡的工作原理低倍

2、鏡的操作低倍鏡的操作1. 1. 置顯微鏡于固定的桌上。置顯微鏡于固定的桌上。2. 2. 旋動(dòng)轉(zhuǎn)換器，將低倍鏡移到鏡筒下方與之對(duì)直。旋動(dòng)轉(zhuǎn)換器，將低倍鏡移到鏡筒下方與之對(duì)直。3. 3. 轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡向著光源處，同時(shí)用眼對(duì)準(zhǔn)目鏡，仔細(xì)觀轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡向著光源處，同時(shí)用眼對(duì)準(zhǔn)目鏡，仔細(xì)觀察，視野亮度均勻。察，視野亮度均勻。4. 4. 將標(biāo)本放在載物臺(tái)上，使觀察的目的物置于圓孔的正將標(biāo)本放在載物臺(tái)上，使觀察的目的物置于圓孔的正中央。中央。5. 5. 將粗調(diào)節(jié)器向下旋轉(zhuǎn)，將粗調(diào)節(jié)器向下旋轉(zhuǎn)，眼睛注視物鏡眼睛注視物鏡，以防物鏡和載，以防物鏡和載玻片相碰，當(dāng)物鏡的尖端距載玻片約玻片相碰，當(dāng)物鏡的尖端距載玻片約0.

3、5cm0.5cm處時(shí)停止旋轉(zhuǎn)。處時(shí)停止旋轉(zhuǎn)。6. 6. 左眼向目鏡觀察，調(diào)節(jié)粗、細(xì)調(diào)節(jié)器直至目的物清晰左眼向目鏡觀察，調(diào)節(jié)粗、細(xì)調(diào)節(jié)器直至目的物清晰為止。為止。高倍鏡的操作高倍鏡的操作1. 1. 使用高倍鏡之前，先用低倍鏡觀察，將目的物移至視使用高倍鏡之前，先用低倍鏡觀察，將目的物移至視野正中央。野正中央。2. 2. 旋動(dòng)轉(zhuǎn)換器換成高倍鏡，調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)節(jié)器直至目的物清旋動(dòng)轉(zhuǎn)換器換成高倍鏡，調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)節(jié)器直至目的物清晰；如果高倍鏡觸及載玻片應(yīng)立即停止旋動(dòng)，說明原來低晰；如果高倍鏡觸及載玻片應(yīng)立即停止旋動(dòng)，說明原來低倍鏡沒有調(diào)準(zhǔn)焦距，應(yīng)重調(diào)低倍鏡，找到目的物。倍鏡沒有調(diào)準(zhǔn)焦距，應(yīng)重調(diào)低倍鏡，找到目的物。

4、油鏡的操作油鏡的操作1. 1. 如果用高倍鏡未能看清目的物，則可用油鏡。應(yīng)先用如果用高倍鏡未能看清目的物，則可用油鏡。應(yīng)先用低倍鏡和高倍鏡檢查標(biāo)本片，將目的物移到視野正中。低倍鏡和高倍鏡檢查標(biāo)本片，將目的物移到視野正中。2.2.在載玻片上滴一滴香柏油，將油鏡移至正中在載玻片上滴一滴香柏油，將油鏡移至正中央，使油鏡頭浸沒在油中，剛好貼近載玻片。用央，使油鏡頭浸沒在油中，剛好貼近載玻片。用細(xì)調(diào)節(jié)器細(xì)調(diào)節(jié)器微微向上調(diào)即可。微微向上調(diào)即可。增加照明亮度增加照明亮度 油鏡的放大倍數(shù)可達(dá)油鏡的放大倍數(shù)可達(dá)100100 ，放大倍數(shù)這樣大的鏡頭，放大倍數(shù)這樣大的鏡頭，焦距很短，直徑很小，但所需要的光照強(qiáng)度卻最

5、大。焦距很短，直徑很小，但所需要的光照強(qiáng)度卻最大。 從承載標(biāo)本的玻片透過來的光線，因介質(zhì)密度不同從承載標(biāo)本的玻片透過來的光線，因介質(zhì)密度不同（從玻片進(jìn)入空氣，再進(jìn)入鏡頭），有些光線會(huì)因折射或全（從玻片進(jìn)入空氣，再進(jìn)入鏡頭），有些光線會(huì)因折射或全反射，不能進(jìn)入鏡頭，致使在使用油鏡時(shí)會(huì)因射入的光線較反射，不能進(jìn)入鏡頭，致使在使用油鏡時(shí)會(huì)因射入的光線較少，物像顯現(xiàn)不清。所以為少，物像顯現(xiàn)不清。所以為了不使通過的光線有所損失，了不使通過的光線有所損失，在使用油鏡時(shí)需在油鏡和玻在使用油鏡時(shí)需在油鏡和玻片之間加入與片之間加入與玻璃的折射率玻璃的折射率相仿的鏡油（通常使用香柏相仿的鏡油（通常使用香柏油，其折

6、射率油，其折射率n =1.52n =1.52）。）。增加了視野的進(jìn)光量，從而增加了視野的進(jìn)光量，從而使物象更加清晰。使物象更加清晰。增加顯微鏡的分辨率增加顯微鏡的分辨率 顯微鏡的分辨率或分辨力（顯微鏡的分辨率或分辨力（resolution or resolving resolution or resolving powerpower）是指顯微鏡能辨別兩點(diǎn)之間的最小距離的能力。從）是指顯微鏡能辨別兩點(diǎn)之間的最小距離的能力。從物理學(xué)角度看，光學(xué)顯微鏡的分辨率受光的干涉現(xiàn)象及所用物理學(xué)角度看，光學(xué)顯微鏡的分辨率受光的干涉現(xiàn)象及所用物鏡性能的限制，可表示為：物鏡性能的限制，可表示為：式中：式中：=光波

7、波長(zhǎng)光波波長(zhǎng)（平均（平均0.550.55 m)m) na=na=物鏡的數(shù)值孔徑值。物鏡的數(shù)值孔徑值。nad2分辨率 數(shù)值孔徑則取決于物鏡的鏡口數(shù)值孔徑則取決于物鏡的鏡口角和玻片與鏡頭間介質(zhì)的折射率，角和玻片與鏡頭間介質(zhì)的折射率，可表示為：可表示為： na=na=n n sin(/2 sin(/2） n:n: 物鏡和被檢標(biāo)本間介質(zhì)的折物鏡和被檢標(biāo)本間介質(zhì)的折射率。射率。 ：鏡口角。鏡口角。 以香柏油為介質(zhì)的油鏡所能達(dá)以香柏油為介質(zhì)的油鏡所能達(dá)到的數(shù)值孔徑（到的數(shù)值孔徑（nana一般在一般在1.21.21.41.4）要高于低倍鏡、高倍鏡）要高于低倍鏡、高倍鏡等物鏡（等物鏡（nana都低于都低于1.01.0