脂質(zhì)體及其制備方法的選擇

1、脂質(zhì)體及其制備方法的選擇1脂質(zhì)體概述1965年，英國(guó)學(xué)者Bangham和Standish將磷脂分散在水中進(jìn)行電鏡觀察時(shí)發(fā) 現(xiàn)了脂質(zhì)體。磷脂分散在水中自然形成多層囊泡，每層均為脂質(zhì)的雙分子層；囊 泡中央和各層之間被水相隔開，雙分子層厚度約為4納米。后來(lái)，將這種具有類 似生物膜結(jié)構(gòu)的雙分子小囊稱為脂質(zhì)體。此兩位學(xué)者曾獲得過(guò)諾貝爾獎(jiǎng)提名。某些磷脂分散在過(guò)量的水中形成了脂質(zhì)體，該脂分子本身排成雙分子層，在磷脂的主要相變溫度（Tm）以上，瞬間形成泡囊，且泡囊包圍水液，根據(jù)磷脂種類 及制備時(shí)所用溫度，雙分子層可以是凝膠或液晶狀態(tài)。在凝膠態(tài)時(shí)磷脂烴鏈?zhǔn)且?種有規(guī)律的結(jié)構(gòu)，在液態(tài)時(shí)烴鏈?zhǔn)菬o(wú)規(guī)律的，每一種用來(lái)制

2、備脂質(zhì)體的純磷脂由 凝膠狀態(tài)過(guò)渡到液晶狀態(tài)時(shí)均具有特征的相變溫度。這種相變溫度（Tin）是根據(jù)磷 脂性質(zhì)而變（見(jiàn)下表），它可在-20+90C之間變化，雙分子層的不同成分混合物 可引起相變溫度的變化或相變完全消失， 當(dāng)雙分子層通過(guò)相變溫度時(shí)，被封閉的 水溶性標(biāo)示物的漏出量增加。磷脂種類相變溫度（C）卵磷脂（卵磷脂膽堿）-15 7腦磷脂酰絲氨酸6 8二棕櫚磷脂41氫化大豆磷脂51脂質(zhì)體的相變行為決定了脂質(zhì)體的通透性、融合、聚集及蛋白結(jié)合能力，所有這些都明顯影響脂質(zhì)體的穩(wěn)定性和它們?cè)谏矬w系中的行為脂質(zhì)體根據(jù)其脂質(zhì)膜的層數(shù)和腔室的數(shù)量， 可以分為單層脂質(zhì)體，多層脂質(zhì)體和多囊脂質(zhì)體，單層脂質(zhì)體。不同類

3、型的脂質(zhì)體其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)各不相同， 見(jiàn)下圖 表。扯件范忤力100 Nm - 丨 000 mo粒咼紙囲為20 I訕、80汕冉水柑律標(biāo)大赴艷在WOcMd唄上閭1971年，英國(guó)Rymen等人開始將脂質(zhì)體用作藥物載體。所謂載體，可以是 一組分子，包蔽于藥物外，通過(guò)滲透或被巨嗜細(xì)胞吞噬后載體被酶類分解而釋放 藥物，從而發(fā)揮作用。它具有類細(xì)胞結(jié)構(gòu)，進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)主要被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞 噬而激活機(jī)體的自身免疫功能，并改變被包封藥物的體內(nèi)分布，使藥物主要在肝、 脾、肺和骨髓等組織器官中積蓄，從而提高藥物的治療指數(shù)，減少藥物的治療劑 量和降低藥物的毒性。脂質(zhì)體技術(shù)是被喻為“生物導(dǎo)彈”的第四代靶向給藥技 術(shù)，也是目前國(guó)際

4、上最熱門的制藥技術(shù)。 至于藥物在脂質(zhì)體中的負(fù)載定位， 其取 決于所載藥物的性質(zhì)，見(jiàn)下圖*水落性藥物2脂質(zhì)體制備方法分類及其介紹脂質(zhì)體是由磷脂分子在水相中通過(guò)疏水作用形成的， 因此制備脂質(zhì)體所強(qiáng)調(diào) 的不是膜組裝，而是如何形成適當(dāng)大小、包封率高和穩(wěn)定性高的囊泡。制備的方 法不同，脂質(zhì)體的粒徑可從幾十納米到幾微米，并且結(jié)構(gòu)也不盡相同。目前，制備脂質(zhì)體的方法較多，常用的有薄膜法、反相蒸發(fā)法、溶劑注入法 和復(fù)乳法等，這些方法一般稱為被動(dòng)載藥法，而 pH梯度法，硫酸銨梯度法一般 被稱為主動(dòng)載藥法。2.1被動(dòng)載藥法脂質(zhì)體常用制備方法主要有薄膜分散法、反相蒸發(fā)法、注入法、超聲波分 散等。在制備含藥脂質(zhì)體時(shí)，首

5、先將藥物溶于水相或有機(jī)相中， 然后按適宜的方 法制備含藥脂質(zhì)體，該法適于脂溶性強(qiáng)的藥物，所得脂質(zhì)體具有較高包封率。2.1.1薄膜分散法此法最初由Ban gham等報(bào)道，是最原始但又是迄今為止最基本和應(yīng)用最廣 泛的脂質(zhì)體的制備方法。 將磷脂和膽固醇等類脂及脂溶性藥物溶于有機(jī)溶劑， 然 后將此溶液置于一大的圓底燒瓶中， 再旋轉(zhuǎn)減壓蒸干， 磷脂在燒瓶?jī)?nèi)壁上會(huì)形成 一層很薄的膜，然后加入一定量的緩沖溶液，充分振蕩燒瓶使脂質(zhì)膜水化脫落， 即可得到脂質(zhì)體。 這種方法對(duì)水溶性藥物可獲得較高的包封率， 但是脂質(zhì)體粒徑 在0.25卩之間，可通過(guò)超聲波儀處理或者通過(guò)擠壓使脂質(zhì)體通過(guò)固定粒徑的 聚碳酸酯膜，在一定程

6、度上降低脂質(zhì)體的粒徑。2.1.2 超聲分散法將磷脂、膽固醇和待包封藥物一起溶解于有機(jī)溶劑中， 混合均勻后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā) 去除有機(jī)溶劑， 將剩下的溶液再經(jīng)超聲波處理， 分離即得脂質(zhì)體。 超聲波法可分 為兩種“水浴超聲波法和探針超聲波法”， 本法是制備小脂質(zhì)體的常用方法， 但 是超聲波易引起藥物的降解問(wèn)題。2.1.3 冷凍干燥法脂質(zhì)體混懸液在貯存期間易發(fā)生聚集、融合及藥物滲漏，且磷脂易氧化、水解，難以滿足藥物制劑穩(wěn)定性的要求。 1978 年 Vanleberghe 等首次報(bào)道采用冷凍 干燥法提高脂質(zhì)體的貯存穩(wěn)定性。 目前，該法已成為較有前途的改善脂質(zhì)體制劑 長(zhǎng)期穩(wěn)定性的方法之一。脂質(zhì)體冷凍干燥包括預(yù)凍、

7、初步干燥及二次干燥 3 個(gè)過(guò)程。凍干脂質(zhì) 體可直接作為固體劑型， 如噴霧劑使用， 也可用水或其它溶劑化重建成脂質(zhì)體混 懸液使用， 但預(yù)凍、干燥和復(fù)水等過(guò)程均不利于脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)和功能的穩(wěn)定。 如在 凍干前加入適宜的凍干保護(hù)劑， 采用適當(dāng)?shù)墓に嚕?則可大大減輕甚至消除凍干過(guò) 程對(duì)脂質(zhì)體的破壞， 復(fù)水后脂質(zhì)體的形態(tài)、 粒徑及包封率等均無(wú)顯著變化。 單糖、 二糖、寡聚糖、多糖、多元醇及其他水溶性高分子物質(zhì)都可以用做脂質(zhì)體凍干保 護(hù)劑，其中二糖是研究最多也是最有效的，常用的有海藻糖、麥芽糖、蔗糖及乳糖。本法適于熱敏型藥物前體脂質(zhì)體的制備， 但成本較高。 陳建明等以大豆磷脂 為膜材，以甘露醇為凍干保護(hù)劑，采

8、用凍干法制備了維生素 A 前體脂質(zhì)體，復(fù) 水化后平均粒徑為0.6151卩m,包封率98.5%。林中方等采用凍干法制備了鬼臼 毒素體脂質(zhì)體，復(fù)水化后平均粒徑為1.451卩m,包封率72.3%，但是這種方法仍然存在著不足之處,例如脂質(zhì)體復(fù)水化后粒徑分布不夠均勻。2.1.4凍融法此法首先制備包封有藥物的脂質(zhì)體,然后冷凍。在快速冷凍過(guò)程中,由于冰 晶的形成, 使形成的脂質(zhì)體膜破裂, 冰晶的片層與破碎的膜同時(shí)存在, 此狀態(tài)不 穩(wěn)定,在緩慢融化過(guò)程中, 暴露出的脂膜互相融合重新形成脂質(zhì)體。 何文等分別 用反相蒸發(fā)法、 乳化法和凍融法制備了甲氧沙林脂質(zhì)體。 通過(guò)研究發(fā)現(xiàn), 凍融法 制備的脂質(zhì)體的包封率最高,

9、 但是粒徑最大。反復(fù)凍融可以提高脂質(zhì)體的包封率, 王健松制備了阿奇霉素脂質(zhì)體,實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),經(jīng) 3次重復(fù)凍融后,阿奇霉素脂質(zhì)體的包封率從 61.4% 增加到 78%,但是當(dāng)凍融次數(shù)增加到 4次,包封率變化很小。 該制備方法適于較大量的生產(chǎn),尤其對(duì)不穩(wěn)定的藥物最適合。2.1.5 復(fù)乳法此法第 1 步將磷脂溶于有機(jī)溶劑, 加入待包封藥物的溶液, 乳化得到 W/O 初 乳,第 2 步將初乳加入到 10 倍體積的水中混合,乳化得到 W/O/W 乳液,然后 在一定溫度下去除有機(jī)溶劑即可得到脂質(zhì)體。 Kim 用乳化法制得脂質(zhì)體的包封率 比較高，但是粒徑較大。Tomoko等通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，第2步乳化過(guò)程和有機(jī)溶劑

10、 的去除過(guò)程的溫度對(duì)脂質(zhì)體的粒徑有比較大的影響, 較低的溫度有利于減小脂質(zhì) 體的粒徑，通過(guò)控制溫度可以制得粒徑為 400 nm,包封率達(dá)到90%的脂質(zhì)體。2.1.6 注入法將類脂質(zhì)和脂溶性藥物溶于有機(jī)溶劑中（油相） ，然后把油相均速注射到水 相（含水溶性藥物）中，攪拌揮盡有機(jī)溶劑，再乳勻或超聲得到脂質(zhì)體。根據(jù)溶 劑的不同可分為乙醇注入法和乙醚注入法。乙醇注入法避免了使用有機(jī)溶劑，丁麗燕用乙醇法制備了司帕沙星脂質(zhì)體， 通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)慢速注入可制得具有較高包封率的脂質(zhì)體，其包封率為47%。乙醚注入法制備的脂質(zhì)體大多為單室脂質(zhì)體，粒徑絕大多數(shù)在2 yrn以下，操作過(guò)程中溫度比較低（40C）,因此，該方

11、法適用于在乙醚中有較好溶解度和 對(duì)熱不穩(wěn)定藥物， 同時(shí)通過(guò)調(diào)節(jié)乙醚中不同磷脂的濃度， 可以得到不同粒徑且粒 徑分布均勻的脂質(zhì)體混懸液。2.1.7 反相蒸發(fā)法最初由Szoka提出，一般的制法是將磷脂等膜材溶于有機(jī)溶劑中，短時(shí)超聲 振蕩，直至形成穩(wěn)定的 W/O 乳液，然后減壓蒸發(fā)除掉有機(jī)溶劑，達(dá)到膠態(tài)后， 滴加緩沖液， 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)使器壁上的凝膠脫落， 然后在減壓下繼續(xù)蒸發(fā)， 制得水性 混懸液， 除去未包入的藥物， 即得大單層脂質(zhì)體脂質(zhì)體。 此法可包裹較大的水容 積，一般適用于包封水溶性藥物、大分子生物活性物質(zhì)等。2.1.8 超臨界法傳統(tǒng)的脂質(zhì)體制備方法，必須要使用氯仿 、乙醚、甲醇等有機(jī)溶劑，這對(duì)環(huán)

12、 境和人體都是有害的。 超臨界二氧化碳是一種無(wú)毒、 惰性且對(duì)環(huán)境無(wú)害的反應(yīng)介 質(zhì)。嚴(yán)賓等用超臨界法制備了頭孢唑林鈉脂質(zhì)體， 將一定量的卵磷脂溶解于乙醇 中配得卵磷酯乙醇溶液， 與頭孢唑啉鈉溶液一起放入加入高壓釜中， 將高壓釜放 入恒溫水浴中，通入C02。在其超臨界態(tài)下孵化30min,制備脂質(zhì)體。采用超臨 界 CO2 法制備的包封率高、粒徑小，穩(wěn)定性增強(qiáng)。2.2 主動(dòng)載藥對(duì)于兩親性藥物， 如某些弱酸弱堿， 其油水分配系數(shù)介質(zhì) pH 和離子強(qiáng)度的 影響較大，用被動(dòng)載藥法制得的脂質(zhì)體包封率低。主動(dòng)載藥是利用兩親性的藥物， 能以電中性的形式跨越脂質(zhì)雙層， 但其電離 形式卻不能跨越的原理來(lái)實(shí)現(xiàn)的。 通過(guò)

13、形成脂質(zhì)體膜內(nèi)、 外水相的 pH 梯度差異， 使脂質(zhì)體外水相的藥物自發(fā)地向脂質(zhì)體內(nèi)部聚集。此法通常用脂質(zhì)體包封酸性緩沖鹽， 然后用堿把外水相調(diào)成中性， 建立脂質(zhì) 體內(nèi)外的 pH 梯度。藥物在外水相的 pH 環(huán)境下以親脂性的中性形式存在，能夠 透過(guò)脂質(zhì)體雙層膜。 而在脂質(zhì)體內(nèi)水相中藥物被質(zhì)子化轉(zhuǎn)為離子形式， 不能再通 過(guò)脂質(zhì)體雙層回到外水相，因而被包封在脂質(zhì)體中。主動(dòng)載藥法廣義上就是指 pH 梯度法。人們把其細(xì)分為： （ 1）pH 梯度法；（ 2）硫酸銨梯度法； （3）醋酸 鈣梯度法。其中硫酸銨梯度法和醋酸鈣梯度法只是 pH 梯度法的兩種特殊形式。 2.2.1 pH 梯度法pH 梯度法通過(guò)調(diào)節(jié)脂

14、質(zhì)體內(nèi)外水相的 pH 值，形成一定的 pH 梯度差，弱酸 或弱堿藥物則順著 pH 梯度， 以分子形式跨越磷脂膜而使以離子形式被包封在內(nèi) 水相中。趙妍等用以 pH 梯度法制備硫酸長(zhǎng)春新堿脂質(zhì)體，其包封率大于85%，而被動(dòng)載藥法制備的硫酸長(zhǎng)春新堿脂質(zhì)體的包封率最高為14.4%。Jia等用pH梯度法內(nèi)水相 pH 0.5%外水相 pH4.0 制備了卡苯達(dá)唑脂質(zhì)體，包封率高于 95%。杜松等 用 pH 梯度法制備鹽酸去氫駱駝蓬堿脂質(zhì)體，包封率大于 80%，研究表明，雖然 制得的脂質(zhì)體沒(méi)有加強(qiáng)藥物的抗癌活性，但是大大降低了其毒副作用。跨膜 pH 梯度是影響包封率的最主要因素，通常 pH 梯度越大，載入脂質(zhì)

15、體內(nèi)的藥物越多，包封率也越高。制備伊立替康脂質(zhì)體時(shí)，當(dāng)pH梯度3.7時(shí)包封率達(dá)97%以上，當(dāng)pH梯度V 2時(shí)，包封率不到5%; Mamyer等在研究中發(fā)現(xiàn) 通過(guò)跨膜 pH 梯度法制備多柔比星脂質(zhì)體， pH 梯度達(dá)到 3.5時(shí)包封率達(dá) 98%，降 低內(nèi)水相緩沖液的 pH 可增大 pH 梯度，但會(huì)加劇磷脂的水解，降低脂質(zhì)體的穩(wěn) 定性。此外，藥物自身性質(zhì)如油水分配系數(shù)、膜滲透性等亦可影響包封率。 Quan 等用 pH 梯度法制備多巴胺脂質(zhì)體，由于多巴胺親水性較強(qiáng)，無(wú)法直接克服能量 壁壘穿過(guò)脂質(zhì)雙分子層進(jìn)入內(nèi)水相，但與拉沙洛西(lasalocid結(jié)合形成復(fù)合物可 暴露出親脂性表面， 即可穿過(guò)脂質(zhì)膜進(jìn)入

16、脂質(zhì)體， 包封率提高到 85%。氧化苦參 堿水溶性較大，脂溶性較弱，因此采用 pH 梯度法制備脂質(zhì)體包封率只有 50%。 2.2.2 硫酸銨梯度法硫酸銨梯度法通過(guò)游離氨擴(kuò)散到脂質(zhì)體外，間接形成 pH 梯度，使藥物積聚 到脂質(zhì)體內(nèi)。 其方法為先將硫酸銨包與脂質(zhì)體內(nèi)水相， 然后通過(guò)透析、 凝膠色譜 或超濾的方法除去脂質(zhì)體外水相的硫酸銨。由于離子對(duì)雙分子層滲透系數(shù)的不 同，氨分子滲透系數(shù)(0.13 cm/s)較高，能很快擴(kuò)散到外水相中；H +的滲透系數(shù) 遠(yuǎn)小于氨分子，因此會(huì)使脂質(zhì)體內(nèi)水相呈酸性，形成pH梯度，梯度大小由NH4+ 外水相/ NH4+ 內(nèi)水相比較決定，這樣使藥物逆硫酸銨梯度載入脂質(zhì)體。藥

17、物 與SO：-形成的硫酸鹽，對(duì)雙分子層有很低滲透系數(shù)，因而使藥物具有很高的包 封率。劉陶世等采用硫酸銨梯度法制備馬錢子堿脂質(zhì)體 ， 0.1 mol/L 硫酸銨水溶液的用量為大豆卵磷脂的 66.7 倍，制得的馬錢子堿脂質(zhì)體包封率在 90%以上。米托恩醌以注入法或反相蒸 發(fā)法制備的脂質(zhì)體，包封率較低，但是其為弱堿性蒽 醌類藥物，易與硫酸根離子形成溶解性更小的硫酸鹽，黃園用硫酸銨梯度法制備 米托蒽醌脂質(zhì)體的平均粒徑均在 60 nm左右，包封率為93.65%。Pan等用不同 的主動(dòng)載藥法制備了 5種多銨硼酸鹽脂質(zhì)體，得到較高的包封率僅為6%和 15%< 研究表明，用硫酸銨梯度法制備的脂質(zhì)體包封率

18、要高于枸櫞酸鹽pH梯度法制得的脂質(zhì)體。Wong等用此法制備了環(huán)丙沙星單室脂質(zhì)體，包封率為90%。相比較于pH梯度法，硫酸銨梯度法不需要改變外水相的 pH值，控制梯度也易實(shí)現(xiàn)， 整個(gè)過(guò)程無(wú)需緩沖液或pH滴定，內(nèi)水相只有pH梯度法更有利于脂質(zhì)體的穩(wěn)定。 2.2.3醋酸鈣梯度法醋酸鈣梯度法通過(guò)醋酸鈣的跨膜運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生的醋酸鈣濃度梯度（內(nèi)部的濃度高于外部），使得大量質(zhì)子從脂質(zhì)體內(nèi)部轉(zhuǎn)運(yùn)到外部產(chǎn)生pH梯度。醋酸的滲透參數(shù)（6.6 x -4（0ms-1 ）比CsT （ 2.5 x 1®ms-1）大7個(gè)數(shù)量級(jí)，所以很少穿越雙 分子膜留在脂質(zhì)體內(nèi)部，醋酸分子則參與了質(zhì)子轉(zhuǎn)運(yùn)。醋酸鈣跨膜運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生的濃 度梯

19、度（內(nèi)部的濃度高于外部）導(dǎo)致大量質(zhì)子從脂質(zhì)體的內(nèi)部轉(zhuǎn)運(yùn)到外部產(chǎn)生 pH梯度，而pH的不平衡為包載和聚集弱堿藥物提供了高效驅(qū)動(dòng)力。因此，在 這基礎(chǔ)上應(yīng)用醋酸鈣梯度法把弱酸藥物萘啶酸包載入預(yù)制備好的空白脂質(zhì)體中， 包封率約99%，在4C下存放10個(gè)月均穩(wěn)定未見(jiàn)泄露。Hwang等也用此法制備 了雙氯芬酸鈉脂質(zhì)體，包封率約100%,而傳統(tǒng)的逆相蒸發(fā)法只有1%8%。 2.3不同的制備方法與脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)關(guān)系上述制備方法的分類是按照載藥方式的不同來(lái)分的，倘若將這些制備方法進(jìn) 行一個(gè)總結(jié)與歸納，不難得出，這些方法一般包括以下步驟：首先形成脂質(zhì)薄膜， 其次，加入需要載入的藥物，使脂質(zhì)分散在其中，從而形成脂質(zhì)體。

20、各種方法的區(qū)別在于脂質(zhì)分散與水相介質(zhì)的方法不同。 各種方法的分散類型可以歸納為機(jī)械 分散法（如薄膜分散法、手搖法、前體脂質(zhì)體法、冷凍干燥法等） ，溶劑分散法 （如逆向蒸發(fā)法、注入法、復(fù)乳法等） ，物理水化法（如超聲法、薄膜振蕩分散 法、薄膜勻化法、擠壓法、干燥重建脂質(zhì)體和微囊化法、凍結(jié)融解法等）及其他 方法（如梯度法、表面活性法等） 。采用不同的制備方法得出來(lái)的脂質(zhì)體其結(jié)構(gòu)與大小各不相同， 一般來(lái)說(shuō)，采 用機(jī)械分散法得到的脂質(zhì)體大多是多層脂質(zhì)體， 采用逆向蒸發(fā)法得到的是大單層 脂質(zhì)體，乙醇注入法中小單層脂質(zhì)體比例較高， 而乙醚注入法中大單層脂質(zhì)體較 多，復(fù)乳法得到的脂質(zhì)體往往是多囊脂質(zhì)體。3.

21、脂質(zhì)體制備方法的選擇3.1脂質(zhì)體制備方法的選擇原則 選用何種脂質(zhì)體制備方法取決于所要包裹的藥物的性質(zhì)， 其中最主要的性質(zhì) 就是藥物的油水分配系數(shù)。油水分配系數(shù)是指平衡狀態(tài)時(shí)， 藥物在油相和水相的分配之比。 一般使用藥物在辛醇一水兩相的分配系數(shù) P來(lái)表示。根據(jù)P值的大小將藥物分成三類：LgP>4.5脂溶性藥物L(fēng)gPv -0.3水溶性藥物-0.3< LgPv 4.5 兩性藥物對(duì)于不同類藥物脂質(zhì)體的制備方法選擇原則如下圖：快速轉(zhuǎn)運(yùn)pH誘導(dǎo)囊化法lgP>4.5的藥物t物理方法減小粒徑蛋白類藥物脂質(zhì)體一表面活性劑處理法和鈣融合法r逆向蒸發(fā)法（大單室） 復(fù)乳法（多囊）制備大粒徑脂質(zhì)靶向脂

22、質(zhì)體一機(jī)械分散法乙醇注入法lgP在一0.34.5的藥物乙醚注入法（大單室）lgPv-0.3的藥物微囊化法冷凍干燥法干燥重建脂質(zhì)體凍融法（適宜包裹水溶性蛋白類）卜制備小粒徑脂質(zhì)主動(dòng)載藥法b將藥物制成鹽（lgP< 0.3）或酯化（lgP>4.5）再包封脂質(zhì)體3.2脂質(zhì)體生產(chǎn)制備中的實(shí)際選擇許多脂質(zhì)體制備技術(shù)是以實(shí)驗(yàn)室規(guī)模進(jìn)行的，但這些小規(guī)模的制備技術(shù)不能 直接用于大規(guī)模制備生產(chǎn)中，因?yàn)樯a(chǎn)規(guī)模的變化會(huì)影響其分散性，改變制備分 散體系的特性應(yīng)保持在可接受的一定范圍限度內(nèi)， 即包封藥物的脂質(zhì)體在體內(nèi)處 于無(wú)顯著變化為準(zhǔn)則。其次，在脂質(zhì)體大規(guī)模生產(chǎn)制備過(guò)程中還得考慮實(shí)際的無(wú) 菌、無(wú)熱源，粒徑

23、的控制、穩(wěn)定性以及工藝便于放大等等實(shí)際問(wèn)題。從查閱的國(guó)內(nèi)外脂質(zhì)體制備文獻(xiàn)上來(lái)看，目前對(duì)于大規(guī)模生產(chǎn)脂質(zhì)體方法上 大多是根據(jù)設(shè)施設(shè)備條件結(jié)合兩三中脂質(zhì)體制備方法來(lái)實(shí)現(xiàn)脂質(zhì)體的生產(chǎn)制備， 如SOD的生產(chǎn)工藝就是結(jié)合了薄膜法和超聲法，阿霉素納米脂質(zhì)體的制備采用 了薄膜分散法和擠壓法相結(jié)合。除了運(yùn)用常規(guī)脂質(zhì)體制備方法相結(jié)合外，在脂質(zhì)體制備生產(chǎn)中還引入了其他前沿的生物學(xué)及化學(xué)上的技術(shù)。如Aphios脂質(zhì)體公司采用超臨界流體技術(shù)制備納米級(jí)單分散的脂質(zhì)體。該技術(shù)和常規(guī)的醇注入技術(shù)有類似之處， 所不同的是溶解磷脂和膽固醇時(shí)用的是超臨界流體。采用該技術(shù)，Aphios已經(jīng)成功的將紫杉醇(paclitaxel),喜

24、樹堿(camptothecin)等難溶性藥物制成了脂質(zhì)體制劑。BernaBiotech公司運(yùn)用Virosomes技術(shù)已經(jīng)開發(fā)了 2個(gè)產(chǎn)品，一個(gè)是流感疫苗 (Inflexal. V)，一個(gè)是甲肝疫苗(Epaxal)。Virosomes與傳統(tǒng)脂質(zhì)體的區(qū)別主要在于，Virosomes的磷脂雙分子層上嵌入了病毒的膜蛋白。這些蛋白可以保證 Virosomes和免疫系統(tǒng)的細(xì)胞發(fā)生融合，進(jìn)而將其所包被的特異性抗原遞呈給免 疫細(xì)胞。Virosomes不僅可以模擬天然抗原的遞呈方式，還可以同時(shí)引起體液免 疫和細(xì)胞免疫，進(jìn)而增強(qiáng)疫苗的有效性。Celsion公司采用微波熱療技術(shù)相結(jié)合，開發(fā)阿霉素?zé)崦糁|(zhì)體Therm

25、oDox.，現(xiàn)已進(jìn)入1期臨床。3.3脂質(zhì)體制備中包封率的影響因素及其提咼辦法影響脂質(zhì)體包封率的因素主要有脂質(zhì)體制備方法、脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)類型、類脂膜的組成、藥物的性質(zhì)和濃度、溶劑的組成等幾大因素。對(duì)于提高包封率除了對(duì)以上因素進(jìn)行優(yōu)化之外，還可以針對(duì)所有包載的藥物的類型采取下圖所示策略來(lái)提高其包封率。堿性藥物溶于酸性緩沖液水化磷脂膽固醇抗氧劑溶于有機(jī)溶劑除去有機(jī)溶劑脂質(zhì)體干膜真空凍干堿性緩沖液復(fù)溶酸性緩沖液復(fù)溶酸性藥物溶于堿性緩沖液3.3生物研究中心現(xiàn)有脂質(zhì)體制備設(shè)備可以采用的制備方法及看法生物研究中心脂質(zhì)體制備設(shè)備可以采用的的制備方法有注入法、復(fù)乳法、擠 壓法及薄膜分散法(包括逆向蒸發(fā)法)，其中，以

26、注入法和復(fù)乳法最利于現(xiàn)有工 藝設(shè)施的生產(chǎn)放大。只不過(guò)，中心現(xiàn)有設(shè)備設(shè)施中，脂質(zhì)體制備工藝流程中人為 操作的環(huán)節(jié)過(guò)多，不利于工藝生產(chǎn)中的再現(xiàn)性，也不利于無(wú)菌的控制。為了能更 好地說(shuō)明此問(wèn)題，先來(lái)看下陜西力邦醫(yī)藥科技有限公司在脂質(zhì)體生產(chǎn)中所設(shè)計(jì)和 采用的自動(dòng)化脂質(zhì)體制備裝置，通過(guò)裝置圖及其使用流程說(shuō)明， 不難看出，該裝 置在脂質(zhì)體制備過(guò)程中使用了分散法和擠壓法相結(jié)合。 利用高壓泵提供穩(wěn)定的壓 力，整個(gè)過(guò)程中避免了人員的干擾。1) 誨處力罩的脂溶性藥物、脂質(zhì)體材料的卵確3已 膽固障、脂質(zhì)休材料前 油酸和抗氧化汛肌堆生東E加入育機(jī)溶剤加熱使之充井溶綽后江人有隣脂熔液(1)屮？用此法包褰水涪性笛呦叭 水

27、溶性幽絢在朮落液或緩沖液加熱便之 充聳酒解后汗入藥液曙越)中；2) 將有機(jī)鋼鼎的物扣水潛掖分別用策一有機(jī)高丘泵(3)和第二有機(jī)高斥泵 (<L)壓入混合器中，在涯合殆中高壓機(jī)Bt.脂站物和水溶液快厘很合便得有機(jī)嗣恢逋r均勻分?jǐn)?shù)生水中”追便鑼鳶形成養(yǎng)胡多宣脂質(zhì)侔藥物瘠液|3) 逋過(guò)擠壓奮(7>即得到粒衽縮小了的脂貞休同液；縮小粒徑劑工藝過(guò)裡 反魚進(jìn)行，脂質(zhì)體儲(chǔ)藏確(8)屮的脂苗體溶液通過(guò)複機(jī)高壓泵(3),混合曙(0 施擠壓黙(7)循環(huán)重復(fù)掾作”直至達(dá)到所需粒徑范桂和脂質(zhì)體溶液：仍然后.將脂質(zhì)體溶液經(jīng)匱壓泵 O 莊入島壓超池透析柱(15),有機(jī)縮 刑和未枝包裹的羽物會(huì)透析出來(lái):hi復(fù)進(jìn)初

28、超湖8析過(guò)程即得到強(qiáng)純的脂質(zhì)體藥 軻產(chǎn)晶.礙終產(chǎn)品是均勻的乳狀幣骯沒(méi)冇沉握分層現(xiàn)象I5J將丄述簾至1J的之阮裝槪后右2 C-8r *ft下貯浚.參考文獻(xiàn)鄭慶忠，劉利軍.pH梯度法制備氧化苦參堿脂質(zhì)體J 中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志,2006,37:679.劉陶世，蔡寶昌，趙新慧，等.硫酸銨梯度法結(jié)合微濾擠出制備馬錢子堿脂質(zhì)體的研究JO 中成藥,2005,11:1247.黃園,段逸松.硫酸銨梯度法制備米托蒽醌脂質(zhì)體JO .中國(guó)藥學(xué)雜 志,2002,12:917.陳建明,張仰眉,高申,等.維生素 A 前體脂質(zhì)體的研制及其特性考察 JO .第二 軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào) ,2003,24(2):207.林中方 ,曾抗,周再

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