向日葵黃萎病田間抗性鑒定規(guī)程

1、DB15內(nèi)蒙古自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)DB 15/ TXXXX2020向日葵黃萎病田間抗性鑒定技術(shù)規(guī)程Tech ni cal Regulati on for Resista nt Ide ntificati on to Sun flower Verticillium Wilt inField點(diǎn)擊此處添加與國際標(biāo)準(zhǔn)一致性程度的標(biāo)識(shí)XXXX XX- XX實(shí)施XXXX XX- XX發(fā)布本標(biāo)準(zhǔn)按照 GB/T 1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 提出。本標(biāo)準(zhǔn)由內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)(SC/TC 20)歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：周洪友、王東、張鍵、趙君、孟

2、煥文、張笑宇。向日葵黃萎病田間抗性鑒定技術(shù)規(guī)程1范圍病圃建立、對照品種選擇、鑒定程序本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了向日葵黃萎病抗性鑒定的病原菌的選擇與培養(yǎng)、 等技術(shù)規(guī)范。本標(biāo)準(zhǔn)適用于內(nèi)蒙古自治區(qū)向日葵產(chǎn)區(qū)。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件， 僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。NY/T 2952-2016 棉花黃萎病抗性鑒定技術(shù)規(guī)程。3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。3.1食用型向日葵 con fectio n sun flower菊科1年生草本，植株高大，2.0 m3.0 m，生育期長，120 d14

3、0 d，花盤、葉片、子粒大，皮殼率高，一般40 %以上。以作為休閑食品為主，籽仁也可作為食品加工的原料。3.2油用型向日葵oil sun flower菊科1年生草本，植株較矮小，1 m2 m,生育期80 d120 d，子粒小，子實(shí)飽滿，子仁率高達(dá) 70 %80 %，含油率38 %58 %。籽粒適于榨油。3.3向日葵黃萎病 sun flower yellow wilt由大麗輪枝孢菌引起的一種土傳病害。田間的癥狀多從植株下層葉片顯癥，葉尖葉肉部分呈現(xiàn)褪綠、黃化的癥狀。隨后，病部邊緣向葉內(nèi)的脈間組織發(fā)展導(dǎo)致整個(gè)葉片的葉肉組織褪綠，變褐，干枯。發(fā)病 重的植株下部葉片全部枯死，中位葉片呈斑駁狀。剖開病莖

4、觀察，可見莖部的維管束變褐。3.4植物的抗病性 pla nt resista nee植物與病原物在長期進(jìn)化和相互作用的復(fù)雜過程中，逐漸形成和表現(xiàn)出各種抵御病原物的特征和能力，稱之為抗病性。4 鑒定病圃所需條件向日葵人工黃萎病圃應(yīng)建立在有利于黃萎病發(fā)生的地區(qū)，正常年份感病對照的病情指數(shù)能達(dá)到35.0 以上；病圃地勢平坦，土壤以沙壤土為宜，周圍應(yīng)具有隔離設(shè)施。5 前期準(zhǔn)備5.1 病原菌的選擇與培養(yǎng)5.1.1 病原菌的選擇根據(jù)所鑒定品種推廣應(yīng)用區(qū)域選擇能代表該區(qū)域病原菌致病力水平的優(yōu)勢菌系。5.1.2 病原菌的培養(yǎng)在超凈臺(tái)上，將分離純化的向日葵黃萎病菌，從 PDA 平板上的菌落邊緣挑取 2 mm 的

5、新鮮菌塊， 接種到查比克液體培養(yǎng)基（ NaNO3 2.0 g ；K2 HPO4 1.0 g ；KCl 0.5 g ； MgSO4 ?7H2O 0.50 g ；FeSO4 0.01 g;蔗糖30.0 g ;用水定容至1000 mL ）中，置于25 C下，150 r/min ，黑暗培養(yǎng)6 d備用。制作麥 麩培養(yǎng)基，加入適量的水，裝入三角瓶，0.1 MPa高壓濕熱滅菌30 min，冷卻到室溫備用；吸取上述液體培養(yǎng)的向日葵黃萎病菌菌液15 mL轉(zhuǎn)接至裝有麥麩沙粒培養(yǎng)基的三角瓶中，隨后放入到25 C培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng) 7 d ，待黃萎病菌的菌絲布滿后，將培養(yǎng)物掏出，自然條件下風(fēng)干備用。5.2 病圃的建立建

6、立一定規(guī)格的水泥池，水泥池高出地面 20 cm ，內(nèi)深 60 cm ，無底。裝入多年（ 10 年以上）未 種植向日葵的生沙壤土。按每平方米45 g的接種量，將培養(yǎng)好的菌種均勻地撒入病圃，再翻耕23遍，使病菌與土壤混合均勻。5.3 對照品種的選擇鑒定中選用一個(gè)感病對照和一個(gè)抗病對照。 感病對照要求高度感病， 選擇標(biāo)準(zhǔn)為正常年份病情指數(shù) 能達(dá)到 35.0 左右，且感病性穩(wěn)定;抗病對照選用已推廣應(yīng)用的抗黃萎病品種，且抗病性穩(wěn)定。6 鑒定程序6.1 材料的處理鑒定的向日葵品種或材料應(yīng)為未包衣的種子，發(fā)芽率應(yīng)符合標(biāo)準(zhǔn)要求。6.2 材料的種植鑒定材料種植在人工病圃中，3次重復(fù)，每小區(qū)2壟4行、行長不少于5

7、 m株數(shù)不少于50株，按向日葵正常的播種時(shí)間播種。6.3 鑒定圃田間管理播種后，進(jìn)行精心管理，確保全苗，保持田間的適宜濕度，以利于黃萎病的發(fā)生，各項(xiàng)田間管理均 勻一致。6.4 病情的調(diào)查記載向日葵播種出苗后， 實(shí)時(shí)監(jiān)測感病對照的發(fā)病情況， 當(dāng)感病對照病情指數(shù)高于 35.0 時(shí)，進(jìn)行第一 次全面調(diào)查，每10 d左右調(diào)查一次，整個(gè)生育期調(diào)查次數(shù)不少于 3次。感病對照病情指數(shù)低于 35.0時(shí), 鑒定無效。在病情調(diào)查記載中采用 5級(jí)法表述病情。根據(jù)植株黃萎病發(fā)生嚴(yán)重程度分成 0、1、2、3、 4共五個(gè)病級(jí)：0級(jí) 植株健康，無病葉，生長正常。1級(jí)植株三分之一以下葉片表現(xiàn)病狀。2級(jí)植株三分之一以上，三分之

8、二以下葉片表現(xiàn)病狀。3級(jí)植株三分之二以上葉片表現(xiàn)病狀，4級(jí)植株枯死。7結(jié)果的計(jì)算7.1 病株率（Ri）見公式（1）：式中：ni發(fā)病株數(shù);nt總株數(shù)。7.2 病情指數(shù)（DI）見公式（2）式中：de相應(yīng)病級(jí)；nc 各病級(jí)病株數(shù);nt總株數(shù)。7.3 相對病情指數(shù)每次試驗(yàn)以及每次調(diào)查記載時(shí)感病對照的病情指數(shù)都不是確定的，因此，病情指數(shù)只能反映當(dāng)次鑒定的情況。為實(shí)現(xiàn)鑒定試驗(yàn)結(jié)果重復(fù)間穩(wěn)定和具有可比性，可將感病對照病情指數(shù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，以標(biāo)準(zhǔn)病情指數(shù)（50.0 ）對試驗(yàn)品種病情指數(shù)進(jìn)行校正，校正結(jié)果即為相對病情指數(shù)。感病對照病情指數(shù)在35.1 65.0之間可采用相對病情指數(shù)，超出范圍不宜采用相對病情指數(shù)。校正系數(shù)（K）：空%式中：50.0感病對照標(biāo)準(zhǔn)病情指數(shù)；DICK本次鑒定感病對照病情指數(shù)。相對病情指數(shù)（RDI）:剛=W X £*式中：DI 被鑒定品種病情指數(shù)；K 校正系數(shù)。8黃萎病抗性評價(jià)8.1 相對病情指數(shù)均值向日葵黃萎病為全生育期病害，應(yīng)采用多次結(jié)果的平均值，將整個(gè)生育期每次（不少于3次）調(diào)查結(jié)果的相對病情指數(shù)算術(shù)平均值，作為供試品種的最終相對病指。相對病情指數(shù)均值（ARDI）：AfiDi 式中：RDIi 第i次相對病情指數(shù)；n整個(gè)生育期計(jì)算相對病情指數(shù)的次數(shù)。8.2 抗性鑒定結(jié)論根據(jù)被鑒定品種的相對病情指數(shù)均值（ARDL的大小評定品種的