透明質(zhì)酸鈉和醋酸強(qiáng)的松龍對(duì)兔顳下頜關(guān)節(jié)影響的掃描電鏡研究

1、    透明質(zhì)酸鈉和醋酸強(qiáng)的松龍對(duì)兔顳下頜關(guān)節(jié)影響的掃描電鏡研究          摘要：目的:通過(guò)掃描電鏡觀察透明質(zhì)酸鈉和醋酸強(qiáng)的松龍對(duì)免顳下頜關(guān)節(jié)表面的作用。方法:在20只未成年日本大耳白兔的右側(cè)顳下頜關(guān)節(jié)下腔分別注射透明質(zhì)酸鈉和醋酸強(qiáng)的松龍。術(shù)后第1、3、7、14 d分批處死各組白兔，將標(biāo)本處理后用掃描電鏡觀察。結(jié)果:掃描電鏡觀察發(fā)現(xiàn)醋酸強(qiáng)的松龍使髁突表面和關(guān)節(jié)盤下腔面的表面凝膠樣物質(zhì)分布不均勻，出現(xiàn)部分區(qū)域表面凝膠樣物質(zhì)減少甚至消失，部分區(qū)域凝膠樣物質(zhì)聚集成

2、團(tuán)；而透明質(zhì)酸鈉不改變關(guān)節(jié)表面凝膠樣物質(zhì)的分布。結(jié)論:醋酸強(qiáng)的松龍可破壞顳下頜關(guān)節(jié)表面的超微結(jié)構(gòu)，透明質(zhì)酸鈉對(duì)顳下頜關(guān)節(jié)表面的超微結(jié)構(gòu)無(wú)損害作用。關(guān)鍵詞：關(guān)節(jié)盤 髁突 關(guān)節(jié)下腔內(nèi)注射 透明質(zhì)酸鈉 強(qiáng)的松龍The Effect of Intra-articular Injection of Sodium Hyaluronate and Prednisolone on RabbitsTemporomandibular JointsSu Tong（Department of Stomatology, the Affilated Xiangya Hospital of Hunan Medical Un

3、iversity）Long XingLi Hongli（College of Stomatology, Hubei Medical University）Zhang Guozhi（Department of Stomatology, Shenzhen Peoples Hospital）Abstract：Objective：To evaluate the different effects of sodium hyaluronate and prednisolone on the surface of rabbits temporomandibular joints. Methods: 20 j

4、uvenile Japanese large ear rabbits were divided into 5 groups, including one control group and the other 4 experimental groups. In these groups, half of their right inferior cavity of temporomandibular joints were injected with sodium hyaluronate(25 mg/ml,0.1 ml), while others were injected with pre

5、dnisolone(1%,0.1 ml), then the rabbits were killed on the 1st, 3rd, 7th,and 14th days after injection. The specimens were evaluated by scanning electron microscope (SEM) to compare the different effects on the inferior superfacial structure of the articular disc and the surface of the condyle. Resul

6、ts: Prednisolone could change the uniform distribution of the agglutinating substance on the inferior superfacial of the articular disc and the surface of the condyle. In the 1st-day and the 3rd-day groups, the agglutinating substance decreased in some areas and gathered in other areas. In the 7th-d

7、ay group, the distribution of the agglutinating substance on the inferior superfacial of the articular disc and the surface of the condyle were more regular than that of the 1st-day and the 3rd-day groups. In the 14th-day group, the distribution of the agglutinating substance were almost as the same

8、 as that of the control group. But sodium hyaluronate didn't change the uniform distribution of the agglutinating substance in every group. Conclusion: Prednisolone can change the uniform distribution of the agglutinating substance on the inferior superfacial of the articular disc and the surfac

9、e of the condyle, while sudium hyaluronate don't have this effect.Key words：articular disc condyle intra-articular injection sodium hyaluronate prednisolone顳下頜關(guān)節(jié)是頜面部具有轉(zhuǎn)動(dòng)和滑動(dòng)運(yùn)動(dòng)的左右聯(lián)動(dòng)關(guān)節(jié)，其解剖和運(yùn)動(dòng)都是人體最復(fù)雜的關(guān)節(jié)之一。當(dāng)患顳下頜關(guān)節(jié)紊亂綜合征時(shí)，臨床上均主張實(shí)施以保守治療為主的綜合治療，并遵循逐步升級(jí)的治療原則。應(yīng)用關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射藥物的方法來(lái)緩解癥狀是最常用的治療手段之一,因此，探討以何種藥物進(jìn)行關(guān)節(jié)腔內(nèi)注

10、射可獲最佳療效一直是國(guó)內(nèi)外醫(yī)務(wù)工作者們致力研究的重要課題。本實(shí)驗(yàn)就透明質(zhì)酸鈉與臨床常用的醋酸強(qiáng)的松龍進(jìn)行比較，作為臨床應(yīng)用的基礎(chǔ)。1材料和方法1.1動(dòng)物及分組20只日本大耳白兔,免齡3個(gè)月左右，體重2.0 kg左右，雌雄不分,隨機(jī)分成5組，每組4只。第1組：此組為正常對(duì)照組。任取其中2只行右側(cè)TMJ下腔穿刺,不注射任何藥物；另外2只右側(cè)TMJ下腔穿刺后注入生理鹽水0.1 ml。4只兔子均在術(shù)后第3天處死;第2組：任取2只兔子右側(cè)TMJ下腔穿刺注入透明質(zhì)酸鈉，另2只右側(cè)TMJ下腔穿刺注入醋酸強(qiáng)的松龍。術(shù)后第1天處死;第3、4、5組方法同第2組，分別于術(shù)后第3、7、14 d處死。1.2注射藥物和劑

11、量本實(shí)驗(yàn)采用濃度為25 mgml的醋酸強(qiáng)的松龍注射液，注射劑量為0.1 ml；透明質(zhì)酸鈉由SIGMA化學(xué)有限公司生產(chǎn)，該產(chǎn)品由牛的氣管中提取，為純結(jié)晶粉末，注射前用生理鹽水配制成1%的濃度，注射劑量為01 ml。1.3注射方法固定兔子四肢，消毒右側(cè)TMJ區(qū)附近皮膚，在眶下緣與髁突后極之間作TMJ下腔穿刺，針尖指向前、內(nèi)、下，進(jìn)針約0.5 cm有落空感，抵到髁突表面，且針頭可隨兔下頜運(yùn)動(dòng)而同步運(yùn)動(dòng)，回抽無(wú)血，注射藥物后可回抽，即表示針尖已在關(guān)節(jié)下腔內(nèi)，注入藥物后，退出針頭，壓迫止血。1.4標(biāo)本處理取下術(shù)區(qū)標(biāo)本后，將關(guān)節(jié)盤與髁突分離，注意勿傷及關(guān)節(jié)盤下腔面與髁突表面。然后用0.9%生理鹽水清洗3次

12、,2%戊二醛固定,酒精梯度脫水（50%、70%、80、95%、100%),自然干燥,真空噴金鍍膜,掃描電鏡（KYKY-AMARY 1000B，中國(guó)科學(xué)院儀器廠）觀察。2結(jié) 果2.1正常關(guān)節(jié)表面超微結(jié)構(gòu)關(guān)節(jié)盤下腔面在鏡下見中央?yún)^(qū)較周邊平坦，中央?yún)^(qū)呈腦回狀，周邊存在著細(xì)小的平行排列的波紋狀結(jié)構(gòu)；且整個(gè)關(guān)節(jié)盤下腔面均勻覆蓋一層凝膠樣物質(zhì)（1）。髁突表面在鏡下可見中央?yún)^(qū)較平坦光滑，外周細(xì)小的波紋狀結(jié)構(gòu)不如關(guān)節(jié)盤表面明顯，髁突表面亦均勻覆蓋了一層凝膠樣物質(zhì)。1 正常關(guān)節(jié)表面結(jié)構(gòu) SEM ×10002.2醋酸強(qiáng)的松龍注射后關(guān)節(jié)表面超微結(jié)構(gòu)注射后1 d、3 d，可見兔關(guān)節(jié)盤下腔面及髁突表面的波紋狀

13、結(jié)構(gòu)仍存，但表面凝膠樣物質(zhì)明顯分布不均勻，部分區(qū)域表現(xiàn)為凝膠樣物質(zhì)減少甚至消失，部分區(qū)域則表現(xiàn)為凝膠樣物質(zhì)聚集成團(tuán)（2、3）；注射后7 d可見表面凝膠樣物質(zhì)的分布仍不均勻，但較1 d，3 d組有明顯改善（4）；注射后14 d可見表面凝膠樣物質(zhì)的分布基本正常（5）。2 強(qiáng)的松龍注射后1 d的關(guān)節(jié)表面結(jié)構(gòu) SEM ×10103 強(qiáng)的松龍注射后3 d的關(guān)節(jié)表面結(jié)構(gòu) SEM ×20004 強(qiáng)的松龍注射后7 d的關(guān)節(jié)表面結(jié)構(gòu) SEM ×10005 強(qiáng)的松龍注射后14 d的關(guān)節(jié)表面結(jié)構(gòu) SEM ×10002.3透明質(zhì)酸鈉注射后關(guān)節(jié)表面超微結(jié)構(gòu)注射后的各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均未

14、見有異常表現(xiàn)（69）。6 透明質(zhì)酸鈉注射后1 d的關(guān)節(jié)表面結(jié)構(gòu) SEM ×10007 透明質(zhì)酸鈉注射后3 d的關(guān)節(jié)表面結(jié)構(gòu) SEM ×10108 透明質(zhì)酸鈉注射后7 d的關(guān)節(jié)表面結(jié)構(gòu) SEM ×10009 透明質(zhì)酸鈉注射后14 d的關(guān)節(jié)表面結(jié)構(gòu) SEM ×20003討 論醋酸強(qiáng)的松龍作為糖皮質(zhì)激素的一種，其生理作用表現(xiàn)為影響中間代謝,而超生理濃度的糖皮質(zhì)激素則產(chǎn)生與生理作用完全不同的藥理作用，即抗炎、免疫抑制、抗毒和抗休克。其中抗炎和免疫抑制作用在減緩TMJDS的癥狀方面發(fā)揮了很大的作用。但早在1966年，Mankin就發(fā)現(xiàn)糖皮質(zhì)激素有直接損傷髁突表面纖

15、維軟骨的作用1;Canelis（1984）認(rèn)為糖皮質(zhì)激素干擾軟骨細(xì)胞增殖的機(jī)制是抑制了細(xì)胞的蛋白質(zhì)和DNA合成2；Pelletier（1989）認(rèn)為激素注射間隔時(shí)間短、劑量大是造成關(guān)節(jié)軟骨損害的主要原因，如果用小劑量、間隔時(shí)間長(zhǎng)的激素注射，不會(huì)造成關(guān)節(jié)損害3。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)掃描電鏡觀察后發(fā)現(xiàn)：糖皮質(zhì)激素可導(dǎo)致髁突表面及關(guān)節(jié)盤下腔面的表面凝膠樣物質(zhì)的分布發(fā)生改變。且隨著時(shí)間的推移，表面凝膠樣物質(zhì)有逐漸自行恢復(fù)正常的能力，其機(jī)制尚有待進(jìn)一步的研究,筆者認(rèn)為與糖皮質(zhì)激素可誘導(dǎo)膠原酶的合成有關(guān)。從上述結(jié)果可認(rèn)為在TMJ腔內(nèi)注射糖皮質(zhì)激素后，一方面須限制關(guān)節(jié)運(yùn)動(dòng)，因?yàn)樗幬镆痍P(guān)節(jié)表面凝膠樣物質(zhì)結(jié)構(gòu)改變，從而

16、增大了關(guān)節(jié)盤與髁突之間的摩擦系數(shù)，此時(shí)不恰當(dāng)?shù)年P(guān)節(jié)運(yùn)動(dòng)將極易導(dǎo)致關(guān)節(jié)表面的損害，另一方面因關(guān)節(jié)表面的微觀結(jié)構(gòu)可自行恢復(fù)正常，故經(jīng)過(guò)較長(zhǎng)的時(shí)間間隔后仍可再次注射。透明質(zhì)酸由滑膜B型細(xì)胞分泌。其生理作用主要為潤(rùn)滑作用?；褐械耐该髻|(zhì)酸蛋白是關(guān)節(jié)表面的有效界面潤(rùn)滑劑，關(guān)節(jié)盤及髁突表面微觀波紋結(jié)構(gòu)能儲(chǔ)留滑液凝膠4；Hlavacek（1993）證明用透明質(zhì)酸酶處理關(guān)節(jié)液后，關(guān)節(jié)的摩擦系數(shù)增加23倍5。當(dāng)患骨關(guān)節(jié)病時(shí)，透明質(zhì)酸對(duì)關(guān)節(jié)組織具有獨(dú)特的藥理作用。首先，它具有鎮(zhèn)痛作用。Gotoh（1988）將一組大白鼠膝關(guān)節(jié)內(nèi)注入一種內(nèi)源性致痛物質(zhì)，發(fā)現(xiàn)大白鼠對(duì)疼痛不敏感；將另一組大白鼠膝關(guān)節(jié)先用透明質(zhì)酸酶破壞透

17、明質(zhì)酸后，再注入內(nèi)源性致痛物質(zhì)，大白鼠對(duì)疼痛很敏感。且注入0.05ml 1%的透明質(zhì)酸后可鎮(zhèn)痛48 h，此時(shí)熒光標(biāo)記透明質(zhì)酸顯示其位于滑膜中。據(jù)此作者提出機(jī)體內(nèi)的透明質(zhì)酸有保護(hù)組織免受致痛物質(zhì)刺激，而外源性透明質(zhì)酸有鎮(zhèn)痛作用，并分析其鎮(zhèn)痛機(jī)理為透明質(zhì)酸包裹了致痛物質(zhì)或是封閉了疼痛感受器所致。其次，透明質(zhì)酸可保護(hù)受損的軟骨細(xì)胞6，Toyoshima（1987）和吳海山（1996）均證明外源性透明質(zhì)酸鹽能有效減輕兔骨關(guān)節(jié)炎模型中膝關(guān)節(jié)軟骨的退變7；此外，外源性透明質(zhì)酸還有促進(jìn)滑膜合成透明質(zhì)酸的功能，可使滑液中透明質(zhì)酸的濃度增加、粘彈性增大，而Nakagawa（1984）Furuhashi（1984）Suzuki（19