用紫外分光光度法直接測定蔬菜中維生素C的含量.

1、第23卷第5期湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報V ol.23N o.5 1997年10月Jo urnal of Huna n A g ricultural U niv ersit y Oct.1997用紫外分光光度法直接測定蔬菜中維生素C的含量劉軍鴿王增盛(湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)中心實驗室,長沙,410128【摘要】根據(jù)Cu(在室溫下催化氧化V-C的原理1,在pH6,測定吸收波長為267nm處,用紫外分光光度法直接測定蔬菜中的V-C含量,與常規(guī)方法比較,結(jié)果基本一致.而且這一方法具有快速、穩(wěn)定、試劑易得、易保存等特點(diǎn).【關(guān)鍵詞】紫外分光光度法測定蔬菜維生素C【中圖分類號】Q564-331蔬菜中V-C含量的測定一般采有2

2、,6-二氯靛酚滴定法、碘量法、2,4-二硝基苯肼法和螢光分光光度法等1.這些方法都有所用試劑不穩(wěn)、操作程序復(fù)雜、費(fèi)時等缺點(diǎn).作者采用紫外分光光度法直接測定蔬菜中的V-C含量(簡稱直接法,取得了好的效果,現(xiàn)介紹如下.1材料與方法1.1試劑與儀器V-C貯存液:1mg/mL.V-C工作液由V-C貯存液稀釋而得,每天新配.Cu(溶液:5 g/m L(pH6.取1mg/mL Cu(溶液5.0mL,加入200mL1m ol/L醋酸鈉溶液和7mL1m ol/L醋酸溶液,用水稀釋至1L,搖勻.Cu(EDT A(6.2×10-5mol/L溶液:Cu(溶液與5×10-4mol/L EDT A溶

3、液混合制成(體積比為4 1,臨用新配.實驗用試劑均為分析純,實驗用水為二次蒸餾水.實驗儀器:7520型分光光度計(上海分析儀器廠生產(chǎn);DU-7型掃描紫外分光光度計(美國Backm an生產(chǎn).1.2供試樣品苦瓜、蘿卜、南瓜、辣椒(青,均購自湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)集貿(mào)市場.1.3方法操作步驟:(1樣品用果汁機(jī)獲得蔬菜汁或加適量水勻漿,于1000r/min下,離心10min,取上清液,視V-C含量及樣液顏色確定稀釋倍數(shù),一般26倍.(2取兩支試管,各加1.0mL 稀釋樣品液,一支試管中加入5.0mL Cu(-EDT A溶液,立即在267nm波長處測定吸收度,標(biāo)記為A(;另一支試管中加入4.0mL5 g/m L

4、的Cu(溶液,室溫下放15m in后,再加入1.0mL5×10-4m ol/L EDT A溶液,于267nm波長處測定吸收度,標(biāo)記為A(;用公式6FA(-A(/S計算樣品中V-C的含量,其中F為稀釋系數(shù),S為標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備:取不同量的V-C標(biāo)液配制成標(biāo)準(zhǔn)溶液(020 g/mL,取標(biāo)準(zhǔn)溶液第一作者劉軍鴿,女,39歲,實驗師.收稿日期:1997-01-071.0mL 于干燥試管中,并加入5.0mL Cu (-EDTA 溶液,搖勻,以試劑為空白,立即于267nm 波長處測吸收度,求得線性回歸方程:y =0.087x -0.0089x ,r =0.9998,S =0.087.

5、2結(jié)果與討論2.1吸收曲線按試驗方法用苦瓜稀釋液和標(biāo)樣繪制吸收曲線(附圖.由附圖可見,最大吸收波長在267nm 處,且樣品和背景的吸光度有一差值,可作定量依據(jù).2.2酸度對吸收波長的影響實驗結(jié)果表明,不同pH 值下,V-C 的最大吸收波長會有所變化.當(dāng)pH<4時,最大吸收波長紫移,這可能是由于V-C 此時以離子化形式存在而造成的.當(dāng)pH >12時,最大吸收波長紅移,很明顯這是由于V -C 在堿性環(huán)境中不穩(wěn)定分解而引起的.pH 值在510時的最大吸收波長不變,為267nm ,但pH 6時的吸收值最大,故選擇最佳pH 值為 6.附圖標(biāo)樣和樣品的吸收曲線Fi g .Absorpti on

6、 curve of vi tamin C and Samples .標(biāo)樣的吸收曲線;.樣品+Cu (-EDT A 的吸收曲線;.樣品+Cu(+EDT A 的吸收曲線.2.3回收率表1回收率Tabl e 1R ecovery樣品含量/mg 100g -1加入量/mg 100g -1測得量/mg 100g -1平均回收率/%19.65069.1599.12.4與滴定法和螢光法分析結(jié)果比較樣品按實驗方法測定,測定結(jié)果用2,6-二氯靛酚滴定法及螢光分光光度法進(jìn)行核對,效果滿意(表2.表23種方法樣品分析結(jié)果比較Table 2Compar sion of resul ts determ i ned wi

7、th three different methodsV -C 含量/mg 100g -1樣品名稱直接法滴定法螢光法苦瓜60.261.459.8 475第23卷第4期劉軍鴿等用紫外分光光度法直接測定蔬菜中V -C 的含量476湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報1997年8月參考文獻(xiàn)2Oi-w ash L au,Shiu-F ai L uk,Kit-Sum Wo ng.D er minat ion of asco rbic acid in phar macut icals using dir ect ul-t rav io let spectro pho tom et ry.A naly st,1987,112:1

8、023DET ERM INAT ION OF VIT AM IN C CONT EN T IN VEGET ABLES WIT H U LT RAVIOLETSPECT ROPHOT OM ET RYLiu JungeWang Zengsheng(Centr al L abo rato r y,HN A U,Chang sha,410128ABSTR ACTA sim ple,rapid and accurate ultraviolet spectro photometric metho d w hich is based on the Cu(-cataly sed ox idation of

9、 v itamin C at the room temper ature has been de-veloped fo r the determination o f v itamin C content in v eg etables.M easurements of the ab-sor bance w ere made at267nm and pH6.When the proposed method w as applied to determi-nation of vitamin C content in vegetables,the results o btained w ere similiar to ones deter-mi