項目二-消毒與滅菌技術(shù)-藥學(xué)微生物

1、消毒與滅菌技術(shù)消毒與滅菌技術(shù)一、基本概念使物體或介質(zhì)上所有微生物死亡的方法(不可逆)。主要消滅病原微生物，防止傳播；但不一定能殺死芽孢。抑制或防止微生物生長，防止腐敗。一定范圍沒有活的微生物。滅菌消毒防腐無菌生活或?qū)嶒炛心男┣闆r下會有消毒、無菌或滅菌的要求？高壓蒸汽滅菌鍋消毒餐具幼兒手足口病消毒牛奶的滅菌方法有哪些？飲用新鮮（剛擠出來的）牛奶安全么？P21。無菌車間無菌車間無菌操作臺無菌操作臺二、物理滅菌法01熱力滅菌法熱力滅菌法干熱、濕熱滅菌04其它其它超聲、干燥、低溫抑菌、滲透壓等。03濾過除菌法濾過除菌法除菌濾器、其它適用物品。02輻射滅菌輻射滅菌紫外、電離、微波等1.1.分類分類2.2

2、.滅菌原理滅菌原理使微生物蛋白質(zhì)凝固變性使微生物體內(nèi)酶失活使微生物體內(nèi)DNA斷裂、破壞微生物組織結(jié)構(gòu)（一）熱力滅菌熱力滅菌法熱力滅菌法干熱法干熱法濕熱法濕熱法空氣導(dǎo)熱空氣導(dǎo)熱傳熱較慢傳熱較慢傳熱快，穿透力強傳熱快，穿透力強空氣、水蒸氣導(dǎo)熱空氣、水蒸氣導(dǎo)熱焚燒、灼燒、干烤、紅外線等。1.11.1特點特點干熱示例灼燒無菌區(qū)無菌區(qū)10-20cm10-20cm1602h干烤干烤紅外線照射紅外線照射但紅外線光源越強、光源距消毒物品越近，溫度越高，其熱效應(yīng)只能在照射到的表面產(chǎn)生干燥箱使用、注意事項避免碰破干燥箱頂部水銀溫度計，若損壞，則撒入硫黃在污染地面A注意觀察干燥箱工作狀態(tài)，有異味時立即關(guān)閉電源B溫度

3、降至60以下再打開箱門，避免溫度差導(dǎo)致玻璃破碎C避免紙張挨著箱壁、避免油紙包扎、干燥箱內(nèi)保持空氣流通D紅外滅菌特點紅外滅菌特點接種環(huán)或針消毒滅菌完全替代酒精燈接種環(huán)或針消毒滅菌完全替代酒精燈,清潔衛(wèi)生，安全、方便，清潔衛(wèi)生，安全、方便，易清潔易清潔, 體積小，重量輕體積小，重量輕 紅外線滅菌器工作時不消耗氧，可以用于厭氧室中紅外線滅菌器工作時不消耗氧，可以用于厭氧室中 ，滅，滅菌徹底，膛內(nèi)溫度可達(dá)到近菌徹底，膛內(nèi)溫度可達(dá)到近900，殺菌只需要，殺菌只需要3到到4秒秒，所，所有微生物徹底焚滅有微生物徹底焚滅 控溫精度高，避免加熱元件滿負(fù)荷工作，使用壽命控溫精度高，避免加熱元件滿負(fù)荷工作，使用壽命

4、長，節(jié)能安全長，節(jié)能安全 在陶瓷漏斗管道的深處灰化有機物質(zhì)，防止傳染性濺污和交在陶瓷漏斗管道的深處灰化有機物質(zhì)，防止傳染性濺污和交叉污染叉污染濕熱滅菌最有效的濕熱滅菌法最有效的濕熱滅菌法 121 121 15-20mim15-20mim水煮水煮100 100 、30min30min( (殺繁殖體殺繁殖體) )；1 1-2-2h h水蒸汽水蒸汽100 15-30100 15-30mimmim反復(fù)多次流動蒸汽間歇加熱滅菌反復(fù)多次流動蒸汽間歇加熱滅菌高壓蒸汽滅菌法（熱壓滅菌法）高壓蒸汽滅菌法（熱壓滅菌法）煮沸消毒法煮沸消毒法流通蒸汽消毒法流通蒸汽消毒法巴氏消毒法巴氏消毒法間歇蒸汽滅菌法間歇蒸汽滅菌法

5、較低的溫度較低的溫度 61 30 61 30mimmim；71 30s71 30s濕熱滅菌特點特點蒸汽比熱干空氣穿透力強，滅菌效果好與干熱滅菌1 1滅菌效果好、經(jīng)濟(jì)、易控制2 2除對熱敏感的產(chǎn)品其它均可使用3 3P 11-12濕熱滅菌各法的適用對象有哪些？高壓蒸汽滅菌耐高溫、高壓物品流通蒸汽滅菌u不需殺死芽孢的物體的消毒。u適用于一些注射劑注射劑生產(chǎn)，尤其是12ml注射劑及不耐高熱的品種。若在藥液中加入抑菌劑（0.1%0.5%苯酚等），可殺死芽孢注射液注射液高壓蒸汽滅菌條件對照表溫度/壓力/kPa(kg/cm2)時間/min11040.52(0.4)4011570.91(0.7)3012010

6、1.3(1.0)20125141.82(1.4)15130182.34(1,8)10熱壓滅菌所需溫度與相當(dāng)壓力及時間熱壓滅菌所需溫度與相當(dāng)壓力及時間煮沸滅菌法注射器和外科器械的消毒。巴氏滅菌法適用對象：奶制、果汁、酒、 糖漿等食品消毒間歇滅菌法適用對象不宜高壓滅菌的培養(yǎng)基不耐熱的藥物和營養(yǎng)物發(fā)酵車間的管道等中藥注射劑常用該法缺點：時間長、功效低，消滅芽孢效果差缺點：時間長、功效低，消滅芽孢效果差（二）輻射滅菌1.1.紫外線殺菌紫外線殺菌 波長為200300nm（256266nm殺菌最強）的紫外線有殺菌能力。殺菌機理殺菌機理 干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄注意事項A穿透力弱，需要保持紫外燈的清潔B對人體

7、有害，照射空氣產(chǎn)生臭氧刺激人體房間靜態(tài)空氣消房間靜態(tài)空氣消毒時劑量一般為毒時劑量一般為0.10.10.4w/m0.4w/m2 2 注意事項C一般615m3房間裝30w紫外燈一只D燈距地面2.53mE操作前照射12h,操作時關(guān)閉2.電離輻射電離輻射射線（電子束滅菌，適用薄、密度低的物 料）60Co 射線（同位素輻射滅菌法）u 殺菌機理：產(chǎn)生游離基,破壞DNA。u 特點：射線穿透力強、被滅菌物體溫度變化小u 適用范圍：一次性醫(yī)用塑料制品的消毒、食品的消毒-不破壞其營養(yǎng)成分3.微波消毒滅菌法01微波是頻率在30-300000MHz，波長在0.0011m左右的電磁波02微波可以殺滅各種微生物，包括細(xì)菌

8、繁殖體、真菌、病毒和細(xì)菌芽孢、真菌孢子。03常用于食物及餐具的消毒、醫(yī)療藥品及耐熱的非金屬材料器械的消毒滅菌。 習(xí)題練習(xí)高壓蒸汽滅菌注意事項有哪些？（三）濾過滅菌法1.1.定義定義 指藥液通過無菌濾器，除去活的和死的微生物而得到無菌濾液的方法。1 1適用于不耐熱、不能用化學(xué)方法處理的液體或氣體。 2 2 必須無菌操作（濾球 、容器 、藥液、環(huán)境無菌等過程）。2.2.特點特點3 3可除去微生物尸體。濾過原理濾餅過濾 深層過濾 架橋現(xiàn)象顆?？走M(jìn)大于篩網(wǎng)孔徑顆?？走M(jìn)可小于篩網(wǎng)孔徑介質(zhì)孔徑彎曲細(xì)長、顆粒進(jìn)入空孔道被截留，流經(jīng)的液體使顆粒緊附在孔徑上。濾過除菌實例表面濾過 含有微細(xì)小孔0.22m,只允許

9、液體或氣體及孔徑0.22m的顆粒通過，細(xì)菌不能濾過。不能除病毒、支原體 維生素、輸液制品、抗生素以及空氣等的除菌；含有血清、酶的培養(yǎng)基。適用范圍（四）其它滅菌法1.超聲滅菌不被人耳感受的高于20kHz/s的聲波，稱為超聲波。超聲波可裂解多數(shù)細(xì)菌，尤其是G-菌。A A方向性好B B穿透力強C C水中傳播距離遠(yuǎn)D D主要用于粉碎細(xì)胞，以提粉碎細(xì)胞，以提取細(xì)胞組分或制備抗原等取細(xì)胞組分或制備抗原等特點應(yīng)用應(yīng)用霧化治療咽喉炎、氣管炎咽喉炎、氣管炎：難利用血流使藥物到達(dá)患病的部位，劇烈的振動使藥物碎成許多小霧滴、病人吸入即可治療治療結(jié)石超聲除螨儀機械效應(yīng)機械效應(yīng)（使組織內(nèi)物質(zhì)運動、改變膜通透性、軟化組織

10、、提高血液循環(huán)）濕熱效應(yīng)濕熱效應(yīng)（吸收超聲能量，溫度升高、增加血液循環(huán)、加速代謝）治療原理治療原理理化效應(yīng)理化效應(yīng)（消炎、修復(fù)細(xì)胞組織）物理滅菌法小結(jié)方法主要技術(shù)參數(shù)應(yīng)用特點干熱滅菌藥典規(guī)定160-1702h 或140，3h穿透力弱，溫度不易均勻，溫度高，不適于大部分藥品濕熱滅菌熱壓滅熱壓滅菌菌98kPa(1kg/cm2),15-20min穿透力強，效果可靠，適用廣流通蒸流通蒸汽汽100，30-60min不能殺滅細(xì)菌芽胞間歇滅間歇滅菌菌100，15-30min，室溫24h，重復(fù)3次以上適于必須加熱滅菌而又不耐高溫者；時間長，效果不理想；須加抑菌劑化學(xué)滅菌法化學(xué)滅菌法.三、化學(xué)滅菌1.1.定義定

11、義 利用化學(xué)藥物（消毒防腐劑）破壞微生物的化學(xué)組成、物理結(jié)構(gòu)和生理活動，達(dá)到防腐滅菌目的。促進(jìn)菌體蛋白質(zhì)變性凝固（酚、醇、醛、酸堿類等）A干擾細(xì)菌酶系統(tǒng)和代謝（氧化劑、重金屬鹽類等）B損傷細(xì)菌細(xì)胞膜，增加其通透性（表面活性劑、脂溶劑等）C菌體成分氧化、水解或結(jié)構(gòu)改變（氧化劑、鹵素、醛、酚等）D2.作用機制作用機制3.方法浸泡法浸泡法擦拭法擦拭法噴霧法噴霧法熏蒸法熏蒸法熏蒸法是將消毒熏蒸法是將消毒劑加熱或劑加熱或加入氧加入氧化劑化劑，使其產(chǎn)生，使其產(chǎn)生氣體來進(jìn)行消毒氣體來進(jìn)行消毒滅菌的方法滅菌的方法適用范圍室內(nèi)物品消毒a室內(nèi)空氣消毒b不能蒸、煮、泡的物品c1.熏蒸法熏蒸試劑在理化性質(zhì)上需要滿足哪

12、些條件熏蒸試劑在理化性質(zhì)上需要滿足哪些條件？能形成氣體或蒸汽的化學(xué)藥品（沸點低）能形成氣體或蒸汽的化學(xué)藥品（沸點低）常用消毒劑（P19-20）空空 氣氣物物 品品1-2%1-2%過氧乙酸過氧乙酸8ml/m8ml/m3 3 30-120min30-120min純?nèi)樗峒內(nèi)樗?.12ml/m0.12ml/m3 3加加等量水等量水食醋食醋5-10ml/m5-10ml/m3 340%40%甲醛甲醛40-60ml/m340-60ml/m3加加高錳酸鉀高錳酸鉀20-40g20-40g，6-12h環(huán)氧環(huán)氧乙烷乙烷800-1200mg/L800-1200mg/L、2.5-4h2.5-4h加加 熱熱操作步驟滅菌滅

13、菌器器減壓減壓排氣排氣預(yù)熱預(yù)熱通環(huán)氧通環(huán)氧乙烷混乙烷混合氣體合氣體抽真空抽真空排除環(huán)排除環(huán)氧乙烷氧乙烷送無菌送無菌空氣空氣2.2.表面擦拭法表面擦拭法 0.1%新潔爾滅（苯扎溴銨） 0.2%0.5%過氧乙酸 2%煤酚皂溶液（來蘇水）潔凈區(qū)地面、門、墻、玻璃窗、天花板、清潔間水池和清潔工具的消毒70%70%75%75%乙醇乙醇n皮膚、直接接觸藥皮膚、直接接觸藥物的儀器設(shè)備物的儀器設(shè)備乙醇滅菌原理脫水脫水劑劑A脂溶脂溶劑劑B蛋白蛋白質(zhì)變質(zhì)變性劑性劑C注意事項 濃度7075殺菌效果最好、高濃度效果差 無水的無殺菌作用廣譜殺菌劑有哪些？適合于人體皮膚的消毒劑有哪些？用甲醛消毒時應(yīng)怎樣進(jìn)行操作？1碘伏、

14、碘酒廣譜廣譜乙醇、苯氧乙醇、洗必泰、甲酚皂、苯扎溴銨、高錳酸鉀、過氧化氫、甲紫（結(jié)晶紫）。適用于人體皮膚適用于人體皮膚碘伏：單質(zhì)碘與聚乙烯吡咯烷酮的不定型結(jié)合物，疼痛刺激?。ㄍ扑]使用）碘酒：碘、碘化鉀溶解于酒精溶液而制成。雙氯苯雙胍己烷 甲酚皂龍膽紫、結(jié)晶紫常用的消毒防腐劑及應(yīng)用小結(jié)類類型型名稱及使用方法名稱及使用方法 作用原理作用原理 應(yīng)用范圍應(yīng)用范圍醇醇類類70%70%75%75%乙醇乙醇脫水、蛋白質(zhì)變性脫水、蛋白質(zhì)變性皮膚、器皿皮膚、器皿醛醛類類0 0.5.5% %10%10%甲醛甲醛2%2%戊二醛（戊二醛（pH=8pH=8）蛋白質(zhì)變性蛋白質(zhì)變性房間、物品消毒（不房間、物品消毒（不適合食

15、品廠）適合食品廠）酚酚類類3%3%5%5%石炭酸石炭酸 2%2%來蘇兒（煤酚皂）來蘇兒（煤酚皂）3%3%5%5%來蘇兒來蘇兒破壞細(xì)胞膜、蛋白質(zhì)變破壞細(xì)胞膜、蛋白質(zhì)變性性地面、器具地面、器具皮膚皮膚地面、器具地面、器具氧氧化化劑劑0 0.1.1% %高錳酸鉀高錳酸鉀3%3%過氧化氫過氧化氫0 0.2.2% %0.5%0.5%過氧乙酸過氧乙酸氧化蛋白質(zhì)活性基團(tuán)，氧化蛋白質(zhì)活性基團(tuán)，酶失活酶失活皮膚、水果、蔬菜皮膚、水果、蔬菜皮膚、物品表面皮膚、物品表面水果、蔬菜、塑料等水果、蔬菜、塑料等類型類型 名稱及使用方法名稱及使用方法 作用原理作用原理 應(yīng)用范圍應(yīng)用范圍重重金金屬屬鹽鹽類類0.05%0.1%0.05%0.1%升汞升汞2%2%紅汞紅汞0.1%1%0.1%1%硝酸銀硝酸銀0.1%0.5%0.1%0.5%硫酸銅硫酸銅蛋白質(zhì)變性、酶蛋白質(zhì)變性、酶失活失活變性、沉淀蛋白變性、沉淀蛋白蛋白質(zhì)變性、蛋白質(zhì)變性、酶失活酶失活非金屬器皿、體溫非金屬器皿、體溫計計皮膚、粘膜、傷口皮膚、粘膜、傷口皮膚、新生兒眼睛皮膚、新生兒眼睛防治植物病害防治植物病害表表面面活活性性劑劑0.05%0.1%0.05%0.1%