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文檔簡介

1、完美 WORD格式編輯XX醫(yī)院檢驗科檢驗技術(shù)操作規(guī)程目錄第一節(jié) 全自動血液細胞分析儀操作規(guī)程第二節(jié)尿液分析儀使用規(guī)程第三節(jié)自動凝血儀操作規(guī)程第四節(jié) 半自動生化分析儀操作規(guī)程第五節(jié)血常規(guī)檢驗操作規(guī)程第六節(jié)尿常規(guī)檢驗操作規(guī)程第七節(jié)肝功能檢驗操作規(guī)程第八節(jié)腎功能檢驗操作規(guī)程第九節(jié)血脂檢驗操作規(guī)程第十節(jié)血液葡萄糖測定技術(shù)操作規(guī)程第十一節(jié)凝血四項檢驗操作規(guī)程第十二節(jié)AB0血型正、反血型鑒定技術(shù)操作規(guī)程第一節(jié) 全自動血液細胞分析儀操作規(guī)程1樣品分析前準備1.1開機前的檢查、準備在開啟分析儀電源之前,操作者須按以下要求進行檢查:i.i.i檢查稀釋液、清洗液、溶血素是否充足,有無過期;試劑管路是否彎折,連接是

2、否可靠。1.1.2 電源線是否正確連接。1.1.3 廢液桶是否清空。1.1.4 UPS電是否足夠,打印紙安裝是否正確,是否足夠。1.1.5 確保鍵盤正確連接到鍵盤接口上。1.2.開機1.2.1打開分析儀后面的電源開關(guān),電源指示燈亮,屏幕上顯示"Initializing”.1.2.2分析儀進行初始化,整個初始化過程持續(xù)約47分鐘。1.2.3初始化過程結(jié)束后,系統(tǒng)自動進入“計數(shù)”界面。1.3動物類型選擇1.3.1按菜單鍵,移動光標,選擇“動物”,按確認進入“動物”界面。1.3.2操作者根據(jù)測量的動物類型,選擇需要分析的動物類型。2.1.1 按 菜單鍵,選擇“計數(shù)”,進入“計數(shù)”界面。再按

3、模式鍵,將當前模式設(shè)置為“全血”模式。2.1.2確認狀態(tài)指示區(qū)的計數(shù)狀態(tài)為“就緒”,工作模式為“全血”。2.1.3將準備好的全血樣本放到采樣針下,使采樣針可以吸到樣本且針頭與容器底保持一定距離。2.1.4按計數(shù)鍵,啟動樣本分析過程。此時,狀態(tài)指示區(qū)的計數(shù)狀態(tài)為“運行”。2.1.5采樣針自動吸取13ul的樣本后蜂鳴器響,在采樣針抬起后,移開樣本。2.1.6分析完成后,按F4鍵進入“樣本信息編輯”界面。按 F9鍵進入漢字狀態(tài)。在漢字 狀態(tài)下,按F8鍵在全拼和五筆輸入法之間進行切換,輸入樣本信息,輸入完成后,點擊“確認”,保存輸入的內(nèi)容并返回到“計數(shù)”界面。2.1.7按打印鍵打印樣本分析報告。2.1

4、.8按照此操作過程進行其余樣本的分析。2.2預(yù)稀釋樣本分析2.2.1 按 菜單鍵,選擇“計數(shù)”,進入“計數(shù)”界面。再按模式鍵,將當前模式設(shè)置為“預(yù)稀釋”模式。按稀釋鍵,屏幕彈出“加稀釋液”對話框,取一個干凈的樣本杯放在采樣針下,按計數(shù)鍵,微傾斜樣本杯一定角度讓分析儀自動排出的1.6ml稀釋液沿管壁流入樣本杯中,避免產(chǎn)生氣泡或濺出。2.2.2加完稀釋液后,按確認鍵,“加稀釋液”對話框關(guān)閉,分析儀自動清洗采樣針。2.2.3采集20ul血液迅速注入盛有稀釋液的樣本杯中混勻。2.2.4確認狀態(tài)指示區(qū)的計數(shù)狀態(tài)為“就緒”,工作模式為“預(yù)稀釋”。2.2.5將準備好的預(yù)稀釋樣本放到采樣針下,使采樣針可以吸到

5、樣本且針頭與容器底保持一定距離。2.2.6按計數(shù)鍵,啟動樣本分析過程。此時,狀態(tài)指示區(qū)的計數(shù)狀態(tài)為“運行”。2.2.7采樣針自動吸取0.7ml的樣本后蜂鳴器響,在采樣針抬起后,移開樣本。2.2.8分析完成后,按F4鍵進入“樣本信息編輯”界面。按 F9鍵進入漢字狀態(tài)。在漢字 狀態(tài)下,按F8鍵在全拼和五筆輸入法之間進行切換,輸入樣本信息,輸入完成后,點擊“確認”,保存輸入的內(nèi)容并返回到“計數(shù)”界面。2.2.9按打印鍵打印樣本分析報告。2.2.10按照此操作過程進行其余樣本的分析。3、樣品分析結(jié)束后3.1按菜單鍵,彈出系統(tǒng)菜單,選擇“關(guān)機”。3.2界面彈出“關(guān)機”對話框,點擊“確認”進入關(guān)機界面。3

6、.3將E-Z清洗液放到采樣針下,按計數(shù)鍵,采樣針將自動吸取 E-Z清洗液,執(zhí)行液路和計數(shù)池的清洗。3.4按照界面提示信息,將E-Z清洗液放到采樣針下,按計數(shù)鍵,采樣針將再次自動吸取E-Z清洗液,執(zhí)行液路和計數(shù)池的清洗。3.5執(zhí)行完成后,界面提示“請關(guān)閉電源”是,關(guān)閉分析儀的電源開關(guān)。3.6關(guān)閉電源后檢查分析儀是否有滲漏,并將血液分析儀的周邊環(huán)境打掃干凈。第二節(jié)尿液分析儀使用規(guī)程本測試儀是一項精密儀器,為了更好的維護和使用本儀器必須遵照以下操作規(guī)程。一、操作步驟1. 尿液分析儀的通訊電纜與電腦背面的通訊端口相連,接通電源,先打開電腦,再打開分析儀;儀器啟動,風扇轉(zhuǎn)動,推進器移動,屏幕顯示“系統(tǒng)正

7、在測試”,此時系統(tǒng)正在自檢,顯示屏顯示主菜單,工作臺檢條區(qū)有紅色光交替閃爍,用戶可以開始測試2點擊電腦桌面尿液分析軟件;3將試紙條的試劑區(qū)完全浸入新鮮的、充分混合的、未離心的樣本中立即取出,將試紙條的側(cè)邊沿尿樣容器的管壁刮去多余尿液;4將蘸有尿液的試紙平放在工作臺的檢條區(qū),確保試紙同工作臺前壁接觸;5. 儀器檢測到試紙存在后,推進器將試紙推到測試區(qū)進行測試;6. 當推進器退回原位,放下一條試紙,這樣實現(xiàn)連續(xù)測試;7. 當工作臺上所有的試紙條測試完畢,打印結(jié)果輸出結(jié)束后,按菜單鍵進入儀器設(shè)置,將電源開關(guān)撥到“斷(O)”位置,關(guān)閉儀器電源。二、儀器維護1. 不要在儀器通電狀態(tài)下清潔儀器;2. 不要

8、用汽油、油漆稀釋劑、苯化合物等可能腐蝕儀器的有機溶劑擦拭儀器;3. 不要用水清洗液晶屏,不要用任何會擦傷工作臺和白基準的物質(zhì)擦拭工作臺;4. 不要用任何溶劑清潔白基準,如果白基準有明顯劃痕或損壞,請與供應(yīng)商聯(lián)系;5. 用柔軟干布或沾有溫和去污劑的軟布擦拭儀器,保持儀器清潔;6. 用柔軟、無磨損的布擦拭液晶屏;7. 為使儀器正常運行并提供準確的測試結(jié)果,必須定期從儀器中取下推進器、工作臺、步進板、用清水沖洗,用軟布依次擦干保持工作臺的清潔。三、注意事項1. 測試時不要將儀器放置在陽光直射的地方,以免影響測試精度;2. 請在測試前核對尿液分析試紙型號,避免因使用的尿液分析試紙型號不正確而導(dǎo)致測試

9、結(jié)果錯誤;3. 請勿使用過有效期或變質(zhì)的尿液分析試紙;4. 尿樣本中血的濃度高時,可影響測試的準確性,儀器能夠識別出高濃度血尿并打印出“結(jié)果無效”的提示;5. 必須在推進器動作前,將待測試紙條放好;6. 在放置試紙條時應(yīng)確保試紙條前端接觸工作臺前壁;7. 如果儀器測試頭下發(fā)生故障導(dǎo)致紙條運行受阻。關(guān)掉儀器,拉出工作臺,取出受阻試紙 條后,重新安裝工作臺。開機自檢后,對未得出結(jié)果的樣本重測。第三節(jié)自動凝血儀操作規(guī)程1儀器的常規(guī)操作1.1打開電源開關(guān)前的檢查。檢查廢液瓶及洗液瓶。如果洗液瓶中洗液的液面過低,請用蒸餾水或去離子水將罐充滿。清空廢液瓶。管道連接檢查各種管線的連接。確保沒有管子脫落或扭結(jié)

10、,電源線被安全的插入交流插座。 確保打印機中有足夠的紙張以供打印當天所需處理的所有樣本結(jié)果。補充反應(yīng)杯丟棄用過的反應(yīng)杯,加入適量的干凈的反應(yīng)杯。1.2打開電源開機順序:打印機 t壓力單元t電源單元和主單元(右側(cè))。打開電源后,儀器自動進入自檢。將病人樣本,質(zhì)控與試劑分別按要求準備就緒,進入分析過程:試劑準備t Set Reage nt t輸入確認試劑體積 t補充反應(yīng)杯t安放樣本架1.3樣本分析:Work List t id No.Entry t 輸入樣本號 t ENTER t 選擇所需檢測的項目(變?yōu)镺 ),確認所有的設(shè)置結(jié)束后t enter t按屏幕右上方“ Start ”鍵,執(zhí)行分析。分析

11、完畢,儀器進入準備狀態(tài)。1.4關(guān)機前的工作每日清潔所有樣本針和試劑針:在主菜單屏上按下【Rinse probe】鍵。將出現(xiàn)清洗針屏。按下【 Excute】鍵。1.5關(guān)機關(guān)閉電源。2. 儀器保養(yǎng)2.1每日保養(yǎng)清洗樣品針每次做完試驗都必須清洗樣品針,主要是預(yù)防堵針,執(zhí)行Rinse Probe t Excute清空垃圾箱2.2清空廢液查看儀器后面防逆流瓶 Trap Chamber有無水,防止因為有水而導(dǎo)致真空泵不能抽真空在洗液瓶中注蒸餾水,最高不要超過上面的凹槽,防止因水過滿,工作時水回流到壓力泵和壓力傳感器上導(dǎo)致人為破壞。2.3每周保養(yǎng)做一次管路清潔,執(zhí)行 Special Operatet Ri

12、nse&Prepare清潔儀器2.4每半年保養(yǎng)清洗洗液瓶內(nèi)部,清洗洗液瓶出水管上的過濾網(wǎng)一次。2.5每三或六個月保養(yǎng)清潔傳動滑軌(X軸、Y軸)并上潤滑油。防止因積塵而使樣品針運行不到位,向下扎錯位置 造成樣品針彎曲或斷裂第四節(jié) 半自動生化分析儀操作規(guī)程【操作規(guī)程】1. 開機之前檢查電源線是否連接無誤,電源要求接地良好;連接打印機電源線,接通打印機電源開關(guān);將廢液管插入廢液容器內(nèi);接通顯示器開關(guān)及主機背部電源開關(guān)。2. 開機t自檢后t鍵入 Enter,確定已設(shè)定測試參數(shù)宀鍵入Enter,進入編制工作表宀在設(shè)置欄,開啟聯(lián)機打印t儀器預(yù)熱20分鐘后,調(diào)用已設(shè)定測試項目進行樣品測定t打印結(jié)果T

13、清洗儀器T關(guān)機。3. 吸液口由不銹鋼保護管和鋼管內(nèi)聚四氟乙烯吸液管組成,應(yīng)注意保護,不要碰彎。4. 切忌在帶電狀態(tài)下連接任何連接口?!緝x器的保養(yǎng)與維護】1日常保養(yǎng)工作主要是清洗流動比色皿, 每天工作結(jié)束后,要用蒸餾水清洗。具體方法如下: 將吸液管插入蒸餾水中,向上扳動吸液開關(guān),反復(fù)沖洗流動比色皿,直到蒸餾水的吸光度值 正常為止。2. 每周要用專門的清洗劑清洗一次流動比色皿,清洗時,讓清洗劑停留在比色皿中約半小時,然后排掉,再用蒸餾水沖洗干凈,最后注入蒸餾水。3. 不使用儀器時,流動比色皿內(nèi)一定要保證充滿蒸餾水。4. 更換打印機色帶時,嚴格遵照打印機操作手冊,避免不規(guī)范操作。5. 光源燈更換時一

14、定要先切斷儀器的電源,手不可觸摸光源燈的玻璃部分,萬一光源燈的玻璃部分弄臟了,可用無水乙醇將污物除去。6. 更換的蠕動泵管尺寸材料應(yīng)與原泵管一致,如不一致則要重新調(diào)整吸液量。第五節(jié)血常規(guī)檢驗操作規(guī)程【標本】抗凝靜脈血(有些儀器也可用末梢血)?!痉椒ā垦杭毎詣臃治鰞x測定法。試齊U】血液細胞自動分析儀配套試劑。【操作】詳見血液細胞自動分析儀使用手冊。附注】1. 血常規(guī)包括白細胞計數(shù)及分類、紅細胞計數(shù)、血紅蛋白濃度、紅細胞比積、血小板 計數(shù)等項目。這些項目亦有相應(yīng)的手工方法,詳見有關(guān)資料。2. 半自動及全自動血液細胞分析儀從設(shè)計上均要求用抗凝靜脈血。其優(yōu)點為:(1) 靜脈血能正確地反映病人實際情

15、況,重復(fù)性好;(2) 利于延長儀器的使用壽命;(3) 解決了采血盤的交叉感染問題等。3. 血細胞計數(shù)應(yīng)用 EDTA? K2:為抗凝劑(EDTA? K2? 2 H2O 1.52.2mg可抗凝1ml 血)。4. 貯血容器應(yīng)選用有蓋塑料管??鼓杉笤谑覝刂匈A存應(yīng)不超過6h;如需制作血涂片應(yīng)在2h內(nèi)完成。5. 測定前必須將 EDTA? K2抗凝血充分混勻。6. 血細胞分析儀測定最適溫度為1822C,低于15C或高于30C,均可使細胞體積發(fā)生改變,影響各參數(shù)的結(jié)果。7. 血細胞分析儀用于白細胞分類只能當作一種過篩手段,當白細胞、紅細胞、血紅蛋白和 血小板的任何一項有明顯升高或降低;白細胞分類出現(xiàn)異常

16、結(jié)果(中間細胞群百分率8.0%);紅細胞、白細胞和血小板的任何一個直方圖出現(xiàn)異常圖形等情況,須用顯微鏡檢查及分類。第六節(jié)尿常規(guī)檢驗操作規(guī)程【標本】新鮮尿液?!痉椒ā炕瘜W試帶法?!驹噭扛餍吞柲蛞夯瘜W分析儀配套試帶?!静僮鳌吭斠娔蛞夯瘜W分析儀使用手冊。附注】1. 尿常規(guī)檢查使用尿液化學分析儀,目前能進行810項檢測(PH蛋白、葡萄糖、酮體、隱血、尿膽紅素、尿膽素原、亞硝酸鹽、比重、白細胞)。這些項目亦有相應(yīng)的手工方法,詳見有關(guān)資料。2. 必須了解所用試帶各膜塊注意事項、藥物干擾。3. 要注意尿液化學分析儀測定結(jié)果與手工法的差異,必要時用手工法復(fù)查。4. 尿液化學分析儀檢測僅是一個過篩手段,當?shù)鞍?/p>

17、、隱血、白細胞等出現(xiàn)異常結(jié)果(如尿蛋白“ + ”或以上)時,應(yīng)進行鏡檢。5. 尿液顏色、透明度等一般性狀異常時也應(yīng)報告。第七節(jié)肝功能檢驗操作規(guī)程血清總膽紅素(TBIL)和結(jié)合膽紅素(DBIL)測定改良JG法【試劑】參照書刊文獻(如全國臨床檢驗操作規(guī)程第二版)自配,配制標準液的膽紅素應(yīng)符合如下標準,純膽紅素的氯仿溶液在 25C當光徑1.000 ±O.OOICm,波長453nm條件下其摩爾 吸光系數(shù)應(yīng)在60700 ± 1600范圍內(nèi),偶氮膽紅素的摩爾吸光系數(shù)應(yīng)在74380 ± 866范圍內(nèi),配制標準液的稀釋劑須含白蛋白,可用牛血清白蛋白或人血清代替人血清白蛋白。標準液

18、應(yīng)貯於棕色瓶中避光保存,在市售試劑中以含堿性酒石酸的靈敏度特異性高?!静僮鳌堪丛噭┖姓f明書或相應(yīng)書刊文獻規(guī)程手工操作,比色測定,波長600nm.制作準曲線。血樣測定,從標準曲線上求TBIL及DBIL的含量以umo1/L報告。也可按廠家提供的試劑及儀器使用的說明書的要求將相應(yīng)的程序及參數(shù)設(shè)入,用自動生化分析儀測定。標本】血清,空腹血為宜,脂血、脂溶性色素及嚴重溶血干擾此測定,暫不能測定的標本應(yīng)避 光保存,室溫可穩(wěn)定 8h, 28C可保存48h。含疊氮鈉作防腐劑的質(zhì)控血清不宜用此法測定膽紅素。膽紅素氧化酶(BOD法【試劑】市售成套試劑。BOD試劑復(fù)溶后28C可保存一周?!静僮鳌堪磸S家提供的試劑及儀

19、器說明書要求設(shè)置程序輸入?yún)?shù)用自動生化分析儀測定。波長450 或 460nm?!緲吮尽垦逡笈c改良J 一 G法相似。二甲亞楓(DMSO法試齊U】市售現(xiàn)成試劑?!静僮鳌堪丛噭┖姓f明書手工操作比色測定或用自動生化儀測定。波長560nm?!緲吮尽垦濉⑤p度脂血,溶血標本對結(jié)果無明顯影響、重度脂血、溶血標本須作標本空白進行 較正。血氨測定【方法】酶兩點法?!驹噭渴惺鄢商自噭?。【操作】按試劑及儀器使用說明書要求,設(shè)入相應(yīng)的程序及各項參數(shù)、用自動生化分析儀測定。 波長340nm。【標本】EDTA.Na2 抗凝血漿。靜脈采血后與 EDTA.Na2混勻,立即置冰水中盡快分離出血漿,加 塞置24 C保存,在

20、23h內(nèi)分析,-20 C可穩(wěn)定24h。溶血標本忌用。第八節(jié)腎功能檢驗操作規(guī)程1. 檢測目的:檢測血清、血漿或尿液中尿素的含量,為臨床對相關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效 果,以及對健康人群正常生理指標的監(jiān)測提供重要的參考價值。2. 標本要求:2.1病人準備:空腹12小時。2.2標本類型:血清、肝素化的血漿或24小時尿。3. 設(shè)備和試劑:3.1儀器設(shè)備:邁瑞半自動生化分析儀3.2試劑材料:試劑3.3試劑的貯存:3.3.1 28C密閉避光貯存至標簽所注失效期。332開蓋上機28C避光穩(wěn)定 30天。3.3.3變質(zhì)指示:試劑混濁變色或空白吸光度值<1.000時,不能繼續(xù)使用。3.4注意:此試

21、劑為體外診斷用,禁止入口,吞下有害。試劑含有疊氮化鈉,誤入眼、口中 或沾染到皮膚上請立即用清水徹底沖洗,必要時到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬反應(yīng)形成爆炸性化合物,故廢棄時請充分稀釋廢液和沖洗排水管。3.5試劑準備:即開即用的,無需特殊準備。4. 操作步驟:見生化分析儀操作流程。5. 質(zhì)量控制:5.1質(zhì)控物:RANDO多項人基質(zhì)血清5.2質(zhì)控措施:5.2.1室內(nèi)質(zhì)控:每日日常工作前進行。5.2.2室間質(zhì)控:參加北京臨床檢驗中心臨床化學室間質(zhì)評。6. 干擾因素:總膽紅素w 40mg/dL,血紅蛋白w 450mg/dL,抗壞血酸w 400mg/dL對本法無干擾。7. 參考區(qū)間及可報區(qū)間:7.

22、1參考范圍:血清/血漿2.868.20mmol/L24小時尿1535g/24h7.2可報范圍:0.0035.00mmol/L。樣品Urea含量超過線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做, 結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。8. 異常結(jié)果處理:結(jié)果異常、與臨床診斷不符,應(yīng)復(fù)查或與臨床聯(lián)絡(luò)。肌酐1.檢測目的:檢測血清、血漿或尿液中肌酐的含量,為臨床對相關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效 果,以及對健康人群正常生理指標的監(jiān)測提供重要的參考價值。3. 標本要求:3.1病人準備:空腹12小時。3.2標本類型:血清、肝素化的血漿或尿液。4. 設(shè)備和試劑:4.1儀器設(shè)備:邁瑞半自動生化分析儀4.2試劑材料:試劑4.3試劑的貯存:4

23、.3.1 28C密閉避光貯存至標簽所注失效期。4.3.2開蓋上機28C避光穩(wěn)定 30天。4.3.3變質(zhì)指示:試劑混濁變色或空白吸光度值>0.050時,不能繼續(xù)使用。4.4注意:此試劑為體外診斷用,禁止入口,吞下有害。試劑含有疊氮化鈉,誤入眼、口中或沾染到皮膚上請立即用清水徹底沖洗,必要時到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬反應(yīng)形成爆炸性化合物,故廢棄時請充分稀釋廢液和沖洗排水管。4.5試劑準備:即開即用的,無需特殊準備。5. 操作步驟:見半自動生化分析儀操作流程。6. 質(zhì)量控制:6.1質(zhì)控物:RANDO多項人基質(zhì)血清6.2質(zhì)控措施:6.2.1室內(nèi)質(zhì)控:每日日常工作前進行。622室間質(zhì)控

24、:參加臨床化學室間質(zhì)評。7. 干擾因素:直接膽紅素w 257卩mol/L,血紅蛋白w 0.5g/L,抗壞血酸w 3mmol/L,甘油三酯w 15.0mmol/L, 肝素W 50KU/L,枸櫞酸鈉w 10g/L對本法無干擾。8. 參考區(qū)間及可報區(qū)間:8.1參考范圍:血清/血漿53.0123.0卩mol/L (男性)44.0 106.0 卩 mol/L (女性)首次晨尿 153015320卩mol/L24 小時尿 6.6 15.0mmol/24h8.2可報范圍:0.08840.0卩mol/L。樣品Crea含量超過線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做, 結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。9. 異常結(jié)果處理:結(jié)果異常、與臨床

25、診斷不符,應(yīng)復(fù)查或與臨床聯(lián)絡(luò)。9. 危急值及處理方法:>177卩mol/L。及時與臨床聯(lián)絡(luò)。10. 實驗室解釋:增高:嚴重腎功能不全、各種腎障礙、肢端肥大癥等。降低:營養(yǎng)不良、多尿等。第九節(jié)血脂檢驗操作規(guī)程標本采集與處理1 受檢者抽血前二周應(yīng)保持平衡的飲食習慣,近期體重穩(wěn)定無外傷,手術(shù)等意外情況。并注意如有使用降糖、降脂、降壓、避孕藥,B-受體阻滯劑,免疫抑制劑,激素藥物等,則應(yīng)根據(jù)所用藥物特性停藥數(shù)天或數(shù)周后再作血液脂類檢測。2 空腹抽血,TG脂蛋白,載脂蛋白測定應(yīng)至少禁食 12小時(僅作膽固醇測定不必強求空腹)24小時內(nèi)不作劇烈運動。抽血前不要久站立。至少應(yīng)靜坐5分鐘。抽血時止血帶使

26、用不可超過1分鐘。3 .標本用血清,也可用肝素或EDTA.Na2抗凝之血漿。EDTA.Na2濃度不宜太高。4 .血標本室溫放置不得超過3h,放置3045分鐘后應(yīng)即時分離出血清 (漿)蓋封於4 C冰箱中可穩(wěn)定至少 4天,如需長期保存,應(yīng)於 -70 C中冰凍存放,不可反復(fù)凍融。血清總膽固醇(TC)測定酶法(CHODPA法)【試劑】市售現(xiàn)成試劑?!静僮鳌枯斎?yún)?shù)用自動或半自動生化分析儀測定(速按試劑及儀器使用說明書要求設(shè)定程序,率法)終點法可手工操作,用普通分光光度計比色測定。波長500nm或520nm?!緲吮尽垦澹{)參看本節(jié)的標本采集與處理?!靖阶ⅰ勘痉橹腥A醫(yī)學會檢驗學會推薦的TC測定常規(guī)方

27、法(中華醫(yī)學檢驗雜志,1995、18 :185)。膽固醇標準液以定值參考血清為宜,而不宜用Choi的水溶液作標準。Choi定值質(zhì)控血清亦不應(yīng)用作標準液。主要技術(shù)指標:終點法批內(nèi)CVk 1.5%、批間 CVC 2.5%。靈敏度:顯色劑用酚時,TC5.2mmo1/L(200mg/dl)時的吸光度(A 500nm)約 0.300.35,故 A 500nm=0.005 時 TC 濃 度約為0.08mmo1/L(3mg/dL)。測定范圍:當血清與試劑用量之比為1:100時其測定的上界為 13mmo1/L(500ng/dL)。血清甘油三酯(TG)測定酶法(GPOPA法)【試劑】市售現(xiàn)成試劑。有兩種。一步酶

28、法單一試劑,二步酶法雙試劑。標準液(參考物)一步酶法之用三油酸甘油酯水溶液,也可用甘油,但甘油不適用於二 步酶法?!静僮鳌坑米詣踊虬胱詣由治鰞x測定,終點500nm二步酶法為中華醫(yī)學檢驗學會的推薦方法按試劑及儀器使用說明書要求設(shè)定程序和參數(shù), 法可用普通分光光度計手工操作,比色測定。波長【標本】血清(漿)參看本節(jié)標本采集與處理。附注】本法在操作程序上分為一步酶法與二步酶法,(中華醫(yī)學檢驗雜志1995、18: 249)?,F(xiàn)階段允許二法并存,要求逐步過渡到統(tǒng)一采用二步酶法,在方法尚未統(tǒng)一前,實驗室報告TG測定結(jié)果時應(yīng)注明“除FG值”或“未除FG值”。主要枝術(shù)指標:酶試劑用緩沖液配制后,2025

29、C應(yīng)穩(wěn)定1天,4C可穩(wěn)定37天,試劑 空白為 A500nmc 0.05 ;顯色后穩(wěn)定30min :測定上界 11.3mmo1/L(100mg/dL);精密度:批內(nèi) CVC 3% 批間CVC 5% 靈敏度:2mmo1/L TG A 500nm0.2。血清高密度脂蛋白膽固醇 (HDL-C)測定磷鎢酸鎂沉淀法【試劑】市售成套試劑,沉淀劑,酶試劑(同TG測定)?!静僮鳌堪丛噭┖姓f明書操作。1 .沉淀含apoB的脂蛋白。2 .測定上清液(只含 HDL的膽固醇含量(方法同酶法TC測定)?!緲吮尽垦澹{)。硫酸葡聚糖一鎂沉淀法【試劑】市售成套試劑:總 HDL試劑,HDL3試劑,酶試劑(同 TC試劑)?!静?/p>

30、作】按試劑說明書操作:1 .沉淀含apoB的脂蛋白,(總HDL試劑);2 .沉淀含apoB的脂蛋白及 HDL2( HDL3試齊U);3 .測定總HDL HDL3C(同酶法TC測定),并計算出HDL2CS。 【標本】血清(漿)血樣在室溫中不宜久放,應(yīng)即時測定,原則應(yīng)低溫保存。直接HDLCKg定法試齊U】市售專門的試劑,無沉淀劑。酶試劑同TC測定。(如日本第一化學藥品株式會社的產(chǎn)品)。操作】按試劑盒及儀器使用說明書要求設(shè)置程序,輸入?yún)?shù)直接用自動或半自動生化分析儀測定,無須沉淀離心分離出 HDL步驟。標本】血清(漿)。血清低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)測定1 . Friedwald工式計算法:(

31、1)LDL-C=TC- HDL-C TG/5 (以 mg/dl 為單位計);(2)LDL-C=TC HDL-C TG/2.2 ( 以 mmo1/L為單位計);(3)只有當血 TG< 4.52mmo/L結(jié)果才較準確;(4) 只有TC TG HDL-C三項測定都準確且符合標準化要求時,才可計算出LDL-C的 近似值。2 聚乙烯硫酸沉淀法【試劑】沉淀劑市售,酶試劑同 TC測定。【操作】1 . TC測定。2 .選擇性沉淀血清中 LDL,測定上清液之 HDL- C與VLDL C之和的量,(同TC測定)。3 .計算出LDL C的含量?!緲吮尽垦?。血清載脂蛋白A1 (apoA1)測定免疫透射比濁法。

32、波長 340nm本法批間CV< 5%【試劑】市售試劑盒,試劑 28C保存,不同批號試劑不能混合使用,抗血清效價不應(yīng)低於16?!静僮鳌堪丛噭┘皟x器使用說明書要求,設(shè)定程序和參數(shù)用自動生化分析儀測定,也可用特定蛋白分析儀作速率法散射比濁測定,或用含340nm的分光光度計手工操作測定?!緲吮尽垦濉Q遢d脂蛋白B (apoB)測定免疫透射比濁法。波長 340nm本法批間CVk 5%【試劑】市售試劑,28C保存,不同批號試劑不能混合使用,抗血清效價不應(yīng)低於1: 12 8?!静僮鳌繀⒖碼poA1測定?!緲吮尽垦?。第十節(jié)血液葡萄糖測定技術(shù)操作規(guī)程1. 檢測目的:檢測血清或血漿中葡萄糖的含量,為臨床

33、對相關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果, 以及對健康人群正常生理指標的監(jiān)測提供重要的參考價值。3. 標本要求:3.1病人準備:空腹12小時。3.2標本類型:血清或 NaF抗凝的血漿。采血后及時分離,以避免血清或血漿中葡萄糖被細 胞利用而降低。4. 設(shè)備和試劑:4.1儀器設(shè)備:奧林巴斯 AU600生化分析儀4.2試劑材料:四川邁克公司試劑參與反應(yīng)成份:R1:酚(12.0mmol/L )R2: GOD(> 35KU/L )、POD(> 5KU/L )、4-AAP (1.20mmol/L )4.3試劑的貯存:4.3.1 28C密閉避光貯存至標簽所注失效期。4.3.2開蓋上機28C避光

34、穩(wěn)定 30天。4.3.3變質(zhì)指示:試劑混濁變色或空白吸光度值>0.150時,不能繼續(xù)使用。4.4注意:此試劑為體外診斷用,禁止入口,吞下有害。試劑含有疊氮化鈉,誤入眼、口中或沾染到皮膚上請立即用清水徹底沖洗,必要時到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬反應(yīng)形成爆炸性化合物,故廢棄時請充分稀釋廢液和沖洗排水管。4.5試劑準備:即開即用的,無需特殊準備。5質(zhì)量控制:5.1質(zhì)控物:RANDO多項人基質(zhì)血清5.2質(zhì)控措施:5.2.1室內(nèi)質(zhì)控:每日日常工作前進行。5.2.2室間質(zhì)控:參加北京臨床檢驗中心臨床化學室間質(zhì)評。6. 參考區(qū)間及可報區(qū)間:6.1參考范圍:空腹3.896.11mmol/L餐后

35、1小時 7.788.89mmol/L餐后2小時 3.897.78mmol/L6.2可報范圍:0.0022.30mmol/L。樣品GLU含量超過線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做, 結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。7. 危急值及處理方法:<2.5mmol/L或>10mmol/L。及時與臨床聯(lián)絡(luò)。第十一節(jié) 凝血四項檢驗操作規(guī)程 全血凝固時間檢驗(CT)【標本】靜脈取血3ml?!痉椒ㄅc操作】試管法、硅管法操作參見全國臨床檢驗操作規(guī)程(第二版)?!靖阶ⅰ?. 靜脈取血要一針見血,盡量減少組織液和空氣混入。2. 水浴箱溫度要恒定,過高或過低,可影響結(jié)果?;罨糠帜蠲笗r間測定(APTT【標本】自靜脈取血,用1

36、09mmol/L枸椽酸鈉作1:9抗凝?!驹噭渴惺鄢商自噭!痉椒ㄅc操作】按試劑及有關(guān)儀器說明書要求進行?!靖阶ⅰ?. 標本應(yīng)及時檢測,最遲不超過2h。2. 分離血漿應(yīng)在 3000r/min,離心10min。3. 本試驗較試管法全血凝血時間敏感,能檢出因子忸:Cv 25%輕型血友病。血漿凝血酶原時間測定(PT, 期法)【標本】靜脈血1.8ml,用109mmol/L枸椽酸鈉 0.2ml抗凝?!驹噭?. 組織凝血活酶浸出液;2. 0.025mol/L CaCl2 液;【方法與操作】 見全國臨床檢驗操作規(guī)程(第二版)。【附注】1. 采血后宜在1h內(nèi)完成,置冰箱 4C保存,不應(yīng)超過4h, -20 C下可放置2周,-70

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