堿性磷酸酶(ALP)

1、堿性磷酸酶鎖定聲明醫(yī)學內(nèi)容僅供參考，不能視作專業(yè)意見。網(wǎng)上任何關(guān)于疾病的建議都不能替代執(zhí)業(yè)醫(yī)師的當面診斷。堿性磷酸酶是廣泛分布于人體各臟器器官中，其中以肝臟為最多其次為腎臟，骨骼、腸、和胎盤等組織，。這種酶能催化核酸分子脫掉5磷酸基團，從而使DNA或RNA片段的5-P末端轉(zhuǎn)換成5-OH末端。但它不是單一的酶，而是一組同功酶。目前已發(fā)現(xiàn)有 AKP1 、AKP2 、AKP3 、AKP4 、AKP5 與 AKP6 六種同功酶。其中第 1 、 2 、 6 種均來自肝臟，第 3 種來自骨細胞，第 4 種產(chǎn)生于胎盤及癌細胞，而第 5 種則來自小腸絨毛上皮與成纖維細胞。 血清中的ALP主要來自肝臟和骨骼。生

2、長期兒童血清內(nèi)的大多數(shù)來自成骨細胞和生長中的骨軟骨細胞，少量來自肝。目錄1化學特征2有何影響3偏高的危害4升高5來源 人體內(nèi)情況 研究應(yīng)用6測定方法7正常范圍8臨床意義9藥物意義10異常原因11抑制作用12肝膽疾病1化學特征堿性磷酸酶名字alkaline phosphatase (ALP 或 AKP)細菌ALP二級結(jié)構(gòu)現(xiàn)多用ALP系統(tǒng)名phosphate-monoester phosphohydrolase (alkaline optimum)其他名稱還有alkaline phosphomonoesterase; phosphomonoesterase; glycerophosphatase;

3、 alkaline phosphohydrolase; alkaline phenyl phosphatase; orthophosphoric-monoester phosphohydrolase (alkaline optimum);basic phosphataseCAS 號: 9001-78-9堿性磷酸酶(AKP或ALP)屬于同源二聚體蛋白，分子量為56KDa。每個單體由449個氨基酸組成，完整的AKP分子呈現(xiàn)典型的/的拓撲結(jié)構(gòu)，同時每個單體均具有一個活性中心，活性中心區(qū)域由Asp101-Ser102-Ala103三連體、Arg166、水分子、三個金屬離子及其配體氨基酸組成。AKP被p

4、hoA 基因編碼，與很多分泌蛋白一樣，在細胞質(zhì)內(nèi)合成氨基末端帶有信號肽的單體前體，信號肽引導(dǎo)前體跨內(nèi)膜運輸后被切除，同源二聚體形成。堿性磷酸酶是一種能夠?qū)?yīng)底物去磷酸化的酶，即通過水解磷酸單酯將底物分子上的磷酸基團除去，并生成磷酸根離子和自由的羥基，這類底物包括核酸、蛋白、生物堿等。而該脫去磷酸基團的過程被稱為去磷酸化或脫磷酸化。堿性磷酸酶是磷酸酶的一種，磷酸酶的作用與激酶的作用正相反，激酶是磷酸化酶，可以利用能量分子，如ATP，將磷酸基團加到對應(yīng)底物分子上。堿性磷酸酶在堿性環(huán)境有最大活力，對來源于細菌中的ALP來說，其最適pH是8.0，而對來源于牛的ALP則是8.5。ALP是一種含鋅的糖蛋

5、白，在堿性環(huán)境中（最適Ph為10左右）可以水解各種天然及人工合成的磷酸單酯化合物底物。堿性磷酸酶偏高的原因當肝臟受到損傷或者障礙時經(jīng)淋巴道和肝竇進入血液，同時由于肝內(nèi)膽道膽汁排泄障礙，反流入血而引起血清堿性磷酸酶明顯升高。1堿性磷酸酶偏高的原因可以分為生理性原因和病理性原因，具體討論如下：1、生理性原因 兒童骨骼發(fā)育期、孕婦、骨折愈合期，這些情況下骨組織中的堿性磷酸酶很活躍，所以檢測時值會偏高。2、病理性原因 當人體患有阻塞性黃疸、原發(fā)性肝癌、繼發(fā)性肝癌、膽汁淤積性肝炎等時，肝細胞過度制造ALP，經(jīng)淋巴道和肝竇進入血液，同時由于膽汁排泄障礙，反流入血，引起血清中的堿性磷酸酶偏高。3、骨骼有病時

6、，例如佝僂病、骨上腫瘤、軟骨病等。4、其他不是很常見的疾病，例如腎病、嚴重性貧血、甲狀腺機能不全、白血病等2。2有何影響堿性磷酸酶主要用于阻塞性黃疸、原發(fā)性肝癌、繼發(fā)性肝癌、膽汁淤積性肝炎等的檢查。它主要經(jīng)淋巴道和肝竇進入血液，同時由于肝內(nèi)膽道膽汁排泄障礙，反流入血而引起血清堿性磷酸酶明顯升高。但由于骨組織中此酶亦很活躍。因此，孕婦、骨折愈合期、骨軟化癥。佝僂病、骨細胞癌、骨質(zhì)疏松、肝膿腫、肝結(jié)核、肝硬變、白血病、甲狀腺機能亢進時，血清堿性磷酸酶亦可升高，所以對人體的危害是比較大的。3偏高的危害堿性磷酸酶（ALP）是診斷膽道系統(tǒng)疾病時常用的指標.堿性磷酸酶存在于機體的各個組織,以骨骼,肝臟,腎

7、臟含量較多.正常血清中的堿性磷酸酶主要來自于骨骼,由成骨細胞產(chǎn)生,經(jīng)血液到肝臟,從膽道系統(tǒng)排泄.膽汁淤積性肝炎肝炎和肝外梗阻時此酶明顯升高,ALP只能提示膽道梗阻性病變,不能鑒別梗阻是良性還是惡性.一般慢肝大多都有多多少少的纖維化現(xiàn)象,只是輕重而已.堿性磷酸酶偏高預(yù)示著肝臟異常，堿性磷酸酶偏高時，有可能是肝囊腫、肝結(jié)核、阻塞性黃疸、繼發(fā)性肝癌和原發(fā)性肝癌等；堿性磷酸酶偏高預(yù)示著骨骼疾病，堿性磷酸酶偏高時，有可能是骨軟化癥、骨折愈合期、骨細胞癌和惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移等；堿性磷酸酶偏高預(yù)示著白血病、甲狀腺機能亢進。如何降低堿性磷酸酶：堿性磷酸酶廣泛分布于人體的骨、肝3、腸、胎盤等組織中。主要用于阻塞性黃

8、疸、原發(fā)性肝癌、繼發(fā)性肝癌、膽汁淤積性肝炎的檢查?；歼@些疾病時，肝細胞過度制造ALP，經(jīng)淋巴道和肝竇進人血液，同時由于肝內(nèi)膽道膽汁排泄障礙，反流入血而引起血清堿性磷酸酶明顯升高。但由于骨組織中此酶亦很活躍。因此，孕婦、骨折愈合期、骨軟化癥。佝僂病、骨細胞癌、骨質(zhì)疏松、肝膿腫、肝結(jié)核、肝硬變、白血病、甲狀腺機能亢進時，血清堿性磷酸酶亦可升高，你最好進一步進行檢查確定是什么原因?qū)е碌膲A性磷酸酶升高，然后再進行針對性治療。建議你用傳統(tǒng)中藥川楝子,佛手柑,白術(shù),八月柞,木蝴蝶,龜板,白芍,海南沉,高麗參,澤瀉,黃芩,烏術(shù)粉,茯苓,柴胡,金精粉,白砂糖,蜂蜜,豬苦膽汁治療。4升高能引起堿性磷酸酶升高的疾

9、病1.肝膽疾?。喝绺斡不?、肝癌、肝炎、肝外膽道阻塞等可造成堿性磷酸酶升高。2.骨骼疾?。喝缲E病,軟骨病,骨惡性腫瘤等均可引起堿性磷酸酶升高。當骨骼發(fā)生病變時就會引起堿性磷酸酶升高4。5來源人體內(nèi)情況堿性磷酸酶主要用于阻塞性黃疸、原發(fā)性肝癌、繼發(fā)性肝癌、膽汁淤積性肝炎等的檢查?；歼@些疾病時，肝細胞過度制造ALP，經(jīng)淋巴道和肝竇進入血液，同時由于肝內(nèi)膽道膽汁排泄障礙，反流入血而引起血清堿性磷酸酶明顯升高。但由于骨組織中此酶亦很活躍。因此，孕婦、骨折愈合期、骨軟化癥。佝僂病、骨細胞癌、骨質(zhì)疏松、肝膿腫、肝結(jié)核、肝硬變、白血病、甲狀腺機能亢進時，血清堿性磷酸酶亦可升高，應(yīng)加以鑒別。研究應(yīng)用堿性磷酸酶

10、也是目前免疫診斷試劑產(chǎn)品最常用的標記酶之一。與辣根過氧化物酶（HRP)相比，ALP用作標記酶的優(yōu)點是，穩(wěn)定性高、靈敏度高，缺點是成本高，標記困難。在研究中最常用的ALP如下：細菌堿性磷酸酶Bacterial alkaline phosphatase (BAP), 來源：Escherichia coliC4 ； Shrimp alkaline phosphatase (SAP), 來源：一種北極蝦 (Pandalus borealis) ; 小牛腸堿性磷酸酶Calf Intestinal Alkaline Phosphatase (CIP); 胎盤堿性磷酸酶Placentalalkaline p

11、hosphatase (PALP)和分泌性堿性磷酸酶the secreted alkaline phosphatase (SEAP)，后者是前者的C末端短缺版與PALP相比，SEAP沒有PALP的C末端最后24個氨基酸(這24個氨基酸構(gòu)成了與糖基化磷脂酰肌醇靶向錨定的區(qū)域)ALP主要應(yīng)用于分子生物學和酶免分析中：分子生物學中主要用作核酸的去磷酸化。因為DNA通常會在5端結(jié)合磷酸基團，用ALP去磷酸化能防止DNA分子5端與3端連接，從而在后續(xù)步驟準備好之前讓DNA分子抑制處于線性化狀態(tài);同樣，通過去磷酸化可用作放射標記示蹤。通常用作這些目的用的最多的是Shrimp alkaline phosph

12、atase (SAP)，因為在反應(yīng)完成之后它是最容易滅活的。酶免分析中應(yīng)用最多的是ELISA，以競爭法測小分子抗原為例，抗體先與固相載體結(jié)合，然后讓待測樣品與事先經(jīng)ALP標記過的該抗原競爭地與抗體結(jié)合，洗去未反應(yīng)的過量ALP-抗原，加入顯色底物。則可以通過與按梯度濃度變化的標準品繪出的標準曲線對比從而知道待測樣品中抗原的濃度。ELISA中用的比較多的是 辣根過氧化物酶(HRP)，底物為OPD， 深桔黃色 ，檢測波長492nm；TMB， 藍綠色，檢測波長450nm 堿性磷酸酶，底物為PNPP（對消基苯磷酸酯）， 黃色 ，檢測波長405nm目前工業(yè)上一個普遍的應(yīng)用是作為檢驗牛奶的巴斯的滅菌的標志：

13、被巴斯德過高溫滅菌的分子會被滅活，向其中和未巴斯滅菌的牛奶中加入ALP的底物，2分鐘后未滅菌的樣品應(yīng)該顯黃色，如果待測樣品(指被巴斯滅菌過的牛奶)也能呈現(xiàn)相同顏色，則說明巴斯滅菌溫度未過度。當然總有例外，因為有少數(shù)細菌會產(chǎn)生耐熱的ALP。6測定方法有很多種，我國曾應(yīng)用較廣的為磷酸苯二鈉比色法，但現(xiàn)在應(yīng)用較多的是連續(xù)檢測法。原理為以磷酸對硝基酚為底物，2-氨基-2-甲基-1-丙醇或二乙醇胺為磷酸?；氖荏w。在堿性環(huán)境下，ALP催化4-NPP水解產(chǎn)生游離的對硝基酚，在堿性溶液中轉(zhuǎn)變成黃色。根據(jù)405nm處吸光度增高速率來計算ALP活性單位。7正常范圍正常范圍（連續(xù)監(jiān)測法）女性，1-12歲小于500

14、U/L；大于15歲，40-150U/L；男性，1-12歲小于500U/L；12-15歲，小于750U/L；大于15歲，40-150U/L。高值可能說明有膽管阻塞現(xiàn)象；低值更多出現(xiàn)于兒童和孕婦身上。高值可能表明骨沉積活躍，因為ALP是成骨細胞活動(造骨)的副產(chǎn)物(例如在佩吉氏斯癥畸形性骨炎的案例中)。一般來說，低值要比高值少見。8臨床意義臨床上測定ALP主要用于骨骼 、肝膽系統(tǒng)疾病的診斷和鑒別診斷，尤其是黃疸的鑒別診斷。對于不明原因的高ALP血清水平，可測定同工酶以協(xié)助明確其器官來源。1生理性增高：兒童在生理性的骨骼發(fā)育期，堿性磷酸酶活力可比正常人高12倍。處于生長期的青少年，以及孕婦和進食脂肪

15、含量高的食物后均可以升高。2病理性升高：(1)骨骼疾病如佝僂病、軟骨病、骨惡性腫瘤、惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移等；(2)肝膽疾病如肝外膽道阻塞、肝癌、肝硬化、毛細膽管性肝炎等；(3)其他疾病如甲狀旁腺機能亢進。3病理性降低：見于重癥慢性腎炎、兒童甲狀腺機能不全、貧血等。9藥物意義催化克林霉素磷酸酯水解成為克林霉素，使其發(fā)揮抗生作用。10異常原因堿性磷酸酶異常多見于阻塞性黃疸，原發(fā)、繼發(fā)性肝癌，膽汁淤積性肝炎等。如果是肝細胞性黃疸，轉(zhuǎn)氨酶的活性會很高，但堿性磷酸酶稍高或者是正常。而如果是阻塞性黃疸則正好相反，血清堿性磷酸酶會明顯升高，轉(zhuǎn)氨酶則輕度增高;而肝癌病變時，血清堿性磷酸酶明顯增高，轉(zhuǎn)氨酶升高卻并不明

16、顯，血清膽紅素也不高。5堿性磷酸酶異常還見于骨骼性疾病，如成骨不全，纖維性骨炎，骨質(zhì)軟化癥，骨折修復(fù)愈合期，骨轉(zhuǎn)移癌。血清堿性磷酸酶異常還有可能因為貧血及腫瘤，兒童甲狀腺發(fā)育不全；重癥型慢性腎炎，甲狀腺功能不全者；維生素C缺乏癥壞血病、乳糜瀉、惡病質(zhì)、貧血肝病。11抑制作用除來源于胎盤外所有哺乳動物的ALP同工酶都能被高精氨酸所抑制；而除來源于腸和胎盤外所有的ALP同工酶都能被左旋咪唑所抑制；而除了來源于胎盤的ALP(PALP和SEAP)外，幾乎所有的ALP都能在652小時即被滅活。單乙醇胺對堿性磷酸酶有溫度依賴的抑制作用；較高濃度的無機磷可競爭性地抑制堿性磷酸酶的活性；EDTA通過絡(luò)合堿性磷

17、酸酶而導(dǎo)致該酶活性中心微環(huán)境構(gòu)象發(fā)生變化，從而不可逆地抑制堿性磷酸酶的活性；其他的抑制劑還有聯(lián)苯胺(競爭性)、L-苯丙氨酸和丹酰-L-苯丙氨酸(反競爭性)、含氮雜環(huán)氧釩配合物(選擇性)、五氯酚(對人胎盤堿性磷酸酶反競爭性抑制)等。12肝膽疾病肝細胞參與合成ALP，肝膽疾病時增高的ALP來自肝細胞。淤膽性疾病時ALP的升高ALP存在于毛細膽管面的微絨毛上，在膽汁分泌障礙時明顯增高。因膽汁酸刺激而ALP mRNA轉(zhuǎn)譯增高，肝細胞合成ALP亦增高。ALP經(jīng)膽汁排出，肝內(nèi)外膽管阻塞時，ALP有非常明顯的升高，ALP升高先于黃疸的出現(xiàn)，在黃疸消退后還可持續(xù)異常。在原發(fā)性膽汁肝硬化、藥物性肝炎、肝移植排斥

18、或淤膽型病毒性肝炎引起的肝內(nèi)淤膽，都會使ALP升高，甚至高達正常值的4倍。肝內(nèi)占位性病變時ALP的升高即使無黃疸，在肝占位性病變時血清ALP也可升高，包括肝腫瘤和肝膿腫，機制不明，可能與存在小膽管阻塞有關(guān)。在單小葉或節(jié)段的膽管阻塞，血清ALP升高可以是唯一的檢驗異常。惡性腫瘤時ALP明顯升高，是腫瘤的標記酶。在肝硬化病人的病程觀察中如發(fā)現(xiàn)血清ALP升高，須考慮合并HCC的可能性。肝轉(zhuǎn)移性腫瘤與其他肝占位性病變一樣，血清ALP可明顯升高。某些肝外腫瘤也可合成ALP，并不表示肝外腫瘤已有肝轉(zhuǎn)移。成骨細胞與ALP成骨細胞的活性及成骨作用的變化與血清ALP的活力密切相關(guān)。骨骼疾病患者主要由于成骨細胞增殖使血清ALP升高?；涡怨茄罪@著升