山楂和山楂葉對大鼠血清中SOD和GSH-Px的影響

1、山楂和山楂葉對大鼠血清中SOD和GSH-Px的影響    【摘要】  目的  為研究山楂和山楂葉的抗氧化作用。方法  本實驗選用Wistar雄性大鼠作為研究對象。使用高脂飼料喂養(yǎng)的同時，用不同劑量的山楂和山楂葉提取物灌胃。5周后測定大鼠血清中的超氧化物歧化酶(SOD)以及血清中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性；同時對山楂和山楂葉的抗氧化指標進行比較。結(jié)果  山楂和山楂葉提取物能增強GSH-Px 的活性，提高SOD的活力；山楂葉GSH-Px的活力高于山楂。結(jié)論  本文提示山楂和山楂葉具有抗氧化的作用。

2、    【關(guān)鍵詞】  山楂和山楂葉；SOD；GSH-Px          Effects of haw and hawthorn leaf extracts on serum SOD and GSH-Px in rats    【Abstract】  Objective  Male Wistar rats were used as experimental subject to investigate the an

3、tioxidation effect of haw and hawthorn leaf extracts.Methods  The rats were feeding on a high-fat diet for 5 weeks， while different doses of the two kinds of extracts were administered respectively by gavage once a day. Then serum SOD and GSH-Px activity were determined.Results  It showed

4、that both haw and hawthorn leaf extracts can increase the activity of SOD and GSH-Px，the activity of hawthorn leaf was higher than that of haw.Conclusion  It indicates that haw and hawthorn leaf both have an action of antioxidation.    【Key words】  haw;hawthorn leaf;SOD;GSH-

5、Px    山楂為薔薇科植物，具有保健與藥用的歷史，近年來對山楂和山楂葉的化學(xué)、藥理與臨床等研究表明，具有降血壓、降血脂的作用，尤其在心血管系統(tǒng)方面有有效的治療保健和抗衰老作用，因此更加受到人們的青睞。本文用山楂和山楂葉的提取物進行了抗氧化作用的實驗研究，為山楂和山楂葉的進一步開發(fā)、利用提供可靠的科學(xué)依據(jù)。    1  材料與方法    1.1  山楂和山楂葉的提取  山楂和山楂葉均采自北京房山地區(qū)。山楂用清水和去離子水浸洗干凈，用消毒紗布擦干水分、去核、稱重，加20倍去離子

6、水煮1h。用四層紗布過濾，取一定量冷凍干燥，稱重，計算含量。稀釋成0.06g/ml、0.18g/ml、0.30g/ml的提取液備用1。山楂葉用清水和去離子水浸洗干凈，自然晾干、去莖根、取葉部分稱重，加20倍去離子水浸煮1h后過濾，取一定量冷凍干燥，稱重，計算含量。稀釋成0.03g/ml、0.09g/ml、0.15g/ml的提取液備用。    1.2  動物處理與分組  實驗動物選用SPF級雄性Wistar大鼠，體重(200±50)g，由首都醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供），在清潔、通風(fēng)、恒溫、恒濕、無污染的SPF環(huán)境下生長。適應(yīng)性飼養(yǎng)大鼠1

7、周后，按體重隨機分為8組，每組10只?？瞻讓φ战M：飼以基礎(chǔ)飼料。   高脂對照組：飼以高脂飼料（79%基礎(chǔ)飼料+1%膽固醇+10%蛋黃酚+10%豬油）2。山楂低劑量組：飼以高脂飼料，每天按0.8ml/100g bw灌胃0.06g/ml的山楂提取液。山楂中劑量組：飼以高脂飼料，每天按0.8ml/100g bw灌胃0.18g/ml的山楂提取液。山楂高劑量組：飼以高脂飼料，每天按0.8ml/100g bw灌胃0.30g/ml的山楂提取液。山楂葉低劑量組：飼以高脂飼料，每天按0.8ml/100g bw灌胃0.03g/ml的山楂葉提取液。山楂葉中劑量組：飼以高脂飼料，每天按0.8ml

8、/100g bw灌胃0.09g/ml的山楂葉提取液。山楂葉高劑量組：飼以高脂飼料，每天按0.8ml/100g bw灌胃0.15g/ml的山楂葉提取液。連續(xù)給藥35天，自由進食飲水，5周后禁食一天宰殺，斷頭取血，分離血清。    1.3  試劑、儀器  SOD、GSH-Px試劑盒購自南京建成生物工程研究所；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，冷凍干燥儀，紫外可見分光光度計(日本島津公司UV-2450)，恒溫水浴箱。    1.4  實驗方法  血清SOD活力測定：黃嘌呤氧化酶法3，血清GSH-Px的活力的測定：DTNB法

9、2。    1.5  統(tǒng)計學(xué)方法  采用SPSS for Windows 10.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理，計量數(shù)據(jù)進行單因素方差分析。    2  結(jié)果    2.1  山楂葉對大鼠血清SOD和GSH-Px的影響  見表1。    表1  山楂葉對大鼠血清中SOD和GSH-Px活性的影響  （±s）       

10、60;                                 注：與高脂對照組相比*P<0.05；與空白組相比P<0.05    由表可見，山楂葉劑量組和空白劑量組與高脂對照組間SOD差異無顯著性（P>0.05）；高脂對照

11、組GSH-Px值明顯低于空白對照組，并且差異有顯著性（P0.05），山楂葉的各組GSH-Px與高脂對照組相比均有所增加，并有顯著性差異（P0.05），山楂葉高劑量組與空白對照組差異無顯著性（P0.05），中、低劑量組GSH-Px低于空白對照組，差異有顯著性（P0.05）。    2.2  山楂對大鼠血清SOD、GSH-Px的影響  見表2。    表2  山楂對大鼠血清中SOD和GSH-Px活性的影響  （±s）      &

12、#160;                                   注：與空白組相比P0.05，與高脂對照組相比*P0.05      表結(jié)果表明：經(jīng)單因素方差分析F=3.228，P0.05，各組間有顯著性差

13、異。進一步進行兩兩比較，高脂對照組SOD值低于空白對照組且差異有顯著性（P0.05），山楂各劑量組與空白對照組SOD值差異無顯著性（P0.05），山楂高、中劑量組能夠增加SOD活性，與高脂對照組相比差異有顯著性（P0.05），山楂低劑量組與高脂對照組差異無顯著性（P0.05）。    經(jīng)單因素方差分析F=375.33，P0.01，各組間差異有顯著性。進一步進行兩兩比較，高脂對照組值GSH-Px低于空白對照組且差異有顯著性（P0.05），補充山楂后能增加GSH-Px活性，山楂各劑量組GSH-Px高于高脂對照組，差異有顯著性（P0.05）；但山楂各劑量組GSH-Px還

14、是低于空白對照組且差異有顯著性（P0.05），山楂高劑量組與山楂低劑量組差異有顯著性（P0.05）。    2.3  山楂與山楂葉對大鼠血清中SOD、GSH-Px的影響的比較    2.3.1  山楂與山楂葉對大鼠血清中SOD的影響的比較  見圖1。經(jīng)單因素方差分析F=0.782，P=0.568，各組間無顯著差異。                 

15、                           圖1  山楂和山楂葉對SOD作用的影響    2.3.2  山楂與山楂葉對大鼠血清中GSH-Px的影響的比較  見圖2。經(jīng)單因素方差分析F=44.433，P0.01，各組間有顯著差異，進一步進行兩兩比較，山楂葉各組GSH-Px值均高于山楂組，并差

16、異有非常顯著性（P0.01）。    3  討論    近年來對山楂和山楂葉的作用越來越引起人們的關(guān)                                    

17、;         圖2  山楂和山楂葉對血清GSH-Px作用的比較                                      

18、60;             注：*相同劑量山楂和山楂葉組比較，P0.05    注，山楂不僅是一種天然食物，也是草藥。山楂和山楂葉的主要化學(xué)成分為黃酮類，是公認的最具抗氧化潛力的一類化合物，許多疾病的發(fā)生發(fā)展與活性氧的產(chǎn)生有關(guān)。有望成為低毒高效的抗氧化劑來補充體內(nèi)抗氧化物的不足，以防治某些活性氧作用所致疾病3，4。    體內(nèi)氧自由基的產(chǎn)生和清除在正常情況下應(yīng)當是平衡的。如果由于某種原因，使得體內(nèi)產(chǎn)生的氧自由基過

19、多，或者體內(nèi)防護、清除和修復(fù)能力下降，體內(nèi)就會出現(xiàn)氧自由基代謝的失衡，就會導(dǎo)致自由基損傷引起疾病的發(fā)生。說明體內(nèi)已無力維持自由基平衡，需要補充外源氧自由基清除劑，幫助維持體內(nèi)氧自由基的平衡。    機體中的抗氧化酶，主要有超氧化物歧化酶（SOD），各種過氧化物酶（GSH-Px）、過氧化氫酶(CAT)和其他血紅素蛋白過氧化物酶。這些酶在防治氧代謝物的損傷中具有重要的作用，它們不但協(xié)同的防治活性氧的損傷效應(yīng)，而且相互間還起著保護作用。     本研究進一步觀察了山楂與山楂葉對大鼠血清中SOD、GSH-Px含量

20、的變化，結(jié)果顯示山楂葉劑量組和空白劑量組與高脂對照組間SOD活性差異無顯著性（P0.05），雖然在統(tǒng)計學(xué)上沒差異有顯著性，但也能看到不同劑量山楂葉SOD活性有增加的趨勢。而山楂高、中劑量組與高脂劑量組相比有顯著差異。山楂葉的各組GSH-Px活性與高脂對照組相比均有所增加，并差異有顯著性（P0.05），山楂各劑量組GSH-Px活性均高于高脂對照組，差異有顯著性（P0.05），說明具有抗氧化作用和降血脂作用。與文獻報道相同5，6。    山楂和山楂葉的抗氧化作用不僅是由于含有維生素C、有機酸、黃酮等還原性物質(zhì)的直接作用，更重要的是通過增強抗氧化物酶系統(tǒng)的活性而起作用的

21、。    通過山楂與山楂葉對大鼠血清中SOD、GSH-Px的影響的比較，我們觀察到山楂在增加SOD活力方面作用與山楂葉無顯著性差異，但山楂葉增加GSH-Px活力優(yōu)于山楂。    對山楂和山楂葉的研究有望成為一種高效的抗氧化劑來補充體內(nèi)抗氧化物質(zhì)的不足，以防治某些活性氧作用所致的疾病，為進一步的開發(fā)利用山楂特別是山楂葉的資源提供理論依據(jù)。