實驗室感染的預防與控制

1、實驗室工作人員的安全防護和醫(yī)院感染控制基本知識及基本技能培訓l安全教育與個人防護1.安全教育做好實驗室人員的安全教育， 是防止實驗室感染的重要措施。 教育的內容可根據實驗室人員 素質及設備條件而定， 并由實驗室主任或高級技師負責培訓。 實驗室的安全教育通常包括下 述內容。1）實驗室感染的原因、途徑及方式；2）意外事故，入注入、溢出等可能引起的感染，及其應采取的預防措施；3）氣溶膠污染空氣引起的感染，并說明氣溶膠產生的原理和物理性質，以及減少氣溶膠發(fā)生的操作方法；4）處理烈性菌的原則及方法；5）實驗室廢物的危害及其處理方法；6）實驗動物的接種、管理及尸體處理原則；7）實驗室的合理設計；8）實驗室

2、事故的應急措施；9）有害化學試劑的貯存及應用；10）放射性物質的危害及使用原則；11）防火措施；12）防護服、護目鏡、面罩等用品的使用方法及原則；13）生物安全柜的使用范圍及方法；14）壓力滅菌器、干燥箱的應用及滅菌效果監(jiān)測；15）離心機的使用方法及事故處理；16）實驗室的空氣消毒方法及其效果監(jiān)測；17）化學消毒劑的性質及其應用范圍；18）其他保證安全的項目。2.個人防護個人防護服（工作服）對工作在實驗室里的工作人員是必穿的。工作服內不可 放食品及個人用品，若接觸傳染病病人、傳染性標本、特種化學品等眾多微生物檢驗中必須 穿隔離衣、戴口罩，接觸傳染性標本等，應使用一次性手套。因此，個人防護服必須

3、大小合 體而易穿。實驗衣保護人體，不能穿著實驗衣到室外，離開工作區(qū)以前必須脫去實驗衣。在檢測傳染性標本時必須戴手套，以保護人體不受感染，大小也必須適宜，實驗人員養(yǎng)成不戴手套的習慣是危險的。戴手套以防明顯的傷害，必須不認為是多余的。對所有人員在全部 工作過程中均是十分重要的。在檢測工作程序中，應對用或不用手套接觸一部儀器或一片紙都應規(guī)定。所有人都應遵守，因為實驗室工作涉及到許多人在不同時間做不同的工作。如某些人員用血液污染的手套操作儀器，而后來又有人未戴手套而處理這臺儀器，就會造成傳染。工作程序可能是復雜的，在短時間內從操作儀器、書寫報告和打電話，工作人員必須想到全 體人員，注意保持全體預防原則

4、。完成工作后要脫手套、洗手，手套既不能洗也不能再用， 必須消毒處理。如果血液或液體可能漏濺到粘膜時，必須戴口罩、眼鏡或面罩。在化學物漏濺事故中，無論是否接觸眼鏡，而保護眼睛是無疑的。戴眼鏡的人應注意在工作區(qū)避免所有 操作接觸眼鏡。（七）實驗室污染事故及其處理微生物實驗室內由于工作人員不慎，或技術不熟練而發(fā)生的一些污染事故，必須及時采取應急措施，以免病原微生物蔓延而造成傳染病流行。下面簡要介紹某些常見的事故及其處理原則。1 .培養(yǎng)物滲漏或容器破損及其處理盛有傳染性標本的容器滲漏，或濺落在工作臺上，或污染地面時，應以0.5%次氯酸鈉或過氧乙酸浸泡的布覆蓋至少 1小時，再用擦布擦去滲漏物， 并將擦布

5、放在污染物容器內壓力滅 菌。如果手和腳被微生物污染，可用碘伏洗滌消毒；受污染的工作服應立即更換。假如發(fā)生大量烈性傳染病的致病菌污染，除采取以上應急措施外，必須立即封閉現場，并報主管防疫部門，請專職防疫人員參加研討和采取相應的處理方法。若發(fā)生盛有培養(yǎng)物的器皿破碎，要用消毒液浸泡的布覆蓋，至少半小時后才能將破碎物和用過的布放在容器中壓力消毒。然后，用消毒液浸泡的布擦洗污染的臺面或地面，擦布使用后也必須壓力消毒。做上述處理者要戴手套。2 .事故性刺傷、劃傷或擦傷及其處理經常使用注射器做實驗動物接種等操作，可能無意中刺傷皮膚，造成有傳染性液體的事故性注入。尤其對于毒性較強的病原菌，如炭疽桿菌、鼠疫耶爾

6、森氏菌和乙型肝炎病毒等，可引起嚴重的實驗室感染。 一旦發(fā)生這樣的意外， 必須立即報告有關部門， 分解不同病原體采取 相應的應急措施，包括預防接種和抗生素治療等。類似的事故必須予以較詳細的登記。其他事故，如被刀剪或破碎玻璃等劃傷或刺傷時，均應先清洗傷口，并給予必要的預防注射和相應的抗生素治療。3 .誤服微生物懸液的處理因實驗操作或使用口吸吸管而誤服微生物懸液并引起感染者曾有過許多報道，對于誤服者必須立即用含漱、洗胃和催吐等方式處理，嚴重者應送往急救室，根據攝入的病原體，采取必要的預防及治療措施，并做好事故登記。若懸液濺入眼內，應先以生理鹽水沖洗，然后每隔1小時以抗生素眼藥水滴眼，再根據具體情況，

7、決定有無必要做針對性的預防注射或給予丙 種球蛋白。4 .裝有病原體離心管破碎后的處理(1)如果離心沉淀過程中發(fā)現離心破碎，應立即停機，并于30分鐘后打開。假如停機后發(fā)現離心管破碎，要重新蓋好蓋子，30分鐘后打開；(2)戴上厚橡皮手套，必要時外面再套上一層塑料手套，用鐐子撿出離心碎片；(3)全部碎管和套管等應放入無腐蝕性的消毒液中浸泡24小時，或采用壓力滅菌；(4)離心機轉筒應采用無腐蝕性的消毒液擦拭干凈，擦布亦需經壓力滅菌。5 .氣溶膠污染室內空氣的處理實驗室內因操作不慎，含有傳染性液體大量噴出而形成氣溶膠并污染室內空氣時，室內所以人員應馬上撤離污染區(qū)域，并應報告主管部門。至少在1小時內任何人

8、員均不能進入污染區(qū)。待氣溶膠排出和較重的傳染性微粒沉淀下來，即1小時后再在安全員的監(jiān)督下進行消毒。遭氣溶膠感染的人員應做相應的預防注射和抗生素等治療。(八)微生物實驗室人員的保健對臨床實驗室的工作人員要有詳細的病史記錄，包括所有職業(yè)病、外傷和一般疾病的記錄， 并定期進行健康檢查，做各種預防接種和結核菌素試驗等。對從事麻疹、風疹、鼠疫和狂犬 病病原體處理的實驗室人員均需做相應的預防接種。孕婦不適宜在病毒室工作， 因為懷孕期間較易感染某些病毒性疾病， 且易造成流產。孕婦同樣也不適宜在大劑量放射性實驗室工作， 否則容易發(fā)生流產、死胎或胎兒畸形。必須牢記，預防接種不能取代合格的微生物實驗操作 和安全防

9、護措施；一旦發(fā)生感染，應首先考慮其是否為實驗室感染。保健科醫(yī)生還應對實驗室人員進行以下各項定期檢查。1 .乙型肝炎病毒的血清學試驗：尤其是新來的工作人員均必須做乙肝病毒的血清學檢查。2 .結核菌素試驗：新來的工作人員若為陰性者，不得參加處理結核標本。要給陰性反應者接 種卡介苗，經2-3個月后做結核菌素試驗復查。陽性者表示對結核桿菌具有一定的免疫力， 方可參加相關的微生物檢驗工作。3 .霉菌血清學試驗：新進入霉菌室工作的人員，必須按常規(guī)進行霉菌，包括皮炎芽生菌、厭 氧酷球胞子菌及莢膜組織胞漿菌等血清學試驗。該項試驗通常應每隔半年重復一次，必要時可提前檢查。4 .從事放射性免疫工作者應每隔 6個月

10、作一次血常規(guī)及血小板計數，白細胞低于3000/mm3 ,和血小板低于60000/ mm3,應暫停與放射源接觸：經治療恢復后再參加放射免疫工作。5 .胸部攝片：新來的人員應進行胸部 X線檢查，正常者方可錄用。所有人員通常均應每隔一 年復查一次；對曾患結核病者更應該根據情況做定期檢查。6. 一般體格檢查：對新人員應進行工作前的例行查體，如發(fā)現 X線片、血清學及皮膚 試驗中有陽性反應者，要根據具體情況決定不予錄取或作醫(yī)療隨訪。 對所有工作人員應定期 體檢；女性需要每年做一次宮頸刮片和胸部檢查。附：傳染性非典型肺炎人體樣品資源管理規(guī)范（暫行）總貝U一、為加強對傳染性非典型肺炎（以下簡稱SARS）的科學

11、研究工作，合理采集、運輸、保藏、規(guī)范使用并保護 SARS人體樣品資源，實現資源共享，規(guī)范管理，防止流失，特制定本規(guī)范。二、SARS人體樣品資源是指 SARS病人和疑似病人及其密切接觸者的血液、血清、鼻咽拭子、口咽拭子、痰液、氣管吸取液或支氣管灌洗液、尿液、糞便，以及SARS死亡患者尸體的組織、器官等樣品。三、本規(guī)范適用于各級疾病預防控制、醫(yī)療等采集、使用SARS人體樣品的機構，以及其他所有可能利用 SARS人體樣品開展工作的機構。四、SARS人體樣品屬于國家特殊生物資源，各級衛(wèi)生行政主管部門和采集、使用單位負有保護SARS人體樣品資源的責任和義務。SARS人體樣品用于國家開展與 SARS有關的

12、科學研究工作，禁止以任何形式買賣。第一章 采集五、采集對象為SARS確診病人、疑似病人及其密切接觸者。采集人員為具有執(zhí)業(yè)資格的醫(yī)務人員。定點醫(yī)院的醫(yī)務人員負責采集住院病人 （確診和疑似病人）的樣品，各級疾病預防控 制機構的技術人員負責采集非住院對象 （出院病人和密切接觸者） 的樣品。未經批準的任何 單位和個人不得擅自采集 SARS人體樣品。六、SARS人體樣品的采集必須嚴格遵循知情同意的原則。七、采集要求：1、第一次采集住院病人的樣品須在入院后24小時內進行；采集前應向病人說明采集樣品的使用目的；2、采集單位應指定專人負責樣品登記、收集、管理，并認真填寫傳染性非典型肺炎病人或密切接觸者人體樣品

13、采集登記表（附后）；3、裝有樣品的螺口塑料管均用膠布或封口膜密封，用清潔塑料袋包裹嚴實，外包裝按照衛(wèi)生部傳染性非典型肺炎實驗室生物安全操作規(guī)范有關規(guī)定執(zhí)行。4、每份樣品必須標明編號及采集日期；5、樣品采集后應立即送當地疾病預防控制機構，如不能立即送交，可置于冰箱在-20 C以下短暫（24小時之內）保存；尿液樣品應暫存于4c冰箱。八、樣品采集種類和方法：1、呼吸道樣品：包括鼻咽拭子、口咽拭子、痰液及下呼吸道樣品。鼻咽拭子：將棉簽平行于上顆插入鼻孔，保持幾秒鐘，吸收分泌物，拭抹雙側鼻孔?？谘适米樱哼m度用力拭抹咽后壁和扁桃體部位，應避免觸及舌部。迅速將棉簽放入無菌、內裝3-5ml樣品運送液（其液體配

14、制見第三章第十五條）、帶墊圈的螺口塑料管中。在靠近頂端處折斷棉簽桿，旋緊管蓋并密封。痰液：讓病人將痰液咳入無菌、內裝 45 ml樣品運送液、帶墊圈的 50ml螺口塑料管 中。旋緊管蓋并密封。下呼吸道樣品（適用于氣管插管病人）：收集氣管吸取液或支氣管灌洗液5-10ml放入無菌、帶墊圈的50ml螺口塑料管中，立即密封。2、血液樣品：包括血清、血凝塊。血清（包括病人急性期和恢復期血清）：采集5-10ml全血于帶墊圈的螺口管中，不加抗凝劑。待血液凝固后，分離血清，放置到-20 C以下冰箱中冷凍保存。采集時間：第一份血清應在入院后24小時內采集；第二份血清應在發(fā)病后10-14天采集；第三份血清應在發(fā)病后

15、22-28天或出院當日（出院當日未采集的，應在出院后）采集。3、糞便樣品：采集 5-10g糞便放入無菌塑料瓶內。在 4 c條件下保存并及時送至有關 機構。4、尿液樣品：應在患者的急性期收集。收集中段尿 10-20ml放入無菌、帶墊圈的 50ml 塑料管中。在4 c條件下保存并及時送至有關機構。5、尸檢組織樣品：病人死亡后應盡早進行尸體解剖，采集肺、氣管、心臟、脾、肝、 腦、腎和淋巴結等重要組織和器官樣品。每采集一部位應更換、消毒采集器械。每種組織和器官應多部位采集，每份樣品應采集20-50g,淋巴結2個，分別置于50ml無菌螺口塑料管中，立即置于-70 C以下保存或冷藏送至有關機構。九、樣品采

16、集器械要求。1、注射器：醫(yī)用（5ml和10ml） 一次性注射器。2、棉拭子：塑料桿棉簽。3、全血收集管：10ml螺口塑料管（外螺旋、帶密封墊圈）。4、血清保存管：2 ml螺口塑料管（外螺旋、帶密封墊圈），可耐深低溫（液氮保存）。5、糞便保存管：50 ml螺口塑料管（外螺旋、帶密封墊圈），可耐深低溫（液氮保存）。6、鼻咽拭子彳存管：10 ml螺口塑料管（外螺旋、帶密封墊圈），可耐深低溫（液氮保存）。7、痰液保存管：50 ml螺口塑料管（外螺旋、帶密封墊圈），可耐深低溫（液氮保存）。8、尿液保存管：50ml螺口塑料管（外螺旋、帶密封墊圈） 。9、尸檢組織凍存管：50ml螺口塑料管（外螺旋、帶密封墊

17、圈）。10、油性，防水的記號筆。十、樣品采集的防護措施。1、采集樣品時，采集人必須穿戴連體式隔離衣、防護鞋套、防護面罩或眼罩、"N95"級防護口罩和乳膠手套（2層）。2、樣品采集完畢，首先消毒并脫掉外層手套，然后戴內層手套依次脫掉帽子、眼罩、 口罩、衣褲和鞋套，最后脫掉內層手套，再用消毒巾擦拭面部和雙手。3、防護材料要求：應選用防水面料的防護服、具備寬闊視野，高透光度和防濺性的防 護眼鏡、外科手術用乳膠手套、"N95"級防護口罩、密封性能好，呼吸阻力較小的全面呼吸防護器。第二章 保藏H一、各級疾病預防控制機構在同級衛(wèi)生行政部門的統(tǒng)一管理下負責SARS人體

18、樣品的保地市級疾病預防控制機構負責樣品收集和短期保存；省級疾病預防控制機構負責樣品的長期安全保藏和管理下級單位及本單位采集的樣品；國家疾病預防控制中心負責收集各省保藏的樣品，建立專門的國家資源庫，長期保藏和管理。十二、SARS人體樣品應使用專用的設備保藏。專用設備應符合以下要求：4oC專用保藏容器，用于呼吸道灌洗液、尿液等樣品的短期保存；-20oC以下冰箱，用于保藏血清樣品；-70oC或以下深低溫冰箱，用于保藏鼻咽拭子、咽拭子、痰液樣品及尸檢樣品。保藏樣 品的單位應有樣品數據的儲存和管理設備。第三章 運輸十三、所有需要運輸的 SARS人體樣品外包裝上必須印有生物危險標志并標明"傳染性

19、物質，SARS病毒"。短途運輸需加冰保冷，使用專車，由2人以上專人運送；長途運送需加干冰保冷；空運應按照民航檢疫部門有關傳染性物品運輸的規(guī)定辦理。十四、運輸含有活病毒的 SARS人體樣品或SARS實驗樣品（如病毒株等）時， 必須對 樣品進行嚴格的三層包裝，避免在運輸過程中發(fā)生污染。樣品的容器要使用能夠承受不少于95Kpa的壓力的高質量的防水包裝材料并且密封，以防止運輸過程中發(fā)生內容物的外泄；第二層和第三層包裝中應使用吸水性好的柔軟的物質充填；幾個易碎的容器在同一個包裹中運輸時，應分別獨立包裝并相互隔離，以免互相碰撞。十五、樣品運輸時所需材料的要求。樣品運送液（MEM ）:牛血清5%,

20、青霉素2000U/ml ,鏈霉素200ug/ml,制霉菌素25U/ml ,用2% NaHCO3調pH值到7.4 （由省或市疾病預防控 制機構配制提供）；如無樣品運送液，也可使用等滲鹽溶液或磷酸鹽緩沖液；樣品密封袋； 專用樣品運送箱；專用不干膠標簽。第四章 使用與管理十六、衛(wèi)生部主管全國SARS人體樣品的使用管理工作，負責樣品資源的統(tǒng)一調配和使 用；地市級以上地方人民政府衛(wèi)生行政部門負責本行政區(qū)域內SARS人體樣品的日常監(jiān)督和管理。十七、含有人類遺傳資源的 SARS人體樣品（如人體細胞、組織、器官、全血）確需出 境的，必須嚴格按照人類遺傳資源管理暫行辦法規(guī)定的程序，報人類遺傳資源管理辦公 室批準

21、；此類樣品的入境需報衛(wèi)生部批準。十八、不含有人類遺傳資源的SARS人體樣品（如血清、尿液、糞便、痰液等）和科研樣品（如病毒株）需出境和入境的，必須按有關規(guī)定報衛(wèi)生部審批，履行有關手續(xù)。十九、各類企業(yè)和個人不得擅自采集、收集和保藏SARS人體樣品和科研樣品 （如病毒株），確需使用SARS人體樣品時，須報衛(wèi)生部批準。二十、樣品的使用單位。 地市級以上臨床醫(yī)院可使用本院采集的樣品；地市級及以上疾病預防控制機構可使用本機構采集的和下級醫(yī)療預防機構采集的樣品；有關科研機構和高等學校與臨床醫(yī)院、 疾病預防控制機構合作開展相關研究工作時，需報衛(wèi)生部備案后， 方可取得并使用樣品。 二十一、SARS人體樣品的提

22、供和使用。SARS病人、疑似病人樣PCR法檢測病毒RNA1、定點醫(yī)療機構負責采集并向所在地市級疾病預防控制機構提供品。有條件的醫(yī)療機構可使用本院采集的樣品開展血清學檢測抗體和 工作。SARS2、地市級疾病預防控制機構負責收集醫(yī)療機構和下級疾病預防控制機構采集的人體樣品。有條件的疾病預防控制機構可使用本單位采集和收集的樣品，開展血清學檢測抗體和PCR法檢測病毒RNA工作，但不可進行病原分離工作。 按規(guī)定時間和要求向省級疾病 預防控制機構提供所有樣品，并附有傳染性非典型肺炎病人或密切接觸者人體樣品采集登 記表。3、省級疾病預防控制機構負責接受并保藏地市級疾病預防控制機構提供的所有SARS人體樣品及

23、完整的傳染性非典型肺炎病人或密切接觸者人體樣品采集登記表。可利用樣品開展血清學檢測抗體、PCR法檢測RNA、SARS病原體分離和鑒定工作。按規(guī)定（另發(fā)）數量和要求及時向國家疾病預防控制中心提供樣品。4、國家疾病預防控制中心負責接收、統(tǒng)一保藏和管理各省、區(qū)、市提供的SARS人體樣品和傳染性非典型肺炎病人或密切接觸者人體樣品采集登記表，建立專門的SARS人體樣品國家資源庫，按照衛(wèi)生部要求向有關機構和單位提供樣品。按照衛(wèi)生部統(tǒng)一部署，開展血清學檢測抗體、抗原、PCR法檢測RNA工作、病原體分離和鑒定、電鏡形態(tài)學研究等相關科學研究工作。 按疫情的輕重緩急對鼻咽拭子、口咽拭子、痰液、糞便及血清樣品進行

24、復核或鑒定工作。二十二、SARS人體樣品接受和檢測單位必須及時將檢測結果反饋送檢單位。二十三、所有負責收集和保藏 SARS人體樣品的機構必須指定專人負責樣品的使用和管 理，對相關工作人員進行培訓，嚴格操作規(guī)程，提高自我防護意識。建立監(jiān)測和登記制度、 事故報告制度和應急預案。嚴格按照國家特殊生物資源保護的有關規(guī)定進行管理和保護，不得以任何形式擅自向其他機構和個人提供SARS人體樣品。凡違反有關規(guī)定，造成樣品丟失、病毒擴散、人員感染及資 源流失等嚴重后果的機構和人員，衛(wèi)生部將根據國家有關規(guī)定和法律法規(guī)追究相關單位和個 人的行政或法律責任。二十四、本規(guī)范自發(fā)布之日起施行，由中華人民共和國衛(wèi)生部負責解

25、釋。傳染性非典型肺炎病人或密切接觸者人體樣品采集登記表（略）傳染性非典型肺炎實驗室生物安全操作指南（略）傳染性非典型肺炎（以下簡稱“非典”）的病原是一種新的冠狀病毒，目前稱為SARS冠狀病毒（SARSCoV）。為了防止實驗室內感染，避免由于實驗室操作不當造成“非典”的傳播， 特制定本生物安全操作指南。所有參與“非典”防治和研究的實驗室和實驗室工作人員都必 須遵守.一、下列操作必須在生物安全3級（BSL3）或以上級實驗室（P3實驗室）中進行：1 .用細胞培養(yǎng)的方法分離病毒；2 .收集或濃縮病毒或其培養(yǎng)產物；3 .用活病毒或病毒的全基因接種動物；4 .咽拭子樣品的診斷檢測。二、下列操作必須在生物安

26、全2級（BSL2）或以上級實驗室或全排式生物安全柜中進行：1 .含漱液、血清和血液等樣品的診斷檢測；2 .溶解、固定或用其他方法處理滅活的病毒和（或）無 傳染性的病毒基因片段；3 .常規(guī)的細菌和毒素檢查；4 .可能產生氣溶膠的樣品處理：5 .臨床樣品的包裝、分裝；6 .離心管和離心機轉頭的封閉和開啟。三、實施上述操作的人員應具備如下防擴措施：1、佩帶N95級口罩（如3M牌產品），按照操作者鼻部尺寸調整口罩的鼻金屬天，保證 做到呼出和吸入氣體確實經過口罩過濾；7 、佩帶可以遮蓋臉部的防護面罩或防護眼罩；8 、佩帶外科手術帽，并遮蓋住雙側耳部；9 、佩帶2層外科手術乳膠手套。每完成一次可能接觸含有

27、病原的樣品的操作后，應更 換外層手套，再進行下一步操作；10 穿著實驗白大衣，在自大衣外再穿著外科手術衣或連體隔離服（最好為防水材料）,雙上肢佩帶袖套，并用乳膠手套袖端將袖口覆蓋、繃緊。11 雙下肢穿著褲套，雙腳穿鞋套，并用鞋套上部橡皮筋將褲套下段繃緊。四、操作場地的消毒實驗完畢后，應將所有可用高壓消毒的用品和樣品在實驗室內進行高壓消毒，不可用高壓消毒的物品應用 70%乙醇消毒，實驗室臺面和污染的設備表面應用對脂包膜病毒有效的 消毒劑消毒。實驗室應用紫外線燈消毒。三、但愿有一天你會記起，我曾默默地，毫無希望地愛過你。我這扇門曾為你打開，只為你一人打開，現在，我要把它關上了。四、你看我的時候我裝

28、做在看別處，你在看別處的時候我在看你。五、陸上的人喜歡尋根究底，虛度很多的光陰。冬天擔憂夏天的遲來，夏天擔心冬天的將至。所以你們不停到處去追求一個遙不可及，四季如夏的地方，我并不羨慕。六、沒想到的是，一別竟是一輩子了。七、朋友們都羨慕我，其實羨慕他們的人是我。愛你，很久了，等你，也很久了，現在，我要離開你了，比很久很久還要久八、Do something today that your future self will thank you for.從現在開始,做一些讓未來的你感謝現在的自己的事。九、有個懂你的人，是最大的幸福。這個人，不一定十全十美，但他能讀懂你，能走進你的心靈深處，能看懂你心里的一切。最懂你的人，總是會一直的在你身邊，默默守護你，不讓你 受一點點的委屈。真正愛你的人不會說許多愛你的