考點加強課7-微生物的篩選、鑒定、分離與計數(shù)

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上考點加強課7 微生物的篩選、鑒定、分離與計數(shù)1.有些細菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株?；卮饐栴}。(1)在篩選過程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種到以_為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上。從功能上講，該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(2)純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即_和_。(3)為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈越大說明該菌株的降解能力越_。(4)通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中，實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、_和_。無菌技術(shù)要求實驗操作應(yīng)在酒精燈_附近進行，以避免周圍環(huán)境中微

2、生物的污染。解析(1)本實驗的目的是篩選出可以分解原油的高效菌株，從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株，使用的培養(yǎng)基應(yīng)是以原油為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。(2)菌種純化培養(yǎng)時，常采用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種。(3)當固體培養(yǎng)基上長出單菌落后，可通過比較菌落周圍分解圈的大小，來判斷菌株降解原油能力的大小。一般來說，分解圈越大說明該菌株的降解能力越強，反之則越弱。(4)滅菌的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。答案(1)原油選擇(2)平板劃線法稀釋涂布平板法(3)強(4)干熱滅菌高壓蒸汽滅菌火焰2.(2016·湖南衡陽模擬)回答有關(guān)微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用問題：(1)微生物的培

3、養(yǎng)需要使用培養(yǎng)基，不同培養(yǎng)基的配方不同，但一般都有_碳源、氮源；在配制從土壤中篩選纖維素分解菌的培養(yǎng)基時，需加入_作為唯一的碳源，該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基；若將樣品接種到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上，在該培養(yǎng)基中需要加入的特殊染料是_，當形成菌落以后可以根據(jù)菌落周圍是否產(chǎn)生_來篩選纖維素分解菌。(2)若要統(tǒng)計土壤樣品中纖維素分解菌的數(shù)目，宜采用_法接種，根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計平板上的_就能大約推測出樣品中的活菌數(shù)。(3)一同學在稀釋倍數(shù)為104的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為23.4，則每毫升樣品中的活菌數(shù)是(所用稀釋液的體積為0.2 mL)_。答案(1)水、無機鹽纖維素

4、選擇剛果紅透明圈(2)稀釋涂布平板菌落數(shù)目(3)1.17×1063.實現(xiàn)生態(tài)農(nóng)業(yè)，讓秸稈回歸農(nóng)田的關(guān)鍵是獲得能夠高效分解秸稈的微生物。請回答下列相關(guān)問題：(1)秸稈的主要成分易被_酶分解；從功能上看，篩選能產(chǎn)生該酶的微生物所用的培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(2)甲、乙兩組同學設(shè)計了兩種培養(yǎng)基(成分見下表)：培養(yǎng)基硝酸銨無機鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水AB注：“”表示有；“”表示無；CR為剛果紅。A培養(yǎng)基_(填“能”或“不能”)用于分離要篩選的分解菌，原因是_；加入剛果紅(CR)的目的是：_。(3)甲、乙兩組同學分別采用稀釋涂布平板法和平板劃線法接種。甲組同學將1 mL水樣稀釋100倍后，在3

5、個平板上分別接入0.1 mL稀釋液，經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別是39、38和37，據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_個；示意圖a和b中，_是甲組同學接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果；乙組同學劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的是_。(4)甲、乙兩組同學在微生物接種培養(yǎng)過程中，均留下一個未接種的平板同時培養(yǎng)，目的是_。解析(1)秸稈的主要成分是纖維素，易被纖維素酶分解；篩選能產(chǎn)生纖維素酶的微生物的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(2)從表中培養(yǎng)基的成分來看，A培養(yǎng)基能用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是該培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，且以纖維素粉為唯一碳源，利用剛果紅來鑒定纖維素的分解情況。剛果紅可與纖維

6、素形成紅色復(fù)合物，當纖維素被分解后.無法形成紅色復(fù)合物，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，可據(jù)此來篩選纖維素分解菌。(3)從示意圖看，圖b是采用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。根據(jù)題意得知每升水樣中的活菌數(shù)為38÷0.1×100×1033.8×107(個)。圖a是采用平板劃線法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果，劃線時總是從上一次劃線的末端開始，這樣做的目的是通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌體的數(shù)目逐漸減少，以便得到單個菌落。(4)為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否徹底，應(yīng)設(shè)置空白對照：隨機取若干滅菌后的空平板培養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成。答案(1)

7、纖維素選擇(2)能纖維素粉是唯一碳源CR可與纖維素形成紅色復(fù)合物，當纖維素被纖維素酶分解后，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈(合理即可)(3)3.8×107圖b將聚集的菌體逐步稀釋，以便獲得單個菌落(4)作為對照4.(2016·山東濟寧檢測)高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性。研究者從熱泉嗜熱菌樣品中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如下圖所示：(1)進行過程的目的是_，過程所使用的接種方法是_法。(2)從用途上來說，號培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基，配制時僅以_作為唯一碳源；從物理狀態(tài)上來說，號培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，配制時應(yīng)加入_作為凝固劑。(3)、號培養(yǎng)

8、基配制和滅菌時，滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是_。一般對配制的培養(yǎng)基采用_法滅菌。(4)培養(yǎng)一段時間后，應(yīng)從號培養(yǎng)基上挑出_的菌落，接種到號培養(yǎng)基上。解析(1)分析題圖可知，過程是梯度稀釋，目的是對樣品進行稀釋；過程是用稀釋涂布平板法進行接種。(2)本題實驗的目的是篩選高效產(chǎn)生耐高溫淀粉酶的嗜熱菌，從用途上來說，號培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，本培養(yǎng)基以淀粉為唯一碳源；從物理狀態(tài)上來說，號培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，配制時應(yīng)加入瓊脂作為凝固劑。(3)培養(yǎng)基配制和滅菌時應(yīng)先調(diào)節(jié)pH，然后再進行滅菌，如果先滅菌再凋節(jié)pH，在調(diào)節(jié)pH時會污染培養(yǎng)基；一般對配制的培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌法滅菌。(4)能分解淀粉的嗜熱菌在

9、號培養(yǎng)基上生長時可釋放淀粉酶，分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈，透明圈越大淀粉酶的活性越強，所以要從號培養(yǎng)基上挑出透明圈大的菌落，接種到號培養(yǎng)基上。答案(1)稀釋稀釋涂布平板(2)選擇淀粉瓊脂(3)先調(diào)節(jié)pH，后滅菌高壓蒸汽滅菌(4)透明圈大5.如表所示甲、乙分別是分離兩種土壤中微生物的培養(yǎng)基的配方，圖丙所示為相關(guān)分離過程，回答下列問題：KH2PO41.4 g纖維素粉5.0 gNa2HPO42.1 gNaNO31.0 gMgSO4·7H2O0.2 gNa2HPO41.2 g葡萄糖10.0 gKH2PO40.9 g尿素1.0 gMgSO4·7H2O0.5 g瓊脂15.

10、0 gKCl0.5 g酵母膏0.5 g水解酪素0.5 g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容至1000 mL甲乙注：水解酪素，即水解酪蛋白，由酪蛋白水解得到。(1)從功能上看，甲培養(yǎng)基屬于_。從物理性質(zhì)上看，甲培養(yǎng)基屬于_。其中提供氮源的物質(zhì)是_。(2)如果將乙培養(yǎng)基配制成固體培養(yǎng)基，則在該培養(yǎng)基上長出的菌落是否都能分解纖維素？_。如果培養(yǎng)基中加入_可以篩選出具有分解纖維素能力的菌株，同時透明圈越_(填“大”或“小”)，表示該菌分解纖維素的能力越強。(3)為了計數(shù)微生物的數(shù)量，圖丙采用_法進行接種培養(yǎng)計數(shù)，除此之外，還可以采用_法進行計數(shù)。其中前一種計數(shù)方法所得結(jié)果要比后一種計數(shù)方法所得結(jié)果_(填“

11、大”或“小”)。(4)一位同學利用圖丙的方法步驟在4個平板培養(yǎng)基上分別接種0.1 mL土壤稀釋液，培養(yǎng)后菌落數(shù)分別為180、155、176、129個，則1 mL原土壤樣液中微生物數(shù)量約為_。解析(4)4個平板中菌落的平均數(shù)量為160個，濃度為1 600個/mL，由丙圖可知，土壤樣液被稀釋了125倍，故原始樣液中微生物的密度為1 600(個/mL)×1252.0×105(個/mL)。答案(1)選擇培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基尿素(2)否剛果紅大(3)稀釋涂布平板血球計數(shù)板計數(shù)小(4)2.0×105個6.牛奶是微生物培養(yǎng)的良好培養(yǎng)基，牛奶在飲前都要經(jīng)過巴氏消毒，以殺死有害微生物，

12、為檢測消毒前后牛奶中細菌含量變化情況，做如圖所示操作。用無菌吸管從錐形瓶中吸取1 mL生牛奶稀釋液至盛有9 mL無菌水的試管中，混合均勻，如此再重復(fù)2次。請回答下列有關(guān)問題：(1)巴氏消毒的方法是_，使用這種方法對生鮮牛奶進行消毒的好處是_。(2)取最終的牛奶稀釋液0.1 mL滴在培養(yǎng)基上進行涂布，應(yīng)選擇的涂布工具是圖中的_。(3)圖中所示方法為稀釋培養(yǎng)法，理想情況下，培養(yǎng)一段時間后可在培養(yǎng)基表面形成菌落。若用該方法培養(yǎng)設(shè)置了3個培養(yǎng)皿，菌落數(shù)分別為35個、33個、34個，則可以推測生牛奶中每毫升含細菌數(shù)為_個，運用這種方法統(tǒng)計的結(jié)果往往較實際值_(填“偏大”或“偏小”)，原因是_。(4)消毒后的牛奶中絕大部分細菌被殺死，若繼續(xù)用該方法檢測消毒后的牛奶中細菌的數(shù)量