逐淤化痰湯對腦出血大鼠腦含水量及SOD活性的影響

1、逐淤化痰湯對腦出血大鼠腦含水量及SOD活性的影響【摘要】目的討論逐淤化痰湯對腦出血大鼠血腫周圍腦組織腦含水量及sd活性的影響。方法90只sd大鼠隨機(jī)分為逐淤化痰湯組、腦出血組和假手術(shù)組，每組30只。用尾狀核注射自體血法建立腦出血模型；在不同時(shí)間點(diǎn)檢測大鼠血腫周圍腦組織腦含水量及黃嘌呤氧化法檢測sd活性的變化。結(jié)果在一樣時(shí)間點(diǎn)逐淤化痰湯組腦含水量低于腦出血組，差異性顯著(p0.05或p0.01)；在一樣時(shí)間點(diǎn)逐淤化痰湯組與出血組比擬sd活性增加，差異性顯著p0.05或p0.01。結(jié)論逐淤化痰湯可減輕出血后腦組織水腫，同時(shí)增加sd活性?！娟P(guān)鍵詞】逐淤化痰湯腦出血腦含水量sd腦出血intraereb

2、ralherrhage，ih是急性腦血管病中死亡率最高的。研究說明，逐淤化痰湯(zhuyuhuatanralliquid)在腦出血恢復(fù)期的治療中發(fā)揮著重要作用。新的觀點(diǎn)提出合理應(yīng)用活血化淤藥，宜早不宜遲1，腦出血急性期應(yīng)用逐淤化痰藥物療效更好2，為腦出血急性期使用活血化淤中藥提供了參考時(shí)間。本實(shí)驗(yàn)觀察大鼠腦出血急性期應(yīng)用逐淤化痰湯后血腫周圍腦組織含水量的變化及過氧化物歧化酶superxidediutase，sd活性的變化情況，為逐淤化痰湯治療急性期腦出血提供理論根據(jù)。1材料與方法1.1材料1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物普通級sd大鼠，90只，體重250300g，34月齡，雌雄不限。由遼寧醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心

3、提供答應(yīng)證號sxy遼2022-0007。1.1.2藥品和試劑逐淤化痰湯鉤藤、生大黃各15g，水蛭、三七、郁金各10g，紅參12g，丹參20g：錦州醫(yī)藥公司，取液250l按1：1濃度水煎，制成含生藥1g/l懸混液，冰箱冷藏備用。sd測定試劑盒：南京建成生物工程研究所。1.1.3主要實(shí)驗(yàn)儀器立體定位儀：美國stelting公司微量進(jìn)樣器：上海安亨微量進(jìn)樣器廠。1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1分組及給藥隨機(jī)分為假手術(shù)、腦出血組、逐淤化痰湯組，每組30只；按術(shù)后1、2、3、5、7d，5個(gè)時(shí)間點(diǎn)各6只。造模后6h開場灌喂給藥，用量為每次1g/kg，2次/日相當(dāng)于70kg人一樣體外表積用量的3倍。腦出血組造模后灌

4、喂等量生理鹽水，2次/日。假手術(shù)組：除不注血外，其余條件同腦出血組。1.2.2制備腦出血模型參照xue3方法制備腦出血模型。定位大鼠右側(cè)尾狀核(前囟后0.2，矢狀縫向右旁開3.0，深度6.0)；在立體定位儀引導(dǎo)下向尾狀核注入自體尾血50l；以25l/in速度2in內(nèi)注入50l血液；留針10in。假手術(shù)組除不注血外，余操作同腦出血組。1.2.3指標(biāo)測定取各時(shí)間點(diǎn)動(dòng)物各6只處死后迅速取腦，去除皮質(zhì)外表的軟腦膜和凝血塊，取血腫旁一樣位置腦組織進(jìn)展腦含水量及sd的測定。腦含水量檢測取血腫旁一樣位置腦組織準(zhǔn)確稱量濕重后放入電熱恒溫箱內(nèi)80烘烤48h，至恒重后稱取干重(兩次干重之差0.2)。

5、干濕重法測腦組織含水量：腦含水量()=(濕重-干重)濕重100。腦組織勻漿sd的測定取血腫旁一樣位置腦組織稱重，用生理鹽水作勻漿介質(zhì)，按1g：10l比例在冰水溶液中用勻漿機(jī)充分勻漿，以4000r/in離心15in后取上清液，制成10%的腦組織勻漿，黃嘌呤氧化酶法測定sd活性。1.2.4數(shù)據(jù)處理采用spss13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件完成。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用xs表示，組間比擬均采用重復(fù)測量的方差分析。2結(jié)果2.1假手術(shù)組腦含水量無明顯變化，低于出血對照組和逐淤化痰湯組p0.01或p0.05；而出血組和逐淤化痰湯組腦含水量24h開場升高，第3天達(dá)頂峰；且逐淤化痰湯組腦含水量低于出血組p0.05或p0

6、.01。見表1。表1逐淤化痰湯對實(shí)驗(yàn)性大鼠腦出血腦組織含水量的影響注：與出血組比擬*p0.05；*p0.012.2逐淤化痰湯對腦出血大鼠sd的影響出血24h后sd含量逐漸減少，3d達(dá)最低值，之后又逐漸增高。逐淤化痰湯組高于出血組p0.05或p0.01。見表2。表2逐淤化痰湯對實(shí)驗(yàn)性大鼠腦出血sd含量的影響3討論腦出血后神經(jīng)細(xì)胞損傷是多種因素綜合作用的結(jié)果，其中腦水腫是一個(gè)重要因素。故防治腦水腫是減輕神經(jīng)細(xì)胞損傷的關(guān)鍵之一。腦出血后的腦水腫主要有血管源性腦水腫和細(xì)胞毒性腦水腫。在循環(huán)的血液中凝血酶的含量微乎其微，而在凝固的血液中可測到大量凝血酶4。目前研究普遍認(rèn)為凝血酶是是引起腦水腫的最重要物質(zhì)

7、。逐淤化痰湯含有水蛭，它是一味傳統(tǒng)的中藥，具有破血、逐淤、通經(jīng)的功能，并含有多種活性成分，其主要成分水蛭素(hirdin)是迄今為止世界上最強(qiáng)的凝血酶特效抑制劑5，實(shí)驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)水蛭可以促進(jìn)腦出血后毛細(xì)血管的形成6。逐淤化痰湯能減輕腦水腫的機(jī)理可能在于此。腦出血后產(chǎn)生大量自由基是造成神經(jīng)細(xì)胞損傷又一重要因素。自由基是指帶有不成對電子的分子、原子、基團(tuán)或離子的總稱，包括超氧陰離子自由基、羥自由基、烷氧自由基等7。sd為體內(nèi)主要的自由基去除劑，可催化超氧自由基發(fā)生歧化反映，生成過氧化氫和氧，而超氧自由基又是其他自由基產(chǎn)生和增殖的關(guān)鍵步驟，sd在去除自由基同時(shí)本身被消耗8。大腦含有大量的多不飽和脂肪酸

8、(pufa)，且大腦對氧的需求量極大，所以對自由基的損傷極為敏感。當(dāng)腦細(xì)胞缺血、缺氧時(shí)，產(chǎn)生的自由基能作用于pufa，從而發(fā)生脂質(zhì)過氧化反響，使dna、rna、蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)發(fā)生交聯(lián)和氧化反響，使多糖分子聚合和解聚9。本實(shí)驗(yàn)顯示：與ih組比擬逐淤化痰湯組一樣時(shí)間點(diǎn)腦含水量顯著減少p0.05或p0.01；而一樣時(shí)間點(diǎn)sd活性顯著增加。研究說明，腦出血后腦水腫的頂峰在35d，這種頂峰與臨床上病情的繼發(fā)性加重的過程一致10，故認(rèn)為腦出血后血腫周圍組織水腫是神經(jīng)細(xì)胞性損傷的重要機(jī)制。綜上所述，逐淤化痰湯作為中藥制劑在腦出血急性期應(yīng)用具有減輕腦水腫，增加sd活性的作用，為臨床腦出血急性期應(yīng)用活血化淤

9、中藥提供了實(shí)驗(yàn)根據(jù)。【參考文獻(xiàn)】1楊金生.中風(fēng)病防治研究.北京:中醫(yī)古籍出版社,1999:240-241.2李如奎,譚宏.活血化淤法治療高血壓腦出血的進(jìn)展j.浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志,2000,10(9):513.3xue,raerebralinjetinfautlgushlebldinrats:tieursefinflaatinandelldeathj.neursieneletters,2000,283:230.4王一芳,潭啟富.凝血酶與出血性腦損傷j.國外醫(yī)學(xué)腦血管病分冊，1999,7(3):153-155.5呂文海,王琦.中藥水蛭現(xiàn)代研究進(jìn)展j.中國中藥雜志,1994,19(6):755-759.6陳貴海,吳強(qiáng),尹世杰,等.水蛭對腦出血治療作用的實(shí)驗(yàn)研究j.中國危重病急救醫(yī)學(xué),1998,10(6):329-333.7惠宏襄,趙小寧,金明,等.自由基與細(xì)胞凋亡j.生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展,1996,231:12-16.8卞留貫,張?zhí)戾a.局灶腦缺血lp、sd后的變化j.上海第二醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),19