實驗淀粉酶固定化以及淀粉水解作用檢測

1、關于實驗淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測第一張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月實驗目的:1.制備固定化a-淀粉酶2.進行淀粉水解的測定第二張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月知識回顧：1、在果汁生產(chǎn)中利用_，可以提高果汁的產(chǎn)量和質(zhì)量，其原理是_。2、洗衣粉中添加_，可以更有效地清除頑漬。常用的酶制劑有_四類。第三張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月1、酶制劑的概念和種類（一）酶制劑含有酶的制品定義：多酶片、加酶洗衣粉中的蛋白酶和脂肪酶種類：A、液體酶制劑治療某些胃病的胃蛋白酶液B、固體酶制劑第四張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月2、酶的生產(chǎn)提取法定義：采用一定的技

2、術直接從動植物或微生物的組織、細胞中將酶提取出來優(yōu)點：簡單易行，在動植物或微生物資源豐富的地區(qū)具有應用價值實例：在屠宰廠，可以從家畜胰臟中提取出胰酶；在水果加工廠，可以從菠蘿皮中提取出菠蘿蛋白酶缺點：要有充足的原材料，廣泛應用受到限制第五張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月發(fā)酵法常用方法定義：通過微生物發(fā)酵獲得所需要的酶。如果是胞外酶，可以從發(fā)酵液中直接提??；如果是細胞內(nèi)酶，則可將細胞弄碎再經(jīng)過提取純化而得到。易培養(yǎng)、繁殖速度快、便于大規(guī)模生產(chǎn)。優(yōu)點：提取方式：第六張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月在食品、化工、輕紡、醫(yī)藥等領域大規(guī)模使用酶制劑，說明酶制劑使用有很多優(yōu)點，你能思考

3、后舉出一些嗎？催化效率高、低能耗、低污染等。酶制劑的使用有缺點嗎？3、酶制劑的優(yōu)點第七張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月4.酶在應用過程中存在的問題天然酶通常對強酸、強堿、高溫和有機溶劑等條件非常敏感，容易失活溶液中酶很難回收，不能再次利用，提高了生產(chǎn)成本反應后，酶會混在產(chǎn)物中，影響產(chǎn)品質(zhì)量，難以在工業(yè)生產(chǎn)中廣泛應用針對酶的特點，如何在生產(chǎn)實踐中加以應用？固定化酶：將水溶性的酶用物理或化學的方法固定在某種介質(zhì)上，使之成為不溶于水而又有酶活性的制劑。第八張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 1、通常對強酸、強堿、高溫和有機溶劑等條件非常敏感，容易失活； 2、溶液中的酶很難回收，不能

4、被再次利用，提高了生產(chǎn)成本； 3、反應后會混在產(chǎn)物中，可能影響產(chǎn)品質(zhì)量。(難分離）4、酶制劑的缺點第九張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月1、固定化酶技術。即將酶固定在一定空間內(nèi)的技術（如固定在不溶于水的載體上）。2、固定化酶技術的優(yōu)點：（1）使酶既能與反應物接觸，又能與產(chǎn)物分離；（2）固定在載體上的沒可以被反復利用。（二）固定化酶第十張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月類型優(yōu)點不足直接使用酶催化效率高，低耗能、低污染等對環(huán)境條件非常敏感，容易失活；溶液中的酶很難回收，不能被再次利用，提高了生產(chǎn)成本；反應后酶會混在產(chǎn)物中，可能影響產(chǎn)品質(zhì)量固定化酶酶既能與反應物接觸，又能與產(chǎn)物分離，

5、同時，固定在載體上的酶還可以被反復利用一種酶只能催化一種化學反應，而在生產(chǎn)實踐中，很多產(chǎn)物的形成都通過一系列的酶促反應才能得到的 直接使用酶和固定化酶的優(yōu)缺點第十一張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月三、 酶的固定化方法1、物理吸附法：將酶吸附到固體吸附劑表面的方法，固體吸附劑多為活性碳、多孔玻璃等2、包埋法：將酶包裹在多孔的載體中，包埋成格子型或包埋成微膠囊型3、化學結合法：將酶分子相互結合，或?qū)⑵浣Y合到纖維素、瓊脂糖，離子交換樹脂等載體上的固定方式交聯(lián)法和共價偶聯(lián)法第十二張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 酶物理吸附法交聯(lián)法包埋法酶的固定化方法共價偶聯(lián)法第十三張，PPT共二十

6、三頁，創(chuàng)作于2022年6月實驗原理：本實驗是用吸附法將a-淀粉酶固定在石英砂上，一定濃度的淀粉溶液經(jīng)過固定化酶柱后，可使淀粉水解成糊精，用淀粉指示劑溶液測試，流出物呈紅色表明水解產(chǎn)物糊精生成淀粉-淀粉酶糊精B淀粉酶葡萄糖糖化淀粉酶麥芽糖這里使用的是枯草桿菌的a-淀粉酶，其作用的最適溫度為5075；最適PH為5.57.5遇碘顯藍色遇碘顯紅色遇碘不顯色四、“-淀粉酶固定化”實驗實驗目的：1、制備固定化的-淀粉酶 2、檢測固定化-淀粉酶的效果第十四張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月設備及用品：5ml塑料注射器 50ml燒杯 滴管 自行車用氣門心及夾子 注射器架 試管及微量離心管3支實驗材料:

7、1、a-淀粉酶的固定化：在燒杯中將5mg a-淀粉酶溶于4ml蒸餾水中。由于酶不純，可能有些不溶物。再加入5g石英砂，不時攪拌，30min后裝入1支下端接有氣門心并用夾子封住的注射器中(石英砂體積約4ml)。用10倍體積的蒸餾水洗滌此注射器，流速為1ml/min。2、可溶性淀粉溶液：取50ml可溶性淀粉溶于100ml熱水中，攪拌均勻。3、5mmol/L KI-I2溶液：稱取0.127g碘和0.83g碘化鉀。加蒸餾水100ml完全溶解后裝入滴瓶中。除去未吸附的游離淀粉酶第十五張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月反應柱固定化酶氣門心夾子5ml注射器第十六張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年

8、6月步驟:1.將灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上,用滴管滴加淀粉溶液,使淀粉溶液以0.3ml/min的流速過柱.在流出5ml后接收0.5ml流出液,加入12滴KI-I2溶液,觀察顏色.用水稀釋1倍后再觀察顏色.反應柱固定化酶氣門心夾子5ml注射器淀粉第十七張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月2.實驗后,用10倍柱體積的蒸餾水洗滌此柱,放置在4冰箱中,幾天后再重復上述實驗,看是否有相同的結果.第十八張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月課后練習 1.如何證明洗滌固定化酶柱的流出液中沒有淀粉酶?2.耐高溫的淀粉酶有哪些可能的用途?可在試管中加入1ml可溶性淀粉，再加幾滴淀粉酶柱流出液

9、，保溫幾分鐘后用碘液檢驗。如仍顯藍色，則流出液中沒有淀粉酶了?？梢栽诟邷叵率沟矸鬯饪欤颐覆粫蚋邷厣隙Щ?，所以可在一些需要高溫加熱同時又要水解淀粉的反應中使用。第十九張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月1、研究認為，用固定化酶技術處理污染物是很有前途的。如將從大腸桿菌得到的磷酸三酯酶固定到尼龍膜上制成制劑，可以用來降解殘留在土壤中的有機磷農(nóng)藥，與用微生物降解相比，其作用不需要適宜的（ ）A、溫度 B、PHC、水分 D、營養(yǎng)D第二十張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月2、目前，日用化工廠大量生產(chǎn)的酶制劑，其中的酶大都來自A、化學合成 B、動物體內(nèi) C、植物體內(nèi) D、微生物體內(nèi) D第二十一張，PPT共