實(shí)驗(yàn)室個(gè)人防護(hù)

1、實(shí)驗(yàn)室生物安全96.01.14實(shí)驗(yàn)室個(gè)人防護(hù)95.12.221病原體及其使用實(shí)驗(yàn)室分級(jí) 危險(xiǎn)群等級(jí)生物安全等級(jí)實(shí)驗(yàn)室類型實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范安全設(shè)備 11基礎(chǔ)教學(xué)、研究優(yōu)良微生物學(xué)技術(shù)無，開放式工作臺(tái)22初級(jí)衛(wèi)生服務(wù)、診斷服務(wù)、研究優(yōu)良微生物學(xué)技術(shù)加上防護(hù)衣、生物危害標(biāo)志開放式工作臺(tái)加上防止氣霧外流之生物安全柜33特殊診斷服務(wù)、研究同第 2 等級(jí)加上特殊防護(hù)衣、進(jìn)入管制及定向氣流生物安全柜及（或）其他所有實(shí)驗(yàn)室工作所需要之基本防護(hù)裝備44具危險(xiǎn)性之病原體同第 3 等級(jí)加上氣密門、出口淋浴及廢棄物之特殊處理級(jí)生物安全柜或級(jí)生物安全柜并穿著正壓防護(hù)衣、雙門高壓蒸氣滅菌器（穿墻式）及經(jīng)過濾之空氣2分類基準(zhǔn)

2、(病原微生物危害性)等級(jí)說明例子第一級(jí)危險(xiǎn)群(RG1)微生物與人類健康成人之疾病無關(guān) Bacillus subtilisEscherichia coli-K12adeno-associated virus Type 1-4第二級(jí)危險(xiǎn)群(RG2)微生物在人類所引起的疾病很少是嚴(yán)重的，而且通常有預(yù)防及治療的方法 Measles virusSalmonellaeToxoplasma spp.Hepatitis B virus第三級(jí)危險(xiǎn)群(RG3)微生物 在人類可以引起嚴(yán)重或致死的疾病，可能有預(yù)防及治療之方法 M. tuberculosis SARS-associated CoronavirusesH

3、antaan virus 第四級(jí)危險(xiǎn)群(RG4)微生物在人類可以引起嚴(yán)重或致死的疾病，但通常無預(yù)防及治療之方法 Ebola virus Marburg virus3人為的疏失，不良的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)以及器具，裝備的錯(cuò)誤使用是引起實(shí)驗(yàn)室傷害和工作相關(guān)的感染。今天我們要討論是如何避免或減少在報(bào)告文獻(xiàn)上常提及發(fā)生的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)性問題。4個(gè)人安全防護(hù) 1.進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室應(yīng)穿白袍實(shí)驗(yàn)衣，微生物中心人員加著隔離衣，戴外科手術(shù)口罩，手戴手套，必要時(shí)戴眼罩或面罩。2.實(shí)驗(yàn)之病原體如有疫苗可預(yù)防，沒有保護(hù)抗體之個(gè)人，必須事先施打疫苗， 如B型肝炎疫苗。 3.實(shí)驗(yàn)室工作人員要事先留存血液檢體當(dāng)Base line ，必要時(shí)定期

4、采取，以利健康管理及追蹤監(jiān)視。(本院是每年定期做員工健康檢查)5實(shí)驗(yàn)室內(nèi)檢體的安全處理 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)檢體的不適當(dāng)搜集，傳送和處理將帶給工作人員暴露于感染的險(xiǎn)境。6檢體容器 檢體的容器可用玻璃材質(zhì)、塑料材質(zhì)尤佳，容器要堅(jiān)固，蓋子或塞子要蓋好，內(nèi)容物不能泄漏，不可以有檢體留在容器之外表，容器外面要標(biāo)示清楚，檢體名稱、編號(hào)、患者姓、采取日期等。檢體報(bào)表或檢驗(yàn)請(qǐng)求表格不可以包在檢體管子外表，要另外放入防水之封套。 7實(shí)驗(yàn)室內(nèi)檢體之傳送為避免意外的泄漏或溢出，檢體要直立挿在試管架上再挿入第二層容器內(nèi)(運(yùn)送箱)，第二層容器之材質(zhì)可以是金屬或塑料材質(zhì)且可高溫蒸氣減菌或耐化學(xué)消毒劑，最好蓋子有彈性墊環(huán)，檢體運(yùn)送箱

5、要常作清消。8檢體的收受 收受多數(shù)之檢體要特別設(shè)立一個(gè)房間或區(qū)塊不可以跟一般辦公室混在一起。檢體收受人收到檢體應(yīng)立即與醫(yī)令單或報(bào)表核對(duì)檢體件數(shù)、量(檢體收受人不可任意打開檢體瓶)、保溫狀況、登記收到日期、時(shí)間、并依序分送各組，除非不耐冷溫的病原體否則分送時(shí)也要保持低溫狀態(tài)。檢驗(yàn)人員收到檢體要在送驗(yàn)簿(單)上簽收(若有的話)才算完成送驗(yàn)程序。9打開檢體包裝 收受及打開檢體包裝的人員，應(yīng)該了解對(duì)健康具有潛在的危險(xiǎn)性，工作人員需接受訓(xùn)練及熟悉標(biāo)準(zhǔn)操作步驟，尤其是遇到檢體容器破裂或泄漏之處理程序，盛檢體的容器一定要在生物安全柜(BSC)內(nèi)才能打開，而且一定要泡好消毒劑以備隨時(shí)之需。 10避免感染物之?dāng)U

6、散避免細(xì)菌掉落，微生物接種環(huán)(白金耳)的直徑限2-3mm，且環(huán)要完整，柄端長度不超過6cm，以減少振動(dòng)。開放式本生燈有濺射感染物之險(xiǎn)，不可使用。應(yīng)采用有阻體之電氣焚燒器滅菌接種環(huán)。小心烘乾痰液檢體，避免造成氣膠。要丟棄之檢體及培養(yǎng)物應(yīng)放進(jìn)防漏之袋子內(nèi)，貼上滅菌指示帶，滅菌后置入棄物桶。工作完畢工作區(qū)域要用適當(dāng)?shù)南緞┳髑逑懈腥拘砸簽R出或滴落立即以浸消毒液之厚紙巾覆蓋。11生物安全柜(BSC)之使用(I)向所有使用者說明BSC之使用限制，并訂定使用紀(jì)錄表、安全操作規(guī)范或使用操作程序書，發(fā)給屬員，尤須特別聲明，濺灑、破裂或不良之操作技術(shù)，無法保護(hù)操作者之生命安全啟動(dòng)BSC電源及馬達(dá)開關(guān)待BSC之

7、氣流穩(wěn)定后(約5分鐘)以紙條測(cè)試BSC操作口氣流是否形成氣幕(Air curtain)功能故障的BSC不可以使用BSC臺(tái)面鋪浸消毒液厚紙巾或抗污紙墊使用操作中不可打開窗口玻璃BSC臺(tái)面盡可能少擺放器械及耗材，后方之氣柵不可堵塞12生物安全柜(BSC)之使用(II)BSC內(nèi)不可使用本生燈，因熱氣擾亂氣流，且可能損壞HEPA，可以電氣焚燒器替代，最好使用丟棄式滅菌接種環(huán)所有感染性實(shí)驗(yàn)操作必須在BSC內(nèi)之中間或后方臺(tái)面上，操作者由窗口向內(nèi)透視減少人員在操作者后面走動(dòng)操作者之手、肘進(jìn)出不能影響到氣流方向注意檢體或?qū)嶒?yàn)材料不可堵到氣柵，因?yàn)檫@樣擾亂氣流方向，會(huì)造成檢體污染及操作者暴露險(xiǎn)境使用真空馬達(dá)吸引

8、潛藏感染性液必須裝Trap及空氣過濾器13生物安全柜(BSC)之使用(III)決不可在BSC臺(tái)面作紀(jì)錄工作實(shí)驗(yàn)操作中不慎濺出或滴出感染性液，立即以浸消毒劑之吸水性厚紙巾覆蓋實(shí)驗(yàn)操作中突然遇到停電或BSC故障，工作人員應(yīng)立即離開實(shí)驗(yàn)操作前及工作完成后BSC風(fēng)扇馬達(dá)至少繼續(xù)運(yùn)轉(zhuǎn)5分鐘工作完畢BSC要用適當(dāng)?shù)南緞┎潦枚ㄆ诓潦肬V燈管開UV燈設(shè)置開燈時(shí)間BSC每年定期檢測(cè)14避免感染性物刺傷 小心操作避免玻璃器具類之破裂碎片導(dǎo)致意外接種或割傷，盡可能使用塑類器皿替代意外刺傷都由尖銳物品如注射針、玻璃毛細(xì)管或玻璃器皿破裂所導(dǎo)致減少使用注射筒或使用特別設(shè)計(jì)之安全針筒及開瓶器以降低傷害注射針使用后絕不可把

9、針套套回去，用過之針筒棄置于有蓋子之堅(jiān)固容器內(nèi)處理破裂之玻璃碎片一定要用掃把及鑷子以塑料品替代玻璃品 15避免吞入感染性物及皮膚、眼睛之接觸微生物實(shí)驗(yàn)操作中大的顆粒和小液滴(直徑5um)很快就落到工作臺(tái)面上和操作者的手上所以操作者要戴拋棄式手套，并避免口、眼及臉部接觸感染性物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不可貯放或飲食、食物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)嘴巴不可含鉛筆，咀嚼口香糖不可以在實(shí)驗(yàn)內(nèi)化妝任何可導(dǎo)致濺灑的可能潛藏感染性物操作，臉部、眼睛、口都要有防護(hù) 16血清分離 經(jīng)過適當(dāng)訓(xùn)練的人員才能從事這項(xiàng)工作戴手套及眼、粘膜之防護(hù)良好的實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)才能避免或減少濺射及氣膠之形成，血液及血清要利用自動(dòng)吸管吸取，不可用倒的或以口吸取分離血清用

10、之全血注意試管之放置，避免血液碰到試管蓋(塞子)欲丟棄之血液檢體管應(yīng)置于有蓋之感染性垃圾桶內(nèi)，由清潔人員打包秤重之后專人焚燒備妥適當(dāng)之消毒劑以備處理污染及濺灑之需血清檢體管盛量要適當(dāng)，過量易造成污染 17離心機(jī)之使用(I) 良好的機(jī)械操作是實(shí)驗(yàn)室安全使用離心機(jī)之要件離心機(jī)應(yīng)依照制造廠商之說明書操作使用離心機(jī)放置之高度要使操作人員能看清楚腔室之離心頭及離心管套以利操作離心管及檢體管之管壁要厚質(zhì)玻璃、塑料材質(zhì)更好，使用前要查看有無瑕疵注意離心管之材質(zhì)是能耐你所要的離心力及轉(zhuǎn)速離心管之檢體裝量要按生產(chǎn)廠商之使用說明裝填離心管及離心管套蓋子必須蓋緊檢體之裝填及吸取必須小心勿使濺灑在外，必要時(shí)在BSC內(nèi)

11、操作離心管套及其套環(huán)要配對(duì)，放好檢體后確實(shí)稱重平衡18離心機(jī)之使用(II) 用角型轉(zhuǎn)子(Angle rotor)，離心管檢體不能裝過量，否則會(huì)溢出，造成污染離心第三及第四等級(jí)危險(xiǎn)之病原體必須用有氣密蓋之安全離心管套每日查看離心機(jī)腔室內(nèi)轉(zhuǎn)子旋轉(zhuǎn)高度處之污穢，如有污穢應(yīng)重新評(píng)估protocol使用前查看轉(zhuǎn)子及離心管套是否有腐蝕或線狀龜裂每次使用后離心管套、轉(zhuǎn)子及離心機(jī)腔室要作清潔消毒離心時(shí)轉(zhuǎn)速不可加速太快用蒸餾水或70%propanol平衡空離心管套(Empty buckets)，不可用生理食鹽水或次氯酸鈉液因?yàn)闀?huì)腐蝕金屬離心機(jī)定期安全檢測(cè)19高壓蒸氣滅菌鍋 (I)1.欲滅菌之液狀物容器不可裝滿超

12、過三分之二以上的容量且不可緊閉容器口。2.用過耗材要裝進(jìn)內(nèi)襯耐高溫滅菌袋之不銹鋼桶才可送進(jìn)高壓蒸氣滅菌鍋內(nèi)。3.滅菌物貼滅菌溫度指示帶。4.隨時(shí)緊閉鍋門。6.滅菌完成欲打開鍋門必先確認(rèn)內(nèi)鍋壓力已歸零才可打開鍋門。 20高壓蒸氣滅菌鍋 (II)7.排氣過濾8.安全閥檢查9.定期清洗10.年度安全檢查21二氧化碳培養(yǎng)箱1.培養(yǎng)容器外面應(yīng)標(biāo)示2.水盤定期清洗及更換蒸餾水3.注意二氧化碳桶氣體量4.定期檢測(cè)及校正培養(yǎng)箱內(nèi)CO25.紀(jì)錄培養(yǎng)箱溫度及CO2厚度6.有培養(yǎng)物滲漏、污染立即清除消毒22恒溫水槽注意水位不可以低于電熱管，隨時(shí)添加水量定期清洗恒溫水槽下班之前關(guān)閉不用的水槽加熱器有感染物污染時(shí)水溫調(diào)

13、高到75持續(xù)加溫一小時(shí)，待溫度降下后加適量維康粉(約1%)消毒，清洗，更換蒸餾水23冰箱、冰柜之使用與管理冰箱、冰柜要定期清理，貯存中容器如有破裂立即處理，清理時(shí)戴面罩及厚橡膠手套、清理完，冰箱、冰柜內(nèi)面要消毒超低溫冰柜要定期更換溫度紀(jì)錄紙及散熱風(fēng)扇濾網(wǎng)冰箱、冰柜內(nèi)要放溫度計(jì)，并每日作溫度紀(jì)錄超低溫冰柜內(nèi)保存物少時(shí)應(yīng)放些冰寶以維溫度之穩(wěn)定所有保存于冰箱、冰柜內(nèi)之容器外表要清楚標(biāo)示內(nèi)容物、保存者姓名、日期、未標(biāo)示及過期的材料滅菌、棄置易燃性液體不可以存放在冰箱(柜)內(nèi)冰柜內(nèi)保存物必須列列表保存超低溫冰柜需加鎖且專人管理24玻璃及尖銳物 盡可能以塑料裝品替代玻璃品，只有Borosilicate g

14、lass可以用，有裂痕或瑕疵品都不可以用注射針筒不可當(dāng)吸管使用欲推出注射筒內(nèi)(有感染性液體)之空氣，針頭必須置于紗布上，注射筒才緩緩?fù)瞥隹諝?25凍結(jié)乾燥安瓶(裝感染性材料)之開封 開凍結(jié)乾燥安瓶一定要特別小心，因內(nèi)容物可能是在負(fù)壓狀態(tài)折斷安瓶突然間空氣進(jìn)入可能有些內(nèi)容物會(huì)沖出，開安瓶一定要在BSC內(nèi)操作步驟如下:消毒安瓶外表2 手戴雙層手套(手術(shù)手套外加防切割手套)3 在安瓶上端之適當(dāng)位置以安瓶切割器割一下，切割處消毒后，安瓶挿入塑料試管，切割部位露出管口，再取一支塑料試管套在安瓶上端使安瓶切割部位介于兩支試管之間，安瓶覆蓋數(shù)層滅菌紗布后放入塑料袋，手在塑料袋外面，兩手握試管輕輕用力一折安瓶就斷4 慢慢注入滅菌蒸餾水或緩沖液溶解內(nèi)容物。避免產(chǎn)生氣泡26顯微鏡觀察之抹片 血液之染色、固定，痰、糞便之顯微鏡觀察不一定殺死所有在玻片上的微生物、病毒，這些抹片之處理要使用鋏子，在作清消、高壓滅菌棄置之前要做適當(dāng)?shù)谋４?27生物安全柜(感染性物)污染之處理1.先以厚紙巾或吸水性良好之抹布覆蓋污染處 2.消毒液傾注于覆蓋紙巾上 3.以電話向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人及生物安全管理人報(bào)告 4.30分鐘后，清除紙巾及破裂物(玻璃片用鑷子夾取， 細(xì)碎片用刷子處理)，廢棄物置入生物安全柜內(nèi)之 棄物容器內(nèi)5.用浸消毒液厚紙巾擦拭污染區(qū)域二次 (不可用手直接擦拭)6.數(shù)分鐘后用清水擦拭