無脊椎動物的采集、培養(yǎng)與固定保存

1、無脊椎動物的采集、培養(yǎng)與固定保存發(fā)布日期：2010年7月21日瀏覽次數(shù)：22來源：網(wǎng)絡(luò)草履蟲一、草履蟲的采集與培養(yǎng)采集草履蟲多生活在湖沼、池塘、水田以及城市生活用水的下水溝中。以細(xì)菌、藻類和其他腐敗 的有機物為食。在水底沉渣表面浮有灰白色絮狀物的有機物質(zhì)豐富的水中，有大量草履蟲。 將廣口瓶系上繩，沉人水底連同沉渣一塊撈起。培養(yǎng)常用稻草培養(yǎng)液。取10g稻草。剪成3cm的小段，用水清洗后，加人1000ml水,煮沸約20min， 注意補充蒸發(fā)掉的水分，冷卻過夜。接人野外采集的水樣，培養(yǎng)5.d左右（視接種量和室溫 而定），可見在培養(yǎng)液的表面有一層浮膜，周緣有白色的環(huán)帶，這是草履蟲在聚集覓食。此 時。此

2、處草履蟲密度大且較純，用滴管吸取，可直接用于一般的教學(xué)實驗。為保持草履蟲高速繁殖的理想環(huán)境，培養(yǎng)液應(yīng)保持p日6.57.0.（可加入1%碳酸氫鈉）也可 加人少量的小麥粉、玉米粉、昆蟲尸體、肝臟碎片等以維持草履蟲的密度。純培養(yǎng)由于外來水樣除含有草靨蟲外，還有其他小生物，如鐘形蟲、眼蟲、輪蟲和藻類;又由于稻 草培養(yǎng)液是以在煮沸中未死的雜細(xì)菌抱子萌發(fā)和環(huán)境中的雜菌在稻草液中繁殖后，成為草履 蟲的食物，來培養(yǎng)草履蟲的。在此過程中也會滋生一些其他小生物等;因此，做研究實驗就 須將草履蟲與其他小生物分離，進行純培養(yǎng)。分離草履蟲。常用方法是在體視顯徽鏡下，用毛細(xì)吸管逐個吸取草履蟲，放于草履蟲生活過 的經(jīng)過濾和

3、高壓滅菌的培養(yǎng)水中清洗。反復(fù)吸取并更換清洗液23次即可去除雜物，得到 純的草履蟲。將稻草培養(yǎng)液經(jīng)O.IMPa滅菌20.min，冷卻后按無菌操作要求，接種已確定種類的細(xì)菌（如產(chǎn) 氣桿菌），置于27r培養(yǎng)，當(dāng)?shù)静菖囵B(yǎng)液由較清澈逐漸變?yōu)榛鞚釙r。及時接種已純化的草履 蟲，并置于25 r培養(yǎng)。幾天后可得到大量純草履蟲。如只取1個草履蟲并按上述方法培養(yǎng)，可獲得由1個草履蟲繁殖的純的種群。二、水螅的采集與培養(yǎng)采集水螅一般生活在少污染、水草豐富、清澈緩流的湖塘、小河中，以水蚤、劍水蚤等為食。水 螅喜附著在水草的莖葉、水底的石塊上。在水中身體伸展時體色較淡。遇剌激或離水時會收 蟾縮淺灰褐色的小粒狀體。緊粘在附著

4、物上，仔細(xì)觀察才能看見。水蚤和水草肉眼易見，是 尋找水螅的標(biāo)志。采集時將水螅連同水草和水帶回實驗室，放人玻璃容器中，靜置數(shù)小時， 水螅體舒展開后即清晰可見。培養(yǎng)培養(yǎng)水螅應(yīng)用清潔的湖塘水。如用自來水培養(yǎng)，須把自來水放置幾天。經(jīng)陽光直接曝曬過的 更好。將水螅連同水草放人培養(yǎng)缸的水中。培養(yǎng)溫度以15 - 20r為適宜，超過30r不利 于生長;過低則繁殖緩慢或停止。每周投食活水蚤12次。如欲加速繁殖，應(yīng)增加投食量。 當(dāng)水螅體上的芽體有3個左右時，投食量為適宜。注意及時用虹吸管吸去水底的死水蚤、沉 渣和一些陳舊缸水，再補充新水。如欲獲得帶精巢或卵巢的水螅?？砂阉疁亟档?r左右， 停止投食。水螅體壁上會長

5、出精巢或卵巢。長期保種培養(yǎng)水螅最好是建1個小的生態(tài)系統(tǒng)。用較大的培養(yǎng)缸（容水量80L左右或更大） 注人凈并置于窗下，控制每日直射光照2h即可。取一瓦缽裝人菜園土，種上水草后放入培 養(yǎng)缸。引入細(xì)菌、藻類、原生動物、輪蟲、螺和水蚤，再將水螅接種進去。在這一相對平衡 的生態(tài)系統(tǒng)中，只需對食物鏈進行調(diào)整性管理。水草翠綠、水質(zhì)清亮、活水蚤數(shù)量穩(wěn)定、水 螅體態(tài)正常則為適宜狀態(tài)。越夏過冬要注意養(yǎng)護，夏天應(yīng)把培養(yǎng)缸放在通風(fēng)陰涼處。保持水 的清潔，減少水螅密度，保種越夏。冬天水螅因有性生殖，其胚熟落到水底，注意不要吸去 底層殘渣。來年春天胚胎會發(fā)育成小水螅。該系統(tǒng)一般不用換水，只需補足揮發(fā)失去的水分。三、渦蟲的

6、采集與培養(yǎng)采集 渦蟲喜生活在較清澈、流動的溪流、水溝中，以活或死的小型蠕蟲、甲殼類動物及昆蟲的幼 蟲等為食。渦蟲避強光，晝間潛伏于石塊、落葉下。發(fā)現(xiàn)有渦蟲時，可將新鮮動物肝臟（或 肌肉）切成小塊。系上細(xì)繩吊放入水中。12h后會誘來較多的渦蟲附著在肝臟上，提起誘 餌放人裝有水的廣口瓶中，涮下渦蟲?？赏瑫r在附近多設(shè)幾處誘餌。采到更多渦蟲。培養(yǎng)培養(yǎng)渦蟲最好是用潔凈的池塘水、井水和泉水，如用自來水培養(yǎng)，須把自來水放置幾天，經(jīng) 陽光直接曝曬過的更好。培養(yǎng)缸內(nèi)可放些瓦塊、卵石便于渦蟲隱蔽。渦蟲喜歡的水溫是16 18C，溫度過高時會自行解體，所以夏季應(yīng)特別注意降溫。食物以動物肝臟或肌肉、熟蛋白 等為主。如需

7、渦蟲加快生長，可每周投食3次;如保種，則2周或更長時間投食1次，因渦 蟲有較強的耐饑餓能力。注意每次投食幾小時后應(yīng)將剩余的食物移出，以免水質(zhì)變壞。換水 時間視水質(zhì)的清、濁來定。當(dāng)缸水有點混濁時，用毛筆將缸內(nèi)的水旋轉(zhuǎn)攪動。使沉渣泛起、 渦蟲卷縮下沉，傾去上部陳水，再充進新水。如用稍大些的培養(yǎng)缸，種植少量水生植物，會 有利于保護水質(zhì)。四、蛔蟲的采集與圃定保存采集蛔蟲寄生在人、畜、禽等動物體內(nèi)。豬蛔蟲是寄生于豬小腸中的蛔蟲，和寄生于人體內(nèi)的蛔 蟲在形態(tài)上十分相似，故常被用作實驗材料。一般是到屠宰場采集，從豬小腸中取出蛔蟲， 用水稍沖洗，放入冰瓶帶回實驗室。固定保存方法一：用0.7%生理鹽水洗凈蛔蟲，

8、再放入30%-50%乙醇溶液中，慢慢加熱至6.0-7.0C， 將蛔蟲殺死并使蟲體伸直，然后用70%乙醇固定，最后保存于含5%甘油的75%80%乙醇 中。方法二：向已洗凈的蛔蟲體內(nèi)注射含2%甘油的70%乙醇溶液。注射量以使蟲體伸直即可， 然后平放在瓷盤中，用10.%福爾馬林溶液固定過夜，最后保存于5%的福爾馬林溶液中。五、蚯蚓的采集與固定保存采集蚯蚓生活在腐殖質(zhì)豐富的土壤中，以腐爛的植物和土壤為食。蚯蚓白晝穴居泥土內(nèi)，夜間到 地面上攝食，糞便排在地面上。一般在樹林、草叢、菜園等土壤肥沃潮濕處、蚓糞多的地方 能挖掘到。大雨過后因土壤滲水過多，蚯蚓會爬行于地面即能拾得。固定保存 蚯蚓洗凈后，浸于水中

9、，逐漸加入95%乙醇，至乙醇濃度達到8%10%為止。待數(shù)分鐘蚯 蛔全部麻醉后，移人50%、70%、95%乙醇內(nèi)各浸1d。最后保存于80%乙醇或5.%福爾馬林 溶液中。如為個體較大的種類。應(yīng)在麻醉后，立即注射福爾馬林乙醇混合液（4.%福爾馬林 12份，95%的乙醇30份，甘油2份及水60份）后再保存。六、河蚌的采集與固定保存采集河蚌生長在湖、塘、河底的淤泥中，用帶鐵絲網(wǎng)兜的耙從水底撈取，夏季可潛入水底摸取。 從市場或珍珠養(yǎng)殖場也可購買到。固定保存河蚌洗去污泥，放在清水中養(yǎng)幾天后，放入溫水中并徐徐加熱，河蚌殼會張開。蚌足慢慢從 殼縫中伸出。繼續(xù)加熱到50C，再放到50%70%的乙醇中固定幾天。然后

10、固定保存于10% 福爾馬林溶液或90%的乙醇中。如個體較大，應(yīng)向內(nèi)臟團中注射10%福爾馬林固定液。如欲保持貝殼的光澤，最好用90% 乙醇固定保存。七、螯蝦的采集與固定保存采集螯蝦喜穴居在田溝、池塘和溪流中。屬底棲動物?？捎脛游飪?nèi)臟和肌肉等誘捕。固定保存為防止螯蝦附肢脫落。應(yīng)將螯蝦放入密閉的容器中，用乙醚或氯仿麻醉。也可浸于10%乙 醇中麻醉。麻醉完全后，最好向體內(nèi)注射含2%甘油的70%乙醇溶液或10%福爾馬林溶液之 后，固定保存于70%80%乙醇中或10%甘油與7%福爾馬林（1： 1）混合液中。八、昆蟲的采集與固定保存1.采集用具（1）采集網(wǎng)依各種昆蟲生活的場所、取食方式和個體大小等不同。應(yīng)采

11、用不同的網(wǎng)。捕網(wǎng)：用來捕捉能飛善跳的昆蟲。網(wǎng)袋用輕便通風(fēng)的紗布制成，直徑約30cm，袋深約65 cm，略呈圓錐形，底部稍圓，開口可做成結(jié)扎的，便于取蟲。網(wǎng)柄長約1m。掃網(wǎng)：主要適用于草叢中掃蕩隱藏在枝葉下的昆蟲。網(wǎng)袋要用較結(jié)實的布制作，直徑和袋 潦比捕網(wǎng)略小，其他與捕網(wǎng)基本相同。水網(wǎng)：用來被捉水生昆蟲。網(wǎng)袋需用堅固不怕浸水的尼龍、亞麻咸金屬紗制作，且要根據(jù) 蟲體大小選取不同孔徑的紗。網(wǎng)袋直徑約30cm,袋底做成平底或瓢形底，網(wǎng)柄要適當(dāng)放長。毒瓶用來收集和迅速殺死昆蟲。常用500mL玻璃廣口瓶做成。簡便方法是在瓶底鋪1 層脫脂棉。再鋪2層濾紙，采集之前倒入適量乙醚或乙酸乙酯或三氧甲烷，蓋緊蓋子備

12、用。 因這幾種試劑易揮發(fā)，要注意添加，以保持麻醉效果。如用氰化鉀(或氰化鈉)毒蟲，應(yīng)將其 (約50g)置于瓶底，上鋪1層鋸末。澆上石膏漿，稍硬化時用針扎些小孔。面上再鋪一層濾 紙，待石膏完全于后，蓋好蓋子備用。氰化鉀(或氰化鈉)是劇毒品，使用時應(yīng)特別小心。制 作毒瓶也可用搗碎的植物組織，如桃仁、桃樹皮和肉桂樹等，效果亦行，且經(jīng)濟安全。誘蟲燈利用夜間多種昆蟲特別是蛾類的趨光性來誘捕它們。要求誘蟲燈光的射程遠(yuǎn)。誘 來的昆蟲落進燈下的容器中不易逃脫，或使昆蟲停息在白色的幕布上任人捕捉。其他采集袋、采集箱、采集傘、白色的幕布、挖土工具、折好的三角紙袋、鑷子、剪刀、 小刀、放大鏡、玻璃指管、毛筆、記錄本

13、、標(biāo)簽紙、筆、70%乙醇等。采集方法昆蟲種類繁多，分布很廣，生活習(xí)性各異。因此要先掌握昆蟲的有關(guān)知識，了解昆蟲生活的 季節(jié)、時間、地點和環(huán)境，才能確定采用何種采集方法。網(wǎng)捕法 是最常使用的采集方法。對善于飛翔的昆蟲，如蝶、蝗、蜂和蜻蜓等可用捕網(wǎng)。 使用時先把飛蟲兜人網(wǎng)內(nèi)，然后迅速把網(wǎng)口轉(zhuǎn)疊以封住網(wǎng)口，再將已打開蓋子的毒瓶送到網(wǎng) 底，把蟲趕入瓶內(nèi)。有底部開口的網(wǎng)，可打開結(jié)扎，將蟲送入毒瓶中。具蟄刺的蜂類入網(wǎng)后， 應(yīng)用鑷子、毒蟲夾取蟲，或應(yīng)先隔著網(wǎng)彈暈蟲后再放入毒瓶中。對棲息在雜草、灌木叢中的 昆蟲，應(yīng)采用較結(jié)實的掃網(wǎng)。使用時邊上下左右振動掃網(wǎng)，邊向前移動網(wǎng)，將昆蟲集中到網(wǎng) 底連同碎枝葉一起倒入毒

14、瓶中，待毒死后再倒出來挑選。采集水生昆蟲，應(yīng)根據(jù)蟲體的大小 及所處水域環(huán)境，選用不同用途的水網(wǎng)捕蟲。誘蟲法 利用許多昆蟲有趨光性的特點，在夜間用誘蟲燈誘捕。利用昆蟲的趨食性，把馬 糞、雜草、糖渣、酒糟堆放在田間，會誘來地老虎、螻蛄等。把糖、醋、蜜、酒等有甜酸發(fā) 酵氣味的漿液涂灑在木板、草堆上或用腐肉、爛瓜果能誘來蛾、蠅等多種昆蟲。還可利用昆 蟲的趨化性、趨異性等，有選擇性地誘捕某種昆蟲。擊落法針對許多昆蟲有假死性的特點，或當(dāng)昆蟲專心取食時，趁其不備，猛然震動寄主 植物，昆蟲會被擊落下來。配合使用采集傘、網(wǎng)和布單效杲更好?？刹傻嚼娌角?、槐尺蠖等 鱗翅目幼蟲和金龜子、象甲及一些半翅目種類。有的昆蟲

15、雖不會被擊落，但受震動后會爬動 或解除擬態(tài)而被發(fā)現(xiàn)。搜尋法有許多昆蟲能發(fā)出聲音，有些昆蟲會在它們生活的地方留下種種蹤跡，如被啃食 的植物葉片、排泄物、蟲癭等。據(jù)此可在附近的植物上、泥土中、磚石下、樹洞里等昆蟲可 能棲居的地方，搜索到多種昆蟲。注童捕到的昆蟲要投人毒瓶里殺死。毒死的昆蟲不應(yīng)在毒瓶中久放，以免蟲體變色。鱗翅目 昆蟲不能和其他昆蟲混放，以免弄壞翅和鱗片。瓶里可放些紙條減少蟲體摩擦。毒死的昆蟲 應(yīng)分別包在三角紙包里，要注明名稱、采集地點、時間、日期和采集人姓名等。固定保存微小的昆蟲，如小蜂類、蚊類、蚜蟲以及鱗翅目和鞘翅目的幼蟲等，可直接放人70%乙醇 中保存。昆蟲的許多成蟲，大都制作成干燥標(biāo)本保存。如用于解剖，需做成浸制標(biāo)本。一般 是將昆蟲直接投入70%乙醇中殺死固