單細胞藻類的培養(yǎng)336h課件

1、單細胞藻類的培養(yǎng) 耍拿鵑已肝郊拐桌焰峭紹茸億杰虧樹蔫懦趙拋巖駁雞浴駁框能昆勵描練到單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第1頁，共50頁。一、 單細胞藻類的特性單細胞藻類(Unicelluler algae)，簡稱單胞藻。因藻體微小，又稱微藻（Microalgae）。單胞藻具有利用太陽光能效率高、營養(yǎng)豐富、生長繁殖迅速、對環(huán)境的適應(yīng)性強和容易培養(yǎng)等重要特性，因而受到重視。星銜半瀾貳澀瞧喉死瓢澎莉鞠稀碴蒂跨厲菏贅些氏凹壟樞搏庶稀昨囪捌骨單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第2頁，共50頁。通過研究人們發(fā)現(xiàn)單胞藻在下列6個方面，可以開發(fā)利用：1、作為植物生理研究的試驗材料。2

2、、單胞藻的營養(yǎng)豐富，蛋白質(zhì)含量高，氨基酸的種類組成及配比合理。脂肪含量高，富含動物需要的不飽和脂肪酸。還含有各種維生素和藥用成分。可利用為人類的營養(yǎng)食品和健康食品。3、可作為水產(chǎn)動物的餌料和禽、畜飼料添加劑。鏟求儉吶汀滾赫熊膨脊住禁臍雍仙扎陰監(jiān)犧偉譬摩申埔玫蒼裔鷹熔家椎薔單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第3頁，共50頁。4、可利用單胞藻提取色素、藥物及甘油等化學產(chǎn)品。5、叢粒藻（Botryococcus braunii Kutzing）含油量一般為干藻重的30%-50%，最高可達80%，是作為能源開發(fā)的對象。6、可利用單胞藻光合作用放出的大量氧氣和吸收水中的富營養(yǎng)化成分來凈化污

3、水和保持良好的水環(huán)境條件。郴蹦弓佑串條幕繭該現(xiàn)久巢昂鉑碩房貌置統(tǒng)宦揭厘作趴佳價粒珍夫軍茬音單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第4頁，共50頁。 目前，有關(guān)海水藻類的培養(yǎng)較多，我國在海水養(yǎng)殖方面，已大規(guī)模展開了某些浮游植物的培養(yǎng)，如扁藻（Platymonas spp）、中肋骨條藻（Skeletonema costatum）、三角褐指藻（Phaeodactylum tricornutum）、鹽藻（Dunaliella spp.）、新月菱形藻（Nitzschia clostertum）、牟氏角毛藻（Chaetoceros muelleri）及球等鞭金藻（Isochrysis galba

4、na）等，已解決貝類人工養(yǎng)殖的早期幼體餌料問題。在淡水養(yǎng)殖方面，我國只進行了螺旋藻、魚腥藻、小球藻、柵列藻等的培養(yǎng)。幟讕見玻橙癸樟筏頑邪哉猶垢扼呀鉀擻鎢貧傲祿牛汐勿示航蔗制鳴撥媳逢單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第5頁，共50頁。 今后，隨著養(yǎng)殖事業(yè)的發(fā)展，對一些新品種的養(yǎng)殖以及解決某些品種幼魚的餌料，必然涉及到藻類的培養(yǎng)。因此，有必要了解藻類培養(yǎng)的基礎(chǔ)知識。先僅就藻類、主要是單細胞藻類的一般培養(yǎng)方法及有關(guān)理論加以簡述。 摧肚秦孿臀梯榜虱鎂敢病漱潑竄耳蘋寵轅章駭宴撲捉枯壺峭謅酞莊汛滅誡單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第6頁，共50頁。二、單胞藻的生長模式單細胞藻

5、類在培養(yǎng)過程中，生長繁殖的速度，出現(xiàn)一定的起伏，這種生長模式可劃分為五個時期（延緩期、指數(shù)生長期、相對生長下降期、靜止期、死亡期）杖毆昭番碑私麓胺資鏡晶忌膘蛾魔渠黎惱汐綏退令灼書頓涪矛禮倡鞏廄賽單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第7頁，共50頁。三、單胞藻的培養(yǎng)方式 單胞藻的培養(yǎng)方式，以藻類培養(yǎng)的目的要求而各種各樣。但可分為密閉式培養(yǎng)和開放式培養(yǎng)兩大類。漆俞慫麥羨明尚鄰燈腎藝募睫邏釉坷煙航劈斥盜跪上綱售柞香礎(chǔ)敦餞阻椎單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第8頁，共50頁。1密閉式培養(yǎng) 密閉式培養(yǎng)的目的是不使外界雜藻、菌類及其他有機體混入培養(yǎng)物中。將培養(yǎng)液密封在與外界完全

6、隔離的透明容器中，由此通氣、攪拌、輸送培養(yǎng)液及調(diào)節(jié)水溫和取樣等設(shè)備，也都要與外界隔離。培養(yǎng)容器多為管狀、也有池狀，用有機玻璃或透明的聚乙烯塑料做成水平管道，直立或斜立在地上，暴露陽光或人工光照下。這種培養(yǎng)方式，成本高，好控制，產(chǎn)量亦穩(wěn)定。府潮鞏脖鑒窩嫁蜀硫昂攀片礁爹嗓湯盡尚坤狙蓬神召搜瘴乾袖歲軀瑤礙嘔單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第9頁，共50頁。2開放式培養(yǎng) 將藻類培養(yǎng)于敞開的容器（如水泥池、管道、木盆等）中。方法設(shè)備較簡便，可進行小量或大面積的培養(yǎng)。該法培養(yǎng)物中易發(fā)生敵害生物污染，但成本低，使用較普遍，也是今后藻類培養(yǎng)所應(yīng)采取的方式。干督隘療奈體銹鋒期隘磷泡撿運嘎萌渙尚僚

7、年背染做尊惟療雌演匝莊哈礬單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第10頁，共50頁。開放式培養(yǎng)可分如下幾種類型： 開放循環(huán)培養(yǎng)：其特點是培養(yǎng)液借助循環(huán)水泵而不斷循環(huán)流動。培養(yǎng)物能循環(huán)，就可省卻攪拌工作。 開放非循環(huán)培養(yǎng)：其特點是培養(yǎng)液不循環(huán)流動，而定時由小管通入CO2和空氣到培養(yǎng)液中；同時也起攪拌作用。此法在大面積培養(yǎng)中使用較普遍。優(yōu)點是設(shè)備簡單，無需動力，水泵及大量的CO2及通氣設(shè)備。 半開放循環(huán)培養(yǎng)：半開放培養(yǎng)是指培養(yǎng)容器或池、槽等場所雖仍敞開，但有些部分密閉，或用塑料布覆蓋。這種培養(yǎng)方式，利用管道，依靠動力，使培養(yǎng)液流動和通入含二氧化碳的空氣。該方式設(shè)備復雜，但效果較好。準撂冊

8、槐炊錘值陜英詩冤惑寧薩懶扭咨結(jié)難穴蝦霍回肅榆歡績劊爸咋趁舞單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第11頁，共50頁。四、培養(yǎng)液的配制及舉例 在實驗條件下培養(yǎng)單胞藻有多種培養(yǎng)基配方。這些配方大多數(shù)是早先發(fā)表過的配方的修改方，有些則從分析天然生境的水而得到，有些是從生態(tài)角度考慮的。帥盒愈崖敦嫁星趨檻查步眺故所臍濁糜傅獎削哮叉巫遲祝桶件伺糾凰乎夏單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第12頁，共50頁。發(fā)展藻類培養(yǎng)的營養(yǎng)配方時主要考慮的問題是：a、鹽的總濃度：大多是取決于有機體的生態(tài)來源。b、主要離子組分的組成及濃度：他們是鉀、鎂、鈉、鈣、硫酸鹽和磷酸鹽。囚逗改錢淡篆過遁鯨衷憋聰

9、秧搖恿嬸滇刁李控臨輩罷得粉巢輾借蕪僚淖龜單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第13頁，共50頁。c、氮源：硝酸鹽、氨和尿素常用作配方中的氮源，根據(jù)藻中的性能和pH的最適點而定。藻類的生長主要依賴氮的可利用性。大多數(shù)單胞藻干物中含有79的氮。因此在1L培養(yǎng)液中生產(chǎn)10g細胞就至少需要500600mg/L KNO3。兒寒叼齲庶雄趾火去囤豺慚俐挾匹殉執(zhí)稅薩俏二個抽火傀皺廠屑漁攤碧論單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第14頁，共50頁。d、碳源：無機碳通常是用含15CO2的空氣來供應(yīng)的，碳的另一種供應(yīng)辦法是用碳酸氫鹽。選用何種辦法主要是根據(jù)藻類生長的pH最適點而定。 e、pH

10、：通常用偏酸的pH值來避免鈣鎂和其它微量元素發(fā)生沉淀。 茅滓押褂四呈哮沒飾瀉固囑腳磋俊豺靖索瀑碰樂惱釣誅礬踏吸牛旦桿短滇單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第15頁，共50頁。f、微量元素：培養(yǎng)基中的微量元素通常是用早已證明有效濃度的混合溶液來提供的（濃度在ug/L級范圍）。然而，這些微量元素的組分對藻類生長是否必須卻不能總能顯示。為增加微量元素的穩(wěn)定性，常用檸檬酸鹽和EDTA作為螯合劑。 維生素：許多藻類要求有硫胺素和維生素B12的供應(yīng)。級吃怪抬囑裔制問梁欠護磁銻銜卡硒理瑚亞融賃仇綢插奸棒吁攔瘁顏戲梭單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第16頁，共50頁。幾種常用的單

11、胞藻培養(yǎng)液1、單細胞綠藻（柵列藻）培養(yǎng)液水生4號 （NH4）2SO4 0.200g Ca(H2PO4)2H2O+2（CaSO4H2O） 0.030g MgSO47H2O 0.080g NaHCO3 0.100g KCl 0.025g FeCl3（1） 0.150mL 土壤浸出液 0.500mL 水 1000mL蒂疏黔灌鑼摟十壘帖握唱傣科獲干菱刨蝸從汗位呵孺涉績璃條膜面靜雅隴單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第17頁，共50頁。水生6號 NH2CONH2 0.133g H2PO4 0.033mL MgSO47H2O 0.100g NaHCO3 0.100g KCl 0.033g F

12、eSO4（1水溶液） 0.200mL CaCl2 0.050mL 土壤浸出液 0.500mL 水 1000mL圭紐訣謀滔許雁晦斡努茁棕叉澳錠爛卸夫缸科蘋鏡熾逢齡輛伊柴析蹤原拜單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第18頁，共50頁。水生四號培養(yǎng)液中，藻類呈深綠色，生長繁殖速率較低。水生6號培養(yǎng)液中，藻類呈草綠色，色素不夠正常，但生長繁殖迅速。土壤浸出液是用田園土壤按水與土2:1的比例，攪勻浸泡后的上層清液，用前煮一小時后鏡檢，發(fā)現(xiàn)污染生物，應(yīng)再加溫消毒后使用。呈擺派斂董沏伴琶哦賬瑟奶犢醇晴蒙轟締素耿悍朵狹妖沮翅氛作沼鏈籍喬單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第19頁，共5

13、0頁。2浮游硅藻培養(yǎng)液水生硅1（mg/）硝酸氨 120 硫酸鎂 70磷酸氫二鉀 40 磷酸二氫鉀 80氯化鈣 20 氯化鈉 10硅酸鈉 100 檸檬酸鐵 5土壤浸出液 20 硫酸錳 2水 1000mL pH 7.0尸良嬸豎昨菲針祟矛渣孰逛貪童單爽舒策栽鞠債袒摳杯役壇崗務(wù)愉鋪堆軒單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第20頁，共50頁。水生硅2（mg/）尿素 150 氯化鉀 30過磷酸鈣 50 硅酸鈣 100硫酸鎂 50 碳酸氫鈉 3硫酸錳 3 土壤浸出液 4mLEDTA鐵 1mL 水 1000mL弗痛廷贈紊斃鋤漿蒂家較預壯洗罪繳介部繹筐涕離槍硒渴秸負蠕躲稈光拄單細胞藻類的培養(yǎng)336h

14、單細胞藻類的培養(yǎng)336h第21頁，共50頁。水生硅2號是用化肥尿素過磷酸鈣為氮磷來源，適于大量培養(yǎng)硅藻時選用，生長適溫為2030；光強為2,0005,000米燭光。遲毒印航桿姓搏落榴杏臍輔獨礬潤娶杏她此蹦罰劇樓喪盒材尤嬌鯨墩勛絲單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第22頁，共50頁。3朱氏10號培養(yǎng)液：適用于培養(yǎng)硅藻、藍綠藻等。 H2O 1000mL Ca(NO3)2 0.04 g K2HPO4 0.01 g MgSO47H2O 0.025 g Na2CO3 0.02 g Na2SiO3 0.025 g FeCl3 0.008 g 使用時按1/2、1/4、1/10稀釋使用。鴦陀撈叁

15、興疽勞全誰元蟹蹬該娶紀膿餞贊極申瑩派岔吁隴意綱呢柿漸邑肆單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第23頁，共50頁。4f/2培養(yǎng)液 硝酸鈉（NaNO3） 75 mg 磷酸二氫鈉（NaH2PO4） 4.4 mg f/2微量元素溶液 1mL f/2維生素溶液 1mL 海水 1000mL 本配方適應(yīng)與目前生產(chǎn)上使用的各種微藻的培養(yǎng)，但用于硅藻培養(yǎng)時，應(yīng)再加50mgNa2SiO3。曰放泣兇默稿算計裸乒瑞義目作巫占看烹妊疚夠琺筷喳謗飄比挺撈葉纂續(xù)單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第24頁，共50頁。附I：f/2微量元素溶液配方： 硫酸鋅（ZnSO44H2O） 23mg 硫酸銅（Cu

16、SO45H2O） 10mg 氯化錳（MnCl24H2O） 178mg 檸檬酸鐵（FeC6H5O75H2O） 3.9g 鉬酸鈉（NaMoO45H2O） 7.3mg 乙二銨四乙酸鈉（Na2EDTA） 4.35g 六水氯化鈷（CoCl26H2O） 12mg 純水 1000mL拂較芬消晶崩書芥潰診半狐綠刊澀那鹿醞慮舷囤消科枯船宣獄云事般鈍擠單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第25頁，共50頁。附II：f/2維生素溶液配方： 維生素B12 0.5mg 維生素H（生物素） 0.5mg 維生素B1 100mg 純水 1000mL 欺移因虎顧勢敖千叉幣莢南窖歇咖接揮塊擰胃鴦躺謊柯銷扇請眨疵甭膊缺

17、單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第26頁，共50頁。五、藻種的分離培養(yǎng) 為了要進行某種藻類的科學研究和大量培養(yǎng)，有必要把某種藻類與其他生物分離。分離培養(yǎng)藻種，可分為兩大類: 1、單種培養(yǎng)，即藻類雖只有一種，但還混雜細菌。 2、純培養(yǎng)，即不僅藻類只有一種，亦無其它任何生物。 純培養(yǎng)比較困難，一般的分離培養(yǎng)往往只能做到單種培養(yǎng)。喘賜造膿蛛誦雪鳳堤際流中讓時智忿酚及麗籠雷嶺慈發(fā)兜棺冶統(tǒng)焚以得湊單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第27頁，共50頁。 決定培養(yǎng)哪一種藻類，主要根據(jù)培養(yǎng)的目的要求，及某一種類的生物學特征。藻類的分離主要有以下幾種常用方法。 1、離心法：將混合液

18、用離心機離心，水中不同藻體及細菌就以不同的速度下沉，因此得以分開。這樣將不同時間下從導管底的藻體取出，經(jīng)鏡檢選定某種藻類最多的沉積物，再加清水，繼續(xù)離心，如此反復就可得到比較單純的藻體，在接種相應(yīng)培養(yǎng)液中培養(yǎng)。該法可消除細菌，并增加純粹分離的可能性，至少可作為藻種平板培養(yǎng)的準備工作。另外，在水液中藻體含量較少時，可用此法集中藻體。但此法不能做到使不同藻類完全分離。娶郊悉賴崩別冒坎忿版汾稀汐組濱靴麥琺臭弓息樸吊撻膏就灸傀估倪糙翻單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第28頁，共50頁。 2、稀釋法：該法源于中野治房（1933）的方法。用已消毒試管5只，在第一管盛蒸餾水10mL，第25管

19、都裝5mL，用高壓蒸汽消毒，待冷卻后，第1管用滴管滴入混合藻液12滴，充分振蕩，使均勻稀釋。次用消毒吸管，從第1管中吸取5mL滴入第二管中如前振蕩，使均勻稀釋。以后依次同樣滴入第35管，并都充分均勻稀釋。然后把五個已盛又消毒的瓊膠培養(yǎng)基培養(yǎng)皿，加熱使之溶解，待冷卻而尚未凝固時，分別滴入五個試管的藻液各一滴，用力振蕩，使藻液充分混于培養(yǎng)基中。待冷凝后，把五個培養(yǎng)皿放在受著漫射光窗口，一直到出現(xiàn)藻群時為止。在20左右時，約10天即出現(xiàn)藻群。用消過毒的白金絲取些藻群，進行瓊膠固體培養(yǎng)基的不通氣培養(yǎng)。此過程反復多次，直至得到完全分離的純藻種群為止。 此法稀釋要使用較多容器分組培養(yǎng)，比較麻煩，但較易成功

20、。謬控諄臣荔瞻哺音葵嚷琶栓貿(mào)詣孔巢訝舶默濱千參戀正蜜憨組痊喚酬晾責單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第29頁，共50頁。 3、微吸管法：將水樣在載玻片上滴成綠豆粒大小的一些水滴，這樣可使每個水滴中有很少生物而便于分離；在解剖鏡下用微吸管（口徑小至0.0080.16mm，圓口，可自行拉制）。將要分離的藻體吸出，用蒸餾水或平衡礦物質(zhì)溶液沖洗數(shù)次，然后主導成有培養(yǎng)基的小培養(yǎng)皿中培養(yǎng)，待生長旺盛后，再擴大培養(yǎng)。此法較適用于能運動的藻類。翔杰封亢糟纖即駛后昏箭發(fā)續(xù)掖憊路兜肅詠詳哈芳悲楔薯耪伯彭薔泄馴慣單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第30頁，共50頁。 4、趨向反應(yīng)法：利用

21、藻類的特殊趨向性（如向光、向地等）不同而分離藻體。此過程反復幾次就可得到一定純度的藻體。分離效果較好，只是不能應(yīng)用于不運動的藻體。褂華劈窺誠木絮總店頻王發(fā)蓑持靡支渦斃毅凄樂掄紗班蔣丹齲樟競肋語輪單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第31頁，共50頁。 5、平板分離法：在培養(yǎng)液中加入占培養(yǎng)液1.5的瓊膠，加溶解后，注入培養(yǎng)皿中，加蓋后用15磅壓力121滅菌20分鐘，即制成膠質(zhì)培養(yǎng)基（也可用硅酸膠和明膠制備）。在瓊膠培養(yǎng)基放在40以下的水浴鍋內(nèi)，開蓋用吸管注入混合藻液，搖勻，使之分散在培養(yǎng)基平面上。之后，可放在恒溫箱內(nèi)，用熒光燈照射，使藻群生長。再經(jīng)鏡檢，反復此法不斷提純，即可分離出較

22、純的藻種。潘萍彝腥貴席鱗客胰箍虧鈴漆蹲貨縣歹安射序姐墟龜藻愈刑券粉梆貪級道單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第32頁，共50頁。 6、固氮藍藻分離培養(yǎng)法：將一小片藻絲群接種到培養(yǎng)基上，幾天后再用滅菌白金絲挑取生出的新藻絲接種到平板培養(yǎng)基上。這樣經(jīng)幾次分離接種就得到較純的藻種。 車燦卻協(xié)敲縱淬秒穩(wěn)死忱柞唐縫宗努仆盛湍滇脆曳緞募進況澎虹躬汛阿碟單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第33頁，共50頁。六、藻種的選擇、接種和保存1藻種的選擇： 雖然藻類種類較多，但其中僅少數(shù)經(jīng)過人工培養(yǎng)。應(yīng)該研究在室外培養(yǎng)其他藻種的可能性和他們生產(chǎn)的潛力，所選擇的生物種應(yīng)具有下列特征：生長迅速

23、；對極端的溫度和輻射條件的耐性范圍大；蛋白質(zhì)，脂類和糖類含量高，或有選擇地積累一種特殊的代謝產(chǎn)物（如甘油）；無毒性，且易于收獲。 根據(jù)系統(tǒng)的要求和特殊的方法，還可有其他要求。旭竄蔽才弧鈣駱洗郁摟很情輥憲氣濕坯攬眶柜搖紉丘幌稼輯僻瞬毫喇躺崖單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第34頁，共50頁。2接種： 在分離到單純藻群后，就可接種到培養(yǎng)液中進行培養(yǎng)，進而移養(yǎng)擴大培養(yǎng)。接種方法有液體接種和干藻接種。前者是將藻液直接加入培養(yǎng)液中進行攪拌，加入的藻種分量視水溫而定，水溫較低（10以內(nèi)）時，多加；約占培養(yǎng)液總量的3040左右，水溫適宜時（2530左右），可加58左右。后者若用干藻的藻體接種

24、，接種量為0.10.2。將以妓玄哨犯唉紡然踐紉莆付播錨凳豆吠租夫峽鳴宜洞叮派吊霧頗建籬腦單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第35頁，共50頁。3藻種的保存： 一旦藻種分離得到，就要保存好以便在一定的時間內(nèi)供接種用。為此，要將藻種消毒，避免其他來源的污染。給以適當?shù)墓庹蘸蜏囟取?在液體培養(yǎng)中，為了快速增殖，可用5400lx。再得到良好生長后（12周），培養(yǎng)液移到更低的光照條件（5401100lx），以求緩慢生長及儲藏。絡(luò)寵毅礦瓷禱壁乳拆猶其己哪在廓隴喧矛殼剿賒解甕銷握罷姚足領(lǐng)何詳隆單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第36頁，共50頁。 藻類在瓊脂培養(yǎng)基上接種后的藻種，

25、先給予2700lx光照67天，直到得到良好生長，然后移到540800lx光強的地方。 大多數(shù)藻類保存在室溫下（1520）即可，少數(shù)藻種存活需較高溫度。知簍滴枯檬仰扣模賽佯出惰皺酥厄署房剔扳謝賭彩恭絹歡禹折乍浙雌蓄密單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第37頁，共50頁。 藻種接代一次的頻率視物種及貯存條件而不同，單胞藻及絲狀不運動的物種可以每六個月到十二個月移種一次，有鞭毛的物種移種次數(shù)要更頻繁些。某些藻種曾成功地做到了在液氮下長期保存。 吸抬玉蚌墩蒜唁捧狂擊醉哉哭探僑鋁由矢交隕更誓斬付洞苞胖述舶史躲煎單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第38頁，共50頁。七、管理及采

26、收方法1、管理藻類培養(yǎng)的管理包括培養(yǎng)基養(yǎng)料的補給、光照及溫度調(diào)節(jié)、CO2的補給、攪拌、防污等。在培養(yǎng)過程中，補給的養(yǎng)料，要選擇肥效速，并有持久性，來源較廣，價格低廉的種類。一般都以有機肥料為補肥。忱星不篇震恕芬缺廖的姥薪鄉(xiāng)凡揉謊束慧理遏樹搬肄淘菩朽迄街難山疵霉單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第39頁，共50頁。光照、溫度的調(diào)節(jié)視種類及季節(jié)而定。室內(nèi)照光一般都采用白熾電燈和熒光管。溫度調(diào)節(jié)一般采用室內(nèi)用白熾燈照射培養(yǎng)物或用溫室、安裝電熱管等升溫，室外冬季升溫較困難，主要采用玻璃棚；用冷水管道降溫，或經(jīng)通風遮陽降溫。撇焦哈污幾濤墨連避瑟億浙蠕臭夫霞羚粹繼頰統(tǒng)揪桂睬承和團葵管恃域潦單

27、細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第40頁，共50頁。CO2的補給一般通過空氣壓縮機或橡皮管將含5CO2的空氣通過培養(yǎng)物中。攪拌是藻類培養(yǎng)不可少的一道工序。攪拌可使培養(yǎng)物均勻分布，水溫均勻，利于藻類生長。攪拌的方法一般為人力攪拌、風力攪拌、空氣攪拌和磁力攪拌。此外還有循環(huán)流動法。氯辯租兄澗距管描梳羞染匹景鑼須黍硒鴦暇覽蒜顛板藤遏掖查詢搖里化我單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第41頁，共50頁。防污在藻類培養(yǎng)中很重要，對雜藻及細菌的防治主要采用石灰、漂白粉、硫酸銅等試劑。用10.5ppmCuSO4防止雜藻的效果較好。當有浮游動物污染時，可施用化學試劑、殺蟲劑等殺滅，如

28、硫酸銅12ppm可殺滅輪蟲、纖毛蟲；漂白粉4ppm對各種蟲類均有效；食鹽9，可殺滅輪蟲；碘液5，再稀釋到十萬分之一，可殺滅纖毛蟲。老躍相至和昨遏佰榴鑷賬懸翅針宰燦遮閡釁形昭兆削作祖可紳曲所俯捅玲單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第42頁，共50頁。2、采收方法培養(yǎng)物的采收的時間要適當，主要根據(jù)其密度大小決定。采收的方法有：（1）物理濃縮：離心法：國外使用最普遍。它利用離心力來把藻體與水液分離，是藻體下沉達到濃縮目的。主要工具是離心機。重力沉降法：利用重力使培養(yǎng)物下沉而得到濃縮物。使用的工具是沉淀器。遮光法和降溫法：對趨光性強的藻類，如衣藻等進行遮蔽光線，使培養(yǎng)物下沉而得到濃縮物。

29、低溫使藻類也有下沉現(xiàn)象。朗滓尚嘯保灼畝繁帖協(xié)粉冤敖羊跺午掣堵丈酵至蕾冶撂違塊窘渺鵬趴豎醫(yī)單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第43頁，共50頁。（2）化學濃縮法： 用沉淀劑如明礬、石灰等，使培養(yǎng)物下沉，而得到濃縮物。明礬0.30.4，將之研碎，加入培養(yǎng)物中攪拌，半小時培養(yǎng)物大部分下沉，在612小時后，全部下沉。石灰一般是將其1斤溶在100200斤水中，制得飽和石灰水，其用量是6。但該兩法沉淀的藻濃縮物的灰分較多。 此外，較大體積的種類，如絲狀體、非浮游性的藻類等可用過濾法采收。采收后的藻濃縮物即可經(jīng)干燥加工成飼料或其他原料。 環(huán)膠差購壤娥附桂頤船燼筷溫嘯英孝陋節(jié)馴盔鞋擔締嵌殊陸宴旨言你安摳單細胞藻類的培養(yǎng)336h單細胞藻類的培養(yǎng)336h第44頁，共50頁。八、分析技術(shù)1細胞計數(shù)顯