人教版高中生物選修1 血紅蛋白的提取和分離練習(xí)題測(cè)試題

1、自我小測(cè)1使用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)中，相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)在凝膠中的行進(jìn)過程，可表示為圖中（）2電泳過程中，什么樣的分子遷移速度最快？A.纖維狀、大分子B.纖維狀、小分子C.球狀、大分子D.球狀、小分子將人紅細(xì)胞置于盛有下列液體的離心管中，10min后離心，得到沉淀物和上清液,則上清液中K+含量最髙的離心管內(nèi)盛有（）質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的氯化鈉溶液質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%的蔗糖溶液質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的氯化鈉溶液蒸餾水下列有關(guān)提取和分離血紅蛋白的實(shí)驗(yàn)敘述錯(cuò)誤的是（）該實(shí)驗(yàn)的材料必須選用雞血通過透析法可以去除樣品中分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)，此為樣品的粗提取凝膠色譜法是利用蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)

2、電泳法是利用各種分子帶電性質(zhì)的差異及分子的大小和形狀不同進(jìn)行分離下列關(guān)于電泳的說法，不正確的是（）電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過程帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率完全取決于它所帶凈電荷的多少用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳，蛋白質(zhì)電泳遷移率完全取決于分子的大小在血紅蛋白的整個(gè)提取過程中，不斷用磷酸緩沖液處理的目的是（）防止血紅蛋白被氧化血紅蛋白是一種兩性物質(zhì)，需要酸中和磷酸緩沖液會(huì)加速血紅蛋白的提取過程讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的pH范圍內(nèi)，維持其結(jié)構(gòu)和功能凝膠色譜分離法分離蛋白質(zhì)時(shí)，凝膠的種類較多，但其作用都是（）改變蛋白質(zhì)分子通過凝膠時(shí)的路徑吸附一部分

3、蛋白質(zhì)，從而影響蛋白質(zhì)分子的移動(dòng)速度將酶或細(xì)胞固定在凝膠中與蛋白質(zhì)分子進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)，從而影響其移動(dòng)速度8將經(jīng)處理破裂后的紅細(xì)胞混合液以2000r/min的速度離心10min后，離心管中的溶液分為四層，從上到下的順序依次是（）血紅蛋白、甲苯層、脂溶性物質(zhì)層、沉淀層甲苯層、沉淀層、血紅蛋白、脂溶性物質(zhì)層脂溶性物質(zhì)層、血紅蛋白、甲苯層、沉淀層甲苯層、脂溶性物質(zhì)層、血紅蛋白、沉淀層下列關(guān)于血紅蛋白提取和分離實(shí)驗(yàn)中樣品處理步驟的描述，正確的是（）紅細(xì)胞的洗滌：加入蒸餾水，緩慢攪拌，低速短時(shí)間離心血紅蛋白的釋放：加入生理鹽水和甲苯，置于磁力攪拌器上充分?jǐn)嚢璺蛛x血紅蛋白：將攪拌好的混合液離心、過濾后，用分液

4、漏斗分離透析：將血紅蛋白溶液裝入透析袋，置于pH為4.0的磷酸緩沖液中透析12h凝膠柱制作的順序一般是（）橡皮塞打孔挖凹穴玻璃管插入橡皮塞孔內(nèi)蓋尼龍網(wǎng)用尼龍紗將橡皮塞上部包好將包好的橡皮塞插入玻璃管連接尼龍管、裝螺旋夾柱頂部插入安裝了玻璃管的橡皮塞一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一關(guān)于凝膠色譜柱的裝填，除哪項(xiàng)外均為正確解釋？（）交聯(lián)葡聚糖凝膠（SephadexG75）“G”表示凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度及分離范圍,75表示凝膠得水值色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，一旦發(fā)現(xiàn)有氣泡，必須重裝用300mL物質(zhì)的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液充分洗滌平衡凝膠12h凝膠用自來水充分溶脹

5、后，配成凝膠懸浮液下列對(duì)在凝膠柱上加入樣品和洗脫的操作，不正確的是（）加樣前要使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液下降到與凝膠面平齊讓吸管管口沿管壁環(huán)繞移動(dòng)，貼壁加樣至色譜柱頂端，不要破壞凝膠面打開下端出口，待樣品完全進(jìn)入凝膠層后，直接連接緩沖液洗脫瓶開始洗脫待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時(shí)，每5mL收集一管，連續(xù)收集流出液血紅蛋白是人和其他脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的主要組成成分，負(fù)責(zé)血液中02或CO2的運(yùn)輸。請(qǐng)根據(jù)血紅蛋白的提取和分離流程圖回答問題。（1）將實(shí)驗(yàn)流程補(bǔ)充完整：A為，B為。凝膠色譜法是根據(jù)達(dá)到蛋白質(zhì)分離的有效方法。（2）洗滌紅細(xì)胞的目的是去除，洗滌次數(shù)過少，無法除去；離心速度過高和時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)使一同沉淀，

6、達(dá)不到分離的效果。洗滌干凈的標(biāo)志是。釋放血紅蛋白的過程中起作用的是。（3）在洗脫過程中加入物質(zhì)的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液（pH為7.0）的目的是。如果紅色區(qū)帶，說明色譜柱制作成功。凝膠色譜技術(shù)是20世紀(jì)60年代初發(fā)展起來的一種快速而又簡(jiǎn)單的分離技術(shù)，由于設(shè)備簡(jiǎn)單，操作方便，不需要有機(jī)溶劑，對(duì)高分子物質(zhì)有很高的分離效果，目前已經(jīng)被生物化學(xué)、分子生物學(xué)、生物工程學(xué)、分子免疫學(xué)以及醫(yī)學(xué)等有關(guān)領(lǐng)域廣泛應(yīng)用，不但應(yīng)用于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究，而且已經(jīng)大規(guī)模地用于工業(yè)生產(chǎn)。據(jù)圖回答下面的問題。（1）a、b均為蛋白質(zhì)分子，其中先從層析柱中洗脫出來的是，原因是（2）自己制作凝膠色譜柱時(shí)，在色譜柱底部d位置相

7、當(dāng)于多孔板的結(jié)構(gòu)可由替代。3）裝填凝膠色譜柱時(shí)，色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，原因是洗脫用的液體應(yīng)盡量與浸泡凝膠所用的液體(填“相同”或“不同”)，洗脫時(shí)，對(duì)洗脫液的流速要求。某生物興趣小組在“蛋白質(zhì)的提取和分離”實(shí)驗(yàn)中，準(zhǔn)備從豬的血液中初步提取血紅蛋白，設(shè)計(jì)的“血紅蛋白提取、分離流程圖”如下：實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備配制緩沖液、血細(xì)胞懸液純化、純樣品處理蛋白質(zhì)度鑒定洗滌、破一粗分離一凝膠色碎、離心等丨透析丨譜法、電泳等請(qǐng)回答下列有關(guān)問題。樣品處理中紅細(xì)胞的洗滌要用反復(fù)沖洗、離心。向紅細(xì)胞懸液中加入一定量的低濃度pH=7.0的緩沖液并充分?jǐn)嚢?，可以破碎紅細(xì)胞，破碎細(xì)胞的原理是血紅蛋白粗分離階段，透析的目的是，若要盡

8、快達(dá)到理想的透析效果，可以(寫出一種方法)。電泳利用了待分離樣品中各種分子的等的差異，而產(chǎn)生不同遷移速度，實(shí)現(xiàn)各種分子的分離。一同學(xué)通過血紅蛋白醋酸纖維薄膜電泳，觀察到正常人和鐮刀型細(xì)胞貧血癥患者的血紅蛋白電泳結(jié)果如圖所示。由圖可知攜帶者有種血紅蛋白，從分子遺傳學(xué)的角度作出的解釋是。TF常人負(fù)極正極負(fù)極正極j育攜帶者參考答案1解析：本題考查對(duì)凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)原理的理解，相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)留在顆粒外面，相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)進(jìn)入顆粒內(nèi)部；相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)通過凝膠間隙先被洗脫，相對(duì)分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)進(jìn)入凝膠內(nèi)部而后被洗脫。答案：B2解析：電泳就是利用了連續(xù)分離樣品中各種分子帶電性

9、質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同。一般來說，球狀分子比纖維狀分子易移動(dòng)，小分子比大分子易移動(dòng)。答案：D解析：紅細(xì)胞在蒸餾水中滲透吸水漲破，所以細(xì)胞中K+流出，使上清液中K+含量較高。答案：D解析：因?yàn)殡u血細(xì)胞中含有細(xì)胞核以及各種復(fù)雜的細(xì)胞器，會(huì)給提取血紅蛋白帶來一定的難度，故提取血紅蛋白一般選用哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞。答案：A解析：蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于它所帶凈電荷的多少以及分子的大小等因素，SDS能與各種蛋白質(zhì)形成蛋白質(zhì)SDS復(fù)合物，SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量，因而掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷差異，使電泳遷移率完全取決于分子的大小。答案：C解析：利

10、用磷酸緩沖液模擬細(xì)胞內(nèi)的pH環(huán)境，保證血紅蛋白的正常結(jié)構(gòu)和功能，便于分離觀察（紅色）和研究（活性）。答案：D解析：凝膠的種類較多，但每一種凝膠內(nèi)部都有孔隙。相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量小的容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程較長(zhǎng)，移動(dòng)速度較慢。相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部，只能在凝膠外部移動(dòng)，路程較短，移動(dòng)速度較快。相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以分離。答案：A解析：混合液經(jīng)離心后，按密度大小排列，在離心管中從上到下的順序依次是，第1層為無色透明的甲苯層，第2層白色薄層固體是脂溶性物質(zhì)沉淀層，第3層紅色透明液體是血紅蛋白溶液，第4層暗紅色沉淀物主要是紅細(xì)胞破碎物沉淀

11、。答案：D9解析：對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌時(shí)，應(yīng)加入生理鹽水，防止細(xì)胞破裂；將血紅蛋白從紅細(xì)胞中釋放時(shí)，需要加入蒸餾水，以便使紅細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白；透析時(shí)，應(yīng)將透析袋置于pH為7.0的磷酸緩沖液中透析12ho答案：C解析：凝膠柱制作的一般流程是：選擇玻璃管一選擇合適的橡皮塞一打孔一挖凹穴f玻璃管插入橡皮塞孔內(nèi)f蓋尼龍網(wǎng)f用尼龍紗將橡皮塞上部包好f將包好的橡皮塞插入玻璃管f連接尼龍管一裝螺旋夾一柱頂部插入安裝了玻璃管的橡皮塞。答案：B解析：本實(shí)驗(yàn)中使用的交聯(lián)葡聚糖凝膠(SephadexG75),其中G表示凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度及分離范圍，75表示凝膠得水值，即每克凝膠膨脹時(shí)吸水7.5g；氣泡會(huì)攪亂

12、洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果，因此，一旦發(fā)現(xiàn)有氣泡，必須重裝；在洗脫過程中，應(yīng)在約50cm髙的操作壓下，用300mL物質(zhì)的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液充分洗滌平衡凝膠12h,以使凝膠裝填緊密；凝膠溶脹時(shí)，應(yīng)使用蒸餾水將其充分溶脹，制成凝膠懸浮液。答案：D解析：打開下端出口，待樣品完全進(jìn)入凝膠層后，關(guān)閉下端出口，再用同樣的方法小心加入適量的20mmol/L的磷酸緩沖液，然后連接緩沖液洗脫瓶開始洗脫。答案：C解析：凝膠色譜法是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法，在蛋白質(zhì)分離與提取過程中包括樣品的處理、粗分離、純化和純度鑒定四步，每一步均應(yīng)用了不同的操作技術(shù)。答案：(1)血

13、紅蛋白的釋放樣品的加入和洗脫相對(duì)分子質(zhì)量的大小(2)雜蛋白(血漿蛋白)血漿蛋白白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞離心后的上清液中沒有黃色蒸餾水和甲苯準(zhǔn)確模擬生物體內(nèi)的生理環(huán)境，保持體外的pH和體內(nèi)一致均勻一致地移動(dòng)解析：用凝膠色譜法分離各種物質(zhì)時(shí)，大分子物質(zhì)先洗脫出來。大分子物質(zhì)由于直徑較大，不易進(jìn)入凝膠顆粒的微孔，而只能分布于顆粒之間，所以向下移動(dòng)的速度較快。小分子物質(zhì)除了可在凝膠顆粒間隙中擴(kuò)散外，還可以進(jìn)入凝膠顆粒的微孔中，即進(jìn)入凝膠內(nèi)，在向下移動(dòng)的過程中，從一個(gè)凝膠顆粒內(nèi)擴(kuò)散到顆粒間隙后再進(jìn)入另一個(gè)凝膠顆粒，如此不斷地進(jìn)入和擴(kuò)散，小分子物質(zhì)的下移速度落后于大分子物質(zhì)，從而落后于大分子物質(zhì)洗脫出來。在色譜柱

14、中裝填凝膠的時(shí)候要盡量緊密，以減少凝膠顆粒之間的空隙。在裝填凝膠色譜柱時(shí)，不得有氣泡存在，因?yàn)闅馀輹?huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果。凝膠色譜操作過程中，不能發(fā)生洗脫液流干，露出凝膠顆粒的現(xiàn)象。一旦發(fā)生上述兩種情況，凝膠色譜柱需要重新裝填。答案：(1)aa的相對(duì)分子質(zhì)量大，無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動(dòng)，路程較短，移動(dòng)速度較快（2）尼龍網(wǎng)和尼龍紗（3）氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果（4）相同保持穩(wěn)定15解析：（1）洗滌紅細(xì)胞所用的溶液是生理鹽水，根據(jù)滲透作用原理，將紅細(xì)胞置于低滲溶液中，紅細(xì)胞會(huì)吸水漲破，釋放出血紅蛋白。（2）血紅蛋白粗分離階段，透析的目的是除去樣品中的小分子雜質(zhì)?？赏ㄟ^增加緩沖液的量或及時(shí)更換緩沖液等方法縮短透析時(shí)間，盡快達(dá)到理想的透析效果。（3）由于各種分子帶電性質(zhì)以及分子大小、形狀