一個(gè)植物乳桿菌隱蔽質(zhì)粒的測(cè)序和注釋

1、一個(gè)植物乳桿菌隱蔽質(zhì)粒的測(cè)序和注釋作者：潘渠胡袁鄧林雷舜胡曉梅胡福泉【摘要】在植物乳桿菌（LactobacillusplantarumCICC6002）中發(fā)現(xiàn)了1個(gè)隱蔽質(zhì)粒（pLP2111），并將其克隆到pUC18質(zhì)粒上進(jìn)行測(cè)序。序列分析表明pLP2111大小為2111bp；僅有1個(gè)ORF，編碼1個(gè)的復(fù)制蛋白；有1個(gè)17bp的重復(fù)序列重復(fù)了13次。BLAST結(jié)果顯示pLp2111和植物乳桿菌CCM1904菌株的pLP1質(zhì)粒相似性最高，為99%，pLP2111比pLP1大可能構(gòu)建為良好的乳桿菌或乳球菌異源蛋白表達(dá)載體?！娟P(guān)鍵詞】植物乳桿菌；隱蔽質(zhì)粒；測(cè)序；注釋【Abstract】,designa

2、tedpLP2111,has2,111bp,【Keywords】Lactobacillusplantarum；crypticplasmid；sequence;analysis植物乳桿菌作為乳桿菌的一員，具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力、降低機(jī)體膽固醇水平、幫助消化和維持腸道微生態(tài)平衡的生理功能，對(duì)人體健康有益；而且該菌已被廣泛用于青貯飼料、肉類和蔬菜的乳酸發(fā)酵中。目前，其基因工程改造是研究熱點(diǎn)，例如將其改造為可口服的疫苗投送載體和酶投送載體。但是，由于乳桿菌轉(zhuǎn)化效率遠(yuǎn)低于大腸桿菌，導(dǎo)致其轉(zhuǎn)化成功率低、重復(fù)性差，成為基因工程改造的難關(guān)。尋找新的質(zhì)粒，從而構(gòu)建轉(zhuǎn)化率高的表達(dá)載體是促進(jìn)乳桿菌基因工程發(fā)展的方法之一

3、。自從1976年Chassy1首次在乳桿菌中發(fā)現(xiàn)質(zhì)粒以來(lái)，已經(jīng)有上百個(gè)乳桿菌質(zhì)粒被發(fā)現(xiàn)，大小從幾千個(gè)堿基對(duì)到幾十萬(wàn)個(gè)堿基對(duì)都有，其中多數(shù)為隱蔽性質(zhì)粒，少數(shù)質(zhì)粒與某些表型，如抗藥性、糖苷代謝、糖代謝、氨基酸代謝、細(xì)菌素產(chǎn)生與免疫等密切相關(guān)。在Genbank數(shù)據(jù)庫(kù)中，登錄有13個(gè)植物乳桿菌質(zhì)粒的完整序列（見(jiàn)表1）。發(fā)現(xiàn)新的質(zhì)粒對(duì)植物乳桿菌分子生物學(xué)的研究有重要的意義，尤其在構(gòu)建新的植物乳桿菌表達(dá)載體上。本研究從植物乳酸桿菌CICC6002菌株中分離了一個(gè)隱蔽性質(zhì)粒，并進(jìn)行了測(cè)序和注釋工作，該質(zhì)粒有可能構(gòu)建為良好的表達(dá)載體。1材料和方法菌株和質(zhì)粒植物乳桿菌CICC6002菌株購(gòu)自中國(guó)工業(yè)微生物菌種保藏中心。培養(yǎng)條件為：在37下，于MRS培養(yǎng)液11中靜置培養(yǎng)24h.大腸桿菌DH5菌株由本實(shí)驗(yàn)室保存，培養(yǎng)條件為：在37