各類成分分析 生物堿

1、各類成分分析 生物堿第1頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二生物堿*皂苷*黃酮*蒽醌揮發(fā)油第五章 各類成分分析第2頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二 一、概述 二、理化性質(zhì)*三、供試品溶液制備（提取、凈化）*四、鑒別：理化鑒別、TLC*五、含量測定：總成分、單體成分第五章 各類成分分析第3頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二春花秋月何時(shí)了，往事知多少！小樓昨夜又東風(fēng)， 故國不堪回首月明中。雕欄玉砌應(yīng)猶在， 只是朱顏改。問君能有幾多愁？ 恰似一江春水向東流！ 虞 美 人 李煜馬錢子腰直不起，頭足相就，狀如牽機(jī)而死強(qiáng)直性驚厥第4頁

2、，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二1988年奧運(yùn)會 ，卡爾劉易斯 ，麻黃堿 1992年奧運(yùn)會，巫丹，士的寧1992年奧運(yùn)會 ，瑪麗喬費(fèi)爾南德斯 ，偽麻黃堿 1994年世界杯，馬拉多納，麻黃堿 2000年奧運(yùn)會 ，拉杜坎，麻黃堿 生物堿與興奮劑第5頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二生物堿與毒品偽麻黃堿麻黃堿冰毒第6頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二一、概 述黃連：小檗堿、巴馬汀、藥根堿、表小檗堿苦參：苦參堿、氧化苦化堿益母草、延胡索、黃柏、貝母麻黃：麻黃堿、偽麻黃堿馬錢子：馬錢子堿、士的寧第一節(jié) 生物堿第7頁，共33頁，202

3、2年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二麻黃堿小檗堿1、結(jié)構(gòu)：C、H、O、N，堿性二、理化性質(zhì)第8頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二2、溶解性親脂性：大多數(shù)，氯仿中溶解度最大親水性：少，季銨型二、理化性質(zhì)一般都易溶于酸水第9頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二3、沉淀反應(yīng)： 1）碘化鉍鉀（BiI3KI） 2）雷氏鹽 NH4Cr(NH3)2(SCN)4 3）苦味酸干擾：蛋白質(zhì)、多肽、鞣質(zhì)沉淀特點(diǎn)：酸性水溶液（苦味酸在中性）中 沉淀常易溶于有機(jī)溶劑 沉淀有顏色二、理化性質(zhì)第10頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二4、光譜特征小檗堿：

4、225 、 270 、 331nm 366nm下 有熒光麻黃堿：210nm二、理化性質(zhì)第11頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二1、有機(jī)溶劑提取法： 堿化+ CHCl3士的寧的含量測定： P127 堿化+ CHCl3提取酸水提堿化CHCl3萃取三、供試品溶液的制備第12頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二2、氧化鋁柱色譜法： 益母草（藥典P203）水蘇堿的薄層鑒別： 取本品3g 乙醇回流提取 上活性炭-氧化鋁柱 乙醇洗脫收集三、供試品溶液的制備第13頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二3、離子交換樹脂法： 益母草流浸膏（藥典P2

5、80）水蘇堿的含量測定： 取本品5g 鹽酸調(diào)pH12 加置強(qiáng)酸型陽離子樹脂柱 水洗脫（棄去） 氨水洗脫 收集三、供試品溶液的制備第14頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二（一）理化鑒別 馬錢子散：馬錢子、地龍 取馬錢子散加濃氨試液三氯甲烷浸泡濾過濾液蒸干加稀鹽酸加碘化鉍鉀試液黃棕色沉淀四、定性鑒別第15頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二（二）薄層鑒別1、展開系統(tǒng)：乙二胺、氨水 P122正丁醇-鹽酸-水（4:1:0.5）生物堿鹽四、定性鑒別2、對薄層板改性：12%NaOH溶液例：黃連中生物堿 苯-EtOAc-MeOH-異丙醇-水 （6:3:1.5:1

6、.5:0.3） 置氨水飽和的展開槽第16頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二2）顯色劑：例：苦參：氧化苦參堿（藥典P141）3、檢視： 1）365nm下看熒光 例：黃連：小檗堿改良碘化鉍鉀稀碘化鉍鉀+亞硝酸鈉乙醇液四、定性鑒別第17頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二（一）總生物堿1、酸堿滴定法：返滴法2、分光光度法直接測定法：小檗堿比色法：苦味酸、雷氏鹽 P125排除干擾：化學(xué)分離、柱色譜五、含量測定第18頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二例：雷氏鹽比色法B + NH4Cr(NH3)2(SCN)4 = BHCr(NH3)2(

7、SCN)4 1、在酸性介質(zhì)中定量反應(yīng)2、反應(yīng)物有顏色，其吸光度取決于硫氰酸鉻銨部分3、反應(yīng)物不溶于水，易溶于丙酮第19頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二例：雷氏鹽比色法 P71益母草口服液中生物堿的含量測定測定方法：1、沉淀過濾，溶于丙酮，直接測定A2、濾除沉淀后，測定殘存的過量雷氏鹽，間接計(jì)算又如：產(chǎn)婦康顆粒第20頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二1、HPLC：離子抑制色譜：二乙胺、三乙胺 例：浙貝母 藥典P205離子對色譜：SDS、辛烷基磺酸鈉 常加入緩沖鹽 例： HPLC測小檗堿（二）單體成分五、含量測定第21頁，共33頁，2022年，5月

8、20日，19點(diǎn)46分，星期二 乙腈-水（50：50） 每100ml含0.34g KH2PO4和0.17g SDS牛黃千金散中鹽酸小檗堿乙腈-水-二乙胺（70：30：0.03）浙貝母中貝母甲素和貝母乙素小兒清熱止咳口服液中鹽酸麻黃堿乙腈-0.1%磷酸溶液（含0.1%三乙胺）（3:97）第22頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二流動相緩沖鹽的pH值對藥物的保留行為有影響，甚至?xí)@著改變某些堿性藥物的保留行為如圖所示。流動相pH值對保留時(shí)間的影響色譜柱：NucleodurC18 15cm4mm流動相：乙腈-10mM 碳酸氫銨50：50, A：pH=3.0 B：pH=10.0檢測

9、波長：240nmpH=3.0pH=10.0第23頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二流動相pH值對保留時(shí)間的影響色譜柱：NucleodurC18 15cm4mm流動相：梯度洗脫程序 A 乙腈-20mM 磷酸氫二銨, pH=2.5 B 乙腈-20mM磷酸氫二銨, pH=10.0檢測波長：254nmpH=2.5pH=10.0第24頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二流動相組成對藥物保留行為的影響組成：生物堿1、2、3、4 檢測波長：280nm色譜柱：Kromasil 15cm4.6mm流動相：A PiCB6流動相-PICB7流動相1：1 B PiCB6流

10、動相-PICB7流動相4：6PICB6流動相：己烷磺酸鈉1.88g甲醇260ml置1000ml量瓶中，用水稀釋至刻度PICB7流動相：庚烷磺酸鈉0.28g 甲醇260ml置1000ml量瓶中，用水稀釋至刻度第25頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二流動相組成對藥物保留行為的影響色譜柱：Kromasil 15cm4.6mm檢測波長：280nmPICB6：己烷磺酸鈉1.88g 甲醇260ml置1000ml量瓶中，用1%的醋酸稀釋至刻度。PICB7：庚烷磺酸鈉0.28g 甲醇260ml置1000ml量瓶中，用1%的醋酸稀釋至刻度。C PiCB6流動相-PICB7流動相1：1D

11、PiCB6流動相-PICB7流動相9：1第26頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二封尾技術(shù)：消除或屏蔽殘留Si-OH技術(shù)1：小分子鍵合技術(shù)2：較大空間位阻的異丙基或異丁基（R基團(tuán)）第27頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二2、TLCS：五、含量測定益母草：藥典P204黃連：藥典P213 熒光掃描, 激發(fā)波長=366nm顯色，=510nm測吸光度士的寧：藥典P319 熒光淬滅掃描, s=254nm第28頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二黃 連第29頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二3、高效毛細(xì)管電泳法（HPCE）原理：電場下溶液中不同荷電物質(zhì)遷移速度不同五、含量測定第30頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二原因：管內(nèi)壁硅羥基解離釋放H+使溶液帶正電五、含量測定第31頁，共33頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)46分，星期二遷移速度：陽離子 中性分子 陰離子