農(nóng)藥殘留速測(cè)卡蔬菜、水果中農(nóng)藥殘留速測(cè)技術(shù)

1、蔬菜、水果中農(nóng)藥殘留速測(cè)技術(shù)果蔬農(nóng)殘速測(cè)卡果蔬農(nóng)殘檢測(cè)卡農(nóng)藥殘留速測(cè)卡對(duì)蔬菜、水果中農(nóng)藥殘留速測(cè)技術(shù)的發(fā)展具有重要意義。一、蔬菜、水果中農(nóng)藥殘留速測(cè)原理及特點(diǎn)（一）蔬菜、水果中用于快速檢測(cè)的農(nóng)藥有兩類(lèi)一是有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥，有甲拌磷（ 3911）、對(duì)硫磷（ 1605）、甲胺磷等；二是氨基甲酸脂類(lèi)農(nóng)藥，有呋喃丹、抗蚜威、西維因等。有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥和氨基甲酸脂類(lèi)農(nóng)藥在我國(guó)使用比較廣泛， 這類(lèi)農(nóng)藥中有不少為高殘留、高毒農(nóng)藥。有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的快速檢測(cè)方法，不受時(shí)間、地點(diǎn)、場(chǎng)合等條件限制，甚至普通消費(fèi)者也能夠操作使用，有利于及時(shí)發(fā)現(xiàn)問(wèn)題、采取措施，控制高殘留農(nóng)藥蔬菜的攝入，降低農(nóng)藥中毒發(fā)生率，保障消費(fèi)者

2、食菜安全。（二）蔬菜、水果中農(nóng)藥殘留速測(cè)原理有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留可以和人體內(nèi)神經(jīng)傳導(dǎo)物質(zhì)膽堿脂酶相結(jié)合，即抑制酶的生理活性，引起神經(jīng)傳導(dǎo)過(guò)程受到阻礙，出現(xiàn)中毒癥狀，輕則引起慢性頭疼、記憶力減退等癥狀，重則導(dǎo)致呼吸困難，甚至死亡。蔬菜中農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)是基于 “在一定條件下， 有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶正常功能有抑制作用， 其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)” 這一原理，提取制備了膽堿脂酶作為檢測(cè)試劑， 根據(jù)酶的活性變化程度來(lái)測(cè)定蔬菜中殘留的農(nóng)藥。正常情況下， 膽堿酯酶（酶）催化乙酰膽堿（底物）水解，其水解產(chǎn)物（膽堿）與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計(jì)在 412nm處測(cè)定吸光度隨

3、時(shí)間的變化值， 計(jì)算出抑制率， 通過(guò)抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的存在?；镜幕瘜W(xué)反應(yīng)式：酶( 膽堿酯酶） + 底物（乙酰膽堿） 中間產(chǎn)物（膽堿）中間產(chǎn)物（膽堿） +顯色試劑 黃色物質(zhì)基本檢驗(yàn)機(jī)理顯色劑抑制率 50%，沒(méi)有或少部分大量中間產(chǎn)物溶液呈黃色活性被抑制，合格酶顯色劑抑制率 50%，大部分活性部+少量中間產(chǎn)物溶液呈 淡黃樣分被抑制，不合格本+底顯色劑物抑制率 100%，無(wú)活性或嚴(yán)重?zé)o中間產(chǎn)物溶液呈無(wú)色超標(biāo)，不合格抑制率的概念抑制率指的是農(nóng)藥對(duì)酶抑制程度的指標(biāo)。其計(jì)算公式為：I=（A0 - At）/ A0*100%為抑制率A0為 3 分鐘對(duì)照溶液吸光度的變化

4、At為 3 分鐘樣品溶液吸光度的變化二、速測(cè)儀檢測(cè)原理、結(jié)構(gòu)前面介紹過(guò)，農(nóng)藥殘留速測(cè)是在412nm處測(cè)定反應(yīng)產(chǎn)物吸光度隨時(shí)間的變化值，因此農(nóng)殘速測(cè)儀即是分光光度計(jì)的一種新的形式。（一）農(nóng)殘速測(cè)儀基本原理光源發(fā)出的光經(jīng)過(guò)單色器時(shí)被變成平行的單色光，當(dāng)單色光通過(guò)均勻的溶液時(shí)，光的一部分被溶液吸收，在吸收層厚度（比色皿）一定時(shí)，光的吸收于溶液的濃度成正比。 儀器檢測(cè)器將光的變化信號(hào)轉(zhuǎn)化為電信號(hào)變化，經(jīng)過(guò)儀器測(cè)量系統(tǒng)處理，檢測(cè)結(jié)果顯示在屏幕上。（二）農(nóng)殘速測(cè)儀結(jié)構(gòu)可見(jiàn)吸光光度計(jì)是利用物質(zhì)本身對(duì)可見(jiàn)光的選擇性吸收進(jìn)行測(cè)定的。分光光度計(jì)的基本部件有：光源、單色器、吸收池（比色皿）、檢測(cè)器和顯示裝置 。光源

5、單色器吸收池檢測(cè)器測(cè)量裝置A、光源分光光度計(jì)常用鎢燈作為光源，波長(zhǎng)為320-2500nm。B、單色器單色器是將光源發(fā)射的復(fù)合光分解為單色光的光學(xué)裝置。C、吸收池也叫比色皿，是盛放樣品溶液的容器，一般為1 厘米厚。D、檢測(cè)器是一種光電轉(zhuǎn)換設(shè)備，它將光強(qiáng)度轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)顯示出來(lái)。E、測(cè)量系統(tǒng)包括放大器和結(jié)果顯示裝置，它可以將結(jié)果進(jìn)行處理，并顯示在屏幕上，或者打印出來(lái)。三、速測(cè)儀的使用方法及注意事項(xiàng)（一）試劑的配制1、提取液：將提取液粉劑置于500ml 瓶中 , 加入 510 ml 蒸餾水搖勻溶解備用?？稍诔叵卤４妗?、酶液：每瓶酶粉劑加入3.1 ml 提取液，搖勻后 4 冰箱中保存?zhèn)溆?。配制好的?/p>

6、液在4可保存 6 天。3、底物：每瓶底物粉劑加入3.1 ml蒸餾水，搖勻后4 冰箱中保存?zhèn)溆?。配制好的底物?4可保存 6 天。4、顯色劑：將顯色劑粉劑倒入棕色瓶中，加入32ml 提取液搖勻后4冰箱中保存（二）試劑保存的注意事項(xiàng)1、酶的保存：粉狀的酶應(yīng)儲(chǔ)藏在冷凍室（約0-8 ），使用時(shí)用提取試劑溶解，溶解后的酶液分成小瓶。暫時(shí)不用的儲(chǔ)存在冷凍室內(nèi)，用時(shí)解凍；用后的酶液儲(chǔ)存在冷藏室（05）內(nèi)，在 1 周內(nèi)用完。酶液反復(fù)解凍最多不超過(guò)兩次，否則會(huì)影響酶活性。2、底物和顯色劑保存：固體保存在冷凍室（約0-8 ），溶解后的底物和顯色劑應(yīng)保存在冰箱的冷藏室內(nèi)（05）。3、提取試劑的保存：固體及溶解后的提

7、取試劑只需在常溫下保存。（三）儀器使用步驟開(kāi)機(jī)預(yù)熱儀器調(diào)零儀器調(diào) 100做對(duì)照樣品檢測(cè)（四）儀器調(diào)零、調(diào)100A、儀器調(diào)零打開(kāi)儀器后，進(jìn)入儀器調(diào)零界面，將儀器所配的擋光黑塊放入檢測(cè)通道，蓋好蓋板，按下儀器調(diào)零確認(rèn)鍵，待出現(xiàn)0.00 后，即可完成調(diào)零。B、儀器調(diào) 100取出擋光黑塊，確認(rèn)各光路中沒(méi)有擋光物質(zhì)后，蓋好蓋板，按下儀器調(diào)100 確認(rèn)鍵，待出現(xiàn)99.9 后，即可完成調(diào)100。注意：一般應(yīng)先調(diào)零，后調(diào)100。（五）樣品處理及檢測(cè)1、樣品采集后，后應(yīng)盡快進(jìn)行檢測(cè)， 選取表面干凈的的蔬菜或水果樣品，葉菜類(lèi)蔬菜用剪刀隨機(jī)取樣品的不同植株葉片； 瓜果類(lèi)蔬菜用削皮刀沿果菜表面處取約 1 厘米厚的樣本

8、，然后剪成 1cm左右見(jiàn)方碎片，備用。2、用天平準(zhǔn)確稱(chēng)取1g 放入小燒杯中。3、用移液管吸取5ml 提取液浸泡，在常溫下放置10 分鐘，每 3 分鐘晃動(dòng)一下燒杯，使蔬菜中的農(nóng)藥充分溶入液體中。若用震蕩器，震蕩 2 分鐘即可。4、吸取上清液2.5ml 于小試管內(nèi)，加入0.1ml 酶、 0.1ml 顯色劑， 30水浴 15 分鐘。6、加入 0.1ml 底物，混勻，倒入比色皿中，放入通道蓋好蓋板，按“啟動(dòng)”鍵，開(kāi)始檢測(cè)。蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有對(duì)酶有影響的植物次生物質(zhì)， 容易產(chǎn)生假陽(yáng)性。處理這類(lèi)樣品時(shí)，可采取整株（體）蔬菜浸提。（六）樣品檢測(cè)流程樣品對(duì)照取樣品可食

9、用部分剪碎 （ 1cm見(jiàn)方），稱(chēng)取 1g 于小燒杯中加入 5ml 提取液，放置10 分鐘，吸取 2.5ml 于試管吸取 2.5ml提取液于試管各加入 100 微升酶液和 100 微升顯色劑搖勻后30水浴 15 分鐘各加入 100 微升底物混勻，立即轉(zhuǎn)移到比色皿立即將比色皿放 入儀分鐘后自動(dòng)計(jì)算抑制結(jié)果判定抑制率 50%抑制率 50%合格不合格根據(jù)市場(chǎng)管理規(guī)定處理，用其他方法進(jìn)一步分析檢測(cè)過(guò)程中應(yīng)注意事項(xiàng)（1）檢測(cè)所用的蒸餾水為兩次以上蒸餾水。（2）檢測(cè)時(shí)操作步驟要按程序進(jìn)行，前后順序不要顛倒，動(dòng)作要迅速，加完試劑不能停留太長(zhǎng)時(shí)間。（3）電子天平使用前要調(diào)水平，使電子天平上的氣泡處于圓圈內(nèi)。然后

10、調(diào)零，稱(chēng)量。（4）樣品、樣品提取液、酶、顯色劑、底物等取樣量要準(zhǔn)確。（5）每次使用移液槍量取液體過(guò)程中，取液時(shí)移液槍按到第一停位點(diǎn)，排液時(shí)按到第二停位點(diǎn)，盡量排盡溶液，以免引起誤差。（6）操作時(shí)間要按照標(biāo)準(zhǔn)控制好。振蕩時(shí)間12 分鐘；樣品提取時(shí)間1015 分鐘；水浴抑制時(shí)間15 分鐘。（7）水浴溫度設(shè)置。乙酰膽堿脂酶抑制溫度30，丁酰膽堿脂酶抑制溫度 3738。（七）結(jié)果判別被測(cè)樣品酶抑制率低于50%為安全果蔬，酶抑制率高于50%為農(nóng)藥殘留超標(biāo)，建議重復(fù)一次，確定之后送農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)檢中心做進(jìn)一步檢測(cè)。結(jié)果判別應(yīng)注意事項(xiàng)1）空白值， 3 分鐘前后吸光值控制在 0.4 0.8 之間為好。如果空白值低于

11、 0.4 ，可適當(dāng)加大酶底物等試劑的使用量。 3 分鐘前后吸光值變化率應(yīng)大于 30%，如果低于 30%，可適當(dāng)提高水浴溫度及時(shí)間。2）如果抑制率出現(xiàn)負(fù)值較大， 造成主要原因是操作中出現(xiàn)的系統(tǒng)誤差，例如操作人員操作不熟練，若蒸餾水的純度不夠，也可能造成抑制率負(fù)值。另外，同一種蔬菜由于不同次重復(fù)取樣部位不同，較小的負(fù)值誤差（ -10%以下）是在允許范圍內(nèi)，這種情況下，樣本無(wú)農(nóng)藥檢出。3）乙酰膽堿脂酶 50%，丁酰膽堿脂酶 70%時(shí)超標(biāo)，說(shuō)明蔬菜中含有某種有機(jī)磷或氨基甲酸脂類(lèi)農(nóng)藥殘留。此時(shí)樣本要有 2 次以上的重復(fù)檢測(cè)。（八）檢測(cè)注意事項(xiàng)1、每次檢測(cè)前儀器預(yù)熱20 分鐘，要進(jìn)行儀器調(diào)零、調(diào)100。2

12、、每次檢測(cè)樣品前應(yīng)先做對(duì)照，在使用過(guò)程中更換一瓶試劑，環(huán)境溫度發(fā)生明顯或者同一瓶酶上次對(duì)照制作的時(shí)間距離本次檢測(cè)時(shí)間超過(guò)4 小時(shí)以上，對(duì)照則要重做。3、提取各種試劑和樣品提取液的移液管及移液器的頭不能混用。4、使用后的燒杯、移液管、比色皿等應(yīng)及時(shí)用自來(lái)水沖洗，再用蒸餾水沖洗，并干燥備用。久華食安專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)研發(fā)果蔬農(nóng)殘速測(cè)卡果蔬農(nóng)殘檢測(cè)卡農(nóng)藥殘留速測(cè)卡。歡迎來(lái)電咨詢(xún)。富不貴只能是土豪，你可以一夜暴富，但是貴氣卻需要三代以上的培養(yǎng)。孔子說(shuō)“富而不驕，莫若富而好禮?！?如今我們不缺土豪，但是我們?nèi)鄙儋F族。高貴是大庇天下寒士俱歡顏的豪氣與悲憫之懷，高貴是位卑未敢忘憂國(guó)的壯志與擔(dān)當(dāng)之志高貴是先天下之憂而憂的責(zé)任之心。精神的財(cái)富和高貴的內(nèi)心最能養(yǎng)成性格的高貴，以貴為美，在不知不覺(jué)中營(yíng)造出和氣的氛圍；以貴為高，在潛移默化中提升我們的素質(zhì)。以貴為尊，在創(chuàng)造了大量物質(zhì)財(cái)富的同時(shí)，精神也提升一個(gè)境界。一個(gè)心靈高貴的人舉手投足間都會(huì)透露出優(yōu)雅的品質(zhì)，一個(gè)道德高貴的社會(huì)大街小巷都會(huì)留露出和諧的溫馨，