金蕎麥抗炎活性部位篩選研究

1、金蕎麥抗炎活性部位挑選研究【摘要】目的從金蕎麥的5個化學(xué)提取部位中挑選出抗炎活性部位。方法采用小鼠耳廓腫脹實驗，大鼠背囊中白細胞游走實驗，大鼠足跖腫脹實驗和大鼠腫脹足跖炎性組織中PGE2含量測定4個實驗進展篩眩結(jié)果金蕎麥氯仿部位與水液部位對小鼠耳廓腫脹有明顯的抑制作用;氯仿、正丁醇、水液部位能明顯抑制大鼠背囊中白細胞游走;氯仿部位對大鼠足跖腫脹有明顯的抑制作用。氯仿、正丁醇和水液部位及水煎液能明顯降低大鼠腫脹足跖炎性組織中的PGE2含量。結(jié)論金蕎麥的氯仿和水液部位具有明顯的抗炎作用，為金蕎麥的抗炎活性部位?！娟P(guān)鍵詞】金蕎麥;提取部位;抗炎Abstrat:bjetiveTsearhanti-in

2、flaatryativesitefRhizaFagpyruDibtrys.ethdsDiethylbenzene-induedSellingfaurileinie,ratdrsalsaleukplania,ratvixpedisengrgeentausedbyalbuenereperfred,andthententfPGE2inratsellingftausedbyalbuenasdeterinedarkedly.ResultsThehlrfrandater-leftsiteshadevidentinhibitryeffetsnsellingfaurileinie;thehlrfr,n-but

3、anlandater-leftsitesuldbviuslyinhibitratdrsalsaleukplania;thehrfrhadstrnginhibitryatinnratvixpedisengrgeent;thehlrfr,n-butanl,ater-leftandater-detusitesulddereasethePGE2ntentinratsellingft.nlusinTheRhizaFagpyruDibtrys.extratinsitesashrfrandater-lefthavesignifiantanti-inflaatryeffets.Keyrds:RhizaFagp

4、yruDibtrys;Abstratsites;Anti-inflaatin金蕎麥Fagpyrudibtrys(D.Bn)Hara也稱野蕎麥、苦蕎頭，為蓼科蕎麥屬植物，它是我國民間常用的一種中草藥，藥用其根莖，在我國主要分布于西北、東北、華北、西南一帶的高寒山區(qū)，資源豐富，在民間很多地區(qū)將金蕎麥作為抗風濕藥物使用，近年來蕎麥屬的藥理研究13較多，但是對金蕎麥的抗炎活性部位挑選研究尚未見報道。本實驗即對金蕎麥的多個提取部位進展了抗炎活性的初步研究4。1材料與儀器1.2動物K小鼠(203)g，SD大鼠(18020)g，雌雄兼用。均由湖北中醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供。1.3儀器UV-2401紫外分光光度

5、計,日本島津消費。2方法及結(jié)果2.1小鼠耳廓腫脹實驗將雄性小鼠按體重隨機分為9組，分別按各劑量給藥，1次/d，連續(xù)3d，末次給藥后1h,于小鼠右耳兩面涂二甲苯0.05l/只，30in后脫臼處死，用6打孔器在左右耳一樣部位打孔，置萬分之一分析天平上稱重，計算左右耳片之差值，以蒸餾水組為空白對照，作組間t檢驗(下同)，其統(tǒng)計結(jié)果見表1。結(jié)果顯示氯仿和水液兩個組對耳廓腫脹均有明顯的抑制作用，水煎液和石油醚組有統(tǒng)計學(xué)差異，而其它組那么未顯示差異。表1對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響2.2大鼠背囊中白細胞游出實驗將大鼠按照體重隨機分為9組，每組雌雄各半，各組按表2劑量灌胃給藥，1次/d，連續(xù)4d。第3天灌胃后

6、，于大鼠背部用30%的Na2S溶液脫毛，脫毛面積44，脫毛皮膚消毒后，用一次性注射器皮下推入5l的空氣，形成一個圓形氣囊，次日末次灌胃后向囊內(nèi)推入5l的1.5%液(高壓滅菌器中109，4.7kg/2下滅菌30in)，分別于3h和7.5h時自囊內(nèi)抽出液各0.1l，注入4l的姬姆薩染料中，混勻，染色5in后滴于白細胞計數(shù)板上于顯微鏡下，按照白細胞計數(shù)法計數(shù)白細胞數(shù)，再換算為每囊內(nèi)之白細胞總數(shù)(結(jié)果見表2)。氯仿、正丁醇、水液3個組在3h時有一定的抑制作用，7.5h時那么能顯著抑制白細胞向炎灶內(nèi)聚集，石油醚及醋酸乙酯組那么未顯示抑制作用。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.3大鼠足跖腫脹實驗將雄性大鼠按體重隨

7、機分成6組，按表3劑量灌胃給藥，1次/d，連灌3d，末次給藥后1h測定每組大鼠左后足爪踝關(guān)節(jié)上端腿毛下標記處的足爪體積，作為致炎前的原始體積，隨即每組大鼠足跖皮下注射0.1l的10%蛋清溶液，并分別于第1，2，3，4，5小時測量各組大鼠標記線下的足體積(結(jié)果見表3)。氯仿組保持著較長時間的抑制作用，具有顯著的統(tǒng)計學(xué)意義，而正丁醇組和水液組作用較差，只是在3，4h時出現(xiàn)了較強的抑制作用，但這可能與蛋清致足腫脹的頂峰時間有關(guān)(30in2h)，而石油醚組在本實驗當中自始至終沒有表現(xiàn)出抑制活性。表2對大鼠背囊中白細胞游出的影響與蒸餾水組比擬，*P0.05,*P0.01表3對蛋清致大鼠足跖腫脹度的影響(

8、s)2.4對蛋清致大鼠足腫脹炎性組織中PGE2的影響將雄性大鼠隨機分成6組，灌胃給藥，1次/d，連續(xù)灌胃4d,末次給藥30in后,于右后足跖皮下注射10%蛋清0.1l，致炎1h后，處死大鼠，在踝關(guān)節(jié)上0.5處剪下炎性腫脹足，稱重，剝皮后剪碎，置生理鹽水5l中浸泡1h，取出足爪，離心浸泡液，汲取上清液0.1l，加0.5l/LKH-eH溶液2l,在50下異構(gòu)化20in，用eH稀釋至20l,于波長為278n處測定其吸光度(A)值。以每克炎性組織相當?shù)奈舛戎当硎綪GE2的含量。結(jié)果見表4。氯仿組和水液組可以顯著減少炎性腫脹足中PGE2的含量，石油醚和正丁醇組僅有統(tǒng)計學(xué)意義。表4對蛋清致大鼠腫脹足炎性

9、組織中PGE2含量的影響3討論本文首次采用局部抗炎藥理實驗方法對金蕎麥的抗炎活性部位進展了挑選，通過小鼠耳廓腫脹實驗和大鼠背囊中白細胞游走實驗，我們發(fā)如今提取中提取率較高的醋酸乙酯部位沒有抗炎的活性，而低極性的特別是氯仿部位卻顯示了較強的活性，同時極性大的水液部位也存在較強的活性，水煎液組雖也有活性，但是其活性差異僅有統(tǒng)計學(xué)意義，提示金蕎麥抗風濕的活性部位可能是由極性較小和較大的成分組成，這可能與存在于氯仿部位的雙聚原矢車菊苷元(黃烷醇兒茶素類)和存在于水液部位的黃烷醇衍生物及其聚合物組成的一類縮合型鞣質(zhì)成分作用有關(guān)。金蕎麥在經(jīng)過煎煮之后活性成分可能被破壞或揮發(fā)，故一味用傳統(tǒng)高溫方法對其煎湯服用治風濕病有待商榷。大鼠足跖腫脹實驗和大鼠足跖腫脹炎性組織中PGE2含量測定實驗同時也說明了氯仿部位是金蕎麥抗炎活性的最主要存在部位，其次是水液部位，而其它部位那么表現(xiàn)為不穩(wěn)定的抗炎作用。PGE是炎癥介質(zhì)，在免疫調(diào)節(jié)中起重要作用，本實驗發(fā)現(xiàn)氯仿和水液組可以明顯抑制PGE2的產(chǎn)生，對于闡述金蕎麥抗風濕作用的機理有一定幫助，也證明民間使用金蕎麥治療風濕是具有科學(xué)道理的，建議對金蕎麥氯仿和水液兩個部位進展提取并做更深化的研究，以開發(fā)成新型的抗風濕藥物?！緟⒖嘉墨I】1劉圣，田莉，陳禮明.金蕎麥研究進展J.基層中藥雜