高效毛細管電泳技術(shù)與現(xiàn)代中藥

1、高效毛細管電泳技術(shù)與現(xiàn)代中藥【關(guān)鍵詞】毛細管關(guān)鍵詞：高效毛細管電泳；現(xiàn)代中藥；有效成分；鑒別；制劑中藥是我國的傳統(tǒng)國粹，但是由于中藥成分和用藥種類的復(fù)雜性，其傳統(tǒng)研究方法已嚴(yán)重影響了我國中藥事業(yè)的國際化開展。為加快我國中藥的現(xiàn)代化和國際化進程，新的研究方法必須依賴和采用現(xiàn)代儀器技術(shù)的應(yīng)用。高效毛細管電泳技術(shù)作為一種新興的分析別離技術(shù)，由于自身的特點和優(yōu)勢在中藥的現(xiàn)代研究具有廣闊的開展前景。本文就近五年來，高效毛細管電泳技術(shù)在中藥中的應(yīng)用及新的開展作一簡要綜述。1高效毛細管電泳的開展概況及別離原理高效毛細管電泳highperfraneapillaryeletrphresis，HPE又稱毛細管電泳

2、apillaryeletrphresis,E是以高壓電場為驅(qū)動力，毛細管為別離通道，根據(jù)樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實現(xiàn)別離的一類液相別離技術(shù)，具有別離效率高、速度快、靈敏度高，所需樣品少、本錢低、抗污染才能強等特點。其理論始于20世紀(jì)60年代末，80年代獲得技術(shù)上的打破，目前已形成毛細管區(qū)帶電泳apillaryzneeletrphresis，ZE，膠束電動毛細管色譜iellareletrkinetiapillaryhratgraphy,E),毛細管等速電泳apillarygeleletrphresis，GE，毛細管等電聚焦電泳apillaryiseletrifusing，IEF及

3、毛細管電色譜apillaryeletrhratgraphy，E等別離形式1。儀器由一個高壓電源、一根毛細管、一個檢測器和兩個供毛細管兩端插入而又可和電源相連的緩沖液貯瓶組成，工作原理是在pH3的情況下，石英毛細管硅膠外表帶負電與溶液接觸時形成一雙電層，在高電壓作用下，雙電層中的水合陽離子引起溶液在毛細管內(nèi)整體向負極方向流動，形成電滲流EDF，粒子在毛細管電解質(zhì)溶液中的遷移速度，等于電泳和電滲流兩種速度的矢量和，正離子電泳方向和電滲一致，先流出；中性粒子電泳速度為零，其遷移速度相當(dāng)于電滲流速度；負離子運動方向和電滲流方向相反，最后流出，從而實現(xiàn)不同組分別離的目的。2在中藥有效成分別離測定中的應(yīng)用

4、一種中藥材含有多種有效成分，通常各化學(xué)組分構(gòu)造比擬復(fù)雜，種類多樣且在藥材中含量不高，用普通的別離方法難以完全別離和定量測定，而多味藥材組成的復(fù)方的成分測定，普通的別離方法就更加難以勝任了，毛細管電泳可以較好的解決這一問題。郝紅艷等2利用膠束電動毛細管電泳分析法建立中藥罌粟殼中3種生物堿嗎啡、可待因和罌粟堿的含量測定法，其測定結(jié)果于HPL法一致。紀(jì)秀紅等3運用毛細管區(qū)帶電泳形式對十大功績屬植物中3種生物堿的含量進展測定，結(jié)果說明該法具有簡便、快速、有效的特點，可用于中藥材的質(zhì)量控制。陳勇川等4采用高效毛細管電泳法測定槐花和槐角中蘆丁的含量，方法準(zhǔn)確、快速、簡便、經(jīng)濟。李琴韻等5采用HPEZE法對

5、中國藥典收載的3個不同品種的14個吳茱萸樣品不同產(chǎn)地中所含吳茱萸堿進展含量測定，同時還在兩種波長下,建立了吳茱萸樣品的高效毛細管電泳色譜指紋譜，能將3種不同品種的吳茱萸明顯地區(qū)分，提醒了其內(nèi)在質(zhì)量，方法準(zhǔn)確、簡便。趙霞等6以毛細管區(qū)帶電泳形式，用內(nèi)標(biāo)法分析了9種貝母藥材中浙貝乙素、西貝素、西貝苷等生物堿的含量，結(jié)果說明毛細管電泳法可以完全別離貝母藥材中的這3種生物堿，并有較好的回收率和重現(xiàn)性。邢鳳琴等7采用高效毛細管區(qū)帶電泳形式，對黨參樣品所含活性成分中的4種有機酸類成分進展別離與測定，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品在20in內(nèi)得到基線別離，且具有良好的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。3在中藥制劑消費質(zhì)量控制中的應(yīng)用中藥制劑成

6、分復(fù)雜，目前其質(zhì)量控制的方法多是測定其中一種指標(biāo)成分的含量，但這種方法不能完全表達出中藥制劑的整體質(zhì)量，尤其是復(fù)方制劑的整體質(zhì)量。隨著毛細管電泳的采用，分析工作者對中藥制劑中多種組分的測定進展了深化研究。尹茶等8建立了同時測定銀翹解毒片中綠原酸、甘草酸和甘草次酸的高效毛細管電泳法，結(jié)果說明：HPE能在10in內(nèi)完成銀翹解毒片中3種有效成分的測定，靈敏度高，適于中成藥中多種有效成分的同時測定。史國兵等9建立中成藥九如天寶液毛細管電泳的方法，繪制出相關(guān)指紋圖，考察了四種不同柞蠶蛾提取物的九如天寶液與市售九如天寶液的指紋圖譜的差異，認為，圖譜特征明顯、專屬性強、可為鑒別該藥物的真?zhèn)翁峁┛茖W(xué)根據(jù)；毛細

7、管電泳技術(shù)在中藥的指紋圖譜和質(zhì)量控制研究中將發(fā)揮更大的作用。陳玉英等10采用高效毛細管電泳法測定了10批供試樣品的HPE指紋圖譜，建立相關(guān)的梔子藥材的指紋圖譜，并對該方法學(xué)進展考察，結(jié)果符合?中藥注射劑指紋圖譜研究的技術(shù)要求(暫行)?中有關(guān)規(guī)定，結(jié)論為該方法可作為控制以含梔子等中藥制劑的內(nèi)在質(zhì)量。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.4在中藥材鑒別中的應(yīng)用雖然目前中藥材的鑒別已采用許多現(xiàn)代的儀器方法，但是這些方法在應(yīng)用中仍存在著不少缺陷，利用毛細管電泳技術(shù)測定中藥材中的有效成分如有機酸、蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸、生物堿和酶等，分析活性成分的指紋圖譜，不僅對中藥的其道地性(地理分布)、引種與分化變異的本質(zhì)從分子程度

8、闡釋提供嶄新的客觀根據(jù)，也是對常規(guī)鑒別方法有益的補充。王德先等11利用毛細管電泳法鑒別天麻及其4種常見偽品以及測定天麻中有效成分天麻素，通過比擬電泳譜圖和天麻素加標(biāo)實驗，4種偽品與天麻可以很容易鑒別，天麻中的天麻素可以達基線別離。王寅等12以HPE法對不同屬群大青葉藥材的理化特征差異進展研究，結(jié)果說明異地栽培的不同屬群大青葉藥材酸性提取部位的化學(xué)成分及含量有顯著差異，根據(jù)電泳圖譜中特征峰的遷移時間和峰面積，能有效鑒別不同屬群的大青葉藥材。孫沂13等采用毛細管區(qū)帶電泳法建立10批紅花道地藥材的指紋圖譜，同時將9個產(chǎn)地的紅花藥材以及紅花的對照藥材加以比擬，結(jié)果顯示在紅花道地藥材的指紋圖譜中，共有峰

9、的相對遷移時間的RSD1.8%，相對峰面積的RSD6.2%；在不同產(chǎn)地紅花藥材的指紋圖譜中，共有峰的相對峰面積有一定的差異。林瑞超等14采用E別離形式，建立了卷柏屬11種不同藥用植物的HPE指紋圖譜，說明不同地域的卷柏屬植物中黃酮類化合物的分布存在明顯差異，可用于卷柏屬藥用植物的鑒別。5結(jié)語高效毛細管電泳以其高效、快速、簡便且柱不易受污染而優(yōu)于HPL法，在中藥有效成分的別離、定性定量、中藥材鑒別，手性化合物的拆分等方面應(yīng)用將越來越廣泛，目前仍存在重現(xiàn)性較差、線性范圍窄和靈敏度較低等缺陷。隨著商品儀器經(jīng)不斷改良和完善，加上自動進樣器的普遍使用，根本可以克制重現(xiàn)性差的缺陷，與常規(guī)HPL法接近；靈敏

10、度低可通過在柱預(yù)濃縮如場放大堆積效應(yīng)，或經(jīng)濃縮預(yù)處理如固相萃取等技術(shù)加以改善。此外，HPE法可與其它進樣技術(shù)如流動注射聯(lián)用，不但可進步測定精度，而且能完成連續(xù)自動進樣及在線分析，方便大批量樣品的測定，或采用ES、ENR及ESS的聯(lián)用技術(shù)，充分利用HPE的高別離效率和S或NR的高靈敏度與定性鑒定才能，快速完成眾多復(fù)雜成分的別離與構(gòu)造鑒定，將大大進步和拓寬了E的性能和應(yīng)用范圍，更適用于中藥復(fù)雜化學(xué)成分的別離與測定。相信在不久的將來，隨著新型別離技術(shù)的應(yīng)用，中藥現(xiàn)代化的進程必獲得輝煌成就。參考文獻：1朱濤，方曉紅，孫亦梁.高效毛細管電泳：分析化學(xué)中的一個新的前沿領(lǐng)域J.化學(xué)進展，1994，63：22

11、9229.2郝紅艷，郭濟賢，順慶生，等.HPL和HPE法測定罌粟殼中3種生物活性生物堿J.藥學(xué)學(xué)報，2000，35(4)：289289.3陳勇川，穆海川，劉松青.高效毛細管電泳法測定槐花和槐角中蘆丁的含量J.華西藥學(xué)雜志，2002，17(4)：284284.4紀(jì)秀紅，李奕，劉虎威，等.十大功績屬局部植物莖中生物堿的高效毛細管電泳法測定J.藥學(xué)學(xué)報，2000，35(3)：220220.5李琴韻，洪筱坤，王智華，等.高效毛細管電泳法測定吳茱萸中吳茱萸堿的含量J.藥物分析雜志，2000，20(6)：:434434.6趙霞，陸陽，陳澤乃.毛細管電泳法定量分析貝母中幾種生物堿J.中草藥，2001，32(2)：116116.7邢鳳琴，朱恩圓，詹慧清.黨參中有機酸的高效毛細管電泳法分析J.同濟大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)，2001，225：1515.8尹茶，吳玉田.高效毛細管電泳法測定銀翹解毒片中的氯原酸、甘草酸和甘草次酸J.色譜，1999，17(2)：209209.9史國兵，武向鋒，沈娟，等.九如天寶液毛細管電泳指紋圖譜研究J.解放軍藥學(xué)學(xué)報，2022，2：153153.10陳玉英，曹敏，季一兵.梔子藥材毛細管電泳指紋圖譜的研究J.中國藥科大學(xué)學(xué)報，2002，33(4)：284284.11王德先，楊更亮，劉海光，等.天麻及其偽品的毛細管電泳鑒別及天麻素的測定J中草藥，2001，324：35