生物化學(xué)習(xí)題及答案-核酸生成_第1頁(yè)
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1、核酸生成(一)名詞解釋TOC o 1-5 h z.半保留復(fù)制().不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄().逆轉(zhuǎn)錄().岡崎片段().復(fù)制叉().領(lǐng)頭鏈().隨后鏈().有意義鏈().光復(fù)活().重組修復(fù)()內(nèi)含子()外顯子().基因載體()質(zhì)粒()(二)填空題.復(fù)制是定點(diǎn)雙向進(jìn)行的,股的合成是,并且合成方向和復(fù)制叉移動(dòng)方向相同;股的合成是的,合成方向與復(fù)制叉移動(dòng)的方向相反。每個(gè)岡崎片段是借助于連在它的末端上的一小段而合成的;所有岡崎片段鏈的增長(zhǎng)都是按方向進(jìn)行。.連接酶催化的連接反應(yīng)需要能量,大腸桿菌由供能,動(dòng)物細(xì)胞由供能。.大腸桿菌聚合酶全酶由組成;核心酶的組成是。參與識(shí)別起始信號(hào)的是因子。.基因有兩條鏈,作為模板指

2、導(dǎo)轉(zhuǎn)錄的那條鏈稱鏈。.以為模板合成稱,由酶催化。.或分別經(jīng)、和牛胰處理所得結(jié)果:基因突變形式分為:,和四類(lèi)。亞硝酸是一個(gè)非常有效的誘變劑,因?yàn)樗芍苯幼饔糜?,使堿基中基氧化成基,造成堿基對(duì)的。所有岡崎片段的延伸都是按方向進(jìn)行的。.前導(dǎo)鏈的合成是的,其合成方向與復(fù)制叉移動(dòng)方向;隨后鏈的合成是的,其合成方向與復(fù)制叉移動(dòng)方向。引物酶與轉(zhuǎn)錄中的聚合酶之間的差別在于它對(duì)不敏感,并可以作為底物。.聚合酶的催化功能有、和?;匦赣纸?,它的功能是。.細(xì)菌的環(huán)狀通常在一個(gè)開(kāi)始復(fù)制,而真核生物染色體中的線形可以在起始復(fù)制。.大腸桿菌聚合酶的活性使之具有功能,極大地提高了復(fù)制的保真度。大腸桿菌中已發(fā)現(xiàn)種聚合酶,其中

3、負(fù)責(zé)復(fù)制,負(fù)責(zé)損傷修復(fù)。.切除修復(fù)需要的酶有、和。在復(fù)制中,可防止單鏈模板重新締合和核酸酶的攻擊。合成時(shí),先由引物酶合成,再由在其端合成鏈,然后由切除引物并填補(bǔ)空隙,最后由連接成完整的鏈。原核細(xì)胞中各種是催化生成的,而真核細(xì)胞核基因的轉(zhuǎn)錄分別由種聚合酶催化,其中基因由轉(zhuǎn)錄,基因由轉(zhuǎn)錄,各類(lèi)小分子量則是的產(chǎn)物。一個(gè)轉(zhuǎn)錄單位一般應(yīng)包括序列、序列和順序。真核細(xì)胞中編碼蛋白質(zhì)的基因多為。編碼的序列還保留在成熟中的是,編碼的序列在前體分子轉(zhuǎn)錄后加工中被切除的是。在基因中被分隔,而在成熟的序列被拼接起來(lái)。染色質(zhì)中的蛋白和蛋白對(duì)轉(zhuǎn)錄均有調(diào)節(jié)作用,其中的調(diào)節(jié)作用具有組織特異性。(三)選擇題.按半保留方式復(fù)制。

4、如果一個(gè)完全放射標(biāo)記的雙鏈分子,放在不含有放射標(biāo)記物的溶液中,進(jìn)行兩輪復(fù)制,所產(chǎn)生的四個(gè)分子的放射活性將會(huì)怎樣:半數(shù)分子沒(méi)有放射性.所有分子均有放射性半數(shù)分子的兩條鏈均有放射性.一個(gè)分子的兩條鏈均有放射性四個(gè)分子均無(wú)放射性.參加復(fù)制的酶類(lèi)包括:()聚合酶()解鏈酶;()聚合酶()聚合酶(引物酶);()連接酶。其作用順序是:、(、(、(、(、(、(、(、(、(、(、(、(、(、(、(、(、(、(.如果標(biāo)記的大腸桿菌轉(zhuǎn)入培養(yǎng)基中生長(zhǎng)了三代,其各種狀況的分子比例應(yīng)是下列哪一項(xiàng):純一純雜種下列關(guān)于復(fù)制特點(diǎn)的敘述哪一項(xiàng)錯(cuò)誤的:與鏈共價(jià)相連.新生鏈沿,方向合成鏈的合成是不連續(xù)的.復(fù)制總是定點(diǎn)雙向進(jìn)行的在一

5、條母鏈上沿方向合成,而在另一條母鏈上則沿方向合成復(fù)制時(shí),,序列產(chǎn)生的互補(bǔ)結(jié)構(gòu)是下列哪一種:復(fù)制時(shí),,序列產(chǎn)生的互補(bǔ)結(jié)構(gòu)是下列哪一種:下列關(guān)于聚合酶的敘述哪一項(xiàng)是正確的:它起修復(fù)酶的作用但不參加復(fù)制過(guò)程它催化聚合時(shí)需要模板和引物在復(fù)制時(shí)把岡崎片段連接成完整的隨從鏈它催化產(chǎn)生的岡崎片段與引物鏈相連有些細(xì)菌突變體其正常生長(zhǎng)不需要它下列關(guān)于真核細(xì)胞聚合酶活性的敘述哪一項(xiàng)是正確的:它僅有一種它不具有核酸酶活性它的底物是二磷酸脫氧核苷它不需要引物它按,方向合成新生鏈從正在進(jìn)行復(fù)制的細(xì)胞分離出的短鏈核酸一岡崎片段,具有下列哪項(xiàng)特性:它們是雙鏈的.它們是一組短的單鏈片段它們是一雜化雙鏈.它們被核酸酶活性切除它

6、們產(chǎn)生于親代鏈的糖磷酸骨架的缺口處切除修復(fù)可以糾正下列哪一項(xiàng)引起的損傷:堿基缺失.堿基插入.堿基甲基化.胸腺嘧啶二聚體形成.堿基烷基化大腸桿菌連接酶需要下列哪一種輔助因子?作為電子受體作為磷酸供體形成活性腺苷酰酶.作為電子受體堿以上都不是.下列關(guān)于和聚合酶的敘述哪一項(xiàng)是正確的:聚合酶用二磷酸核苷合成多核苷酸鏈聚合酶需要引物,并在延長(zhǎng)鏈的,端加接堿基聚合酶可在鏈的兩端加接核苷酸僅能以為模板合成.所有聚合酶和聚合酶只能在生長(zhǎng)中的多核苷酸鏈的,端加接核苷酸.紫外線照射引起最常見(jiàn)的損傷形式是生成胸腺嘧啶二聚體。在下列關(guān)于分子結(jié)構(gòu)這種變化的敘述中,哪項(xiàng)是正確的:不會(huì)終止復(fù)制可由包括連接酶在內(nèi)的有關(guān)酶系統(tǒng)

7、進(jìn)行修復(fù)可看作是一種移碼突變是由胸腺嘧啶二聚體酶催化生成的引起相對(duì)的核苷酸鏈上胸腺嘧啶間的共價(jià)聯(lián)結(jié)下列哪種突變最可能是致死的:.腺嘌呤取代胞嘧啶.胞嘧啶取代鳥(niǎo)嘌呤甲基胞嘧啶取代胞嘧啶.缺失三個(gè)核苷酸插入一個(gè)核苷酸鐮刀形紅細(xì)胞貧血病是異常血紅蛋白純合子基因的臨床表現(xiàn)。B鏈變異是由下列哪種突變?cè)斐傻模?交換.插入.缺失.染色體不分離.點(diǎn)突變?cè)谂囵B(yǎng)大腸桿菌時(shí),自發(fā)點(diǎn)突變的引起多半是由于:氫原子的互變異構(gòu)移位.糖磷酸骨架的斷裂插入一個(gè)堿基對(duì).鏈間交聯(lián).脫氧核糖的變旋插入或缺失堿基對(duì)會(huì)引起移碼突變,下列哪種化合物最容易造成這種突變:口丫啶衍生物.溴尿嘧啶氮雜絲氨酸.乙基乙磺酸.咪唑硫嘌呤在對(duì)細(xì)菌復(fù)制機(jī)制

8、的研究中,常常用到胸腺嘧啶的類(lèi)似物溴尿嘧啶,其目的在于:引起特異性移碼突變以作為順序研究用在胸腺嘧啶參入部位中止合成在親和載體中提供一個(gè)反應(yīng)基合成一種密度較高的以便用離心分離法予以鑒別在中造成一個(gè)能被溫和化學(xué)方法裂解的特異部位關(guān)于指導(dǎo)的合成,下列敘述哪一項(xiàng)是錯(cuò)誤的:只有在存在時(shí),聚合酶才能催化磷酸二酯鍵的生成轉(zhuǎn)錄過(guò)程中,聚合酶需要引物鏈的合成是從,端大多數(shù)情況下只有一股鏈作為模板合成的鏈從來(lái)沒(méi)有環(huán)狀的下列關(guān)于。因子的敘述哪一項(xiàng)是正確的:是聚合酶的亞基,起辨認(rèn)轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)的作用是聚合酶的亞基,容許按和雙向合成是核蛋白體亞基,催化肽鏈生成是核蛋白體亞基,促進(jìn)與之結(jié)合在亞基和亞基之間起搭橋作用,構(gòu)成核

9、蛋白體真核生物聚合酶催化轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物是:.下列關(guān)于真核細(xì)胞復(fù)制的敘述哪一項(xiàng)是錯(cuò)誤的:是半保留式復(fù)制.有多個(gè)復(fù)制叉有幾種不同的聚合酶.復(fù)制前組蛋白從雙鏈脫出真核聚合酶不表現(xiàn)核酸酶活性下列關(guān)于原核細(xì)胞轉(zhuǎn)錄終止的敘述哪一項(xiàng)是正確的:是隨機(jī)進(jìn)行的.需要全酶的P亞基參加如果基因的末端含一豐富的回文結(jié)構(gòu)則不需要P亞基參加如果基因的末端含一豐富的片段則對(duì)轉(zhuǎn)錄終止最為有效需要P因子以外的酶.下列關(guān)于大腸桿菌連接酶的敘述哪些是正確的:.催化雙螺旋結(jié)構(gòu)之?dāng)嚅_(kāi)的鏈間形成磷酸二酯鍵.催化兩條游離的單鏈分子間形成磷酸二酯鍵產(chǎn)物中不含需要作能源下列關(guān)于真核細(xì)胞的敘述不正確的是:它是從細(xì)胞核的前體一核不均生成的在其鏈的端有甲

10、基鳥(niǎo)苷,在其,端連有多聚腺苷酸的尾巴它是從前通過(guò)剪接酶切除內(nèi)含子連接外顯子而形成的是單順?lè)醋拥?四)是非判斷題()中心法則概括了在信息代謝中的主導(dǎo)作用。()原核細(xì)胞復(fù)制是在特定部位起始的,真核細(xì)胞則在多個(gè)位點(diǎn)同時(shí)起始進(jìn)行復(fù)制。()逆轉(zhuǎn)錄酶催化指導(dǎo)的合成不需要引物。()原核細(xì)胞和真核細(xì)胞中許多都是多順?lè)醋愚D(zhuǎn)錄產(chǎn)物。()因?yàn)閮蓷l鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?,在雙向復(fù)制中一條鏈按的方向合成,另一條鏈按的方向合成。()限制性內(nèi)切酶切割的片段都具有粘性末端。()已發(fā)現(xiàn)一些前體分子具有催化活性,可以準(zhǔn)確地自我剪接,被稱為核糖酶(),或稱核酶。()重組修復(fù)可把損傷部位徹底修復(fù)。()原核生物中一般不需要轉(zhuǎn)錄后加工。(),聚

11、合酶對(duì)弱終止子的識(shí)別需要專(zhuān)一的終止因子如蛋白)()原核細(xì)胞啟動(dòng)子中聚合酶牢固結(jié)合并打開(kāi)雙鏈的部分稱為真核細(xì)胞啟動(dòng)子中相應(yīng)的順序稱為,因?yàn)楦缓?又稱。().增強(qiáng)子()是真核細(xì)胞上一類(lèi)重要的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)元件,它們自己并沒(méi)有啟動(dòng)子活性,卻具有增強(qiáng)啟動(dòng)子活性轉(zhuǎn)錄起始的效能。(五)問(wèn)答題.簡(jiǎn)述中心法則。復(fù)制的基本規(guī)律?簡(jiǎn)述復(fù)制的過(guò)程?簡(jiǎn)述復(fù)制時(shí)酶系。簡(jiǎn)述原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的聚合酶有何不同?簡(jiǎn)述轉(zhuǎn)錄的過(guò)程?.簡(jiǎn)述基因工程過(guò)程。參考答案(一)名詞解釋.半保留復(fù)制:雙鏈DNA的復(fù)制方式,其中親代鏈分離,每一子代DNA分子由一條親代鏈和一條新合成的鏈組成。.不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄:轉(zhuǎn)錄通常只在DNA的任一條鏈上進(jìn)行,這稱為不對(duì)

12、稱轉(zhuǎn)錄。.逆轉(zhuǎn)錄:Temin和Baltimore各自發(fā)現(xiàn)在RNA腫瘤病毒中含有RNA指導(dǎo)的DNA聚合酶,才證明發(fā)生逆向轉(zhuǎn)錄,即以RNA為模板合成DNA。.岡崎片段:一組短的DNA片段,是在DNA復(fù)制的起始階段產(chǎn)生的,隨后又被連接酶連接形成較長(zhǎng)的片段。在大腸桿菌生長(zhǎng)期間,將細(xì)胞短時(shí)間地暴露在氚標(biāo)記的胸腺嘧啶中,就可證明岡崎片段的存在。岡崎片段的發(fā)現(xiàn)為DNA復(fù)制的科恩伯格機(jī)理提供了依據(jù)。.復(fù)制叉:復(fù)制DNA分子的Y形區(qū)域。在此區(qū)域發(fā)生鏈的分離及新鏈的合成。.領(lǐng)頭鏈:DNA的雙股鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?,一條鏈?zhǔn)?/3/方向,另一條是3/-5/方向,上述的起點(diǎn)處合成的領(lǐng)頭鏈,沿著親代DNA單鏈的3/-5/方向

13、(亦即新合成的DNA沿5/-3/方向)不斷延長(zhǎng)。所以領(lǐng)頭鏈?zhǔn)沁B續(xù)的。.隨后鏈:已知的DNA聚合酶不能催化DNA鏈朝3/-5/方向延長(zhǎng),在兩條親代鏈起點(diǎn)的3/端一側(cè)的DNA鏈復(fù)制是不連續(xù)的,而分為多個(gè)片段,每段是朝5/-3/方向進(jìn)行,所以隨后鏈?zhǔn)遣贿B續(xù)的。.有意義鏈:即華森鏈,華森一一克里格型DNA中,在體內(nèi)被轉(zhuǎn)錄的那股DNA鏈。簡(jiǎn)寫(xiě)為Wstrand。.光復(fù)活:將受紫外線照射而引起損傷的細(xì)菌用可見(jiàn)光照射,大部分損傷細(xì)胞可以恢復(fù),這種可見(jiàn)光引起的修復(fù)過(guò)程就是光復(fù)活作用。.重組修復(fù):這個(gè)過(guò)程是先進(jìn)行復(fù)制,再進(jìn)行修復(fù),復(fù)制時(shí),子代DNA鏈損傷的對(duì)應(yīng)部位出現(xiàn)缺口,這可通過(guò)分子重組從完整的母鏈上,將一段相

14、應(yīng)的多核苷酸片段移至子鏈的缺口處,然后再合成一段多核昔酸鍵來(lái)填補(bǔ)母鏈的缺口,這個(gè)過(guò)程稱為重組修復(fù)。.內(nèi)含子:真核生物的mRNA前體中,除了貯存遺傳序列外,還存在非編碼序列,稱為內(nèi)含子。.外顯子:真核生物的mRNA前體中,編碼序列稱為外顯子。.基因載體:外源DNA片段(目的基因)要進(jìn)入受體細(xì)胞,必須有一個(gè)適當(dāng)?shù)倪\(yùn)載工具將帶入細(xì)胞內(nèi),并載著外源DNA一起進(jìn)行復(fù)制與表達(dá),這種運(yùn)載工具稱為載體。.質(zhì)粒:是一種在細(xì)菌染色體以外的遺傳單元,一般由環(huán)形雙鏈DNA構(gòu)成,其大小從1200Kb。(二)、填空題答案1.領(lǐng)頭鏈;連續(xù)的;隨從鏈;不連續(xù)的;5,;RNA;53,。2NAD+;ATP。32;2;4有意義鏈。

15、5反向轉(zhuǎn)錄;逆轉(zhuǎn)錄酶。6.不作用;不作用;不作用;Up+Gp+Cp+A;UpGp+CpA;GpCp+Up+A;7轉(zhuǎn)換;顛換;插入;缺失。8氨基;酮基;轉(zhuǎn)換。9.5310連續(xù)相同不連續(xù)相反11.利福平dNTP.5,-3聚合3-5外切5-3外切焦磷酸解作用,焦磷酸交換作用.拓樸異構(gòu)酶使超螺旋DNA變?yōu)樗神Y狀.復(fù)制位點(diǎn)多位點(diǎn).3,-5核酸外切酶校對(duì).3DNA聚合酶田DNA聚合酶.專(zhuān)一的核酸內(nèi)切酶解鏈酶DNA聚合酶DNA連接酶.SSB(單鏈結(jié)合蛋白).RNA引物DNA聚合酶田DNA聚合酶DNA連接酶.同一RNA聚合酶3RNA聚合酶RNA聚合酶RNA聚合酶田.啟動(dòng)子編碼終止子.隔裂基因外顯子內(nèi)含子外顯子

16、內(nèi)含子23組非組非組1(A)DNA半保留復(fù)制需要來(lái)自親代的每一條標(biāo)記鏈作模板合成互補(bǔ)鏈,以保持與親代相同的完整結(jié)構(gòu)。因此,在無(wú)記溶液中進(jìn)行第一輪復(fù)制將產(chǎn)生兩個(gè)半標(biāo)記分子。第二輪復(fù)制將產(chǎn)生兩個(gè)半標(biāo)記分子和兩個(gè)不帶標(biāo)記的雙鏈DNA分子。(E)在DNA真正能夠開(kāi)始復(fù)制之前,必須由解鏈酶使DNA雙鏈結(jié)構(gòu)局部解鏈。在每股單鏈DNA模板上,由RNA聚合酶(引物酶)催化合成一小段(大約1050個(gè)核苷酸)互補(bǔ)RNA引物。然后由DNA聚合酶HI向引物3,端加入脫氧核苷一5,一三磷酸,從5,3,方向合成DNA片段(岡崎片段),直至另一RNA引物的5,末端。接著在DNA聚合酶的作用下將RNA引物從5,端逐步降解除去

17、與之相鄰的DNA片段由3,端延長(zhǎng),以填補(bǔ)RNA除去后留下的空隙。最后由DNA連接酶將DNA片段連接成完整連續(xù)的DNA鏈。(D)DNA復(fù)制三代后,每八個(gè)完整DNA雙鏈中將有兩個(gè)雙鏈分子含有一股親代鏈。(E)DNA是由DNA聚合酶HI復(fù)合體復(fù)制的。該酶催化脫氧三磷酸核苷以核苷酸的形式加到RNA引物鏈上,選擇只能與親鏈DNA堿基互補(bǔ)配對(duì)的核苷酸參入。參入的第一個(gè)脫氧核苷酸以共價(jià)的磷酸二酯鍵與引物核苷酸相連。鏈的生長(zhǎng)總是從5,向3,延伸的。DNA復(fù)制開(kāi)始于特異起始點(diǎn),定點(diǎn)雙向進(jìn)行。(A)DNA復(fù)制必需胸腺嘧啶(T)與腺嘌呤(A)配對(duì),鳥(niǎo)嘌呤(G)與胞嘧啶(C)配對(duì),從而使雙螺旋兩鏈之間部分地靠氨基與酮

18、基間形成的氫鍵維系起來(lái)。鏈本身是反向平行方向合成的,即題中所述之磷酸二酯鍵的5,-3,順序決定其沿35方向互補(bǔ)。(B)DNA聚合酶在起聚合酶作用時(shí)必需要有模板和引物。這個(gè)一條肽鏈的蛋白質(zhì)除聚合酶活性外還具有3,和5外切核酸酶活性。在正常DNA復(fù)制時(shí),它的作用是水解RNA引物鏈(5,-3,外切核酸酶活性)并用模板指導(dǎo)的脫氧核苷酸取代它們(聚合功能)。DNA聚合酶也參與DNA修復(fù)。例如在切除胸腺嘧啶二聚體中起5,-3,外切核酸酶的作用。在正常DNA復(fù)制時(shí),DNA聚合酶表現(xiàn)3,外切核酸酶活性,切除錯(cuò)誤參入的脫氧核苷酸殘基。岡崎片段是由DNA聚合酶HI復(fù)合體產(chǎn)生的,而不是DNA聚合酶。在除去RNA引物

19、鏈后,DNA片段通過(guò)DNA連接酶連接。DNA聚合酶其功能目前還不清楚,一些細(xì)菌突變體,雖無(wú)DNA聚合酶但卻能正常生長(zhǎng)。DNA聚合酶則是正常生長(zhǎng)所必需的。(B)真核生物中有三種DNA聚合酶,ap及Y。DNApola在細(xì)胞核DNA復(fù)制中起作用;DNApolp在細(xì)胞核DNA修復(fù)中起作用;而DNApolY則在線粒體DNA復(fù)制中起作用。它們都需要引物,都用脫氧三磷酸核苷作底物,都按5,-3方向合成新生DNA鏈。真核生物DNA聚合酶任何一種均不表現(xiàn)核酸酶活性。(B)DNA復(fù)制時(shí),如果兩股鏈按5,-3方向先合成短的DNA片段,然后再連接成連續(xù)的鏈,這就能使DNA的兩條反向互補(bǔ)鏈能夠同時(shí)按5-3,方向的聚合機(jī)

20、制進(jìn)行復(fù)制。岡崎首先從大腸桿菌中分離出正在復(fù)制的新生DNA,并發(fā)現(xiàn)這新生DNA是由一些不連續(xù)片段(岡崎片段)所組成。在大腸桿菌生長(zhǎng)期間,將細(xì)胞短時(shí)間地暴露在氚標(biāo)記的胸腺嘧啶中,在將細(xì)胞DNA變性處理(也就是解鏈)之后,岡崎分離得到了標(biāo)記的DNA片段。它們是單鏈的,并且由于DNA聚合酶HI復(fù)合體用RNA作引物,因此新生岡崎片段以共價(jià)鍵連著小段RNA鏈,但它們既不是堿基互補(bǔ)的RNADNA雙鏈雜合體,也不是來(lái)自親鏈的片段。新生岡崎片段決不會(huì)被核酸酶切除。(D)DNA鏈內(nèi)胸腺嘧啶二聚體可因紫外線(UV)照射而形成。專(zhuān)一的修復(fù)系統(tǒng)依賴UV特異的內(nèi)切核酸酶,它能識(shí)別胸腺嘧啶二聚體,并且通常在二聚體5,側(cè)切

21、斷磷酸二酯鍵從而在DNA鏈內(nèi)造成一個(gè)缺口。損傷序列的切除以及用完整的互補(bǔ)鏈作為模板重新合成切去的片段都是由DNA聚合酶來(lái)完成的。主鏈與新合成片段之間的裂口則由DNA連接酶接合。堿基缺失、插入、甲基化,或烷基化均不能作為切除修復(fù)體系靶子而為UV特異性內(nèi)切核酸酶所識(shí)別。(C)DNA連接酶能夠連接留有缺口的DNA鏈或閉合單股DNA鏈以形成環(huán)狀DNA分子。該酶需要一股鏈末端的游離3/-OH和另一股鏈末端的5/-磷酸,并且要求這兩股鏈?zhǔn)请p鏈DNA的一部分。反應(yīng)是吸能的,因此需要能源。在大腸桿菌和其它細(xì)菌中,能源是NAD+分子中的焦磷酸鍵。NAD+先與酶形成酶一AMP復(fù)合物,同時(shí)釋放叮NAD的尼克酰胺單核

22、苷酸;酶一AMP復(fù)合物上的AMP再轉(zhuǎn)移到DNA鏈的5/-磷酸基上,使其活化,然后形成磷酸二酯鍵并釋放AMP。(E)RNA聚合酶和DNA聚合酶都是以三磷酸核苷(NTP或dNTP)為其底物,這兩種聚合酶都是在生長(zhǎng)中的多核苷酸鏈的3,端加接核苷酸單位。DNA聚合酶合成與DNA互補(bǔ)的DNA。合成與RNA互補(bǔ)的DNA的酶稱作逆轉(zhuǎn)錄酶。(B)紫外線(260nm)照射可引起DNA分子中同一條鏈相鄰胸腺嘧啶之間形成二聚體,并從該點(diǎn)終止復(fù)制。該二聚體可由包括連接酶在內(nèi)的酶系切除和修復(fù),或在光復(fù)合過(guò)程中,用較長(zhǎng)(330450nm)或較短(230nm)波長(zhǎng)的光照射將其分解。(E)DNA鏈中插入一個(gè)額外核苷酸會(huì)引起移

23、碼突變并使突變點(diǎn)以后轉(zhuǎn)錄的全部mRNA發(fā)生翻譯錯(cuò)誤。題中列出的所有其它突變通常僅引起一個(gè)氨基酸的錯(cuò)誤(如題中的A或B),或從氨基酸序列中刪除一個(gè)氨基酸(D),或在氨基酸順序中完全沒(méi)有錯(cuò)誤。需要指出的是,如果A或B突變導(dǎo)致生成“無(wú)意義”或鏈終止密碼子,則這種突變所造成的后果也會(huì)象移碼突變那樣是致死的。(E)在Hbs中,B鏈上一個(gè)纈氨酸殘基替換了谷氨酸,這是由于一個(gè)核苷酸堿基的點(diǎn)突變所造成的后果。即位于三聯(lián)體第二位的胸腺嘧啶轉(zhuǎn)換為腺嘌呤。(A)自發(fā)點(diǎn)突變多半是由于嘌呤或嘧啶堿中氫原子的互變異構(gòu)移位而引起的。在DNA復(fù)制中,這種移位會(huì)引起堿基配對(duì)的改變。某些誘變劑如5溴尿嘧啶和2氨基嘌呤可促進(jìn)DNA

24、堿基的互變異構(gòu)。(A)吖啶衍生物可導(dǎo)致一個(gè)堿基對(duì)的插入或缺失,從而引起移碼突變。5溴尿嘧啶可引起轉(zhuǎn)換突變,因?yàn)殇迦〈诵叵汆奏さ募谆?,這樣則增加了烯醇式互變異構(gòu)物與鳥(niǎo)嘌呤而不是腺嘌呤進(jìn)行堿基配對(duì)的可能性。咪唑硫嘌呤可轉(zhuǎn)變?yōu)?巰基嘌呤,后者是嘌呤的類(lèi)似物。乙基乙磺酸可通過(guò)使鳥(niǎo)嘌呤烷基化引起轉(zhuǎn)換突變。(D)5溴尿嘧啶可代替胸腺嘧啶參入到DNA中,從而產(chǎn)生密度較高的DNA。然后可在氯化銫密度梯度中用離心法對(duì)新合成的DNA進(jìn)行定量分析。DNA中的5溴尿嘧啶較正常胸嘧啶既不更活潑又不更易被斷裂,也不能象吖啶染料那樣引起移碼突變。(B)RNA聚合酶必須以DNA為模板催化合成RNA,通常只轉(zhuǎn)錄雙螺旋DNA其

25、中的一條鏈。RNA鏈的合成方向是從5,到3,端,產(chǎn)物從來(lái)沒(méi)有環(huán)狀分子。與DNA聚合酶不同,RNA聚合酶不需要引物。(A)O因子是RNA聚合酶的一個(gè)亞基,O因子本身沒(méi)有催化功能,它的作用是與核心酶結(jié)合,對(duì)轉(zhuǎn)錄的起始特異性起決定性的作用。在有。因子的情況下,RNA聚合酶將選擇DNA準(zhǔn)備轉(zhuǎn)錄的那條鏈,并在適當(dāng)?shù)膯?dòng)基因部位開(kāi)始轉(zhuǎn)錄。(B)真核生物有三種RNA聚合酶,它們分別催化45SrRNA(RAN聚合酶)mRNA和SnRNA(RNA聚合酶),以及tRNA和5SrRNA(RNA聚合酶山)的合成。這三種酶可以根據(jù)它們對(duì)抗生素a一鵝膏蕈堿的敏感度不同加以區(qū)別:RNA聚合酶耐受;RNA聚合酶極敏感;RNA

26、聚合酶田中等敏感。RNA聚合酶催化合成的45S原始轉(zhuǎn)錄本,經(jīng)轉(zhuǎn)錄后加工而成為成熟的18SrRNA,5.8SrRNA和28SrRNA。(D)真核生物DNA在多個(gè)復(fù)制叉上按半保留方式復(fù)制。真核生物有三種DNA聚合酶:a、B及Y。分別參加細(xì)胞核DNA復(fù)制,細(xì)胞核DNA修復(fù),以及線粒體DNA復(fù)制。真核生物DNA聚合酶一般都不具有核酸酶活性。真核DNA復(fù)制時(shí),組蛋白不從DNA解離下來(lái),而是留在含有領(lǐng)頭子鏈的雙鏈DNA上。新合成的組蛋白則與隨從子鏈結(jié)合。(C)原核細(xì)胞轉(zhuǎn)錄終止不是隨機(jī)進(jìn)行的,據(jù)目前所知有兩種轉(zhuǎn)錄終止方式即依賴兩立游因子與不依賴Rho因子的方式。不依賴Rho因子的轉(zhuǎn)錄終止與轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物形成二級(jí)結(jié)

27、構(gòu)有關(guān),即在基因的末端含GC豐富的回文結(jié)構(gòu),當(dāng)RNA轉(zhuǎn)錄延長(zhǎng)至該部位時(shí),按模板轉(zhuǎn)錄出的RNA堿基序列會(huì)立即形成發(fā)夾型的二級(jí)結(jié)構(gòu),這種二級(jí)結(jié)構(gòu)是阻止轉(zhuǎn)錄繼續(xù)向下游推進(jìn)的關(guān)鍵。Rho因子是RNA聚合酶之外的一種蛋白質(zhì),有控制轉(zhuǎn)錄終止的作用。Rho因子本身似乎就具有ATP酶的活性。B:DNA連接酶催化DNA鏈兩段之間形成磷酸二酯鍵,但這兩段必須是在DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)之中,它不能將兩條游離的單鏈DNA分子連接起來(lái)。在大腸桿菌中,成鍵所需能量來(lái)自NAD,產(chǎn)物是AMP和煙酰胺單核苷酸;而在某些動(dòng)物細(xì)胞以及噬菌體中,則以ATP作為能源。DNA連接酶在DNA合成、修復(fù)以及重組中都是十分重要的。B:真核mRNA是

28、從2至20千堿基長(zhǎng)的細(xì)胞核RNA前體核不均一RNA(hnRNA)形成的。所有真核mRNA5,端均具有5一5,焦磷酸連接的7-甲基鳥(niǎo)苷(帽結(jié)構(gòu))。大多數(shù)真核mRNA的3,端連有150至200個(gè)核苷酸長(zhǎng)度的聚腺苷酸尾鏈。從mRNA前體切除內(nèi)含子是由具有高度專(zhuān)一性的酶性催化完成的。內(nèi)含子是不被翻譯的。真核生物mRNA是單順?lè)醋拥摹?四)是非題1.對(duì)2.對(duì)3.錯(cuò)4.錯(cuò)5.錯(cuò)6.錯(cuò)7.對(duì)8.錯(cuò)9.對(duì)10.對(duì)11.對(duì)12.對(duì)(五)問(wèn)答題答:在細(xì)胞分裂過(guò)程中通過(guò)DNA的復(fù)制把遺傳信息由親代傳遞給子代,在子代的個(gè)體發(fā)育過(guò)程中遺傳信息由DNA傳遞到RNA,最后翻譯成特異的蛋白質(zhì);在RNA病毒中RNA具有自我復(fù)制

29、的能力,并同時(shí)作為mRNA,指導(dǎo)病毒蛋白質(zhì)的生物合成;在致癌RNA病毒中,RNA還以逆轉(zhuǎn)錄的方式將遺傳信息傳遞給DNA分子。答:(1)復(fù)制過(guò)程是半保留的。(2)細(xì)菌或病毒DNA的復(fù)制通常是由特定的復(fù)制起始位點(diǎn)開(kāi)始,真核細(xì)胞染色體DNA復(fù)制則可以在多個(gè)不同部位起始。(3)復(fù)制可以是單向的或是雙向的,以雙向復(fù)制較為常見(jiàn),兩個(gè)方向復(fù)制的速度不一定相同。(4)兩條DNA鏈合成的方向均是從5向3方向進(jìn)行的。(5)復(fù)制的大部分都是半不連續(xù)的,即其中一條領(lǐng)頭鏈?zhǔn)窍鄬?duì)連續(xù)的,其他隨后鏈則是不連續(xù)的。(6)各短片段在開(kāi)始復(fù)制時(shí),先形成短片段RNA作為DNA合成的引物,這一RNA片段以后被切除,并用DNA填補(bǔ)余下

30、的空隙。答:DNA復(fù)制從特定位點(diǎn)開(kāi)始,可以單向或雙向進(jìn)行,但是以雙向復(fù)制為主。由于DNA雙鏈的合成延伸均為5,-3的方向,因此復(fù)制是以半不連續(xù)的方式進(jìn)行,可以概括為:雙鏈的解開(kāi);RNA引物的合成;DNA鏈的延長(zhǎng);切除RNA引物,填補(bǔ)缺口,連接相鄰的DNA片段。(1)雙鏈的解開(kāi)在DNA的復(fù)制原點(diǎn),雙股螺旋解開(kāi),成單鏈狀態(tài),形成復(fù)制叉,分別作為模板,各自合成其互補(bǔ)鏈。在復(fù)制叉上結(jié)合著各種各樣與復(fù)制有關(guān)的酶和輔助因子。(2)RNA引物的合成引發(fā)體在復(fù)制叉上移動(dòng),識(shí)別合成的起始點(diǎn),引發(fā)RNA引物的合成。移動(dòng)和引發(fā)均需要由ATP提供能量。以DNA為模板按5-3的方向,合成一段引物RNA鏈。引物長(zhǎng)度約為幾

31、個(gè)至10個(gè)核苷酸。在引物的5,端含3個(gè)磷酸殘基,3,端為游離的羥基。DNA鏈的延長(zhǎng)當(dāng)RNA引物合成之后,在DNA聚合酶HI的催化下,以四種脫氧核糖核苷5,-三磷酸為底物,在RNA引物的3,端以磷酸二酯鍵連接上脫氧核糖核苷酸并釋放出PPi。DNA鏈的合成是以兩條親代DNA鏈為模板,按堿基配對(duì)原則進(jìn)行復(fù)制的。親代DNA的雙股鏈呈反向平行,一條鏈?zhǔn)?-3方向,另一條鏈?zhǔn)?,5,方向。在一個(gè)復(fù)制叉內(nèi)兩條鏈的復(fù)制方向不同,所以新合成的二條子鏈極性也正好相反。由于迄今為止還沒(méi)有發(fā)現(xiàn)一種DNA聚合酶能按3,-5,方向延伸,因此子鏈中有一條鏈沿著親代DNA單鏈的35方向(亦即新合成的DNA沿5,-3方向)不斷

32、延長(zhǎng)。(4)切除引物,填補(bǔ)缺口,連接修復(fù)當(dāng)新形成的岡崎片段延長(zhǎng)至一定長(zhǎng)度,其3,-OH端與前面一條老片斷的5,斷接近時(shí),在DNA聚合酶的作用下,在引物RNA與DNA片段的連接處切去RNA引物后留下的空隙,由DNA聚合酶催化合成一段DNA填補(bǔ)上;在DNA連接酶的作用下,連接相鄰的DNA鏈;修復(fù)摻入DNA鏈的錯(cuò)配堿基。這樣以兩條親代DNA鏈為模板,就形成了兩個(gè)DNA雙股螺旋分子。每個(gè)分子中一條鏈來(lái)自親代DNA,另一條鏈則是新合成的。答:()原核細(xì)胞大腸桿菌的RNA聚合酶研究的較深入。這個(gè)酶的全酶由5種亞基(a2PP63)組成,還含有2個(gè)Zn原子。在RNA合成起始之后,6因子便與全酶分離。不含6因子

33、的酶仍有催化活性,稱為核心酶。6亞基具有與啟動(dòng)子結(jié)合的功能,P亞基催化效率很低,而且可以利用別的DNA的任何部位作模板合成RNA。加入6因子后,則具有了選擇起始部位的作用,6因子可能與核心酶結(jié)合,改變其構(gòu)象,從而使它能特異地識(shí)別DNA模板鏈上的起始信號(hào)。(2)真核細(xì)胞的細(xì)胞核內(nèi)有RNA聚合酶I、II和III,通常由46種亞基組成,并含有Zn2+。RNA聚合酶I存在于核仁中,主要催化rRNA前體的轉(zhuǎn)錄。RNA聚合酶和存在于核質(zhì)中,分別催化mRNA前體和小分子量RNA的轉(zhuǎn)錄。此外線粒體和葉綠體也含有RNA聚合酶,其特性類(lèi)似原核細(xì)胞的RNA聚合酶。5答:RNA轉(zhuǎn)錄過(guò)程為起始位點(diǎn)的識(shí)別、起始、延伸、終

34、止。(1)起始位點(diǎn)的識(shí)別RNA聚合酶先與DNA模板上的特殊啟動(dòng)子部位結(jié)合,O因子起著識(shí)別DNA分子上的起始信號(hào)的作用。在。亞基作用下幫助全酶迅速找到啟動(dòng)子,并與之結(jié)合生成較松弛的封閉型啟動(dòng)子復(fù)合物。這時(shí)酶與DNA外部結(jié)合,識(shí)別部位大約在啟動(dòng)子的-35位點(diǎn)處。接著是DNA構(gòu)象改變活化,得到開(kāi)放型的啟動(dòng)子復(fù)合物,此時(shí)酶與啟動(dòng)子緊密結(jié)合,在-10位點(diǎn)處解開(kāi)DNA雙鏈,識(shí)別其中的模板鏈。由于該部位富含A-T堿基對(duì),故有利于DNA解鏈。開(kāi)放型復(fù)合物一旦形成,DNA就繼續(xù)解鏈,酶移動(dòng)到起始位點(diǎn)。(2)起始留在起始位點(diǎn)的全酶結(jié)合第一個(gè)核苷三磷酸。第一個(gè)核苷三磷酸常是GTP或ATP。形成的啟動(dòng)子、全酶和核苷三磷酸復(fù)合物稱為三元起始復(fù)合物,第一個(gè)核苷酸摻入的位置稱為轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)。這時(shí)。亞基被釋放脫離核心酶。(3)延伸從起始到延伸的轉(zhuǎn)變過(guò)程,包括。因子由締合向解離的轉(zhuǎn)變。DNA分子和酶分子發(fā)生構(gòu)象的變化,核心酶與DNA的結(jié)合松弛,核心酶可沿模板移動(dòng),并按模板序列選擇下一個(gè)核苷酸,將核苷三磷酸加到生長(zhǎng)的RNA鏈的3-OH端,催化形成磷酸二

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