下載本文檔
版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
5/5【體外診斷試劑】試劑配方中防腐劑的選擇策略!我國(guó)診斷試劑市場(chǎng)規(guī)模為30億~40億元,約占全球市場(chǎng)的1.14%,年增長(zhǎng)速度為15%~20%,發(fā)展?jié)摿薮?。體外診斷試劑在臨床檢驗(yàn)應(yīng)用中已相當(dāng)普遍,隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,體外診斷試劑的種類越來(lái)越多,用途也越來(lái)越廣泛。在體外診斷試劑相關(guān)產(chǎn)品研發(fā)過(guò)程中,除了需要關(guān)注其準(zhǔn)確性和重復(fù)性外,研發(fā)人員同樣需要保證產(chǎn)品在保質(zhì)期內(nèi)的品質(zhì),因此防腐劑的選擇至關(guān)重要。防腐劑是一類能夠殺滅或抑制微生物生長(zhǎng)的化學(xué)物質(zhì),在液體試劑中發(fā)揮著重要的防腐作用。只有充分了解各種防腐劑的特性,才能選擇最合適的防腐劑及試劑配伍比例。作者根據(jù)防腐劑的作用機(jī)理及選擇原則,簡(jiǎn)述了疊氮鈉、慶大霉素、硫柳汞、異噻唑啉酮類等防腐劑在體外診斷試劑中的性能對(duì)比及應(yīng)用范圍,以期幫助IVD研發(fā)人員更好地選擇合適的防腐劑。1,防腐劑的作用機(jī)理及一般選擇原則防腐劑是能夠殺滅或抑制微生物,特別是細(xì)菌和真菌生長(zhǎng)的化學(xué)物質(zhì)。防腐劑不是殺菌劑,沒(méi)有很強(qiáng)的即時(shí)殺滅效果,只有在足夠濃度并與微生物直接接觸的情況下才能發(fā)揮作用。防腐劑通過(guò)作用于微生物的細(xì)胞膜、細(xì)胞壁及酶等多個(gè)靶點(diǎn),破壞細(xì)胞的分裂,抑制微生物的生長(zhǎng)和繁殖,達(dá)到防腐的目的。實(shí)際上,防腐劑主要是對(duì)酶活力或?qū)?xì)胞原生質(zhì)部分的遺傳微粒結(jié)構(gòu)產(chǎn)生影響的。例如,硫柳汞作用于巰基酶,而慶大霉素則作用于核糖體。總之,防腐劑是通過(guò)抑制細(xì)胞中基礎(chǔ)代謝酶的合成或重要生命物質(zhì)核酸和蛋白質(zhì)的合成,起到阻礙細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。防腐劑的種類很多,如酸堿及其鹽類、中性化合物類、汞化合物類、季胺化合物類等。防腐劑對(duì)微生物繁殖體有殺滅作用,但對(duì)芽孢則使其不能發(fā)育為繁殖體而逐漸死亡。不同類型的防腐劑其作用機(jī)理也不盡相同,如醇類能使病原微生物蛋白質(zhì)變性;苯甲苯酸、尼泊金類等則能與病原微生物酶系統(tǒng)結(jié)合,競(jìng)爭(zhēng)其輔酶;陽(yáng)離子表面活性劑等則是通過(guò)降低表面張力作用,增加菌體細(xì)胞膜的通透性。優(yōu)良的防腐劑應(yīng)具備以下特性:①加入防腐劑應(yīng)能有效抑制在試劑盒制備、保存和使用過(guò)程中最有可能污染的一種或多種微生物的生長(zhǎng);防腐劑應(yīng)對(duì)大多數(shù)細(xì)菌、真菌及酵母有較強(qiáng)的抑制作用;②防腐劑在試劑中有足夠的溶解度,以保證其在兩相或多相體系的試劑中具有足夠濃度;③在試劑盒的有效期內(nèi),防腐劑應(yīng)非常穩(wěn)定,不會(huì)因化學(xué)降解或揮發(fā)而降低濃度;防腐劑本身的理化性質(zhì)和抗微生物性質(zhì)應(yīng)穩(wěn)定,不易受熱和樣品pH值的影響,在長(zhǎng)期貯存時(shí)不分解失效、不揮發(fā),不沉淀,不與包裝材料起作用;④防腐劑不與試劑盒中的任何成分發(fā)生反應(yīng),不會(huì)影響試劑盒的檢測(cè)效果或防腐劑的效果;⑤使用成本低,容易獲得。2,常用防腐劑的特性2.1疊氮鈉(sodiumazide,NaN3)疊氮鈉是體外診斷試劑中最常用的防腐劑之一,可抑制細(xì)菌生長(zhǎng),溶于水、液氨,不溶于乙醚,微溶于乙醇,用量一般為0.1%~0.5%。多數(shù)情況下行之有效,但由于其含有氨基,會(huì)干擾辣根過(guò)氧化物酶(HRP)、超氧化物歧化酶、觸酶等多種酶,所以一般含有HRP的試劑都不建議使用。同理,一般不用于抗體及酶免實(shí)驗(yàn)中的標(biāo)本保存。另外,它能阻斷細(xì)胞的電子傳遞鏈,對(duì)許多生物體都有毒性,因此也不適用于活體實(shí)驗(yàn)。同時(shí),疊氮鈉與氰化物相似,屬于劇毒化合物,半數(shù)致死量為27mg/kg(大鼠,經(jīng)口),對(duì)細(xì)胞色素氧化酶和其他酶有抑制作用,并能使體內(nèi)氧合血紅蛋白形成受阻,有顯著的降壓作用。急性中毒出現(xiàn)頭暈、頭痛、全身無(wú)力、血壓下降、心動(dòng)過(guò)緩和昏迷。除對(duì)眼和皮膚有刺激性外,還可經(jīng)吸入、口服或皮膚吸收引起中毒死亡,而且遇高熱或劇烈震動(dòng)能強(qiáng)烈爆炸,使用時(shí)應(yīng)十分注意安全。出于安全方面的考慮,疊氮鈉的使用日益受限。2.2硫柳汞(thiomersalatum,C9H9O2HgNaS)硫柳汞作為防腐劑已有60多年歷史,曾廣泛用于生物制品中的疫苗及體外診斷試劑。硫柳汞稍有特殊臭味,微有引濕性,遇光易變質(zhì),易溶于水、乙醇,不溶于乙醚和苯,用量為0.001%~0.01%。它對(duì)革蘭陽(yáng)性和陰性菌均有很強(qiáng)的抑菌能力,為廣譜抑菌劑。其作用機(jī)理為重金屬離子與菌體中酶蛋白的巰基結(jié)合而使酶失去活性,但對(duì)細(xì)菌抗原和血清蛋白的損害極其微弱,不能與酸、碘、鋁等重金屬鹽或生物堿配伍。硫柳汞為含汞化學(xué)物質(zhì),汞含量占到分子質(zhì)量的50%,代謝或降解產(chǎn)物為乙基汞和硫代水楊酸鹽,乙基汞是由二甲基汞降解的有機(jī)汞。由于少量有機(jī)汞在理論上具有神經(jīng)毒性,因此硫柳汞的使用安全問(wèn)題深受人們關(guān)注。2.3慶大霉素(gentamicin,C21H43N5O7)慶大霉素是由絳紅小單孢菌、棘孢小單孢菌等發(fā)酵產(chǎn)生的氨基糖苷類抗生素,是由22-脫氧鏈霉胺、絳紅糖胺、加拉糖胺組成的多組分混合物,并以C族復(fù)合物為主。其作用機(jī)理是直接與30S核糖體亞單位16SrRNA解碼區(qū)的A部位結(jié)合,從而導(dǎo)致菌體死亡。它的抗菌譜較廣,對(duì)綠膿桿菌、大腸桿菌、產(chǎn)氣桿菌、克雷伯桿菌、奇異變形桿菌、某些吲哚變形桿菌、某些奈瑟菌、某些無(wú)色素雷桿菌和志賀菌等革蘭陰性菌有抗菌作用,對(duì)革蘭陽(yáng)性菌中的金黃色葡萄球菌也有很強(qiáng)的抗菌作用。但抗生素的缺點(diǎn)是容易產(chǎn)生耐藥性,Jakobsen等[6]曾報(bào)道了120株對(duì)慶大霉素耐藥的大腸埃希菌的最小抑菌濃度(MIC)和耐藥機(jī)制的關(guān)系。2.4異噻唑啉酮類(isothiazolinones)異噻唑啉酮類防腐劑商品化產(chǎn)品主要有Kathon和Proclin,是2種異噻唑啉酮類化合物的混合物,并含有一定量的硝酸鎂及氯化鎂。此類防腐劑是非常高效的防腐劑,對(duì)各種細(xì)菌、霉菌、酵母及藻類有很強(qiáng)的抑制作用,使用濃度為0.1%~0.02%(活性成分約為1.5%)。其作用機(jī)理為2種活性成分在與細(xì)胞膜接觸幾分鐘后,可立即滲透到膜內(nèi)并抑制細(xì)胞內(nèi)酶的活性,從而抑制細(xì)胞生長(zhǎng)代謝、大分子合成,引起細(xì)胞內(nèi)能量水平迅速下降;由于能量體系的崩潰,細(xì)胞不能合成日常代謝所需要的化合物,從而導(dǎo)致菌體死亡。這類防腐劑能與氯及大多數(shù)陰、陽(yáng)離子及非離子表面活性劑混溶,且在較高的使用濃度下不會(huì)影響酶活性。pH適用范圍廣(pH2~8.5),化學(xué)穩(wěn)定性好。經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),在25℃下保存2年,該防腐劑的活性組分僅損失3%,與水可以任意比混合。Proclin系列防腐劑具有多標(biāo)靶作用位點(diǎn),因此大大降低了因變異產(chǎn)生的微生物的耐藥性,是一種理想的可替代硫柳汞、疊氮化鈉和慶大霉素的生物防腐劑。但遇銨、亞硫酸鹽、強(qiáng)還原劑和強(qiáng)堿性會(huì)降低其活性,在過(guò)量使用下有一定的刺激性和致敏性。3,總結(jié)在ELISA等體外診斷試劑研
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 人人文庫(kù)網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 《人的正確思想是從哪里來(lái)的?》課件 2023-2024學(xué)年統(tǒng)編版高中語(yǔ)文選擇性必修中冊(cè)
- 2025屆吉林省延邊高三第三次模擬考試數(shù)學(xué)試卷含解析
- 湖北省襄州一中棗陽(yáng)一中等四校2025屆高考仿真卷英語(yǔ)試題含解析
- 云南省楚雄市古城二中2025屆高考適應(yīng)性考試語(yǔ)文試卷含解析
- 2025屆廣東省汕頭市六都中學(xué)高三最后一卷語(yǔ)文試卷含解析
- 專題02 單項(xiàng)選擇(同義替換)50題(原卷版)-2024-2025學(xué)年七年級(jí)英語(yǔ)上學(xué)期期末名校真題進(jìn)階練(深圳專用)
- 吉林省延邊二中2025屆高考考前提分?jǐn)?shù)學(xué)仿真卷含解析
- 浙江省溫州市示范名校2025屆高三第三次測(cè)評(píng)語(yǔ)文試卷含解析
- 2025屆山東省濟(jì)南市外國(guó)語(yǔ)學(xué)校高考仿真卷語(yǔ)文試題含解析
- 重慶市大學(xué)城第一中學(xué)2025屆高考數(shù)學(xué)二模試卷含解析
- 1神州謠 課件(共50張PPT)
- 國(guó)家開放大學(xué)思想道德與法治社會(huì)實(shí)踐作業(yè)集合6篇
- 小學(xué)侵害未成年人強(qiáng)制報(bào)告制度
- 2023年飛行員基礎(chǔ)知識(shí)考試題庫(kù)(500題版)
- 公租房運(yùn)營(yíng)管理服務(wù)投標(biāo)方案
- 能源管理系統(tǒng)EMS用戶需求說(shuō)明書
- 人工智能對(duì)中學(xué)教學(xué)的影響與應(yīng)對(duì)策略
- 2668-人員招聘與培訓(xùn)實(shí)務(wù)
- 閉合導(dǎo)線自動(dòng)計(jì)算表
- 股權(quán)投資基金(有限合伙)設(shè)立、投資及退出交易安排法律意見書
- 分管學(xué)校安全、德育、后勤等業(yè)務(wù)副校長(zhǎng)述職報(bào)告
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論