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文檔簡介
法醫(yī)物證(wùzhèng)檢驗熊小明瀘州(lúzhōu)醫(yī)學院病理學教研室第一頁,共一百零一頁。第一節(jié)
概述第二頁,共一百零一頁。物證(materialevidence):對案件的真實情況有證明作用的物品或痕跡。法醫(yī)物證:主要指與人體有關的生物性檢材。包括人體組織與器官、體液、分泌物、排泄物及由它們形成的斑痕,如血液、精液、唾液、骨骼(gǔgé)、牙齒、毛發(fā)、肌肉、皮膚、粘膜等。物證檢驗(examinationofmaterialevidence):為了偵破或審理案件,對與案件有關的物證進行檢驗鑒定的過程。一、概念(gàiniàn)第三頁,共一百零一頁。其他名稱和涉及領域:法醫(yī)(fǎyī)血清學(forensicserology)法醫(yī)血型血清學(forensicbloodgroupserology)法醫(yī)血液遺傳學(forensichematogenetics)法醫(yī)遺傳學(forensicgenetics)法醫(yī)生物學(forensicbiology)法醫(yī)人類學(forensicanthropology)法醫(yī)昆蟲學(forensicentomology)以法醫(yī)(fǎyī)物證為研究對象,以提供科學證據為目的。研究應用生命科學技術解決案件中與人體有關的生物檢材鑒定的一門學科。法醫(yī)(fǎyī)物證學(ScienceofMedico-legalPhysicalEvidence)
第四頁,共一百零一頁。二、法醫(yī)物證(wùzhèng)的特點法醫(yī)物證的穩(wěn)定性受環(huán)境影響法醫(yī)物證屬于“科學證據”--是查明案件事實的依據(案件重現(xiàn))--是審查其他證據的手段(shǒuduàn)(客觀可靠邏輯性)第五頁,共一百零一頁?!拔镒C不怕恫嚇,物證不會遺忘,物證不會受外界影響而情緒激動?!趯徟羞^程中,被告人會說謊,證人會說謊,辯護律師和檢查官會說謊,甚至法官(fǎguān)也會說謊,惟有物證不會說謊?!?美)郝伯特?麥克唐奈讓證據(zhèngjù)說話。(美)李昌鈺第六頁,共一百零一頁。三、基本(jīběn)技術物理、化學方法(fāngfǎ)計算機技術形態(tài)學方法免疫血清學方法生物化學方法分子生物學方法遺傳學方法第七頁,共一百零一頁。四、基本(jīběn)任務個人(gèrén)識別(personalidentification)親子鑒定(parentagetesting)第八頁,共一百零一頁。五、法醫(yī)(fǎyī)物證檢材的提取、包裝、保存和送檢檢材的特點
法醫(yī)物證檢材包括人體(réntǐ)各種體液與組織。具有容易變性、變質、降解和腐敗的特點。第九頁,共一百零一頁。檢材的發(fā)現(xiàn)及采集
全面仔細搜尋十分必要(勘查、嫌疑人檢查、搜查)。原位拍照、測量、繪圖(huìtú)等記錄原始狀態(tài)。
“我歸納了七種簡單方法:站著看、彎腰看、腰彎深一點看、蹲著看、跪著看、坐著看、各種方法綜合(zōnghé)起來看。”第十頁,共一百零一頁。第十一頁,共一百零一頁。檢材提取以不損失、不污染、不破壞檢材的可檢測性為基本原則。禁止用手直接觸摸(chùmō)檢材。凡是從各種載體上提取檢材,均應提取檢材附近材料做空白對照。各種體液性檢材應在陰涼通風處干燥,勿加熱烘干和曬干。第十二頁,共一百零一頁。擦拭(cāshì)--適宜大部分載體刮--磚、白灰墻、土墻削--樹木、朽木剪--被褥、大窗簾等紡織品粘--膠紙--玻片上洗--實驗室--不吸水的載體冰雪--紗布--晾干沙土--用鑷子撿噴濺血--分別提取包裝①尸體(shītǐ)血②現(xiàn)場(xiànchǎng)血常見檢材的提取方法第十三頁,共一百零一頁。③精斑--同時應提取被害人唾液、血液--做對照④毛發(fā)--室內現(xiàn)場應注意毛發(fā)與案件是否有關,不同部位的毛應分別包裝(bāozhuāng)⑤唾液斑--水杯沿、煙蒂(逐個提取,分別包裝)第十四頁,共一百零一頁。包裝、保存和送檢每件檢材必須單獨包裝,包裝物干凈無污染,標記。專人負責保存,物證檢材袋應加密封口。①各種斑跡均應經干燥處理(晾干保存),防止霉變;②不能及時送檢時需冷凍保存;③檢材應在原辦案單位保存到案件審理終結后1~2年。檢材應及時送到實驗室鑒定(①送檢單位、送檢人姓名;②案情簡介;③送檢物品(wùpǐn)清單--對照;④鑒定目的和要求;⑤送檢日期、復函地址、郵編、聯(lián)系電話)。第十五頁,共一百零一頁。六、血痕(xuèhén)檢驗(一)血痕檢驗需要解決的問題送檢檢材是否是血痕。如果是血痕,是人血還是動物血。若是人血,則測定遺傳標記進行個人識別。同時(tóngshí)進行其他諸如出血量、出血時間及出血部位推斷等問題。第十六頁,共一百零一頁。肉眼檢查預試驗確證試驗種屬鑒定血痕的個人識別(遺傳(yíchuán)標記測定以及性別鑒定)其他檢驗(出血部位、出血量、血痕陳舊度等)(二)血痕檢驗(jiǎnyàn)的步驟第十七頁,共一百零一頁。1、肉眼(ròuyǎn)檢查
肉眼檢查主要觀察血痕的數(shù)量、分布、位置、大小、形狀、范圍、色澤、它們的相互關系以及它們與現(xiàn)場其他物品的相互關系。
目的:推斷死亡時間、死亡原因以及案件(ànjiàn)發(fā)生經過等等。第十八頁,共一百零一頁。部位:1.室外(shìwài):泥土、草叢
2.室內:地面、墻壁、家俱、被褥、蚊帳
3.嫌疑人身體
4.嫌疑人衣帽
5.可疑兇器斧錘類剪刀類折疊式刀類頭發(fā)(tóufa)間指甲縫縫隙(fèngxì)處:第十九頁,共一百零一頁。顏色:鮮紅色→暗紅色→紅褐色→褐色→綠褐色→灰褐色腐敗--淡綠褐色、污綠色區(qū)別--醬油、油漆(yóuqī)、色素、顏料、染料第二十頁,共一百零一頁。形狀:①滴狀:因高度及方向而異;同等量血液落下時,落差越高,形成的斑點越大,周緣的小突起也越多。鋸齒狀突起指示行走方向,突起大小多少--行走速度②流柱狀:血液從身體高位流向低位時形成,一般由靜脈出血引起--體位③噴濺狀:似感嘆號,尖端是噴射方向--受傷時位置④擦拭狀:染有血液的物體或出血部位與其他物體接觸磨擦(mócā)后形成--死后移尸⑤血印痕:染有血液的部位直接與某物體接觸形成。
血指紋、血掌紋、血鞋印、血足印、兇器印痕⑥血泊:原始現(xiàn)場第二十一頁,共一百零一頁。范圍:取決于出血量。出血量常與死亡(sǐwáng)原因及受傷后存活時間等有關。雨淋日曬洗滌細菌(xìjūn)深色衣物有色物質--油漆、顏料、醬料、泥土動物血痕影響(yǐngxiǎng)因素第二十二頁,共一百零一頁。2、預試驗(shìyàn)目的:要從大量可疑血痕中篩除不是血痕的檢材。原理:血痕中的血紅蛋白或正鐵血紅素具有過氧化物酶活性,能使過氧化氫分解成水和新生態(tài)氧,后者使加入的化學物質氧化成有色物質。方法:聯(lián)苯胺試驗、酚酞試驗等。意義:篩選試驗(陽性(yángxìng)--可能是血痕;陰性--否定血痕/血痕已被完全破壞)。優(yōu)缺點:靈敏度高,特異性差、假陽性率高、直接破壞檢材,致癌作用。第二十三頁,共一百零一頁。聯(lián)苯胺試驗(shìyàn)方法:取微量檢材,依次(yīcì)滴加冰醋酸,聯(lián)苯胺無水乙醇飽和溶液,1~2min無藍色反應,再加3%過氧化氫,立即出現(xiàn)深藍色為陽性反應。第二十四頁,共一百零一頁。3、確證(quèzhènɡ)試驗目的:證明檢材是血痕。原理:檢測檢材中是否含有(hányǒu)血紅蛋白或其衍生物。若為陽性結果,則可以認定為血痕。方法:氯化血紅素結晶試驗,血色原結晶試驗,顯微分光鏡檢查及顯微鏡下查找血細胞。優(yōu)缺點:靈敏度不高;霉菌生長、細菌污染、洗滌、日曬后的血痕,確證試驗往往呈陰性反應。第二十五頁,共一百零一頁。血色(xuèsè)原結晶試驗原理(yuánlǐ):[OH-]正鐵血紅素變性(biànxìng)珠蛋白血紅素或吡啶、氨基酸等含氮化合物還原+血色原結晶血紅蛋白第二十六頁,共一百零一頁。血色(xuèsè)原結晶第二十七頁,共一百零一頁。氯化血紅素結晶(jiéjīng)試驗原理(yuánlǐ):血紅蛋白(xuèhóngdànbái)正鐵血紅素氯化血紅素結晶醋酸氯化鈉第二十八頁,共一百零一頁。顯微(xiǎnwēi)分光鏡檢查原理:有色物質能吸收一定波長的光線,在太陽光譜上出現(xiàn)黑色線條,稱為吸收線。血紅蛋白及其衍生物是有色物質并且具有(jùyǒu)很強的選擇性吸收光線的性質。氰化血紅蛋白碳氧血紅蛋白第二十九頁,共一百零一頁。4、種屬鑒定(jiàndìng)目的:確定血痕是否為人血。原理:通過(tōngguò)檢測人的種屬特異性指標確證檢材為人血。方法:免疫學方法(沉淀反應、ELISA),生物化學和分子生物學方法(血紅蛋白聚丙烯凝膠電泳、人類基因組中種屬特異的DNA序列的PCR檢測)。注意:檢材中非人類的生物性斑痕的干擾。第三十頁,共一百零一頁。酶聯(lián)免疫吸附試驗(shìyàn)--ELISA法聚丙烯酰胺凝膠等電點聚焦--PAGIEF法膠體金標記McAb-Hb試紙法沉淀環(huán)試驗瓊脂凝膠免疫擴散試驗免疫(miǎnyì)電滲電泳抗原抗體(kàngtǐ)反應常用鑒定方法第三十一頁,共一百零一頁??谷搜?xuèqīng)沉淀素試驗方法:用毛細吸管將抗人血清沉淀素(用人血清蛋白免疫動物獲得的抗體)加入(jiārù)沉降管底部,將檢材浸出液疊加于抗人血清沉淀素表面,保持兩液界面清晰,室溫靜置,60分鐘內觀察結果。結果:兩液界面上出現(xiàn)白色沉淀環(huán)為陽性反應,無沉淀環(huán)形成為陰性反應。注意:建立陽性對照和陰性對照。第三十二頁,共一百零一頁??谷搜t蛋白(xuèhóngdànbái)沉淀素試驗抗人血紅蛋白沉淀素:用人血紅蛋白免疫動物獲得的抗體。方法及結果(jiēguǒ):同抗人血清沉淀素試驗。第三十三頁,共一百零一頁。人及兒種動物血紅蛋白(xuèhóngdànbái)的等電聚焦電泳圖譜第三十四頁,共一百零一頁。5、個人(gèrén)識別測定(cèdìng)血痕中的遺傳標記紅細胞血型(xuèxíng)ABO白細胞血型HLA酶型PGM血清型HpDNA長度多態(tài)性VNTR,STRDNA序列多態(tài)性SNP,mtDNADNA水平遺傳標記基因產物水平遺傳標記遺傳標記第三十五頁,共一百零一頁。七、精液(jīngyè)(斑)檢驗①被害人陰道內--由外向內直至(zhízhì)后穹隆部位--分三段--紗布提?。幍朗米樱w表--肛門、會陰、腹壁、大腿內側--蒸餾水浸紗布?、诂F(xiàn)場堅硬且不宜移動的載體--擦取或刮取柔軟或易于移動的載體--剪取或整塊提取(一)精液(jīngyè)及精斑收集方法第三十六頁,共一百零一頁。1、肉眼(ròuyǎn)檢查暗色(ànsè)布上呈硬固、灰白色漿糊斑狀;白色布上呈黃白色地圖狀;放大鏡觀察可見黃白色小鱗片。(二)精斑檢驗(jiǎnyàn)第三十七頁,共一百零一頁。2、預試驗(shìyàn)常用的方法為紫外線檢查和酸性磷酸酶試驗。紫外線照射可發(fā)出特殊的銀白色熒光(可提示有精斑存在)。近來因螢光洗滌劑的大量使用,這個方法受到干擾,但在確定范圍,形狀時仍有一定(yīdìng)意義。此法簡單且不破壞檢材,還可用于大件物品如床單、被褥、褲子等的精斑查找和定位。第三十八頁,共一百零一頁。3、確證(quèzhènɡ)試驗①精子的檢出:檢材處理:直接法精斑檢驗取檢材適量(shìliàng),剪碎,置試管內,加生理鹽水約0.5此,室溫2小時,4℃過夜,2500轉/分鐘,離心5分鐘,上清液留作抗人精液沉淀試驗和中和試驗。沉渣涂片,干燥后染色,顯微鏡下找精子。注意:不適用于輸精管結扎術者、精子缺乏癥患者或其他無精子形態(tài)的檢材。第三十九頁,共一百零一頁。第四十頁,共一百零一頁。②免疫學方法抗人精(或抗P30)沉淀素試驗③生物化學(shēnɡwùhuàxué)方法電泳檢驗LDH-X帶第四十一頁,共一百零一頁。4、個體(gètǐ)識別DNA檢測
檢測方法(fāngfǎ)同血液第四十二頁,共一百零一頁。八、唾液(tuòyè)斑檢驗唾液(tuòyè)是由腮腺、領下腺,舌下腺三個腺體的分泌液所組成的,其中除含有大量淀粉酶及上皮細胞外,還含有大量ABO式血型物質,以及脫落的口腔上皮細胞,可行DNA檢測。肉眼觀察:沒有明顯的特征。分布區(qū)域:煙頭、煙斗、吸管、杯子、飲料瓶、信封口、咬痕、郵票、瓜子殼、牙簽。第四十三頁,共一百零一頁。九、毛發(fā)(máofà)檢驗毛發(fā)在兇殺、強奸、搶劫、盜竊、交通事故等案件中均可出現(xiàn),是重要物證檢材。毛發(fā)檢驗要解決的問題有:①區(qū)分(qūfēn)檢材是毛發(fā)還是纖維;②鑒別是人毛還是動物毛;③區(qū)別毛發(fā)來自人體何部位;④鑒別是自然脫落還是暴力拔脫,推斷致傷物;⑤毛發(fā)的個人識別(DNA鑒定)。第四十四頁,共一百零一頁。十、骨骼(gǔgé)檢驗由于某種原因對尸體未能進行及時檢查:或雖檢查但有所疏漏;或在偵審研究過程中對檢查發(fā)生爭議,而這些疑問發(fā)生時尸體己腐敗,甚至白骨化,就只有根據骨骼(gǔgé)檢查來進行法醫(yī)學鑒定。另一種情況是在施工工地,或在田野、森林、江河,湖泊中發(fā)現(xiàn)來歷不明的尸骨,當有重大疑問時,也需進行骨骼檢查。骨骼檢驗需解決骨骼的確定、骨骼的種屬、性別,年齡、死亡時間以及死因等問題。第四十五頁,共一百零一頁。第二節(jié)
個人(gèrén)識別第四十六頁,共一百零一頁。個人識別(personalidentification):指用科學的方法確定某活體或尸體是誰。廣義言之,還包括對來自某個個體留下的痕跡(如指紋、足紋、血痕、精斑,其他各種(ɡèzhǒnɡ)體液斑、筆跡等)或部分肢體、臟器、組織等進仔檢驗,認定是否與某人的相同。第四十七頁,共一百零一頁。個人識別的項目很多,主要包括指紋、性別、年齡、個體特征、血型、復原面容和顱像重合等鑒定,現(xiàn)在還可利用記錄聲紋(構成某個人的單音周波數(shù)的各種特征)及用氣相色譜分析個人氣味進行個人識別。其他如記錄衣著、裝飾物、攜帶物品,考查文化水平,考查對有關事物(shìwù)的了解記憶等,均可作為個人識別的參考。第四十八頁,共一百零一頁。一、外表(wàibiǎo)特征1、體表形態(tài)特征:包括外貌特征,如體重、身高、膚色、面形、耳形、毛發(fā)的形態(tài)、顏色及分布、瘢痕、畸形、紋身、指紋,以及衣物與飾物等。這些都應詳細檢查、記錄、繪圖(huìtú)、拍照并與失蹤者進行比較、認定。2、牙齒:在碎尸、燒死、高度腐敗、白骨化以及交通事故中嚴重破壞的尸體均可能剩下牙齒。牙齒的個人識別在法醫(yī)學實踐中具有重要的意義。第四十九頁,共一百零一頁。二、性別(xìngbié)性別確定一般不難。但在某些特殊情況下,還需采取不同的方法。例如尸體高度腐敗,須依據不易腐敗的器官如前列腺或子宮決定性別;又如尸體白骨化后,須依據骨骼決定性別。即使在活體,如果性器官發(fā)育(fāyù)異常(兩性畸形),必須借助細胞遺傳學方法,檢查性染色質以區(qū)別性別;尸體僅剩一部分時也可用細胞學檢查核性別。第五十頁,共一百零一頁。1、骨骼的性別差異以骨盆最為明顯,其次是顱骨。2、性染色體:女性(nǚxìng)一條X染色體失活--X染色質。巴氏小體鼓槌(ɡǔchuí)小體第五十一頁,共一百零一頁。三、年齡(niánlíng)對年齡的推斷,未成年人主要(zhǔyào)根據骨化中心和骨骼愈合等情況,以及骨骼的大小和長短來推斷年齡;成年人主要(zhǔyào)根據骨骼的形態(tài)學變化(據恥骨聯(lián)合面隆起情況)鑒定年齡。第五十二頁,共一百零一頁。四、身長(shēncháng)完整骨骼--按順序排放、測得全身骨骼的高度。部分骨/殘骨--先確定骨骼的性別、年齡、種族,然后將所測得的數(shù)據(shùjù)代入相應公式,計算身高,計算出來的身高僅是死者生前的近似身高。身高的推算以用長骨為最好。第五十三頁,共一百零一頁。五、面貌復原(fùyuán)與顱像重合顱骨蘊藏著人頭面部形態(tài)特征的大量信息,根據顱骨進行身源鑒定主要(zhǔyào)有兩種方法:面貌復原法顱像重合技術第五十四頁,共一百零一頁。第三節(jié)
親權鑒定(jiàndìng)第五十五頁,共一百零一頁。時間方法特點三國滴骨法最早,缺乏科學性明代合血法缺乏科學性,接近凝血實驗1920年ABO血型凝集實驗最早用于親子鑒定的血型系統(tǒng),只能否定,不能肯定20世紀70年代免疫學電泳技術酶譜分析開始對細胞表面抗原蛋白質、同工酶進行分型,累計提高了個體識別率和排除率,但仍然只能否定,不能肯定1985年DNA指紋親子鑒定第一次達到可以認定程度,但是誤判發(fā)生率也很高1990年STR-GeneScan應用廣泛,普遍認可親權鑒定(jiàndìng)發(fā)展簡表第五十六頁,共一百零一頁。1985年,一名英國婦女申請他在加納的兒子回英國定居,移民局要求做親子鑒定,在檢測17個血型系統(tǒng)認定親子概率達99%,移民局不能肯定該婦女是男孩的生母還是姨母,不同意移居。后來(hòulái)Jeffreys教授對母親、男孩一個兄弟和兩個姐妹取血樣用DNA指紋分析,結果顯示該婦女是生母的概率比是姨母的概率大10萬倍,確認了親緣關系,移民局最終同意該男孩移民。第五十七頁,共一百零一頁。一、親權鑒定(jiàndìng)基本理論應用醫(yī)學生物學理論與技術,判斷親代與子代、同胞之間是否(shìfǒu)有生物學關系,稱為親權鑒定(parentagetesting),又稱親子鑒定。(一)親權鑒定的類型民事糾紛:離婚、嬰兒錯抱、撫養(yǎng)權、繼承權刑事案件:盜拐兒童、強奸致孕、殺嬰、碎尸行政事務:認親、移民、計劃生育、意外災害第五十八頁,共一百零一頁。(二)親子鑒定(qīnzǐjiàndìnɡ)的理論依據遺傳特征①多基因遺傳特征如毛發(fā)、皮膚、眼睛的顏色、臉型及多指畸形等。②單基因遺傳特征如血型(紅/白細胞與血漿的遺傳標記),DNA多態(tài)性等。妊娠期限如果有充分證據證明被懷疑的男子在女方受孕期間,由于各種原因沒有條件與女方性交,就可能否定親子關系。性交及生育能力如被控男子確實存在性交及生育能力障礙,可以初步得到排除。第五十九頁,共一百零一頁。1、孟德爾遺傳規(guī)律決定某一性狀的基因在親代與子代之間傳遞的規(guī)律:①孩子的一對等位基因必定一個來自父,一個來自母;②孩子不可能帶有雙親均沒有的等位基因;③除非父母雙方均有同一基因,否則子女不會是純合子;④父母之一若是純合子,則子女必得其一。在肯定某個基因必須來自生父,而假設父親并不具有這個(zhège)基因的情況下,可以排除其親子關系。在肯定某個基因必須來自生父,而假設父親具有這個基因的情況下,不能排除其親子關系。第六十頁,共一百零一頁。ABO血型遺傳(yíchuán)原則:ABO血型由兩個遺傳基因結合而成;遺傳時這兩個基因必定分離;第六十一頁,共一百零一頁。ABO血型(xuèxíng)遺傳父母 子女表現(xiàn)型表現(xiàn)型 可能 不可能O×O O A、B、ABO×A O、A B、ABO×B O、B A、ABO×AB A、B AB、OA×A A、O B、ABA×B A、B、AB、O ---------A×AB A、B、AB OB×B B、O A、ABB×AB A、B、AB OAB×AB A、B、AB O第六十二頁,共一百零一頁。2、非孟德爾遺傳(yíchuán)規(guī)律男性伴性遺傳核外遺傳:線粒體DNA在單親鑒定、隔代、同胞間、旁系個體間親緣關系的鑒定第六十三頁,共一百零一頁。二、親子鑒定常用(chánɡyònɡ)的遺傳標記紅細胞血型(xuèxíng)ABO白細胞血型(xuèxíng)HLA酶型PGM血清型HpDNA長度多態(tài)性VNTR,STRDNA序列多態(tài)性SNP,mtDNADNA水平遺傳標記基因產物水平遺傳標記遺傳標記第六十四頁,共一百零一頁。適用于親子鑒定的血液遺傳標記,一般應具備以下條件:1、表現(xiàn)為簡單的遺傳性狀,其遺傳方式經家系調查已明確。2、具有遺傳多態(tài)性,基因頻率分布較均勻,父權排除率高。3、在相應地區(qū)、民族(mínzú)中的群體遺傳數(shù)據已建立。4、血型個體發(fā)生早,不易受年齡、疾病及其他因素影響。5、檢驗方法操作簡單,重復性好,結果明確可靠。第六十五頁,共一百零一頁。1、血清學方法檢驗紅細胞血型(xuèxíng)、白細胞血型(xuèxíng)、紅細胞酶型、血清型。血清學方法的局限性:①檢材需要量大,且對時限要求較高。②不適用于陳舊、微量檢材。③鑒別能力有限(只能否定)。三、鑒定(jiàndìng)方法第六十六頁,共一百零一頁。2、DNA檢驗技術:DNA指紋技術、PCR擴增技術與傳統(tǒng)血清相比,DNA分型技術最大的優(yōu)點就是(jiùshì)血痕以外的組織可被用來提取DNA。親權鑒定中利用口腔拭子采集上皮細胞有其獨特的優(yōu)點,即它是一種非介入的、無痛的方法,更適合于新生兒DNA的提取。第六十七頁,共一百零一頁。四、親子鑒定應具備(jùbèi)的條件1、鑒定人的資格:2、鑒定機構的條件:批準,標準化3、被鑒定人的要求:①成年被鑒定人應自愿(zìyuàn)接受鑒定。②14歲以下的應征得其監(jiān)護人的同意。第六十八頁,共一百零一頁。五、親子鑒定(qīnzǐjiàndìnɡ)檢案程序檢驗委托填寫委托受理合同一份,內容包括:委托單位(委托人)、委托日期、送檢人、檢驗材料名稱數(shù)量、有關人員姓名、性別、年齡、案情摘要、委托要求,并由委托人和受理機構(jīgòu)鑒定人雙方簽名和蓋章。填寫采樣單一份,內容包括委托單位(人)、委托日期、采樣地點、采樣日期和采樣人,以及被采樣人的姓名、性別、出生日期、證件號碼,最后由被采樣人簽名、按指紋確認,并接受拍照。第六十九頁,共一百零一頁。六、親子鑒定(qīnzǐjiàndìnɡ)結果的評估非父排除率(probabilityofexclusion,PE
):是指通過某一個遺傳標記系統(tǒng)的檢測,將不是生父的被控父親排除的概率即在所有非父被控為生父的男子(nánzǐ)中,用遺傳標記否定父權有多大的可能性。各遺傳標記系統(tǒng)非父排除率取決于該系統(tǒng)的遺傳方式、等位基因數(shù)目以及各等位基因在群體中的頻率分布。累積非父排除率(combinedpowerofexclusion,CPE):CPE=1-(1-PE1)(1-PE2)(1-PE3)(1-PE4)……(1-PEn)第七十頁,共一百零一頁。父權相對機會(relativechanceofpaternity,RCP) PI XRCP= = ×100% PI+1 X+Y其中X/X+Y又稱為(chēnɡwéi)父權概率或父權肯定幾率(W)父權指數(shù)(paternityindex,PI),是假設父提供(tígōng)父基因成為孩子生父的可能性與隨機男子提供(tígōng)生父基因成為孩子生父可能性的比值,表示假設父為孩子生父的機會比隨機男子為孩子生父的機會大多少倍。累積父權指數(shù)(combinedpaternityindex,CPI):CPI=PI1×PI2×PI3×PI4……PIn第七十一頁,共一百零一頁。排除親子關系:兩個以上遺傳標記排除父權(fùquán)否定:當被控父親與孩子的遺傳標記不符合孟得爾遺傳規(guī)律時,可否定他們之間的血緣關系??隙ㄓH子關系認定父權的標準:累積非父排除率≥99.95% 累積父權指數(shù)≥2000(RCP≥99.95%)第七十二頁,共一百零一頁。父權(fùquán)否定第七十三頁,共一百零一頁。可能錯誤否定父權的情況1、遺傳變異:有沉默基因、替代等位基因、基因缺失、基因互換、基因突變、弱抗原(kàngyuán)、嵌合體抗原(kàngyuán)、生理與病理變異等。2、檢驗過程:第七十四頁,共一百零一頁。第四節(jié)
DNA分析技術在
法醫(yī)(fǎyī)物證鑒定中的應用第七十五頁,共一百零一頁。個人識別的DNA鑒定主要涉及的案件:兇殺案強奸案碎尸案石蠟(shílà)包埋組織塊調錯案第七十六頁,共一百零一頁。親權關系的DNA鑒定主要涉及的案件:親權糾紛(離婚案)移民案強奸致孕案拐賣(ɡuǎimài)丟失兒童案(醫(yī)院中)嬰兒錯抱案(計劃生育中)超生與否的鑒定第七十七頁,共一百零一頁。一、人類(rénlèi)基因組DNA核DNA:約30億個堿基對(basepair,bp)組成,分成24個不同的線性DNA分子,每個DNA分子包含在一個染色體中。線粒體DNA:是唯一(wéiyī)的細胞核外DNA,呈閉環(huán)雙鏈結構。特征:單克隆性和母系遺傳。細胞細胞核第七十八頁,共一百零一頁。(一)核DNA的片段(piànduàn)長度多態(tài)性1980-Whyman和white首個發(fā)現(xiàn)了限制性片斷長度多態(tài)性(restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP)。1985年Jefferys等首次將DNA指紋圖(RFLP圖譜——兩無關個體之間完全相同的幾率<1/300億)成功應用(yìngyòng)于親權鑒定(首次達到可認定的程度)。1986又用于強奸殺人案。導致DNA長度多態(tài)性的最常見原因是重復序列數(shù)目變異。RELP由多個特定序列首尾相連而成(衛(wèi)星DNA),在人類基因組中占20-30%第七十九頁,共一百零一頁。1、串聯(lián)(chuànlián)重復序列VNTR基因座(可變數(shù)目(shùmù)重復序列VariableNumberofTandemRepeats,小衛(wèi)星DNA):重復單位6-70bp優(yōu)點:高度多態(tài)性、穩(wěn)定的遺傳方式。缺點:需要相對多的高分子量DNA。STR基因座(短串聯(lián)重復序列ShortTandemRepeats,微衛(wèi)星DNA)重復單位2-7bp優(yōu)點:分布廣,靈敏度高,方便快捷。(最理想)第八十頁,共一百零一頁。2、串聯(lián)(chuànlián)重復序列的遺傳多態(tài)性串聯(lián)重復序列,多態(tài)性表現(xiàn)為核心單元(dānyuán)重復次數(shù)的不同。(D13S317)ACGATAGATAGATAGATAGATAGATAGATAGATAGATAGATAGATAGATAGACAGAT長度相差1個重復單位就構成一個等位基因第八十一頁,共一百零一頁。56串聯(lián)重復(chóngfù)數(shù)目41234123第八十二頁,共一百零一頁。重復(chóngfù)單元的長度Dinucleotides:Trinucleotides:Tetranucleotides:Pentanucleotides:2CA3AAT4AGAT5AATGT第八十三頁,共一百零一頁。TH01基因座
(AATG)5-115169bp*6173bp7177bp8181bp9185bp10189bp11193bp*AmpFlSTR第八十四頁,共一百零一頁。優(yōu)點:1、等位基因頻率可估計;2、分布較STR標記更廣泛;3、高度(gāodù)穩(wěn)定的,尤其是編碼區(qū)SPN;4、可能就是疾病遺傳機制的侯選改變位點;5、易于進行自動化分析,效率高。(二)序列(xùliè)多態(tài)性單核苷酸多態(tài)性(Single
Nucleotide
Polymorphism)第八十五頁,共一百零一頁。PolymeraseChainReaction1985年,由Cetus公司(ɡōnɡsī)的Mullis博士發(fā)明Dr.KaryMullis,wasawardedaNobelPrizeforhisworkin1993.(三)聚合酶鏈式反應(liànshìfǎnyìng)第八十六頁,共一百零一頁。二、STR基本(jīběn)分析技術
--聚丙烯酰胺凝膠電泳、銀染單位(dānwèi)點復合(fùhé)位點第八十七頁,共一百零一頁。常用(chánɡyònɡ)STR基因座常染色體STR:FGAvWATH01D3S1358D8S1179D16S539D18S51D21S11D5S818D13S317TPOXCSF1POD7S820D2S1338D19S433PentaDPentaED6S1043D12S391性染色體STR:X-STRY-STR 第八十八頁,共一百零一頁。三、STR激光誘導熒光(yíngguāng)染料顯帶自動分析
(復合擴增)檢材(血樣、羊水、毛發(fā)、唾液(tuòyè)斑、精斑等)DNA的提取15個STR基因座的PCR擴增對擴增產物進行電泳分析,通過Collection1.0軟件(ruǎnjiàn)收集電泳信息通過GeneMapper3.2軟件對擴增產物進行等位基因的命名第八十九頁,共一百零一頁。四、STR基因座檢測結果(jiēguǒ)的存檔第九十頁,共一百零一頁。失蹤(shīzōng)兒童DNA數(shù)據庫第九十一頁,共一百零一頁。五、DNA鑒定結論的證據(zhèngjù)效力兩樣(liǎngyàng)本DNA分型不同,排除來自同一個體。兩樣本DNA分型相同,不能排除來自同一個體。意義(yìyì):除同卵雙生外,每一個生物個體DNA信息是不同的。運用的遺傳標記對特定的個體來講,終身不變(干細胞移植除外)。DNA樣本無癌變鑒定結果正確鑒定的科學邏輯:第九十二頁,共一百零一頁。強奸(qiángjiān)致孕案(檢材:血斑、流產組織)胎兒(tāiér)的遺傳基因一半來源于受害人,一半來源于嫌疑人。STR基因座受害人絨毛膜嫌疑人D3S135816,1616,1616,17VWA17,1816,1716,16FGA20,2423,2419,23D8S117914,1413,1413,16D21S1128,3029.2,3029.2,29.2D18S5117,2113,1712,13D5S81810,1010,119,11D13S3178,118,99,10D7S82012,128,128,10D16S5399,1210,1210,11THO19,96,96,8TPOX9,118,98,8CSF1PO11,1212,1310,13D2S133819,2417,2117,19D19S43313,1414,1413,14第九十三頁,共一百零一頁。兇殺案STR基因座頭顱失蹤者之父失蹤者之子D3S135816,1715,1615,17vWA15,1814,1815,18FGA21,2625,2623,26D8S117914,1511,1414,14D21S1129,32.229,2930,32.2D18S5115,2213,1515,22D13S3179,108,910,12D7S8208,118,1211,11D16S5399,119,1011,11THO19,99,9.39,10TPOX8,98,88,9CSF1PO10,1210,1010,10D2S133820,2121,2320,22D19S43314,15.215.2,15.214,15.2D5S8189,1110,119,9第九十四頁,共一百零一頁。盜拐嬰兒(yīngér)案STR基因座兒子?父親D3S135814,1715,16vWA14,1814,17FGA20,2423,23D8S117912,1413,15D21S1130,3130,32.2D18S5114,1416,19D13S3178,89,11D7S82010,1211,11D16S539
9,1112,13THO16,99,9TPOX8,98,8CSF1PO12,129,10第九十五頁,共一百零一頁。認親(rènqīn)STR基因座媽媽哥哥妹妹?D3S135816,171
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