雜環(huán)類藥物的分析TheAnalysisofHeterodrugs課件

第八章雜環(huán)類藥物的分析第八章雜環(huán)類藥物的分析1概述定義：

雜環(huán)類藥物是指：碳環(huán)中夾雜有非碳原子的環(huán)狀有機(jī)化合物，其中的非碳原子成為雜原子，一般為氧、硫、氮等。分類：

按其所含的雜原子種類與數(shù)目，環(huán)的元數(shù)與環(huán)數(shù)的不同分為：吡啶類、喹啉類、托烷類、酚噻嗪類和苯并二氮卓類等。而各大類又可根據(jù)環(huán)上取代基的類型、數(shù)目、位置的不同衍生出眾多的同系列藥物。概述定義：2共性:(1)雜環(huán)類藥物是合成藥物中所占比例最多的一大類藥物.(2)多為五元環(huán)或六元環(huán),單環(huán)或并合環(huán).(3)雜環(huán)結(jié)構(gòu)較穩(wěn)定,不易開環(huán),其性質(zhì)受雜原子種類、數(shù)目、位置影響.(4)雜環(huán)上取代基性質(zhì)較活潑,常用于分析.(5)含氮雜環(huán),其堿性的強(qiáng)弱往往用于分析.共性:3

第一節(jié)吡啶類藥物分析一、結(jié)構(gòu)分析1.

結(jié)構(gòu)：本類藥物均有吡啶環(huán)吡啶

異煙肼尼可剎米第一節(jié)吡啶類藥物分析一、結(jié)構(gòu)分析吡啶異煙肼尼可剎米42.性質(zhì)：（1）堿性：吡啶環(huán)上氮原子具有叔胺性質(zhì)，pKb=8.8（水中），可非水滴定；（2）母核能與金屬鹽反應(yīng)生成有色沉淀（3）異煙肼：酰肼基有強(qiáng)還原性,且能與羰基縮合,氧化還原滴定；（4）尼可剎米:酰胺基堿性下可水解,放出NH(C2H5)2↑，用于鑒別或凱氏定N直接蒸餾測定。2.性質(zhì)：5二、鑒別：

（一）吡啶環(huán)的開環(huán)反應(yīng)適用于a,a’未取代，b,γ烷基或羧基取代的。1.

戊烯二醛反應(yīng)（k?nig反應(yīng)）二、鑒別：1.

戊烯二醛反應(yīng)（k?nig反應(yīng)）6

2、與2，4-二硝基氯苯反應(yīng)，加醇制氫氧化鉀紫紅色

紫紅色2、與2，4-二硝基氯苯反應(yīng)，加醇制氫氧化鉀紫紅色7（二）、酰肼基團(tuán)的反應(yīng)

常用的氧化劑：I2、Br2、KBrO3、AgNO31還原反應(yīng)：（二）、酰肼基團(tuán)的反應(yīng)常用的氧化劑：I2、Br2、KBrO8取本品約10mg加水2ml溶解加氨制硝酸銀試液反應(yīng)現(xiàn)象：產(chǎn)生氣泡與黑色渾濁，并在試管壁上形成銀鏡取本品約10mg加水2ml溶解加氨制硝酸銀試液反應(yīng)現(xiàn)象：產(chǎn)生92、縮合反應(yīng)：與芳醛縮合形成腙，如香草醛、水楊醛、二甲氨基苯甲醛黃色異煙腙λmax=380nm，在105℃干燥后，測定熔點(diǎn)，228231℃香草醛2、縮合反應(yīng)：與芳醛縮合形成腙，黃色異煙腙λmax=380n10(四)形成沉淀的反應(yīng)（吡啶環(huán)）（1）與金屬離子反應(yīng)生成有色沉淀

異煙肼,尼可剎米+HgCl2→白色沉淀↓

異煙肼+CuSO4→紅棕色↓（Cu2O）尼可剎米+CuSO4+硫氰酸鉀→草綠色絮狀沉淀(四)形成沉淀的反應(yīng)（吡啶環(huán)）（1）與金屬離子反應(yīng)生成有色沉11（五）分解產(chǎn)物的反應(yīng)

1.尼可剎米ChP（2000）

【鑒別】

（1）取本品10滴，加氫氧化鈉試液3ml，加熱，即發(fā)生二乙胺的臭氣，能使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變藍(lán)色。（六）紫外與紅外吸收光譜特征（五）分解產(chǎn)物的反應(yīng)1.尼可剎米ChP（12三、雜質(zhì)檢查

雜質(zhì)來源原料引入、降解產(chǎn)生

（一）異煙肼中游離肼的檢查

1.薄層色譜法（TLC）（1）ChP（2000）雜質(zhì)對(duì)照品法三、雜質(zhì)檢查雜質(zhì)來源原料引入、降解產(chǎn)生（13

取本品，加水制成每1ml中含50mg的溶液，作為供試品溶液。另取硫酸肼加水制成每1ml中含0.20mg（相當(dāng)于游離肼50μg的溶液，作為對(duì)照溶液。吸取供試品溶液10μl與對(duì)照溶液2μl分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板（用羧甲基纖維素鈉溶液制備）上，以異丙醇－丙酮（3∶2）為展開劑，展開后，晾干，噴以乙醇制對(duì)二甲氨基苯甲醛試液，15min后檢視，在供試品主斑點(diǎn)前方與硫酸肼斑點(diǎn)相應(yīng)的位置上，不得顯黃色斑點(diǎn)。取本品，加水制成每1ml中含50mg的溶14（2）BP（1998）游離肼雜質(zhì)對(duì)照品法有關(guān)物質(zhì)高低濃度對(duì)比法（2）BP（1998）152.比濁法JP（13）檢查方法靈敏度法

反應(yīng)原理游離肼+水楊醛→水楊醛腙↓

優(yōu)點(diǎn)：不用對(duì)照品，價(jià)廉、簡單易行缺點(diǎn)：準(zhǔn)確度差2.比濁法JP（13）16（二）尼可剎米中有關(guān)物質(zhì)的檢查

ChP（2005）

TLC高低濃度對(duì)比法配制兩種不同濃度的對(duì)照溶液（二）尼可剎米中有關(guān)物質(zhì)的檢查ChP（2005）17第二節(jié)喹啉類藥物共性：含有吡啶與苯環(huán)稠合而成的喹啉雜環(huán)

代表藥物：硫酸奎寧、硫酸奎尼丁硫酸奎寧硫酸奎尼丁

第二節(jié)喹啉類藥物硫酸奎寧18

鹽酸環(huán)丙沙星鹽酸環(huán)丙沙星19主要化學(xué)性質(zhì)：1、堿性：喹啉環(huán)上的氮原子具有堿性，可與強(qiáng)酸形成穩(wěn)定的鹽。2、旋光性：硫酸奎寧為左旋體；硫酸奎尼丁為右旋體。3、熒光特性主要化學(xué)性質(zhì)：20二、鑒別試驗(yàn)（一）綠奎寧反應(yīng)6－羥基喹啉，經(jīng)氯水的氯化反應(yīng)，再以氨水處理，生成綠色的二醌基吲胺的銨鹽。O二、鑒別試驗(yàn)（一）綠奎寧反應(yīng)O21（二）光譜特征1.UVCh.P采用本法鑒別鹽酸環(huán)丙沙星。2.熒光光譜特征硫酸奎寧和硫酸奎尼丁，在稀H2SO4中均顯藍(lán)色熒光，鹽酸環(huán)丙沙星則無熒光，可用于本類藥物的鑒別。3.IRCh.P中硫酸奎寧和鹽酸環(huán)丙沙星均采用紅外光譜的方法進(jìn)行鑒別，而硫酸奎尼丁未采用此法。（二）光譜特征22（三）無機(jī)酸鹽硫酸奎寧硫酸奎尼丁酸性條件

BaCl2白色沉淀鹽酸環(huán)丙沙星酸性條件

AgNO3白色沉淀（三）無機(jī)酸鹽硫酸奎寧酸性條件BaCl2白色沉淀鹽酸23第三節(jié)托烷類（莨菪烷類）莨菪烷衍生的氨基醇和不同有機(jī)酸縮合成酯硫酸阿托品、氫溴酸東莨菪堿硫酸阿托品氫溴酸東莨菪堿第三節(jié)托烷類（莨菪烷類）硫酸阿托品24主要化學(xué)性質(zhì)1.水解性

本類藥物分子結(jié)構(gòu)中具有酯的結(jié)構(gòu)，易水解。以阿托品為例，水解生成莨菪醇(Ⅰ)和莨菪酸(Ⅱ)。2.堿性

阿托品和東莨菪堿的結(jié)構(gòu)中，五元脂環(huán)上含有叔胺氮原子,具有較強(qiáng)的堿性,易與酸成鹽。如阿托品的pKb1為4.35。3.旋光性氫溴酸東莨菪堿結(jié)構(gòu)中含有不對(duì)稱碳原子，呈左旋體，阿托品結(jié)構(gòu)中雖然有不對(duì)稱碳原子，但因外消旋化而為消旋，無旋光性。主要化學(xué)性質(zhì)2.堿性阿托品和東莨菪堿的結(jié)構(gòu)中，五元脂環(huán)25（一）托烷生物堿一般鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn)生物堿水解莨菪酸發(fā)煙硝酸三硝基衍生物KOH（C2H5OH）固體KOH有色的醌型產(chǎn)物（一）托烷生物堿一般鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn)生物堿水解莨菪酸發(fā)煙硝酸26（二）氧化反應(yīng)

本類藥物水解后，生成的莨菪酸，可與硫酸和重鉻酸鉀在加熱的條件下，發(fā)生氧化反應(yīng)，生成苯甲醛，而逸出類似苦杏仁的臭味。其反應(yīng)式為：（二）氧化反應(yīng)27(三)沉淀反應(yīng)

本類藥物具有堿性，可與生物堿沉淀劑生成沉淀。

如：阿托品+氯化汞醇試液黃色沉淀東莨菪堿+氯化汞醇試液白色沉淀（四）硫酸鹽與溴化物反應(yīng)硫酸阿托品+氯化鋇白色沉淀（不溶于鹽酸或硝酸）硫酸阿托品+醋酸鉛白色沉淀（溶于醋酸氨或氫氧化鈉溶液）氫溴酸東莨菪堿+硝酸銀黃色凝乳沉淀氨試液中微溶，硝酸中幾乎不溶。加氯試液，再加氯仿，氯仿層顯黃色或紅棕色(三)沉淀反應(yīng)（四）硫酸鹽與溴化物反應(yīng)白色沉淀（不溶于鹽28第四節(jié)吩噻嗪類藥物分析一、結(jié)構(gòu)分析共同點(diǎn)：（1）硫氮雜蒽母核；（2）含兩個(gè)雜原子多環(huán)共軛體系，有UV吸收；（3）S具還原性，可被氧化生成砜或亞砜；（4）與金屬離子絡(luò)合，生成有色物，可比色測定第四節(jié)吩噻嗪類藥物分析一、結(jié)構(gòu)分析共同點(diǎn)：29雜環(huán)類藥物的分析TheAnalysisofHeterodrugs課件30奮乃靜癸氟奮乃靜奮乃靜癸氟奮乃靜31二、性質(zhì)

1.紫外與紅外吸收光譜本類藥物的紫外特征吸收，主要由母核三環(huán)的π系統(tǒng)所產(chǎn)生，一般具有三個(gè)峰值。即在204～209nm（205nm附近）、250～265nm（254nm附近）和300～325nm（300nm附近）。最強(qiáng)峰多在250～265nm。2位上的取代基（R′）不同，會(huì)引起吸收峰發(fā)生位移。

其結(jié)構(gòu)中的硫，易氧化，氧化產(chǎn)物砜及亞砜有四個(gè)吸收峰。

二、性質(zhì)32

2.易被氧化呈色硫氮雜蒽母核中的二價(jià)硫易氧化，遇不同氧化劑（硫酸，過氧化氫），其母核易被氧化成亞砜、砜等不同產(chǎn)物，隨取代基的不同呈現(xiàn)的顏色不同。3.易與金屬離子絡(luò)合呈色本類藥物分子結(jié)構(gòu)中未被氧化的硫，可與金屬鈀離子形成配位化合物。※其氧化產(chǎn)物砜和亞砜無此反應(yīng)4.堿性

2.易被氧化呈色33二、鑒別試驗(yàn)

（一）UV和IRUV：奮乃靜

ChP（2005）[鑒別]取本品，加無水乙醇制成每1ml中含7g的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA）測定，在258nm的波長處有最大吸收，吸收度約為0.65。

IR：本品的紅外吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜一致二、鑒別試驗(yàn)（一）UV和IRIR：本品的紅外吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)34

（二）顯色反應(yīng)

1.與氧化劑的顯色反應(yīng)

藥物名稱硫酸硝酸過氧化氫

鹽酸氯丙嗪顯紅色,漸變淡黃色—

鹽酸異丙嗪顯櫻桃紅色,放置生成紅色沉淀,加熱即溶解,

后顏色漸變深溶液由紅色轉(zhuǎn)變?yōu)槌赛S色奮乃靜——顯深紅色;放置后紅色漸褪去鹽酸氟奮乃靜顯淡紅色,溫?zé)帷?/p>

后變成紅褐色鹽酸三氟拉嗪—生成微帶紅色的白色沉淀;放—

置后,紅色變深,加熱后變黃色

鹽酸硫利達(dá)嗪顯藍(lán)色

—

—

（二）顯色反應(yīng)35

2.與鈀離子絡(luò)合顯色反應(yīng)

利用分子結(jié)構(gòu)中未被氧化的硫與金屬鈀離子絡(luò)合形成有色絡(luò)合物，如與癸氟奮乃靜形成紅色絡(luò)合物。2.與鈀離子絡(luò)合顯色反應(yīng)36（三）分解產(chǎn)物的反應(yīng)癸氟奮乃靜

ChP（2005）含氟藥物[鑒別]（1）取本品15～20mg，加碳酸鈉與碳酸鉀各約0.1g，混勻，在600℃熾灼15～20分鐘，放冷，加水2ml使溶解，加鹽酸溶液（1→2）酸化，濾過，濾液加茜素鋯試液0.5ml，應(yīng)顯黃色。（三）分解產(chǎn)物的反應(yīng)37雜環(huán)類藥物的分析TheAnalysisofHeterodrugs課件38三、有關(guān)物質(zhì)檢查

1.癸氟奮乃靜及其注射液

TLC參比雜質(zhì)對(duì)照品法以鹽酸氟奮乃靜為對(duì)照品

2.其他藥物

TLC高低濃度對(duì)比法三、有關(guān)物質(zhì)檢查39第五節(jié)苯并二氮雜卓類藥物的分析

第五節(jié)苯并二氮雜卓類藥物的分析40雜環(huán)類藥物的分析TheAnalysisofHeterodrugs課件41硝西泮阿普唑侖硝西泮阿普唑侖42一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)

1.苯并二氮雜卓母核弱堿性，UV2.結(jié)構(gòu)中的環(huán)一般比較穩(wěn)定，但在酸性溶液中可水解，形成相應(yīng)的二苯甲酮衍生物。

3.不同pH條件下離子狀態(tài)不同，UV不同

一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1.苯并二氮雜卓母核弱堿性，U43

1.沉淀反應(yīng)

氯氮卓

橙紅色沉淀

阿普唑侖鹽酸氟西泮

＋KBiI4

也生成橙紅色沉淀氯硝西泮放置后，沉淀顏色變深，因此可以相互區(qū)別。鑒別試驗(yàn)阿普唑侖+遇硅鎢酸白色沉淀，藥典中也用于鑒別。

(一)化學(xué)鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn)阿普唑侖+遇硅鎢酸白色沉淀，藥典442.水解后呈芳伯胺反應(yīng)2.水解后呈芳伯胺反應(yīng)453.硫酸-熒光反應(yīng)

本類藥物溶于硫酸后，在紫外光（365nm）下，顯不同顏色的熒光。例如：

地西泮黃綠色黃色氯氮卓黃色紫色艾司唑侖+H2SO4亮綠色+稀硫酸天藍(lán)色硝西泮淡藍(lán)色藍(lán)綠色奧沙西泮淡黃綠色4.含鹵素3.硫酸-熒光反應(yīng)地西泮46（二）紫外特征吸收和紅外吸收光譜（三）色譜法TLC法酸水解產(chǎn)物的TLC法（二）紫外特征吸收和紅外吸收光譜47一、非水溶液滴定法(一)基本原理：在水中堿性較弱，不能順利地進(jìn)行中和滴定。在酸性非水介質(zhì)中（如HAc中），則能顯示出較強(qiáng)的堿性，滴定突躍增大，可以順利地進(jìn)行中和滴定。

含量測定當(dāng)HA酸性較強(qiáng)時(shí)，反應(yīng)不能定量完成，必須除去或降低HA的酸性，使反應(yīng)順利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游離堿類鹽被置換出的弱酸因此，要根據(jù)不同情況采用相應(yīng)測定條件。一、非水溶液滴定法含量測定當(dāng)HA酸性較強(qiáng)時(shí)，反應(yīng)不能定量完48(二)一般方法供試品+冰醋酸10ml~30ml若供試品為氫鹵酸鹽再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml~5ml結(jié)果高氯酸滴定液滴定以空白試驗(yàn)校正(二)一般方法供試品+冰醋酸10ml~30ml若供試品為氫491.適用范圍

主要用于Kb＜10-8的有機(jī)堿鹽的含量測定。對(duì)堿性較弱的雜環(huán)類藥物，只要選擇合適的溶劑、滴定劑和終點(diǎn)指示的方法，可使pKb為8～13的弱堿性藥物采用本法滴定。

一般來說：

Kb為10-8～10-10時(shí)，宜選冰醋酸作為溶劑；藥物的Kb為10-10～10-12時(shí)，宜選冰醋酸與醋酐的混合溶液；

Kb＜10-12時(shí)，應(yīng)用醋酐作為溶劑。

另外，在冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突躍顯著增大，使一些堿性極弱的雜環(huán)類藥物獲得滿意測定結(jié)果。

(三)問題討論1.適用范圍主要用于Kb＜10-8的有機(jī)堿鹽的含量測定。對(duì)50

2.酸根的影響：無機(jī)酸類，在醋酸介質(zhì)中的酸性以下列排序遞減：

高氯酸＞氫溴酸＞硫酸＞鹽酸＞硝酸

消除HX干擾的方法：加Hg(Ac)2

量不足終點(diǎn)不明顯，結(jié)果偏低。

2B·HX+Hg(Ac)2→2B·HAc+HgX2

過量(1～3倍)不影響測定結(jié)果2.酸根的影響：無機(jī)酸類，在醋酸介質(zhì)中的酸性以下列排序遞51(四)應(yīng)用實(shí)例

1.游離弱堿性藥物測定

異煙肼、尼可剎米、地西泮及氯氮卓等。基于這些藥物分子結(jié)構(gòu)中氮原子的弱堿性，可用非水溶液滴定法直接測定其含量。由于這些藥物的堿性強(qiáng)弱不同，測定時(shí)所采用溶劑、指示劑及其指示終點(diǎn)的方法也不盡相同。

藥物名稱取樣量(g)溶劑指示劑終點(diǎn)顏色

尼可剎米0.15冰醋酸10ml結(jié)晶紫藍(lán)綠色地西泮0.2冰醋酸、酸酐10ml結(jié)晶紫綠色氯氮卓0.3冰醋酸10ml結(jié)晶紫藍(lán)色(四)應(yīng)用實(shí)例52

2.氫鹵酸鹽類藥物測定

當(dāng)這些藥物溶于冰醋酸時(shí)，由于氫鹵酸在冰醋酸中酸性較強(qiáng)，對(duì)測定有干擾，必須先加入過量的醋酸汞冰醋酸溶液，使其形成難以電離的鹵化汞，而氫鹵酸鹽藥物，則轉(zhuǎn)變成可測定的醋酸鹽。然后再用高氯酸滴定液滴定，并可獲得滿意的結(jié)果。應(yīng)用示例如下：

藥物名稱取樣量(g)溶劑加入醋酸汞試液(ml)指示劑終點(diǎn)顏色

鹽酸氯丙嗪0.2醋酐10ml5橙黃Ⅳ玫瑰紅色鹽酸異丙嗪0.3冰醋酸10ml4結(jié)晶紫藍(lán)色鹽酸氟奮乃靜0.3冰醋酸20ml5結(jié)晶紫藍(lán)綠色鹽酸環(huán)丙沙星0.2冰醋酸25ml5橙黃Ⅳ粉紅色氫溴酸東莨菪堿0.3冰醋酸20ml5結(jié)晶紫純藍(lán)色

2.氫鹵酸鹽類藥物測定533.硫酸鹽類藥物測定

硫酸是二元酸，在水溶液中能完成二級(jí)解離，生成SO42-，但在非水介質(zhì)中，只顯示一元酸解離為HSO4，即只供給一個(gè)H+，所以硫酸鹽類藥物在冰醋酸中，只能滴定至硫酸氫鹽，因此可以用高氯酸滴定液直接滴定。3.硫酸鹽類藥物測定54（1）硫酸阿托品測定：阿托品為堿性較強(qiáng)的

一元堿藥物，因而硫酸阿托品的化學(xué)結(jié)構(gòu)式可以簡寫為(BH+)2·SO42-，用高氯酸直接滴定時(shí)的反應(yīng)式為：(BH+)2·SO42-+HClO4→(BH+)·ClO4-+(BH+)·HSO4-可根據(jù)1mol的硫酸阿托品消耗1mol高氯酸的關(guān)系計(jì)算其含量。（1）硫酸阿托品測定：阿托品為堿性較強(qiáng)的(BH+)2·SO455（2）硫酸奎寧測定：奎寧為二元堿，其中喹核堿的堿性較強(qiáng)，可與硫酸生成鹽；而喹啉環(huán)的堿性極弱，不能與硫酸成鹽，而保持游離狀態(tài)。當(dāng)用高氯酸直接滴定硫酸奎寧時(shí)，1mol的硫酸奎寧消耗3mol的高氯酸。其反應(yīng)式如下：

(C20H24N2·H+)2SO4+3HClO4→(C20H24N2·2H+)·2ClO4-

+(C20H24N2·2H+)·HSO4-·ClO4-

Ch.P和USP(24)都采用此法測定硫酸奎寧和硫酸奎尼丁的含量。（2）硫酸奎寧測定：奎寧為二元堿，其中喹核堿的堿性較56滴定反應(yīng)如下：+3HClO4+用HClO4直接滴定硫酸喹寧時(shí)，摩爾比是1∶3滴定反應(yīng)如下：+3HClO4+用HClO4直接滴定硫酸喹寧時(shí)57硫酸奎寧片的測定

首先經(jīng)過堿化處理，生成奎寧的游離堿，再用高氯酸直接滴定。

摩爾比為1：4B2·H2SO4＋2NaOH→2B+Na2SO4+2H2OB+2HClO4≒B·2HClO4硫酸奎寧片的測定584.硝酸鹽的測定

硝酸在冰醋酸介質(zhì)中酸性不強(qiáng)，滴定反應(yīng)可以進(jìn)行完全。但是硝酸具有氧化性可以破壞指示劑使其變色，使指示劑無法指示終點(diǎn)。因此采用非水溶液滴定法測定硝酸鹽時(shí)，一般不用指示劑法而用電位法指示終點(diǎn)。4.硝酸鹽的測定595.

磷酸鹽及有機(jī)酸鹽的測定磷酸、有機(jī)酸為弱酸，不干擾滴定。5.

磷酸鹽及有機(jī)酸鹽的測定磷酸、有機(jī)酸為弱酸，不干擾滴定。60終點(diǎn)指示方法最常用的指示劑是結(jié)晶紫，少量電位法紫藍(lán)藍(lán)綠黃綠黃（堿性區(qū)）—————→（酸性區(qū)）終點(diǎn)的顏色應(yīng)用電位法校準(zhǔn)。終點(diǎn)指示方法紫藍(lán)藍(lán)綠黃綠黃61（一）硝苯地平的測定

基本原理硝苯地平的測定原理，可用下列反應(yīng)式表示：

終點(diǎn)時(shí):微過量的Ce4+將指示劑鄰二氮菲亞鐵中的Fe2+氧化成Fe3+，使橙紅色配合物離子呈淡藍(lán)色或無色，以指示終點(diǎn)的到達(dá)。二、鈰量法（一）硝苯地平的測定二、鈰量法62（二）吩噻嗪類藥物的測定藥物Ce(SO4),-e紅色Ce(SO4),-2e紅色消退自身指示終點(diǎn)或電位法、永停法指示終點(diǎn)（二）吩噻嗪類藥物的測定藥物Ce(SO4),-e紅色Ce(63優(yōu)點(diǎn)：（1）賦形劑不干擾,復(fù)方制劑中咖啡因、苯丙胺、可待因、巴比妥類藥物等不干擾；（2）反應(yīng)為一價(jià)還原（Ce4+→Ce3+）,對(duì)環(huán)上取代基無作用；（3）用于原料藥，也可用于制劑分析。優(yōu)點(diǎn)：64（二）溴酸鉀法異煙肼具有較強(qiáng)的還原性，在酸性溶液中可以用溴酸鉀滴定，異煙肼及其片劑均可用此法測定，方法簡便準(zhǔn)確。取本品約0.2g，精密稱定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀釋到刻度，搖勻，精密量取25ml，加水50ml，鹽酸20ml與甲基橙指示劑1滴，用溴酸鉀滴定液（0.01667mol/L）緩緩滴定（溫度保持在18~25℃）至紅色消失。

（二）溴酸鉀法65討論：1、甲基橙是不可逆氧化還原指示劑，為防止溶液中局部過濃的溴酸鉀破壞指示劑提前到達(dá)終點(diǎn)，應(yīng)在18~25℃溫度下，于充分?jǐn)嚢璧臈l件下緩緩滴定。2、加水量的多少對(duì)指示劑的褪色影響較大。當(dāng)鹽酸用量20ml，加水25ml，顏色5分鐘未褪，加水30ml，褪色時(shí)間45秒，當(dāng)加水70ml以上，褪色時(shí)間在2秒以內(nèi)。討論：66三、比色法（一）酸性染料比色法原理:在適當(dāng)pH溶液中,有機(jī)堿（B）可以與氫離子成鹽,酸性染料（HIn）可解離成陰離子,陰離子可與有機(jī)堿鹽陽離子定量地結(jié)合成有色離子對(duì)，而進(jìn)入到有機(jī)相。通過測定有機(jī)溶劑提取液的吸收度;或?qū)⒂袡C(jī)溶劑提取液酸化或堿化，使與有機(jī)堿結(jié)合的酸性染料釋放出來，測定染料的吸收度來測得有機(jī)堿的含量。

三、比色法原理:

67雜環(huán)類藥物的分析TheAnalysisofHeterodrugs課件68主要條件1、最主要條件是水相的pH要求：能使有機(jī)堿全部以鹽的形式存在，酸性染料能夠解離成離子，以便它們定量地結(jié)合成離子對(duì)而轉(zhuǎn)溶于有機(jī)相，且又能將剩余的染料完全保留在水相。主要條件69★pH（酸性）BH+，In－BH+In-，有機(jī)溶劑提取的是HIn★pH（堿性）

In-，BH+BH+In-，有機(jī)溶劑提取的是B★pH（酸性）BH+，In－★pH（堿性）702、酸性染料的選擇要求：常用酸性染料有溴麝香草酚藍(lán)、甲基橙、溴甲酚綠等。酸性染料濃度，對(duì)測定影響不大，有足夠量即可。（1）能與有機(jī)堿定量的結(jié)合（2）生成的絡(luò)合物（離子對(duì)）在有機(jī)相中溶解度大（3）染料自身在有機(jī)溶劑中不溶或很少溶解（4）在最大波長處有較高的吸收度。

2、酸性染料的選擇71(3)有機(jī)溶劑的選擇

有機(jī)堿藥物應(yīng)對(duì)離子對(duì)提取率高，不與水混溶，或能與離子對(duì)形成氫鍵的有機(jī)溶劑。常用的有機(jī)溶劑有氯仿、二氯甲烷、二氯乙烯、四氯化碳等。(4)水分的影響：嚴(yán)防水分混入有機(jī)溶劑中，水相中有色酸性染料，而影響測定結(jié)果；水分的混入使氯仿混濁，而影響比色測定。一般加入脫水劑，或?yàn)V紙過濾的方法，除去混入的水分。(3)有機(jī)溶劑的選擇有機(jī)堿藥物應(yīng)對(duì)離子對(duì)提取率高，不與72（二）鈀離子比色法：

原理：吩噻嗪類藥物可與一些金屬離子（如Pd2+）在適當(dāng)pH值的溶液中形成有色的絡(luò)合物，借以進(jìn)行比色測定。（二）鈀離子比色法：73

反應(yīng)在pH2±0.1的緩沖液中進(jìn)行優(yōu)點(diǎn)：鈀離子比色法可選擇性地用于未被氧化的吩噻嗪類藥物的測定。反應(yīng)在pH2±0.1的緩沖液中進(jìn)行優(yōu)點(diǎn)：74（一）直接分光光度法

供試品不需提取分離，溶于適當(dāng)?shù)娜軇┲屑纯蛇M(jìn)行含量測定。

1.奧沙西泮原料的測定在229nm，采用標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法測定。

2.鹽酸異丙嗪片的測定在249nm，采用E1cm1%＝910測定。

3.鹽酸異丙嗪注射液的測定

測定波長的選擇：注射液處方加VC作抗氧劑，防止異丙嗪氧化變色。VC在鹽酸異丙嗪最大吸收波長249nm處有吸收，干擾測定。因此選用299nm波長測定鹽酸異丙嗪注射液的含量時(shí)，維生素C在此波長處則不產(chǎn)生干擾,但E1cm1%

＝108

。四、紫外分光光度法（一）直接分光光度法四、紫外分光光度法75（二）萃取后分光光度法

鹽酸氯丙嗪注射液（二）萃取后分光光度法76（三）萃取—雙波長分光光度法原理在待測組分（a）的最大吸收波長（測定波長，1）處測定待測組分和干擾組分（b）吸收度的總和；另選一適當(dāng)波長（參比波長，2）測定吸收度，并使干擾組分在測定波長和參比波長處的吸收度相等，而待測組分在這兩個(gè)波長處吸收度的差值足夠大。必要條件

①干擾組分在兩個(gè)波長處吸收度相等

②待測組分在兩個(gè)波長處吸收度相差足夠大（三）萃取—雙波長分光光度法必要條件77定量依據(jù)樣品在二波長下吸收度差值（A）：即，吸收度差值（A）僅與待測組分的濃度有關(guān)，而與干擾組分無關(guān)，干擾組分的干擾被消除。定量依據(jù)樣品在二波長下吸收度差值（A）：即，吸收度差78（四）二階導(dǎo)數(shù)分光光度法鹽酸氯丙嗪注射液

抗氧劑維生素C的二階導(dǎo)數(shù)光譜近似為接近基線的一條直線，不干擾鹽酸氯丙嗪的測定因此鹽酸氯丙嗪可從其二階導(dǎo)數(shù)光譜量取峰66nm～谷254nm距離，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量（四）二階導(dǎo)數(shù)分光光度法因此鹽酸氯丙嗪可從其二階導(dǎo)數(shù)光譜量79五、氣相色譜法一、托烷類藥物制劑的含量測定二、血漿中二氫吡啶類藥物的測定五、氣相色譜法一、托烷類藥物制劑的含量測定80六．高效液相色譜法：

1．特點(diǎn)：80~90%反相色譜分離，最常用十八烷基硅烷鍵合硅膠（ODS）。硅膠表面僅有25~50%硅醇基可與硅烷化試劑作用，在分離極性化合物特別是堿性藥物和生物堿時(shí)，裸露的硅醇基和堿性藥物發(fā)生吸附或離子交換作用，而使色譜峰拖尾，保留時(shí)間過長，甚至長期保留在色譜柱上。六．高效液相色譜法：1．特點(diǎn)：812．幾種主要方法：（1）加掃尾劑法：以十八烷基硅烷（ODS）鍵合的硅膠為固定相，在流動(dòng)相中加入掃尾劑，以抑制或掩蔽固定相表面的游離硅醇基的活性。最常用的掃尾劑是三乙胺（TEA）。（2）離子對(duì)HPLC法2．幾種主要方法：82離子對(duì)HPLC法測定氫溴酸東莨菪堿注射液的含量和降解產(chǎn)物的測定色譜條件色譜柱:DiamonsilTM(鉆石)C18(150mm×4.6mm,5μm);流動(dòng)相:0.004%磷酸溶液(pH3.0)-乙腈(50∶50)配制的8mmol·L-1十二烷基硫酸鈉溶液;流速:1.0mL·min-1;檢測波長:210nm;進(jìn)樣量:10μL。

氫溴酸東莨菪堿分離色譜圖2.氫溴酸東莨菪堿;3.硫酸阿托品離子對(duì)HPLC法測定氫溴酸東莨菪堿注射液的含量和降解產(chǎn)物的測83（3）用硅膠作固定相法：在不改性的普通硅膠柱上，利用堿性成分與硅醇基相互作用，以高濃度極性有機(jī)溶劑，堿性水相緩沖液為流動(dòng)相分離堿性藥物。（4）用金剛烷基硅烷化硅膠作固定相法：這種固定相表面被一根根短的烴鏈（乙基）連著的烴球（金剛烷）將硅膠表面上未反應(yīng)的硅醇基全部覆蓋，使其不能與極性物質(zhì)作用。（3）用硅膠作固定相法：在不改性的普通硅膠柱上，利用堿性成分84七、液-質(zhì)聯(lián)用法

液-質(zhì)聯(lián)用儀由以下幾部分組成

數(shù)據(jù)及供電系統(tǒng)┏━━━━┳━━━━━╋━━━━━━┓進(jìn)樣系統(tǒng)離子源質(zhì)量分析器檢測接收器┗━━━━━╋━━━━━━┛

真空系統(tǒng)

七、液-質(zhì)聯(lián)用法液-質(zhì)聯(lián)用儀由以下幾部分組成85色-質(zhì)聯(lián)用特點(diǎn)適用于多組分混合物的定性鑒定，克服色譜法在無純物質(zhì)作對(duì)照時(shí)難于定性的缺點(diǎn)。利用選擇性離子檢測，可鑒定出部分分離、甚至未分離的峰。利用選擇性離子檢測定量。色-質(zhì)聯(lián)用特點(diǎn)適用于多組分混合物的定性鑒定，克服色譜法在無純86

LC/MS系統(tǒng)構(gòu)成++

樣品與溶劑脫離及電離

EIESIAPCILC/MS接口

離子源質(zhì)量分析器檢測離子HPLC數(shù)據(jù)系統(tǒng)質(zhì)譜離子識(shí)別

QuadrapoleTimeofFlightFourierTransform…+++++++離子檢測++-++++++-+++LC/MS系統(tǒng)構(gòu)成++樣品與溶劑脫LC/MS離子87EI:電子轟擊電離—硬電離。CI:化學(xué)電離—核心是質(zhì)子轉(zhuǎn)移。ESI:電噴霧電離—適宜極性分子的分析，能分析小分子及大分子(如蛋白質(zhì)分子多肽等)

APCI:大氣壓化學(xué)電離—屬較軟的電離方式，更適宜做弱極性小分子。其中ESI，APCI統(tǒng)稱大氣壓電離(API)EI:電子轟擊電離—硬電離。其中ESI，APCI統(tǒng)稱大氣壓88硝苯地平緩釋片在健康志愿者體內(nèi)的生物等效性硝苯地平緩釋片在健康志愿者體內(nèi)的生物等效性89雜環(huán)類藥物的分析TheAnalysisofHeterodrugs課件90硝苯地平遇光不穩(wěn)定,所有操作均在避光條件下進(jìn)行?？疾炝艘颐选⒁宜嵋掖住⒄和?、正己烷一二氯甲烷等有機(jī)試劑對(duì)硝苯地平的提取效率。結(jié)果表明,經(jīng)乙醚提取的樣品硝苯地平及內(nèi)標(biāo)地西伴的提取回收率較高,且對(duì)測定沒有干擾,故選擇乙醚為提取試劑。提取過程中氫氧化鈉溶液的加人可以減少內(nèi)源性雜質(zhì)的干擾。硝苯地平遇光不穩(wěn)定,所有操作均在避光條件下進(jìn)行?？疾炝艘颐?1第八章雜環(huán)類藥物的分析第八章雜環(huán)類藥物的分析92概述定義：

雜環(huán)類藥物是指：碳環(huán)中夾雜有非碳原子的環(huán)狀有機(jī)化合物，其中的非碳原子成為雜原子，一般為氧、硫、氮等。分類：

按其所含的雜原子種類與數(shù)目，環(huán)的元數(shù)與環(huán)數(shù)的不同分為：吡啶類、喹啉類、托烷類、酚噻嗪類和苯并二氮卓類等。而各大類又可根據(jù)環(huán)上取代基的類型、數(shù)目、位置的不同衍生出眾多的同系列藥物。概述定義：93共性:(1)雜環(huán)類藥物是合成藥物中所占比例最多的一大類藥物.(2)多為五元環(huán)或六元環(huán),單環(huán)或并合環(huán).(3)雜環(huán)結(jié)構(gòu)較穩(wěn)定,不易開環(huán),其性質(zhì)受雜原子種類、數(shù)目、位置影響.(4)雜環(huán)上取代基性質(zhì)較活潑,常用于分析.(5)含氮雜環(huán),其堿性的強(qiáng)弱往往用于分析.共性:94

第一節(jié)吡啶類藥物分析一、結(jié)構(gòu)分析1.

結(jié)構(gòu)：本類藥物均有吡啶環(huán)吡啶

異煙肼尼可剎米第一節(jié)吡啶類藥物分析一、結(jié)構(gòu)分析吡啶異煙肼尼可剎米952.性質(zhì)：（1）堿性：吡啶環(huán)上氮原子具有叔胺性質(zhì)，pKb=8.8（水中），可非水滴定；（2）母核能與金屬鹽反應(yīng)生成有色沉淀（3）異煙肼：酰肼基有強(qiáng)還原性,且能與羰基縮合,氧化還原滴定；（4）尼可剎米:酰胺基堿性下可水解,放出NH(C2H5)2↑，用于鑒別或凱氏定N直接蒸餾測定。2.性質(zhì)：96二、鑒別：

（一）吡啶環(huán)的開環(huán)反應(yīng)適用于a,a’未取代，b,γ烷基或羧基取代的。1.

戊烯二醛反應(yīng)（k?nig反應(yīng)）二、鑒別：1.

戊烯二醛反應(yīng)（k?nig反應(yīng)）97

2、與2，4-二硝基氯苯反應(yīng)，加醇制氫氧化鉀紫紅色

紫紅色2、與2，4-二硝基氯苯反應(yīng)，加醇制氫氧化鉀紫紅色98（二）、酰肼基團(tuán)的反應(yīng)

常用的氧化劑：I2、Br2、KBrO3、AgNO31還原反應(yīng)：（二）、酰肼基團(tuán)的反應(yīng)常用的氧化劑：I2、Br2、KBrO99取本品約10mg加水2ml溶解加氨制硝酸銀試液反應(yīng)現(xiàn)象：產(chǎn)生氣泡與黑色渾濁，并在試管壁上形成銀鏡取本品約10mg加水2ml溶解加氨制硝酸銀試液反應(yīng)現(xiàn)象：產(chǎn)生1002、縮合反應(yīng)：與芳醛縮合形成腙，如香草醛、水楊醛、二甲氨基苯甲醛黃色異煙腙λmax=380nm，在105℃干燥后，測定熔點(diǎn)，228231℃香草醛2、縮合反應(yīng)：與芳醛縮合形成腙，黃色異煙腙λmax=380n101(四)形成沉淀的反應(yīng)（吡啶環(huán)）（1）與金屬離子反應(yīng)生成有色沉淀

異煙肼,尼可剎米+HgCl2→白色沉淀↓

異煙肼+CuSO4→紅棕色↓（Cu2O）尼可剎米+CuSO4+硫氰酸鉀→草綠色絮狀沉淀(四)形成沉淀的反應(yīng)（吡啶環(huán)）（1）與金屬離子反應(yīng)生成有色沉102（五）分解產(chǎn)物的反應(yīng)

1.尼可剎米ChP（2000）

【鑒別】

（1）取本品10滴，加氫氧化鈉試液3ml，加熱，即發(fā)生二乙胺的臭氣，能使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變藍(lán)色。（六）紫外與紅外吸收光譜特征（五）分解產(chǎn)物的反應(yīng)1.尼可剎米ChP（103三、雜質(zhì)檢查

雜質(zhì)來源原料引入、降解產(chǎn)生

（一）異煙肼中游離肼的檢查

1.薄層色譜法（TLC）（1）ChP（2000）雜質(zhì)對(duì)照品法三、雜質(zhì)檢查雜質(zhì)來源原料引入、降解產(chǎn)生（104

取本品，加水制成每1ml中含50mg的溶液，作為供試品溶液。另取硫酸肼加水制成每1ml中含0.20mg（相當(dāng)于游離肼50μg的溶液，作為對(duì)照溶液。吸取供試品溶液10μl與對(duì)照溶液2μl分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板（用羧甲基纖維素鈉溶液制備）上，以異丙醇－丙酮（3∶2）為展開劑，展開后，晾干，噴以乙醇制對(duì)二甲氨基苯甲醛試液，15min后檢視，在供試品主斑點(diǎn)前方與硫酸肼斑點(diǎn)相應(yīng)的位置上，不得顯黃色斑點(diǎn)。取本品，加水制成每1ml中含50mg的溶105（2）BP（1998）游離肼雜質(zhì)對(duì)照品法有關(guān)物質(zhì)高低濃度對(duì)比法（2）BP（1998）1062.比濁法JP（13）檢查方法靈敏度法

反應(yīng)原理游離肼+水楊醛→水楊醛腙↓

優(yōu)點(diǎn)：不用對(duì)照品，價(jià)廉、簡單易行缺點(diǎn)：準(zhǔn)確度差2.比濁法JP（13）107（二）尼可剎米中有關(guān)物質(zhì)的檢查

ChP（2005）

TLC高低濃度對(duì)比法配制兩種不同濃度的對(duì)照溶液（二）尼可剎米中有關(guān)物質(zhì)的檢查ChP（2005）108第二節(jié)喹啉類藥物共性：含有吡啶與苯環(huán)稠合而成的喹啉雜環(huán)

代表藥物：硫酸奎寧、硫酸奎尼丁硫酸奎寧硫酸奎尼丁

第二節(jié)喹啉類藥物硫酸奎寧109

鹽酸環(huán)丙沙星鹽酸環(huán)丙沙星110主要化學(xué)性質(zhì)：1、堿性：喹啉環(huán)上的氮原子具有堿性，可與強(qiáng)酸形成穩(wěn)定的鹽。2、旋光性：硫酸奎寧為左旋體；硫酸奎尼丁為右旋體。3、熒光特性主要化學(xué)性質(zhì)：111二、鑒別試驗(yàn)（一）綠奎寧反應(yīng)6－羥基喹啉，經(jīng)氯水的氯化反應(yīng)，再以氨水處理，生成綠色的二醌基吲胺的銨鹽。O二、鑒別試驗(yàn)（一）綠奎寧反應(yīng)O112（二）光譜特征1.UVCh.P采用本法鑒別鹽酸環(huán)丙沙星。2.熒光光譜特征硫酸奎寧和硫酸奎尼丁，在稀H2SO4中均顯藍(lán)色熒光，鹽酸環(huán)丙沙星則無熒光，可用于本類藥物的鑒別。3.IRCh.P中硫酸奎寧和鹽酸環(huán)丙沙星均采用紅外光譜的方法進(jìn)行鑒別，而硫酸奎尼丁未采用此法。（二）光譜特征113（三）無機(jī)酸鹽硫酸奎寧硫酸奎尼丁酸性條件

BaCl2白色沉淀鹽酸環(huán)丙沙星酸性條件

AgNO3白色沉淀（三）無機(jī)酸鹽硫酸奎寧酸性條件BaCl2白色沉淀鹽酸114第三節(jié)托烷類（莨菪烷類）莨菪烷衍生的氨基醇和不同有機(jī)酸縮合成酯硫酸阿托品、氫溴酸東莨菪堿硫酸阿托品氫溴酸東莨菪堿第三節(jié)托烷類（莨菪烷類）硫酸阿托品115主要化學(xué)性質(zhì)1.水解性

本類藥物分子結(jié)構(gòu)中具有酯的結(jié)構(gòu)，易水解。以阿托品為例，水解生成莨菪醇(Ⅰ)和莨菪酸(Ⅱ)。2.堿性

阿托品和東莨菪堿的結(jié)構(gòu)中，五元脂環(huán)上含有叔胺氮原子,具有較強(qiáng)的堿性,易與酸成鹽。如阿托品的pKb1為4.35。3.旋光性氫溴酸東莨菪堿結(jié)構(gòu)中含有不對(duì)稱碳原子，呈左旋體，阿托品結(jié)構(gòu)中雖然有不對(duì)稱碳原子，但因外消旋化而為消旋，無旋光性。主要化學(xué)性質(zhì)2.堿性阿托品和東莨菪堿的結(jié)構(gòu)中，五元脂環(huán)116（一）托烷生物堿一般鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn)生物堿水解莨菪酸發(fā)煙硝酸三硝基衍生物KOH（C2H5OH）固體KOH有色的醌型產(chǎn)物（一）托烷生物堿一般鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn)生物堿水解莨菪酸發(fā)煙硝酸117（二）氧化反應(yīng)

本類藥物水解后，生成的莨菪酸，可與硫酸和重鉻酸鉀在加熱的條件下，發(fā)生氧化反應(yīng)，生成苯甲醛，而逸出類似苦杏仁的臭味。其反應(yīng)式為：（二）氧化反應(yīng)118(三)沉淀反應(yīng)

本類藥物具有堿性，可與生物堿沉淀劑生成沉淀。

如：阿托品+氯化汞醇試液黃色沉淀東莨菪堿+氯化汞醇試液白色沉淀（四）硫酸鹽與溴化物反應(yīng)硫酸阿托品+氯化鋇白色沉淀（不溶于鹽酸或硝酸）硫酸阿托品+醋酸鉛白色沉淀（溶于醋酸氨或氫氧化鈉溶液）氫溴酸東莨菪堿+硝酸銀黃色凝乳沉淀氨試液中微溶，硝酸中幾乎不溶。加氯試液，再加氯仿，氯仿層顯黃色或紅棕色(三)沉淀反應(yīng)（四）硫酸鹽與溴化物反應(yīng)白色沉淀（不溶于鹽119第四節(jié)吩噻嗪類藥物分析一、結(jié)構(gòu)分析共同點(diǎn)：（1）硫氮雜蒽母核；（2）含兩個(gè)雜原子多環(huán)共軛體系，有UV吸收；（3）S具還原性，可被氧化生成砜或亞砜；（4）與金屬離子絡(luò)合，生成有色物，可比色測定第四節(jié)吩噻嗪類藥物分析一、結(jié)構(gòu)分析共同點(diǎn)：120雜環(huán)類藥物的分析TheAnalysisofHeterodrugs課件121奮乃靜癸氟奮乃靜奮乃靜癸氟奮乃靜122二、性質(zhì)

1.紫外與紅外吸收光譜本類藥物的紫外特征吸收，主要由母核三環(huán)的π系統(tǒng)所產(chǎn)生，一般具有三個(gè)峰值。即在204～209nm（205nm附近）、250～265nm（254nm附近）和300～325nm（300nm附近）。最強(qiáng)峰多在250～265nm。2位上的取代基（R′）不同，會(huì)引起吸收峰發(fā)生位移。

其結(jié)構(gòu)中的硫，易氧化，氧化產(chǎn)物砜及亞砜有四個(gè)吸收峰。

二、性質(zhì)123

2.易被氧化呈色硫氮雜蒽母核中的二價(jià)硫易氧化，遇不同氧化劑（硫酸，過氧化氫），其母核易被氧化成亞砜、砜等不同產(chǎn)物，隨取代基的不同呈現(xiàn)的顏色不同。3.易與金屬離子絡(luò)合呈色本類藥物分子結(jié)構(gòu)中未被氧化的硫，可與金屬鈀離子形成配位化合物。※其氧化產(chǎn)物砜和亞砜無此反應(yīng)4.堿性

2.易被氧化呈色124二、鑒別試驗(yàn)

（一）UV和IRUV：奮乃靜

ChP（2005）[鑒別]取本品，加無水乙醇制成每1ml中含7g的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA）測定，在258nm的波長處有最大吸收，吸收度約為0.65。

IR：本品的紅外吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜一致二、鑒別試驗(yàn)（一）UV和IRIR：本品的紅外吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)125

（二）顯色反應(yīng)

1.與氧化劑的顯色反應(yīng)

藥物名稱硫酸硝酸過氧化氫

鹽酸氯丙嗪顯紅色,漸變淡黃色—

鹽酸異丙嗪顯櫻桃紅色,放置生成紅色沉淀,加熱即溶解,

后顏色漸變深溶液由紅色轉(zhuǎn)變?yōu)槌赛S色奮乃靜——顯深紅色;放置后紅色漸褪去鹽酸氟奮乃靜顯淡紅色,溫?zé)帷?/p>

后變成紅褐色鹽酸三氟拉嗪—生成微帶紅色的白色沉淀;放—

置后,紅色變深,加熱后變黃色

鹽酸硫利達(dá)嗪顯藍(lán)色

—

—

（二）顯色反應(yīng)126

2.與鈀離子絡(luò)合顯色反應(yīng)

利用分子結(jié)構(gòu)中未被氧化的硫與金屬鈀離子絡(luò)合形成有色絡(luò)合物，如與癸氟奮乃靜形成紅色絡(luò)合物。2.與鈀離子絡(luò)合顯色反應(yīng)127（三）分解產(chǎn)物的反應(yīng)癸氟奮乃靜

ChP（2005）含氟藥物[鑒別]（1）取本品15～20mg，加碳酸鈉與碳酸鉀各約0.1g，混勻，在600℃熾灼15～20分鐘，放冷，加水2ml使溶解，加鹽酸溶液（1→2）酸化，濾過，濾液加茜素鋯試液0.5ml，應(yīng)顯黃色。（三）分解產(chǎn)物的反應(yīng)128雜環(huán)類藥物的分析TheAnalysisofHeterodrugs課件129三、有關(guān)物質(zhì)檢查

1.癸氟奮乃靜及其注射液

TLC參比雜質(zhì)對(duì)照品法以鹽酸氟奮乃靜為對(duì)照品

2.其他藥物

TLC高低濃度對(duì)比法三、有關(guān)物質(zhì)檢查130第五節(jié)苯并二氮雜卓類藥物的分析

第五節(jié)苯并二氮雜卓類藥物的分析131雜環(huán)類藥物的分析TheAnalysisofHeterodrugs課件132硝西泮阿普唑侖硝西泮阿普唑侖133一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)

1.苯并二氮雜卓母核弱堿性，UV2.結(jié)構(gòu)中的環(huán)一般比較穩(wěn)定，但在酸性溶液中可水解，形成相應(yīng)的二苯甲酮衍生物。

3.不同pH條件下離子狀態(tài)不同，UV不同

一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1.苯并二氮雜卓母核弱堿性，U134

1.沉淀反應(yīng)

氯氮卓

橙紅色沉淀

阿普唑侖鹽酸氟西泮

＋KBiI4

也生成橙紅色沉淀氯硝西泮放置后，沉淀顏色變深，因此可以相互區(qū)別。鑒別試驗(yàn)阿普唑侖+遇硅鎢酸白色沉淀，藥典中也用于鑒別。

(一)化學(xué)鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn)阿普唑侖+遇硅鎢酸白色沉淀，藥典1352.水解后呈芳伯胺反應(yīng)2.水解后呈芳伯胺反應(yīng)1363.硫酸-熒光反應(yīng)

本類藥物溶于硫酸后，在紫外光（365nm）下，顯不同顏色的熒光。例如：

地西泮黃綠色黃色氯氮卓黃色紫色艾司唑侖+H2SO4亮綠色+稀硫酸天藍(lán)色硝西泮淡藍(lán)色藍(lán)綠色奧沙西泮淡黃綠色4.含鹵素3.硫酸-熒光反應(yīng)地西泮137（二）紫外特征吸收和紅外吸收光譜（三）色譜法TLC法酸水解產(chǎn)物的TLC法（二）紫外特征吸收和紅外吸收光譜138一、非水溶液滴定法(一)基本原理：在水中堿性較弱，不能順利地進(jìn)行中和滴定。在酸性非水介質(zhì)中（如HAc中），則能顯示出較強(qiáng)的堿性，滴定突躍增大，可以順利地進(jìn)行中和滴定。

含量測定當(dāng)HA酸性較強(qiáng)時(shí)，反應(yīng)不能定量完成，必須除去或降低HA的酸性，使反應(yīng)順利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游離堿類鹽被置換出的弱酸因此，要根據(jù)不同情況采用相應(yīng)測定條件。一、非水溶液滴定法含量測定當(dāng)HA酸性較強(qiáng)時(shí)，反應(yīng)不能定量完139(二)一般方法供試品+冰醋酸10ml~30ml若供試品為氫鹵酸鹽再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml~5ml結(jié)果高氯酸滴定液滴定以空白試驗(yàn)校正(二)一般方法供試品+冰醋酸10ml~30ml若供試品為氫1401.適用范圍

主要用于Kb＜10-8的有機(jī)堿鹽的含量測定。對(duì)堿性較弱的雜環(huán)類藥物，只要選擇合適的溶劑、滴定劑和終點(diǎn)指示的方法，可使pKb為8～13的弱堿性藥物采用本法滴定。

一般來說：

Kb為10-8～10-10時(shí)，宜選冰醋酸作為溶劑；藥物的Kb為10-10～10-12時(shí)，宜選冰醋酸與醋酐的混合溶液；

Kb＜10-12時(shí)，應(yīng)用醋酐作為溶劑。

另外，在冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突躍顯著增大，使一些堿性極弱的雜環(huán)類藥物獲得滿意測定結(jié)果。

(三)問題討論1.適用范圍主要用于Kb＜10-8的有機(jī)堿鹽的含量測定。對(duì)141

2.酸根的影響：無機(jī)酸類，在醋酸介質(zhì)中的酸性以下列排序遞減：

高氯酸＞氫溴酸＞硫酸＞鹽酸＞硝酸

消除HX干擾的方法：加Hg(Ac)2

量不足終點(diǎn)不明顯，結(jié)果偏低。

2B·HX+Hg(Ac)2→2B·HAc+HgX2

過量(1～3倍)不影響測定結(jié)果2.酸根的影響：無機(jī)酸類，在醋酸介質(zhì)中的酸性以下列排序遞142(四)應(yīng)用實(shí)例

1.游離弱堿性藥物測定

異煙肼、尼可剎米、地西泮及氯氮卓等?；谶@些藥物分子結(jié)構(gòu)中氮原子的弱堿性，可用非水溶液滴定法直接測定其含量。由于這些藥物的堿性強(qiáng)弱不同，測定時(shí)所采用溶劑、指示劑及其指示終點(diǎn)的方法也不盡相同。

藥物名稱取樣量(g)溶劑指示劑終點(diǎn)顏色

尼可剎米0.15冰醋酸10ml結(jié)晶紫藍(lán)綠色地西泮0.2冰醋酸、酸酐10ml結(jié)晶紫綠色氯氮卓0.3冰醋酸10ml結(jié)晶紫藍(lán)色(四)應(yīng)用實(shí)例143

2.氫鹵酸鹽類藥物測定

當(dāng)這些藥物溶于冰醋酸時(shí)，由于氫鹵酸在冰醋酸中酸性較強(qiáng)，對(duì)測定有干擾，必須先加入過量的醋酸汞冰醋酸溶液，使其形成難以電離的鹵化汞，而氫鹵酸鹽藥物，則轉(zhuǎn)變成可測定的醋酸鹽。然后再用高氯酸滴定液滴定，并可獲得滿意的結(jié)果。應(yīng)用示例如下：

藥物名稱取樣量(g)溶劑加入醋酸汞試液(ml)指示劑終點(diǎn)顏色

鹽酸氯丙嗪0.2醋酐10ml5橙黃Ⅳ玫瑰紅色鹽酸異丙嗪0.3冰醋酸10ml4結(jié)晶紫藍(lán)色鹽酸氟奮乃靜0.3冰醋酸20ml5結(jié)晶紫藍(lán)綠色鹽酸環(huán)丙沙星0.2冰醋酸25ml5橙黃Ⅳ粉紅色氫溴酸東莨菪堿0.3冰醋酸20ml5結(jié)晶紫純藍(lán)色

2.氫鹵酸鹽類藥物測定1443.硫酸鹽類藥物測定

硫酸是二元酸，在水溶液中能完成二級(jí)解離，生成SO42-，但在非水介質(zhì)中，只顯示一元酸解離為HSO4，即只供給一個(gè)H+，所以硫酸鹽類藥物在冰醋酸中，只能滴定至硫酸氫鹽，因此可以用高氯酸滴定液直接滴定。3.硫酸鹽類藥物測定145（1）硫酸阿托品測定：阿托品為堿性較強(qiáng)的

一元堿藥物，因而硫酸阿托品的化學(xué)結(jié)構(gòu)式可以簡寫為(BH+)2·SO42-，用高氯酸直接滴定時(shí)的反應(yīng)式為：(BH+)2·SO42-+HClO4→(BH+)·ClO4-+(BH+)·HSO4-可根據(jù)1mol的硫酸阿托品消耗1mol高氯酸的關(guān)系計(jì)算其含量。（1）硫酸阿托品測定：阿托品為堿性較強(qiáng)的(BH+)2·SO4146（2）硫酸奎寧測定：奎寧為二元堿，其中喹核堿的堿性較強(qiáng)，可與硫酸生成鹽；而喹啉環(huán)的堿性極弱，不能與硫酸成鹽，而保持游離狀態(tài)。當(dāng)用高氯酸直接滴定硫酸奎寧時(shí)，1mol的硫酸奎寧消耗3mol的高氯酸。其反應(yīng)式如下：

(C20H24N2·H+)2SO4+3HClO4→(C20H24N2·2H+)·2ClO4-

+(C20H24N2·2H+)·HSO4-·ClO4-

Ch.P和USP(24)都采用此法測定硫酸奎寧和硫酸奎尼丁的含量。（2）硫酸奎寧測定：奎寧為二元堿，其中喹核堿的堿性較147滴定反應(yīng)如下：+3HClO4+用HClO4直接滴定硫酸喹寧時(shí)，摩爾比是1∶3滴定反應(yīng)如下：+3HClO4+用HClO4直接滴定硫酸喹寧時(shí)148硫酸奎寧片的測定

首先經(jīng)過堿化處理，生成奎寧的游離堿，再用高氯酸直接滴定。

摩爾比為1：4B2·H2SO4＋2NaOH→2B+Na2SO4+2H2OB+2HClO4≒B·2HClO4硫酸奎寧片的測定1494.硝酸鹽的測定

硝酸在冰醋酸介質(zhì)中酸性不強(qiáng)，滴定反應(yīng)可以進(jìn)行完全。但是硝酸具有氧化性可以破壞指示劑使其變色，使指示劑無法指示終點(diǎn)。因此采用非水溶液滴定法測定硝酸鹽時(shí)，一般不用指示劑法而用電位法指示終點(diǎn)。4.硝酸鹽的測定1505.

磷酸鹽及有機(jī)酸鹽的測定磷酸、有機(jī)酸為弱酸，不干擾滴定。5.

磷酸鹽及有機(jī)酸鹽的測定磷酸、有機(jī)酸為弱酸，不干擾滴定。151終點(diǎn)指示方法最常用的指示劑是結(jié)晶紫，少量電位法紫藍(lán)藍(lán)綠黃綠黃（堿性區(qū)）—————→（酸性區(qū)）終點(diǎn)的顏色應(yīng)用電位法校準(zhǔn)。終點(diǎn)指示方法紫藍(lán)藍(lán)綠黃綠黃152（一）硝苯地平的測定

基本原理硝苯地平的測定原理，可用下列反應(yīng)式表示：

終點(diǎn)時(shí):微過量的Ce4+將指示劑鄰二氮菲亞鐵中的Fe2+氧化成Fe3+，使橙紅色配合物離子呈淡藍(lán)色或無色，以指示終點(diǎn)的到達(dá)。二、鈰量法（一）硝苯地平的測定二、鈰量法153（二）吩噻嗪類藥物的測定藥物Ce(SO4),-e紅色Ce(SO4),-2e紅色消退自身指示終點(diǎn)或電位法、永停法指示終點(diǎn)（二）吩噻嗪類藥物的測定藥物Ce(SO4),-e紅色Ce(154優(yōu)點(diǎn)：（1）賦形劑不干擾,復(fù)方制劑中咖啡因、苯丙胺、可待因、巴比妥類藥物等不干擾；（2）反應(yīng)為一價(jià)還原（Ce4+→Ce3+）,對(duì)環(huán)上取代基無作用；（3）用于原料藥，也可用于制劑分析。優(yōu)點(diǎn)：155（二）溴酸鉀法異煙肼具有較強(qiáng)的還原性，在酸性溶液中可以用溴酸鉀滴定，異煙肼及其片劑均可用此法測定，方法簡便準(zhǔn)確。取本品約0.2g，精密稱定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀釋到刻度，搖勻，精密量取25ml，加水50ml，鹽酸20ml與甲基橙指示劑1滴，用溴酸鉀滴定液（0.01667mol/L）緩緩滴定（溫度保持在18~25℃）至紅色消失。

（二）溴酸鉀法156討論：1、甲基橙是不可逆氧化還原指示劑，為防止溶液中局部過濃的溴酸鉀破壞指示劑提前到達(dá)終點(diǎn)，應(yīng)在18~25℃溫度下，于充分?jǐn)嚢璧臈l件下緩緩滴定。2、加水量的多少對(duì)指示劑的褪色影響較大。當(dāng)鹽酸用量20ml，加水25ml，顏色5分鐘未褪，加水30ml，褪色時(shí)間45秒，當(dāng)加水70ml以上，褪色時(shí)間在2秒以內(nèi)。討論：157三、比色法（一）酸性染料比色法原理:在適當(dāng)pH溶液中,有機(jī)堿（B）可以與氫離子成鹽,酸性染料（HIn）可解離成陰離子,陰離子可與有機(jī)堿鹽陽離子定量地結(jié)合成有色離子對(duì)，而進(jìn)入到有機(jī)相。通過測定有機(jī)溶劑提取液的吸收度;或?qū)⒂袡C(jī)溶劑提取液酸化或堿化，使與有機(jī)堿結(jié)合的酸性染料釋放出來，測定染料的吸收度來測得有機(jī)堿的含量。

三、比色法原理:

158雜環(huán)類藥物的分析TheAnalysisofHeterodrugs課件159主要條件1、最主要條件是水相的pH要求：能使有機(jī)堿全部以鹽的形式存在，酸性染料能夠解離成離子，以便它們定量地結(jié)合成離子對(duì)而轉(zhuǎn)溶于有機(jī)相，且又能將剩余的染料完全保留在水相。主要條件160★pH（酸性）BH+，In－BH+In-，有機(jī)溶劑提取的是HIn★pH（堿性）

In-，BH+BH+In-，有機(jī)溶劑提取的是B★pH（酸性）BH+，In－★pH（堿性）1612、酸性染料的選擇要求：常用酸性染料有溴麝香草酚藍(lán)、甲基橙、溴甲酚綠等。酸性染料濃度，對(duì)測定影響不大，有足夠量即可。（1）能與有機(jī)堿定量的結(jié)合（2）生成的絡(luò)合物（離子對(duì)）在有機(jī)相中溶解度大（3）染料自身在有機(jī)溶劑中不溶或很少溶解（4）在最大波長處有較高的吸收度。

2、酸性染料的選擇162(3)有機(jī)溶劑的選擇

有機(jī)堿藥物應(yīng)對(duì)離子對(duì)提取率高，不與水混溶，或能與離子對(duì)形成氫鍵的有機(jī)溶劑。常用的有機(jī)溶劑有氯仿、二氯甲烷、二氯乙烯、四氯化碳等。(4)水分的影響：嚴(yán)防水分混入有機(jī)溶劑中，水相中有色酸性染料，而影響測定結(jié)果；水分的混入使氯仿混濁，而影響比色測定。一般加入脫水劑，或?yàn)V紙過濾的方法，除去混入的水分。(3)有機(jī)溶劑的選擇有機(jī)堿藥物應(yīng)對(duì)離子對(duì)提取率高，不與163（二）鈀離子比色法：

原理：吩噻嗪類藥物可與一些金屬離子（如Pd2+）在適當(dāng)pH值的溶液中形成有色的絡(luò)合物，借以進(jìn)行比色測定。（二）鈀離子比色法：164

反應(yīng)在pH2±0.1的緩沖液中進(jìn)行優(yōu)