




版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
關(guān)于青霉素類藥物工業(yè)分析與檢測(cè)方法第1頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六第一部分:青霉素類藥物生產(chǎn)工藝第2頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六菌種優(yōu)化抗生素發(fā)酵及提取精制工業(yè)生產(chǎn)方法及總的工藝抗生素生產(chǎn)菌的菌種菌種來源抗生素工業(yè)生產(chǎn)
內(nèi)容速覽第3頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六抗生素總的生產(chǎn)工藝過程菌種孢子制備種子制備發(fā)酵發(fā)酵液預(yù)處理及過濾出廠檢驗(yàn)提取過程成品包裝精制過程成品檢驗(yàn)第4頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六微生物合成抗生素下游:提取預(yù)處理過濾進(jìn)一步提取菌種保存、選育、孢子及種子制備發(fā)酵——適宜的培養(yǎng)基碳源氮源無機(jī)鹽(微量元素)前體上游:結(jié)晶干燥純品成品:制劑工作第5頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六第6頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六★發(fā)酵控制1)發(fā)酵時(shí)間:視抗生素品種和發(fā)酵工藝而定。2)溶氧:在整個(gè)發(fā)酵過程中,需不斷通無菌空氣和攪拌,以維持一定罐壓或溶氧。3)控制灌溫:在罐的夾層或蛇管中需通冷卻水以維持一定罐溫。4)消泡:加泡沫劑以控制泡沫,必要時(shí)還加入酸、堿以調(diào)節(jié)發(fā)酵液的pH。第7頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六成品檢驗(yàn)《中華人民共和國(guó)藥典》抗生素成品常規(guī)檢驗(yàn)的主要項(xiàng)目有:①鑒別實(shí)驗(yàn):用化學(xué)或生物方法證明是何種抗生素;②效價(jià)測(cè)定:測(cè)定有效成分的含量;③毒性試驗(yàn):限制產(chǎn)品中的致毒雜質(zhì)⑤水分測(cè)定:限制過高水分以免影響穩(wěn)定性;④無菌實(shí)驗(yàn):檢查有無雜菌污染;⑥pH測(cè)定:規(guī)定水溶液的酸堿度,保證產(chǎn)品穩(wěn)定和臨床的安全應(yīng)用;第8頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六第二部分:青霉素類藥物的分析與檢測(cè)第9頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六(一)、鑒別實(shí)驗(yàn)一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1、化學(xué)結(jié)構(gòu)①
青霉素類結(jié)構(gòu)NSRCONHCH3CH3COOHO1234567青霉素類:氫化噻唑環(huán)或氫化噻嗪環(huán)與β-內(nèi)酰胺并合的雜環(huán),分別構(gòu)成二者的母體:6-APA、7-ACA。母核:由-內(nèi)酰胺環(huán)和氫化噻唑環(huán)組成的雙雜環(huán)。
6-APA6-AminopenicillanicAcid
側(cè)鏈:RCO-
第10頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六2、性質(zhì)青霉素類和頭孢菌素類結(jié)構(gòu)共同特點(diǎn)具有-內(nèi)酰胺環(huán)。青霉素分子中都有一個(gè)游離羧基和酰胺側(cè)鏈。①
酸性
有羧基,具有酸性pKa值在2.5~2.8之間與堿成鹽如:青霉素G鈉、青霉素G鉀等分子中游離羧基具有相當(dāng)強(qiáng)的酸性,能與無機(jī)堿或某些有機(jī)堿形成鹽。其堿金屬鹽易溶于水,而有機(jī)堿鹽難溶于水,易溶于甲醇等有機(jī)溶劑。第11頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六②
旋光性青霉素分子中含有三個(gè)手性碳原子(C3,、C5、C6)有手性碳原子,具有旋光性,根據(jù)此性質(zhì),可用于青霉素藥物的定性和定量分析第12頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六③紫外吸收特性青霉素類母核無明顯UV多數(shù)有苯環(huán)取代基
*但青霉素類藥物在弱酸性下水解,可以產(chǎn)生具有共軛雙鍵的青霉烯酸,在紫外光區(qū)有吸收。*側(cè)鏈中有苯環(huán)等取代基的藥物,在紫外光區(qū)也有吸收。像芐青霉素。第13頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六頭孢菌素類分子中有共軛體系(O=C-N-C=C)在260nm處有最大吸收。第14頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六④不穩(wěn)定性干燥條件下青霉素鹽穩(wěn)定。青霉素水溶液在pH6-6.8時(shí)較穩(wěn)定。β-內(nèi)酰胺環(huán)是該類抗生素結(jié)構(gòu)最不穩(wěn)定的部分。不穩(wěn)定性因素:四元環(huán)張力大,酰胺鍵易水解青霉素類藥物遇到某些氧化劑(酸、堿、青霉素酶,或某些金屬離子)或遭遇某種溫度,藥物將降解失效。第15頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六二、青霉素類藥物的鑒別反應(yīng)(一)官能團(tuán)的呈色反應(yīng):1、羥肟酸鐵反應(yīng):堿性環(huán)境中與羥胺作用β-內(nèi)酰胺環(huán)破裂生成羥肟酸在稀酸中與高鐵離子呈色?!捐b別】(1)取本品約20mg,加水15ml溶解后,加鹽酸羥胺試液與氫氧化鈉試液各2ml,放置5分鐘后,加鹽酸溶液(1→100)3ml與三氯化鐵試液1ml,隨即振搖,即顯赤褐色。第16頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六2、硫酸-硝酸呈色反應(yīng):頭孢菌素能與硫酸-硝酸反應(yīng)后呈黃色。此顯色反應(yīng)可區(qū)別某些頭孢菌素族抗生素,因此被一些國(guó)家藥典采用供鑒別。3、茚三酮反應(yīng):α-氨基酸的反應(yīng),如氨芐西林遇茚三酮顯藍(lán)紫色4、與斐林試劑反應(yīng):分子中具有(-CONH-)結(jié)構(gòu),可使堿性酒石酸銅還原顯紫色,5、變色酸-硫酸呈色反應(yīng):中國(guó)藥典(1995年版)采用本法鑒別。如阿莫西林林加變色酸-硫酸試劑混合后,于150℃加熱2-3min,因分解出甲醛與變色酸縮合而呈深褐色。6、各種鹽的反應(yīng):火焰反應(yīng)在火焰下遇鉀顯紫色遇鈉顯淡黃色青霉素族、頭孢菌素族藥品中,許多制成鉀鹽或鈉鹽供臨床使用,因而可利用其火焰反應(yīng)進(jìn)行鑒別。第17頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六(二)沉淀反應(yīng)1、在稀鹽酸中生成白色沉淀:青霉素鉀(鈉)白色游離基沉淀2、有機(jī)胺鹽的特殊反應(yīng):側(cè)鏈含有苯羥基基團(tuán)時(shí),能與重氮苯磺酸試液產(chǎn)生偶合反應(yīng)而呈色。如:第18頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六(三)類似肽鍵的反應(yīng)雙縮脲反應(yīng)【鑒別】(2)取樣本約10mg,加水6ml溶解后,加堿性酒石酸銅試液0.5ml,即顯紫色。(四)生物學(xué)法(抑菌能力)如青霉素鈉鑒別取本品與已知含量的青霉素適量,分別加水制成每1ml中約含50μg的溶液,各取1ml,加入不少于200單位的青霉素酶溶液1ml,在37℃滅活1小時(shí)后,取滅菌濾紙片,分別用上述溶液浸濕后,用濾紙吸去多余的液體,置攤布金黃色葡萄球菌[CMCC(B)26003]的培養(yǎng)基上,在37℃培養(yǎng)約16小時(shí)后均無抑菌作用,而用同一方法檢查未經(jīng)青霉素酶滅活的溶液均有抑菌作用。
第19頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六第20頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六二、藥物中有效物質(zhì)含量測(cè)定(1)容量法:容量分析是依據(jù)已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)試劑溶液與被測(cè)定的一定量供試品藥物完全作用所消耗的標(biāo)準(zhǔn)試劑的體積,來計(jì)算被測(cè)定藥物中有效物質(zhì)含量的方法。在抗生素類藥物分析中,常用的有酸堿滴定法、碘量法。青霉素含量的測(cè)定,青霉素在水溶液中經(jīng)水解后,產(chǎn)生青霉噻唑酸,可用酸堿滴定法測(cè)定?;蛴弥苯拥味ǚǎ蛴媚娴畏ㄟM(jìn)行測(cè)定,最后均以堿標(biāo)準(zhǔn)溶液的消耗量來計(jì)算青霉素的含量。第21頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六終點(diǎn)觀察:用目視指示劑或電位滴定均可。溫度對(duì)指示劑的變色范圍有影響。堿性指示劑,溫度升高時(shí),對(duì)氫離子的靈敏度降低,變色范圍偏向較低的pH值,如甲基橙在室溫時(shí)為pH3.1~4.4,在100℃時(shí),移到2.5~3.7。酸性指示劑對(duì)溫度的影響不太敏感。指示劑的用量不宜多,過多時(shí),因指示劑本身也消耗酸或堿,變色較慢。在水溶液中,大部分羧酸在pH約8.4時(shí)中和,一般可用酚酞指示劑(無色到紅色),也可采用百里酚酞(無色到藍(lán)色)或百里酚藍(lán)(黃色到藍(lán)色)等。滴定劑的選擇,一般選用氫氧化鈉或氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液作滴定劑。標(biāo)準(zhǔn)堿液一般采用新沸冷卻蒸餾水進(jìn)行稀釋制備。貯存標(biāo)準(zhǔn)堿液的容器要密封,以免吸收二氧化碳而影響堿液質(zhì)量。青霉素鈉的含量測(cè)定精密稱取本品約0.3~0.4g,加新沸過的蒸餾水20mL使其溶解,加0.01mol/L氫氧化鈉液中和后,精密加0.1mol/L氫氧化鈉液25mL,95℃左右水浴20min。冷卻后,加酚酞指示劑2滴,用0.1mol/L鹽酸滴定,從粉紅色至無色。不加供試樣品作為空白,重復(fù)以上操作。兩者滴定數(shù)的差即為所消耗氫氧化鈉的量。第22頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六(2)光譜學(xué)測(cè)定法
①旋光法:平面偏振光通過含有某些光學(xué)活性的化合物液體或溶液時(shí),能引起旋光現(xiàn)象,使偏振光的平面向左或向右旋轉(zhuǎn)。偏振光平面旋轉(zhuǎn)的度數(shù),稱為旋光度。使偏振光向右旋轉(zhuǎn)(順時(shí)針方向)為右旋,以“+”符號(hào)表示;使偏振光向左旋(逆時(shí)針方向)為左旋,以“-”符號(hào)表示。偏振光透過長(zhǎng)1dm并每1mL中含有旋光物質(zhì)1g的溶液,在一定波長(zhǎng)與溫度下測(cè)得的旋光度稱為比旋度。旋光法亦用于紅霉素、螺旋霉素等的效價(jià)測(cè)定。②分光光度法:紫外分光光度法多用于抗生素制劑中抗生素含量的測(cè)定。如測(cè)定奧格門?。◤?fù)合制劑)中羥氨芐青霉素和克拉維酸的含量;測(cè)定麥迪霉素膠囊中麥迪霉素的含量;用金屬離子絡(luò)合物測(cè)定土霉素制劑中的土霉素含量等等。比色法用于多種抗生素的效價(jià)測(cè)定。如青霉素和頭孢菌素的羥胺比色法測(cè)定抗生素效價(jià);鏈霉素的麥芽酚法測(cè)定鏈霉素效價(jià);三氯化鐵比色法測(cè)定土霉素效價(jià)等。第23頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六③色譜法測(cè)定法色譜法在抗生素藥物分析中,主要用于鑒別定性及定量(如雜質(zhì)、異構(gòu)體的限度試驗(yàn)和組分分析)。第24頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六④高效液相測(cè)定法:在每種抗生素進(jìn)行檢測(cè)前要求對(duì)儀器進(jìn)行系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn),即用規(guī)定的對(duì)照品對(duì)儀器進(jìn)行試驗(yàn)和調(diào)整,應(yīng)達(dá)到規(guī)定的要求;或規(guī)定分析狀態(tài)下色譜柱的最小理論板數(shù)、分離度和拖尾因子。高效液相色譜在抗生素類藥物的定性、定量分析中應(yīng)用的愈來愈多,如半合成青霉素的衍生物的含量測(cè)定。(3)碘量法(剩余碘量法)
原理
*β-內(nèi)酰胺類不直接與碘反應(yīng)*β-內(nèi)酰胺類水解產(chǎn)物可與碘發(fā)生定量反應(yīng):
第25頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物,精密稱取約0.12g,置100ml量瓶中,加水使溶解并稀釋至刻度,搖勻,精密量取5ml,置碘瓶中,加1mol/L氫氧化鈉溶液1ml放置20分鐘,再加1mol/L鹽酸溶液1ml與醋酸-醋酸鈉緩沖液(pH4.5)5ml,精密加入碘滴定液(0.01mol/L)15ml,密塞,搖勻,在20~25℃暗處放置20分鐘,用硫代硫酸鈉滴定液(0.01mol/L)滴定,近終點(diǎn)時(shí)加淀粉指示液,繼續(xù)滴定并強(qiáng)力振搖,至藍(lán)色消失;另精密量取供試品溶液5ml,置碘瓶中,加醋酸-醋酸鈉緩沖液(pH4.5)5ml,精密加入碘滴定液(0.01mol/L)15ml,密塞,搖勻,在暗處放置20分鐘,用硫代硫酸鈉滴定液(0.01mol/L)滴定,作為空白。同時(shí)用青霉素對(duì)照品同法測(cè)定作對(duì)照,算出供試品的含量。第26頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六(4)電位配位滴定法——汞量法1.原理*β-內(nèi)酰胺類不直接與汞鹽反應(yīng)*β-內(nèi)酰胺類水解產(chǎn)物可與汞鹽2.青霉胺發(fā)生定量反應(yīng):青霉素藥物與硝酸汞發(fā)生絡(luò)合反應(yīng)。先按2分子青霉胺與1分子汞離子的比例絡(luò)合,發(fā)生第一次滴定突躍,但突躍范圍很小,變化比較平緩,不宜用于做終點(diǎn),繼續(xù)用硝酸汞滴定時(shí),青霉胺分子與汞離子按1:1的比例絡(luò)合,生成穩(wěn)定的絡(luò)合物——青霉胺絡(luò)汞,發(fā)生第二次滴定突躍。其突躍范圍較大,變化較急劇,宜于確定終點(diǎn)。計(jì)算青霉素胺含量并進(jìn)行結(jié)果討論:(1)電位法指示終點(diǎn),以第二次滴定突躍為終點(diǎn)反應(yīng)摩爾比1:1(2)空白試驗(yàn)用未降解樣品測(cè)定(3)優(yōu)點(diǎn)不需標(biāo)準(zhǔn)品第27頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六三、抗生素效價(jià)測(cè)定和微生物檢定法1、稀釋法:稀釋法是抗生素效價(jià)測(cè)定最簡(jiǎn)單的方法之一。一般是在一系列的試管中用液體培養(yǎng)基逐管將抗生素做2倍稀釋,并于各個(gè)試管中加入同量的對(duì)該抗生素有高度敏感性的試驗(yàn)菌液。將各個(gè)試管放置于37℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,觀察能抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的最低抗生素濃度作為測(cè)定終點(diǎn)。再與同法測(cè)得的抗生素標(biāo)準(zhǔn)品終點(diǎn)做比較,即可求得被測(cè)定抗生素的效價(jià)。第28頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六2、比濁法:細(xì)菌生長(zhǎng)產(chǎn)生的濁度與細(xì)菌數(shù)的增加、細(xì)菌群體質(zhì)量的增加和細(xì)菌細(xì)胞容積的增加之間,存在著相關(guān)性,在一定的范圍內(nèi)符合比耳定律。將抗生素標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋液與供試品的稀釋液分別加入試管中,再加入已接種試驗(yàn)菌的液體培養(yǎng)基,搖勻,置37℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后,觀察試驗(yàn)菌生長(zhǎng)情況。由于抗生素濃度不同,試驗(yàn)菌受抑制的程度也不同,因而產(chǎn)生不同程度的混濁。用分光光度計(jì)測(cè)定其透光率或吸收度,用標(biāo)準(zhǔn)曲線法可測(cè)定出供試品的效價(jià)。取每mL含24.0、26.8、29.9、33.5和37.5U的鏈霉素標(biāo)準(zhǔn)品溶液各1mL,分別加入15支試管中(3個(gè)平行)。另取試管3支,每管中各加入供試品溶液1mL。于18支試管中各加入已接種試驗(yàn)菌的液體培養(yǎng)基9mL,搖勻。將標(biāo)準(zhǔn)品管和供試品管置37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2~4h后,取出,分別于每管中各加入12%甲醛溶液0.5mL,搖勻,即可于分光光度計(jì)上530nm處以未接種試驗(yàn)菌的液體培養(yǎng)基9mL,加蒸餾水1mL,12%甲醛溶液0.5mL,搖勻作為空白,測(cè)定各管內(nèi)培養(yǎng)物的透光率。以透光度為縱坐標(biāo),鏈霉素濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,則可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出供試品的效價(jià)。第29頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六3、瓊脂擴(kuò)散法:(即管碟法)管碟法是目前國(guó)際上測(cè)定抗生素效價(jià)的通用方法。我國(guó)藥典收載的微生物檢定法也是管碟法。此法靈敏度高,但操作較麻煩,影響試驗(yàn)結(jié)果的因素較多,需要從各個(gè)操作步驟嚴(yán)格控制試驗(yàn)條件,盡可能減小試驗(yàn)誤差,才能使試驗(yàn)結(jié)果達(dá)到精密、準(zhǔn)確。第30頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六管碟法的原理:管碟法是利用抗生素在攤布特定試驗(yàn)菌的瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)擴(kuò)散,形成含一定濃度抗生素的球型區(qū),抑制了試驗(yàn)菌的繁殖,通過透明瓊脂培養(yǎng)基,可觀察到透明的抑菌圈。在一定的抗生素濃度范圍內(nèi),對(duì)數(shù)濃度(劑量)與抑菌圈面積或直徑成正比。方法設(shè)計(jì)是在同樣條件下將已知效價(jià)的標(biāo)準(zhǔn)品溶液與未知效價(jià)的供試品溶液的劑量反應(yīng)(抑菌圈)進(jìn)行比較;當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)品和供試品是屬于同一性質(zhì)的抗生素時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品溶液和供試品溶液,對(duì)一定試驗(yàn)菌所得的劑量反應(yīng)曲線,在一定劑量范圍內(nèi)應(yīng)互相平行。根據(jù)以上原理,可設(shè)計(jì)為一劑量法、二劑量法及三劑量法等,從而可以較為準(zhǔn)確地測(cè)定供試品的效價(jià)。第31頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六四、青霉素藥物雜質(zhì)檢查高分子雜質(zhì)——分子量大于青霉素藥物本身的雜質(zhì)總稱。外源性雜質(zhì)蛋白、多肽、多糖或抗生素與蛋白、多肽、多糖的結(jié)合物。主要來自于發(fā)酵工藝,致敏,如青霉噻唑蛋白、青霉噻唑多肽。雜質(zhì)分類:基本特點(diǎn)-對(duì)青霉素而言,青霉噻唑多肽-外源性的(2400~3500)青霉素聚合物-內(nèi)源性的(聚合度)母核參與的聚合反應(yīng)-N型聚合反應(yīng),側(cè)鏈參與的聚合反應(yīng)-L型聚合反應(yīng),特點(diǎn):第32頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六(1)生產(chǎn)過程中的任何蛋白或碎片都可帶入產(chǎn)品中,易與藥物形成多肽類雜質(zhì)(2)形成的聚合物也可發(fā)生不同程度的降解(3)異構(gòu)體之間可以相互聚合-L-L、D-D、L-D(4)高分子雜質(zhì)與生產(chǎn)工藝密切相關(guān)第33頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六高分子雜質(zhì)的控制方法1、凝膠色譜-自身對(duì)照外標(biāo)法*凝膠色譜法:利用凝膠的分子篩作用,讓藥物分子自由的進(jìn)入到凝膠顆粒內(nèi)部,而高分子雜質(zhì)被排阻的原理進(jìn)行的。故此大分子則先流出色譜柱,小分子后出峰而得以分離。*分析方法:1、HPLC系統(tǒng)2、簡(jiǎn)單測(cè)定系統(tǒng)3、色譜適用性條件:(1)藍(lán)色葡聚糖在高分子分離中的N>2500/m,拖尾因子0.75~1.5(2)峰面積的RSD<5%第34頁(yè),共42頁(yè),2022年,5月20日,13點(diǎn)13分,星期六2、分子排阻色譜法
【檢查】青霉素聚合物填充劑葡聚糖凝膠G-10(
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 人人文庫(kù)網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 戰(zhàn)略合作方銷售代理合同范本
- 土地使用權(quán)買賣合同樣本
- 臨時(shí)雇傭合同標(biāo)準(zhǔn)文本
- 高校畢業(yè)生實(shí)習(xí)協(xié)議合同
- 股份合作企業(yè)合同范本
- 婚禮場(chǎng)地租賃合同書
- 度企業(yè)信用反擔(dān)保合同協(xié)議
- 企業(yè)安全生產(chǎn)責(zé)任協(xié)議合同
- 勞動(dòng)合同樣本:?jiǎn)T工長(zhǎng)期雇傭
- 海濱度假村物業(yè)銷售合同協(xié)議
- 《數(shù)與形》(教學(xué)設(shè)計(jì))-2024-2025學(xué)年六年級(jí)上冊(cè)數(shù)學(xué)人教版
- 政府審計(jì) 課件 第二章 政府審計(jì)組織與審計(jì)法律
- 常用血管活性藥物的應(yīng)用及護(hù)理
- 2025年云南省昆明國(guó)家高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開發(fā)區(qū)招聘合同聘用制專業(yè)技術(shù)人員47人歷年高頻重點(diǎn)模擬試卷提升(共500題附帶答案詳解)
- 農(nóng)機(jī)安全知識(shí)講座
- DeepSeek從入門到精通 -指導(dǎo)手冊(cè)
- 校長(zhǎng)第一次全體教師會(huì)上發(fā)言:2025春季開學(xué)教師掌握這 6 詞教育之路暢通無阻
- 新能源汽車及零部件檢驗(yàn)檢測(cè)公共服務(wù)平臺(tái)建設(shè)項(xiàng)目可行性研究報(bào)告
- 《工程熱力學(xué)》課件-11 理想氣體熱力學(xué)能、焓和熵的計(jì)算
- 發(fā)票知識(shí)培訓(xùn)課件
- 《綜合辦崗位職責(zé)》課件
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論