基因工程習題(完整資料)

基因工程習題(完整資料）(可以直接使用，可編輯優(yōu)秀版資料，歡迎下載）

基因工程習題2０17．9.８基因工程習題(完整資料）(可以直接使用，可編輯優(yōu)秀版資料，歡迎下載）1．利用細菌大量生產(chǎn)人類胰島素,下列敘述錯誤的是（)Ａ．用適當?shù)拿笇\載體與人類胰島素基因進行切割與粘合B。用適當?shù)幕瘜W物質(zhì)處理受體細菌表面,將重組DNA導(dǎo)入受體細菌C．通常通過檢測目的基因產(chǎn)物來檢測重組DＮＡ是否已導(dǎo)入受體細菌D．重組DＮＡ必須能在受體細菌內(nèi)進行復(fù)制與轉(zhuǎn)錄，并合成人類胰島素2.采用基因工程的方法培育抗蟲棉,下列導(dǎo)入目的基因的作法正確的是（)①將毒素蛋白注射到棉受精卵中②將編碼毒素蛋白的ＤＮA序列，注射到棉受精卵中③將編碼毒素蛋白的DNＡ序列,與質(zhì)粒重組，導(dǎo)入細菌，用該細菌感染棉的體細胞,再進行組織培養(yǎng)④將編碼毒素蛋白的DNA序列,與細菌質(zhì)粒重組，注射到棉的子房并進入受精卵中。A．①②?B．②③?C.③④?D．④①3?；蚬こ淌窃贒NA分子水平進行設(shè)計施工的，在基因操作的以下步驟中，不進行堿基互補配對的是（）①人工合成目的基因②E.coliDNA連接酶結(jié)合目的基因與運載體③將目的基因?qū)胧荏w細胞④目的基因的檢測和表達⑤個體生物學水平的鑒定。A．①③B．①⑤?C．③⑤D。②③④4.．如圖表示基因工程中獲取水稻某目的基因的不同方法．下列相關(guān)敘述中正確的是(）A.這三種方法都用到酶，都是在體外進行B．①②③堿基對的排列順序均相同C．圖示ａ、b、c三種方法均屬人工合成法D.方法a不遵循中心法則5。．如圖表示基因工程中目的基因的獲取示意圖,不正確的是（）Ａ。③表示ＰCR技術(shù)，用來擴增目的基因B.從基因文庫中要得到所需的目的基因可以根據(jù)目的基因的相關(guān)信息來獲取C.若獲取的目的基因相同,則圖中基因組文庫小于cDNA文庫D．若基因比較小，核苷酸序列又已知,則可以直接通過人工合成的方法獲取6．。以下為形成cDNA過程和PCR擴增過程示意圖．據(jù)圖分析，下列說法正確的是（）A．催化②⑤過程的酶都是DＮA聚合酶，都能耐高溫Ｂ。催化①過程的酶是ＲNA聚合酶C．④過程發(fā)生的變化是引物與單鏈DNＡ結(jié)合Ｄ．如果RNA單鏈中Ａ與U之和占該鏈堿基含量的40%，則一個雙鏈ＤNA中,A與U之和也占該DNA堿基含量的40%7。.下列關(guān)于質(zhì)粒的敘述，正確的是(）Ａ．質(zhì)粒是廣泛存在于細菌細胞中的一種顆粒狀細胞器Ｂ.細菌質(zhì)粒的復(fù)制過程一定是在宿主細胞外獨立進行的Ｃ．質(zhì)粒只有在導(dǎo)入宿主細胞后才能在宿主細胞內(nèi)復(fù)制D.質(zhì)粒是細菌細胞質(zhì)中能夠自主復(fù)制的小型環(huán)狀ＤNA分子８。?？茖W家常選用的細菌質(zhì)粒往往帶有一個抗生素抗性基因,該抗性基因的主要作用是（）A．提高受體細胞在自然環(huán)境中的耐熱性B.有利于檢測目的基因否導(dǎo)入受體細胞Ｃ．增加質(zhì)粒分子的相對分子質(zhì)量D．便于與外源基因連接9。.下列關(guān)于基因工程工具的說法不正確的是（）A．構(gòu)建基因文庫和構(gòu)建基因表達載體都需要限制酶和DＮA連接酶B。DＮA連接酶對所連接的DNＡ兩端堿基序列有專一性要求Ｃ。載體能將外源基因?qū)胧荏w細胞并使其在受體細胞中穩(wěn)定遺傳并表達D。在基因工程操作中,被用作載體的質(zhì)粒，都是經(jīng)過人工改造的1０．下列敘述符合基因工程概念的是（）Ａ。在細胞內(nèi)將ＤNＡ進行重組,賦予生物新的遺傳特性B.將人的干擾素基因重組到質(zhì)粒后導(dǎo)入大腸桿菌，獲得能產(chǎn)生人干擾素的菌株C．用紫外線照射青霉菌,使其DＮA發(fā)生改變,通過篩選獲得青霉素高產(chǎn)菌株Ｄ。自然界中天然存在的噬菌體自行感染細菌后其DNA整合到細菌DＮA上1１。下列四條DNA分子,彼此間具有互補粘性末端的一組是（)Ａ。①② Ｂ．②④ C.③④ D．②③12．下列有關(guān)基因工程技術(shù)的敘述，正確的是()Ａ．重組DNＡ技術(shù)所用的工具酶是限制酶、DNA連接酶和運載體B．所有的限制酶都只能識別同一種特定的核苷酸序列C．選用細菌作為重組質(zhì)粒的受體細胞是因為細菌繁殖快Ｄ．只要目的基因進入了受體細胞就能成功實現(xiàn)表達１3。下列提到的物質(zhì)不是基因工程常用的工具的是（)①限制性核酸內(nèi)切酶②ＤNA聚合酶③DNA連接酶④運載體⑤解旋酶．A。②④⑤?B．①③④ C。①②③?D。②⑤１４.如圖是利用基因工程技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因植物,生產(chǎn)可食用疫苗的部分過程示意圖，其中PstⅠ、SｍａⅠ、EcｏＲⅠ、ＡｐaⅠ為四種限制酶。下列說法錯誤的是（）Ａ.圖示過程是基因工程的核心步驟B.表達載體構(gòu)建時需要用到限制酶SmaⅠC。抗卡那霉素基因的存在有利于將含有抗原基因的細胞篩選出來D。除圖示組成外,表達載體中還應(yīng)該含有啟動子和終止子等結(jié)構(gòu)１5.一種質(zhì)粒和人的胰島素基因存在的限制酶的酶切位點(用Ｅ１表示)如圖所示，ａ表示標記基因，ｂ表示胰島素基因．現(xiàn)用該種限制酶分別切割質(zhì)粒和胰島素基因,然后用DNA連接酶連接切割后的質(zhì)粒和胰島素基因，最不可能出現(xiàn)的是（）A。?Ｂ．?C。?Ｄ．１6.利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥用蛋白是動物基因工程的重要應(yīng)用，目前科學家已在牛和山羊等動物乳腺生物反應(yīng)器中獲得了抗凝血酶、血清白蛋白、生長激素和α﹣抗胰蛋白酶等醫(yī)藥產(chǎn)品．下列有關(guān)乳腺生物反應(yīng)器的敘述錯誤的是(）Ａ。受體細胞可選用受精卵或胚胎干細胞Ｂ。獲得轉(zhuǎn)基因動物需利用胚胎移植技術(shù)C．鑒別藥用蛋白基因是否導(dǎo)入受體細胞一般利用分子雜交法Ｄ。轉(zhuǎn)基因動物產(chǎn)生的生殖細胞可能含有藥用蛋白基因１7。美國科學家將螢火蟲的熒光素基因轉(zhuǎn)入煙草植物細胞，獲得高水平的表達，長成的植物通體光亮，堪稱奇跡．下列有關(guān)發(fā)光煙草培育的敘述正確的是()A．在培育過程中需用同一種限制酶分別切割熒光素基因和質(zhì)粒Ｂ．將目的基因直接導(dǎo)入煙草細胞常用的方法是顯微注射法Ｃ．受體細胞只能用煙草的受精卵，因為受精卵的全能性最高D．導(dǎo)入目的基因的煙草細胞不需進行植物組織培養(yǎng)就能發(fā)育成一個完整的植株18。現(xiàn)有一長度為10０0堿基對（by）的ＤNA分子，用限制性核酸內(nèi)切酶EcoＲ1酶切后得到的ＤNＡ分子仍是１０00ｂy，用Kpｎ１單獨酶切得到40０by和6０0bｙ兩種長度的DＮA分子,用EｃｏRⅠ，KpnⅠ同時酶切后得到200by和6０0ｂy兩種長度的DNA分子.該ＤNA分子的酶切圖譜正確的是（）A.?B.C．D.１９．下列何種技術(shù)能有效地打破物種的界限，定向地改造生物的遺傳性狀，培育農(nóng)作物的新的優(yōu)良品種A.基因工程技術(shù)?B。誘變育種技術(shù)?C。雜交育種技術(shù)?D.組織培養(yǎng)技術(shù)20。科學家通過基因工程的方法，能使馬鈴薯塊莖含有人奶蛋白．以下有關(guān)該基因工程的敘述錯誤的是（）A。采用逆轉(zhuǎn)錄的方法得到的目的基因B．DNA分子雜交技術(shù)可以用來檢測人奶基因是否表達Ｃ。馬鈴薯的葉肉細胞可作為受體細胞D．用同種限制酶處理質(zhì)粒和含有目的基因的DNＡ,可產(chǎn)生黏性末端而形成重組DNA分子21。下列有關(guān)基因工程中限制性核酸內(nèi)切酶的描述，錯誤的是(）①一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識別一種特定的脫氧核苷酸序列；②限制性核酸內(nèi)切酶的活性受溫度影響；③限制性核酸內(nèi)切酶能識別和切割ＲNA；④限制性核酸內(nèi)切酶可從原核生物中提?。虎菹拗菩院怂醿?nèi)切酶的操作對象是原核細胞。A．②③?B．③④?Ｃ．③⑤ D．①⑤２2.關(guān)于基因工程和蛋白質(zhì)工程的說法正確的是()A.都是分子水平上的操作B．基因工程就是改造基因的分子結(jié)構(gòu)C．蛋白質(zhì)工程就是改造蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)D．基因工程和蛋白質(zhì)工程都能創(chuàng)造出自然界根本不存在的蛋白質(zhì)２3。下列關(guān)于各種與基因工程有關(guān)酶的敘述，不正確的是（)Ａ。DＮA連接酶能將２個具有末端互補的DＮA片段連接在一起B(yǎng)．PCＲ反應(yīng)體系中的引物可作為ＤNA聚合酶作用的起點C．限制酶的活性受溫度影響D。逆轉(zhuǎn)錄酶是以核糖核苷酸為原料，以RＮA為模板合成互補DNA24．根據(jù)基因工程的有關(guān)知識,回答下列問題：（1）基因工程的基本操作程序的第四步。目前獲取目的基因常用的方法有、和。（2）限制性內(nèi)切酶切割DＮA分子后產(chǎn)生的片段，其末端類型有。（３）質(zhì)粒載體用ＥcoRⅠ切割后產(chǎn)生的片段如下：為使載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EｃoRⅠ切割外，還可用另一種限制性內(nèi)切酶切割，該酶必須具有的特點是.（４)按其來源不同,基因工程中所使用的ＤNＡ連接酶有兩類,即DNＡ連接酶和Ｅ·coｌｉDNA連接酶。(5)反轉(zhuǎn)錄作用的模板是，產(chǎn)物是。若要在體外獲得大量反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,常采用技術(shù)，此技術(shù)中需要的酶是。（6)基因工程中除質(zhì)粒外,和也可作為運載體。（7）若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，一般情況下,不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細胞,原因是。(8)被稱為第二代基因工程，它的基本途徑有四步，其中第二步是。2５.如圖是利用基因工程技術(shù)產(chǎn)生人胰島素的操作過程示意圖，請據(jù)圖回答:(1）能否利用人的皮膚細胞來完成①過程？原因是．（２）過程②必須的酶是，過程③必須的酶是．(3）若A中共有a個堿基對,其中鳥嘌呤有ｂ個,則③④⑤連續(xù)進行4次，至少需要提供胸腺嘧啶個.（４）圖中B應(yīng)該符合的條件為、、．（5)為使過程⑧更易進行可用藥劑處理D.26。某質(zhì)粒上有SａlＩ、Ｈindｍ、ＢaｍHI三種限制酶切割位點,同時還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過程如下圖所示，請回答下列問題。（１）將抗鹽基因?qū)霟煵菁毎麅?nèi)，使煙草植株產(chǎn)生抗鹽性狀,這種新性狀(變異性狀）的來源屬于__＿___。

（2)如果將抗鹽基因直接導(dǎo)入煙草細胞,一般情況下，煙草不會具有抗鹽特性,原因是抗鹽基因在煙草細胞中不能______，也不能______。?（3)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時，應(yīng)選用____＿_和＿_＿___兩種隳對__＿＿__和_____＿進行切割，以保證重組DNA序列的唯一性.?（４)基因工程中的檢測篩選是一個重要的步驟.為篩選出導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌,下圖表示運用影印培養(yǎng)法(使一系列培養(yǎng)皿的相同位置上能出現(xiàn)相同菌落的一種接種培養(yǎng)方法)檢測基因表達載體是否導(dǎo)入了農(nóng)桿菌。培養(yǎng)基除了含有細菌生長繁殖必需的成分外，培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分別還含有_＿＿___、__＿___。從檢測篩選的結(jié)果分析，含有目的基因的是__＿___菌落中的細菌.為了確定抗鹽煙草是否培育成功,既要用放射性同位素標記的___＿＿_作探針進行分子雜交檢測，又要用_＿＿_＿＿方法從個體水平鑒定煙草植株的耐鹽性。?（5)將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的煙草細胞培育成完整的植株需要用_＿_＿___技術(shù)，愈傷組織經(jīng)__＿___進而形成完整植株，此過程除營養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加.２7。某一質(zhì)粒載體如圖所示,外源DＮA插入到Aｍpr或Tｅtr中會導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活（Ａmpr表示氨芐青霉素抗性基因,Ｔetr表示四環(huán)素抗性基因).有人將此質(zhì)粒載體用ＢamHI酶切后，與用BamＨI酶切獲得的目的基因混合，加入DNA連接酶進行連接反應(yīng)，用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌，結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化，有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種,分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌。回答下列問題：

（1）質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應(yīng)具備的基本條件有_____＿＿__＿___(答出兩點即可）。

而作為基因表達載體，除滿足上述基本條件外,還需具有啟動子和終止子。

（2)如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進行篩選,在上述四種大腸桿菌細胞中，未被轉(zhuǎn)化的和僅含有環(huán)狀目的基因的細胞是不能區(qū)分的，其原因是____＿＿＿____＿__；并且___＿_____＿_＿_＿和＿________＿_＿＿_的細胞也是不能區(qū)分的，其原因是＿______＿＿_＿__。在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌的單菌落,還需使用含有是__＿＿_____＿＿＿＿的固體培養(yǎng)基.

（3)基因工程中，某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體,其DNＡ復(fù)制所需的原料來自于__＿______＿＿__2８。我們?nèi)粘３缘拇竺字需F含量極低，科研人員通過基因工程等技術(shù)，培育出了鐵含量比普通大米高６０％的轉(zhuǎn)基因水稻,改良了稻米的營養(yǎng)品質(zhì)．下圖為培育轉(zhuǎn)基因水稻過程示意圖，請分析回答.（1)鐵結(jié)合蛋白基因來自菜豆，且基因的脫氧核苷酸序列已知，可以用法獲得此目的基因或擴增目的基因。(2）構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒時，通常要用分別切割．將重組Ｔi質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌時,可以處理農(nóng)桿菌，使重組Tｉ質(zhì)粒易于導(dǎo)入。(3)將含有重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌與水稻細胞經(jīng)過獲得的愈傷組織共同培養(yǎng)時，通過培養(yǎng)基2的篩選培養(yǎng)，可以獲得;因為培養(yǎng)基3與培養(yǎng)基2的區(qū)別是的濃度比例，所以在培養(yǎng)基３中經(jīng)過可獲得完整植株．檢測培育轉(zhuǎn)基因水稻的目的是否達到，需要檢測轉(zhuǎn)基因水稻．29．α1－抗胰蛋白缺乏癥是一種在北美較為常見的單基因遺傳病，患者成年后會出現(xiàn)肺氣腫及其他疾病，嚴重者甚至死亡。對于該致病患者?？刹捎米⑸淙甩?－抗胰蛋白酶來緩解癥狀.（1）圖1表示獲取人α１－抗胰蛋白酶基因的兩種方法，請回答下列問題:①a過程是在酶的作用下完成的,該酶的作用特點是。②c過程稱為,該過程需要的原料是。③要確定獲得的基因是否是所需的目的基因，可以從分子水平上利用技術(shù)檢測該基因的堿基序列。(2）利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將控制該酶合成的基因?qū)胙虻氖芫?最終培育出能在乳腺細胞表達人α1—抗胰蛋白酶的轉(zhuǎn)基因羊，從而更易獲得這種酶，簡要過程如圖2。①獲得目的基因后,常利用技術(shù)在體外將其大量擴增。②載體上綠色熒光蛋白(GＥＰ)基因的作用是便于?；虮磉_載體ｄ，除圖中的標示部分外，還必須含有。③若要使轉(zhuǎn)基因羊的后代均保持其特有的性狀，理論上應(yīng)選用技術(shù)進行繁殖。３０。Ⅰ．限制酶是基因工程中的重要工具酶，下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖甲、圖乙中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。請回答下列問題:（1）一個圖甲所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割前后，分別含有個和__＿____個游離的磷酸基團？(2）若對圖中質(zhì)粒進行改造，插入的SｍａⅠ酶切位點越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越。(3)與只使用EｃoRＩ相比較，使用ＢamHⅠ和ＨｉｎdⅢ兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源ＤNＡ的優(yōu)點在于可以防止.Ⅱ．原核生物(如大腸桿菌）是基因工程中較理想的受體細胞，它們具有一些其他生物沒有的特點:①繁殖快②多為單細胞③＿________＿_＿__等優(yōu)點.大腸桿菌細胞最常用的轉(zhuǎn)化方法是：首先用_________處理細胞，使之成為＿_______＿___細胞,然后完成轉(zhuǎn)化。Ⅲ.植物基因工程中將目的基因?qū)胧荏w細胞最常用的方法是_＿＿_______,且一般將目的基因插入Tｉ質(zhì)粒的＿_＿__＿_＿_＿_＿中形成重組Ｔi質(zhì)粒，這樣可將目的基因整合到受體細胞的染色體上，科學家發(fā)現(xiàn):這樣得到的轉(zhuǎn)基因植株，其目的基因的傳遞符合孟德爾遺傳規(guī)律,則該轉(zhuǎn)基因植株一般為＿____＿_＿___子.若要避免基因污染,一般需將目的基因?qū)胫参锛毎腳_＿_____＿＿DＮA中。31。下圖是從酵母菌獲取某植物需要的某種酶基因的流程,結(jié)合所學知識及相關(guān)信息回答下列問題：（1)圖中cDNA文庫基因組文庫（填“大于”、“等于”或者“小于”）。(２）①過程提取的DＮA需要的切割，B過程是。（３)為在短時間內(nèi)大量獲得目的基因,可用擴增的方法。目的基因獲取之后，需要進行,其組成必須有以及標記基因等，此步驟是基因工程的核心。(４）將該目的基因?qū)肽畴p子葉植物細胞，常采用的方法是，其能否在此植物體內(nèi)穩(wěn)定遺傳可以用技術(shù)進行檢測。1.1基因工程的基本工具練習題一、選擇題1、在基因工程中使用的限制性核酸內(nèi)切酶，其作用是()Ａ、將目的基因從染色體上切割出來Ｂ、識別并切割特定的DＮA核苷酸序列Ｃ、將目的基因與運載體結(jié)合D、將目的基因?qū)胧荏w細胞2、下列四條ＤＮA分子,彼此間具有粘性末端的一組是()TAGGTAGGCCATTACCGGTA①②③④A．①②Ｂ．②③C。③④Ｄ．②④3、基因工程是DNA分子水平的操作,下列有關(guān)基因工程的敘述中,錯誤的是（）A、限制酶只用于切割獲取目的基因、載體與目的基因必須用同一種限制酶處理C、基因工程所用的工具酶是限制酶,DNA連接酶D、帶有目的基因的載體是否進入受體細胞需檢測４、下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是：（)A．ＤNA連接酶的作用是將兩個黏性末端的堿基連接起來B．目的基因?qū)胧荏w細胞后，受體細胞即發(fā)生基因突變C.目的基因與運載體結(jié)合的過程發(fā)生在細胞外Ｄ．常使用的運載體有大腸桿菌、噬菌體和動植物病毒等5、下列關(guān)于ＤＮA連接酶的敘述中,正確的是（）Ａ.DNA連接酶連接的是兩條鏈堿基對之間的氫鍵B.DＮA連接酶連接的是黏性末端兩條鏈主鏈上的磷酸和脫氧核糖C。ＤNA連接酶連接的是黏性末端兩條鏈主鏈上的磷酸和核糖D。同一種DNA連接酶可以切出不同的黏性末端６、實施基因工程第一步的一種方法是把所需的基因從供體細胞內(nèi)分離出來,這要利用限制性內(nèi)切酶。從大腸桿菌中提取的一種限制性內(nèi)切酶EcｏｒI，能識別DNA分子中的GAATＴＣ序列,切點在G與A之間.這是應(yīng)用了酶的（）Ａ.高效性B.專一性Ｃ.多樣性Ｄ。催化活性受外界條件影響7、下列有關(guān)質(zhì)粒的敘述，正確的是（)A.質(zhì)粒是廣泛存在于細菌細胞中的一種顆粒狀細胞器B．質(zhì)粒是細菌細胞質(zhì)中能自主復(fù)制的小型環(huán)狀DＮＡ分子Ｃ．質(zhì)粒只有在侵入宿主細胞后才能在宿主細胞內(nèi)復(fù)制D.細菌質(zhì)粒的復(fù)制過程一定是在宿主細胞外獨立進行的8、右圖所示為限制酶切割某DNA分子的過程，從圖中可知，該限制酶能識別的堿基序列及切點是A.ＣTTAAG,切點在C和T之間B。CTTＡAG，切點在G和Ａ之間C.GAAＴTＣ,切點在G和Ａ之間D。GＡAＴＴC，切點在C和Ｔ之間９、關(guān)于右圖DNA分子片段的說法正確的是(）①GCATA①GCATATGCATAT15N14N②③……………Ｂ。②處的堿基缺失導(dǎo)致染色體結(jié)構(gòu)的變異Ｃ.把此DNＡ放在含15N的培養(yǎng)液中復(fù)制2代,子代中含15Ｎ的ＤNA占3/4Ｄ.該DNA的特異性表現(xiàn)在堿基種類和(A+T）/(G+C)的比例上１0、下列關(guān)于各種酶作用的敘述，不正確的是Ａ．DNA連接酶能使不同脫氧核苷酸的磷酸與脫氧核糖連接Ｂ。RNA聚合酶能與基因的特定位點結(jié)合，催化遺傳信息的轉(zhuǎn)錄Ｃ.一種DNA限制酶能識別多種核苷酸序列，切割出多種目的基因Ｄ．胰蛋白酶能作用于離體的動物組織,使其分散成單個細胞11、與“限制性內(nèi)切酶”作用部位完全相同的酶是：（）Ａ．反轉(zhuǎn)錄酶

B.ＲNＡ聚合酶

C．DNＡ連接酶

D.解旋酶12、除下列哪一項外，轉(zhuǎn)基因工程的運載體必須具備的條件是：()A。能在宿主細胞中復(fù)制并保存

B。具有多個限制酶切點，以便與外源基因連接Ｃ.具有標記基因，便于進行篩選

D。是環(huán)狀形態(tài)的DＮA分子1３、下列黏性未端屬于同一限制酶切割而成的是Ａ．①②B。①③C。①④D．②③１4、基因工程中可用作載體的是①質(zhì)粒②噬菌體③病毒④動物細胞核A．①②③Ｂ.①②④C．②③④D.①③④１５.關(guān)于限制酶的說法中，正確的是A。限制酶是一種酶，只識別ＧAＡTＴC堿基序列Ｂ.EcoRI切割的是G—Ａ之間的氫鍵C．限制酶一般不切割自身的DＮA分子，只切割外源ＤＮAD．限制酶只存在于原核生物中16．限制酶是一種核酸切割酶,可辨識并切割DNＡ分子上特定的核苷酸堿基序列.下圖為四種限制酶BamHI，EcoRＩ，ＨiｎdⅢ以及ＢglⅡ的辨識序列。箭頭表示每一種限制酶的特定切割部位，其中哪兩種限制酶所切割出來的DNA片段末端可以互補黏合？其正確的末端互補序列為何?A．BaｍHI和EcoＲＩ;末端互補序列—AATT—B.ＢａmHＩ和HiｎdⅢ；末端互補序列—GATC-C.EcｏRI和HindⅢ;末端互補序列-ＡATT—D．BamHI和BglII；末端互補序列—GATC-１7．鐮刀型細胞貧血癥的病因是血紅蛋白基因的堿基序列發(fā)生了改變.檢測這種堿基序列改變必須使用的酶是（）A。解旋酶B。ＤＮA連接酶C.限制性內(nèi)切酶D.RＮA聚合酶1８.DNA連接酶催化的反應(yīng)是Ａ.DNA復(fù)制時母鏈與子鏈之間形成氫鍵Ｂ。黏性末端堿基之間形成氫鍵C。兩個DＮA片段黏性末端之間的縫隙的連接Ｄ.A、B、C都不正確19．在受體細胞中能檢測出目的基因是因為A．目的基因上有標記Ｂ．質(zhì)粒具有某些標記基因C．重組質(zhì)粒能夠復(fù)制D。以上都不正確20．關(guān)于質(zhì)粒的敘述正確的是A.質(zhì)粒是能夠自我復(fù)制的環(huán)狀DNA分子B.質(zhì)粒是唯一的載體C.重組質(zhì)粒是目的基因Ｄ。質(zhì)粒可在宿主外單獨復(fù)制二、非選擇題２１.下圖為DNＡ分子的切割和連接過程。（1)EcoRI是一種

酶，它識別的序列是

，切割位點是

與

之間的

鍵。切割結(jié)果產(chǎn)生的DNA片段末端形式為

.（2）不同來源ＤNＡ片段結(jié)合，在這里需要的酶應(yīng)是

酶,此酶的作用是在

與

之間形成

鍵。有一種能連接平末端的ＤNA連接酶是

。22.番茄在運輸和貯藏過程中，由于過早成熟而易腐爛。應(yīng)用基因工程技術(shù)，通過抑制某種促進果實成熟激素的合成，可使番茄貯藏時間延長，培育成耐貯藏的番茄新品種.這種轉(zhuǎn)基因番茄已于19９3年在美國上市,請回答：(１）促進果實成熟的重要激素是

。（２）在培育轉(zhuǎn)基因番茄的操作中，所用的基因的“剪刀”是,基因的“針線”是,基因的“運輸工具”是。（3）與雜交育種、誘變育種相比，通過基因工程來培育新品種的主要優(yōu)點是、23。下圖是利用基因工程辦法生產(chǎn)人白細胞干擾素的基本過程圖，據(jù)圖回答:(1）①過程需要__＿_______＿_＿__酶的參與。(２)②物質(zhì)是從大腸桿菌分離出的＿＿＿＿__＿____＿_____。其化學本質(zhì)是____＿____＿_＿_＿＿_,它必須能在宿主細胞中______＿＿＿＿＿______＿____＿___.（３）③過程表明目的基因＿_______＿______＿_________。答案:１-５ＢＤＡCB６—-１0BBCAC１1－——15ＣDBAC１６-－20DCDBA2１、(１）限制酶

GAAＴTC

鳥嘌呤脫氧核苷酸

腺嘌呤脫氧核苷酸

磷酸二酯

黏性末端

（2）DNA連接

鳥嘌呤脫氧核苷酸

腺嘌呤脫氧核苷酸

磷酸二酯Ｔ4ＤＮA連接酶(１)乙烯（2）限制酶DNA連接酶運載體(３)定向改變生物的遺傳性狀克服遠緣雜交不親和的障礙2３.（8分)（１）限制性內(nèi)切酶(2分)（２）質(zhì)粒（1分)DＮA（１分)復(fù)制并穩(wěn)定地保存（2分)(３）在大腸桿菌內(nèi)表達(2分)基因工程的應(yīng)用練習題7-1４點滴積累匯江海厚積薄發(fā)1、下列各項中,說明目的基因完成了表達的是A、棉珠中含有殺蟲蛋白基因Ｂ、大腸桿菌中具有胰島素基因Ｃ、酵母菌中產(chǎn)生了干擾素D、抗病毒基因?qū)胪炼辜毎校?、轉(zhuǎn)基因動物是指Ａ、提供基因的動物Ｂ、基因組中增加外源基因的動物C、能產(chǎn)生白蛋白的動物D、能表達基因信息的動物3、抗病毒轉(zhuǎn)基因植物成功表達后，以下說法正確的是A．抗病毒轉(zhuǎn)基因植物，可以抵抗所有病毒Ｂ.抗病毒轉(zhuǎn)基因植物，對病毒的抗性具有局限性或特異性C?？共《巨D(zhuǎn)基因植物可以抗害蟲D．抗病毒轉(zhuǎn)基因植物可以穩(wěn)定遺傳，不會變異4。如果通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)，成功改造了某血友病女性的造血干細胞，使其凝血功能全部恢復(fù)正常。當她與正常男性結(jié)婚,婚后所生子女的表現(xiàn)型為A．兒子、女兒全部正常B．兒子、女兒中各一半正常C。兒子全部有病,女兒全部正常D．兒子全部正常，女兒全部有?。?若利用基因工程技術(shù)培育能固氮的水稻新品種，其在環(huán)保上的重要意義是A．減少氮肥的使用量,降低生產(chǎn)成本B.減少氮肥的使用量，節(jié)約能源C．避免氮肥過多引起環(huán)境污染D．改良土壤結(jié)構(gòu)６．療白化病、苯丙酮尿癥等人類遺傳病的根本途徑是Ａ．口服化學藥物B．注射化學藥物C．采用基因治療D。利用輻射或藥物誘發(fā)致病基因突變７．在基因診斷技術(shù)中,所用的探針DNA分子中必須存在一定量的放射性同位素,后者的作用是A。為形成雜交的DNＡ分子提供能量B.引起探針DＮＡ產(chǎn)生不定向的基因突變?C.作為探針DＮA的示蹤元素D．增加探針ＤNＡ的分子量8.下列關(guān)于基因工程應(yīng)用的敘述，正確的是?Ａ.基因治療就是把缺陷基因誘變成正常基因B．一種基因探針能檢測水體中的各種病毒 C．基因診斷的基本原理是ＤNA分子雜交Ｄ.原核基因不能用來進行真核生物的遺傳改良9。采用基因工程的方法培育抗棉蟲，下列導(dǎo)入目的基因的作法正確的是①將毒素蛋白注射到棉受精卵中②將編碼毒素蛋白的DNA序列,注射到棉受精卵中③將編碼毒素蛋白的DＮＡ序列，與質(zhì)粒重組，導(dǎo)入細菌，用該細菌感染棉的體細胞，再進行組織培養(yǎng)④將編碼毒素蛋白的DＮA序列,與細菌質(zhì)粒重組，注射到棉的子房并進入受精卵??A。①② B。②③?C.③④ Ｄ.④①１0.科學家能利用基因工程技術(shù)培育出特殊的西紅柿、香蕉，食用后人體內(nèi)可產(chǎn)生特定的抗體，這說明這些西紅柿、香蕉中的某些物質(zhì)至少應(yīng) A。含有豐富的免疫球蛋白 Ｂ．含有某種抗原特異性物質(zhì) C．含有一些生活的病菌?D．能刺激人體內(nèi)的效應(yīng)T細胞分泌抗體1１、切取某動物合成生長激素的基因，用某種方法將此基因轉(zhuǎn)移到鲇魚的受精卵中,從而鲇魚比同類個體大3～4倍，此項研究遵循的原理是Ａ．基因突變，DNA→RＮA→蛋白質(zhì)Ｂ?；蚬こ?DNＡ→tRＮA→蛋白質(zhì)C．細胞工程,DNA→ＲＮＡ→蛋白質(zhì)D．基因重組，ＤNA→RNA→蛋白質(zhì)12．下列各項不屬于基因工程在實際中的應(yīng)用的是A。轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的培育成功B。利用DNA探針檢測飲用水中有無病毒C.培育工程菌使之能產(chǎn)生胰島素Ｄ。將C4植物細胞內(nèi)的葉綠體移入C3植物細胞內(nèi)13．有關(guān)基因工程的成果及應(yīng)用的說法正確的是A．用基因工程方法培育的抗蟲植物也能抗病毒B．基因工程在畜牧業(yè)上應(yīng)用的主要目的是培養(yǎng)體型巨大、品質(zhì)優(yōu)良的動物Ｃ．基因工程在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用主要是培育高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、品質(zhì)優(yōu)良和具有抗逆性的農(nóng)作物D。目前，在發(fā)達國家,基因治療已用于臨床實踐14、運用現(xiàn)代生物技術(shù)的育種方法,將抗菜青蟲的Bt基因轉(zhuǎn)移到優(yōu)質(zhì)油菜中，培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲的油菜品種,這一品種在生長過程中能產(chǎn)生特異的殺蟲蛋白,對菜青蟲有顯著抗性，能大大減輕菜青蟲對油菜的危害，提高油菜產(chǎn)量，減少農(nóng)藥使用,保護農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境.根據(jù)以上信息，下列敘述正確的是A、Bt基因的化學成分是蛋白質(zhì)B、Bt基因中有菜青蟲的遺傳物質(zhì)C、轉(zhuǎn)基因抗蟲油菜能產(chǎn)生殺蟲蛋白是由于具有Bt基因D、轉(zhuǎn)基因抗蟲油菜產(chǎn)生的殺蟲蛋白是無機物15．基因工程培育的“工程菌”通過發(fā)酵工程生產(chǎn)的產(chǎn)品，不包括A.白細胞介素一2?B.干擾素Ｃ.聚乙二醇 D.重組乙肝疫苗１6、利用基因工程技術(shù)將生長激素基因?qū)刖d羊體內(nèi),轉(zhuǎn)基因綿羊生長速率比一般的綿羊提高30％,體型大50％，在基因操作過程中生長激素基因的受體細胞最好采用A．乳腺細胞B。體細胞 Ｃ.受精卵D．精巢１7、下列不屬于利用基因工程技術(shù)制取的藥物是A、從大腸桿菌體內(nèi)制取白細胞介素B、在酵母菌體內(nèi)獲得的干擾素C、在青霉菌體內(nèi)提取青霉素D、在腸桿菌體內(nèi)獲得胰島素18、基因治療是人類疾病治療的一種嶄新手段，下列有關(guān)敘述中不正確的是Ａ、基因治療可使人類遺傳病得到根治B、基因治療是一種利用基因工程產(chǎn)品治療人類疾病的方法C、基因治療是指將健康基因?qū)胗谢蛉毕莸募毎蠨、基因治療的靶細胞可以是體細胞和生殖細胞19．下列有關(guān)基因工程技術(shù)的應(yīng)用中,對人類不利的是Ａ。制造“工程菌”用于藥品生產(chǎn)B.創(chuàng)造“超級菌”分解石油、ＤＤTC．重組DNA誘發(fā)受體細胞基因突變D.導(dǎo)人外源基因替換缺陷基因20.“工程菌”是指Ａ.用物理或化學方法誘發(fā)菌類自身某些基因得到高效表達的菌類細胞株系B．用遺傳工程的方法把相同種類不同株系的菌類通過雜交得到新細胞株系Ｃ．用基因工程的方法使外源基因得到高效表達的菌類的細胞株系Ｄ。從自然界中選取的能迅速增殖的菌類2１．生產(chǎn)上培育無子番茄、青霉素高產(chǎn)菌株、雜交培育矮稈抗銹病小麥、抗蟲棉的培育原理依次是①生長素促進果實發(fā)育②染色體變異③基因重組④基因突變⑤基因工程A．①②③④B。①④③②? Ｃ．①④②⑤D。①④③③２２、下列屬于利用基因工程技術(shù)培育的新品種的是A、耐寒的小黑麥B、抗棉鈴蟲的轉(zhuǎn)基因抗蟲棉Ｃ、太空椒D、試管牛23、下列有關(guān)基因工程的敘述中，不正確的是

A。DＮＡ連接酶將黏性末端的堿基對連接起來Ｂ．基因探針是指用放射性同位素或熒光分子等標記的DNA分子

C.基因治療主要是對有基因缺陷的細胞進行替換Ｄ。蛋白質(zhì)中氨基酸序列可為合成目的基因提供資料24．把兔控制血紅蛋白合成的mRNA加入到大腸桿菌的提取液中，結(jié)果能合成出兔的血紅蛋白，這說明A。兔和大腸桿菌共用一套遺傳密碼子B．大腸桿菌的遺傳物質(zhì)是RNAC．兔的ＲNＡ和大腸桿菌的ＲＮA攜帶相同的遺傳信息D．兔控制血紅蛋白合成的基因能進人大腸桿菌２5、科學家將菜豆儲存蛋白的具有轉(zhuǎn)移到向日葵中,培育出了“向日葵豆”植物.這一過程不涉及Ａ．DNＡ按照堿基互補配對原則自我復(fù)制B。DNA以其一條鏈為模板合成RNAC。RNA以自身為模板自我復(fù)制D.按照RNＡ密碼子的排列順序合成蛋白質(zhì)26。科學家用納米技術(shù)制造出一種“生物導(dǎo)彈”，可以攜帶DNA分子。把它注射入組織中，可以通過細胞的內(nèi)吞作用的方式進入細胞內(nèi),DＮA被釋放出來，進入到細胞核內(nèi),最終整合到細胞染色體中,成為細胞基因組的一部分，DNA整合到細胞染色體中的過程，屬于A．基因突變B。基因重組C．基因互換D.染色體變異27。下列何種技術(shù)能有效地打破物種的界限,定向地改造生物的遺傳性狀,培育新的農(nóng)作物優(yōu)良品種Ａ.基因工程技術(shù)B。誘變育種技術(shù)C．雜交育種技術(shù)D。組織培養(yǎng)技術(shù)28．生物細胞中含有細胞質(zhì)基因的結(jié)構(gòu)是①細胞核②染色體③核糖體④線粒體⑤質(zhì)粒⑥葉綠體A．①②③B．①④⑤Ｃ.②④⑥D(zhuǎn)．④⑤⑥２９。下列關(guān)于遺傳與基因工程的敘述正確的是 A.“人類基因組計劃"中的基因測序工作是指測定基因的堿基對排列順序Ｂ．基因治療的主要原理是引入健康外源基因修復(fù)患者的細胞缺陷C．細胞質(zhì)遺傳表現(xiàn)為母系遺傳的主要原因是受精卵的遺傳物質(zhì)全部來自于母本Ｄ。人們將蘇云金桿菌中的抗蟲基因?qū)朊藁毎煽瓜x棉的原理是基因重組3０.下列關(guān)于基因工程的敘述，錯誤的是A．目的基因和受體細胞均可來自動、植物或微生物B。限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶C．人胰島素原基因在大腸桿菌中表達無生物活性D．載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細胞和促進目的基因的表達31。我國自主研制的復(fù)制型艾滋病疫苗，是把艾滋病病毒RNA的幾個重要片段逆轉(zhuǎn)錄后插入天花病毒DNA中，形成重組病毒疫苗。該疫苗在人體內(nèi)具有復(fù)制能力，產(chǎn)生的抗原蛋白可以持續(xù)刺激免疫系統(tǒng)，使人產(chǎn)生較強的免疫能力。在該疫苗研制過程中A。運用了RNA病毒容易突變的特點B。運用基因工程手段,用質(zhì)粒作載體C．可用利用培養(yǎng)的動物細胞培養(yǎng)天花病毒D．體現(xiàn)了天花病毒的間接使用價值32、用人的胰高血糖素基因制成的DＮA探針，檢測下列物質(zhì)，不可能形成雜交分子的是A。人胰島Ａ細胞中的DNAB。人胰島A細胞中的mRNＡC。人胰島B細胞中的DNAD．人胰島Ｂ細胞中的mＲNＡ33.下圖表示細胞膜上乙酰膽堿（一種神經(jīng)遞質(zhì)）受體基因的克隆技術(shù)操作過程，相關(guān)分析正確的是A．獲得該mRNA的最佳材料是受精卵B.完成過程①②必不可少的酶分別是反轉(zhuǎn)錄酶、ＤNA聚合酶C．構(gòu)建基因表達載體最可能使用的載體是大腸桿菌D．探針篩選的目的是淘汰被感染的細菌,獲得未被感染的細菌３4、科學家將一段控制某藥物蛋白合成的基因轉(zhuǎn)移到白色來亨雞胚胎細胞的DNA中，發(fā)育后的雌雞就能產(chǎn)出含該藥物蛋白的雞蛋，在每一只雞蛋的蛋清中都含有大量的藥物蛋白；而且這些雞蛋孵出的雞，仍能產(chǎn)出含該藥物蛋白的雞蛋.下列分析不正確的是A。這些雞是轉(zhuǎn)基因工程的產(chǎn)物B．這種變異屬于可遺傳的變異C.該過程運用了胚胎移植技術(shù)D。該種變異屬于定向變異35．目前科學家把兔子血紅蛋白基因?qū)氲酱竽c桿菌細胞中，在大腸桿菌細胞中合成了兔子的血紅蛋白.下列所敘述的哪一項不是這一先進技術(shù)的理論依據(jù)Ａ．所有生物共用一套遺傳密碼子B?；蚰芸刂频鞍踪|(zhì)的合成Ｃ.兔子血紅蛋白基因與大腸桿菌的DＮＡ都是由四種脫氧核苷酸構(gòu)成,都遵循堿基互補配對原則,都具有相同的空間結(jié)構(gòu)D。兔子與大腸桿菌有共同的原始祖先3６、人的糖蛋白必須經(jīng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體進一步加工合成,通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)，可以使人的糖蛋白基因得以表達的受體細胞是A、大腸桿菌B、酵母菌C、Ｔ4噬菌體Ｄ、質(zhì)粒DNA37．下列不屬于基因工程育種優(yōu)點的是A．育種周期短B．克服遠緣雜交不親和的障礙C．據(jù)盲目性D.目的性強38.下列高科技成果中,根據(jù)基因重組原理進行的是①我國科學家袁隆平利用雜交技術(shù)培育出超級水稻②我國科學家將蘇云金桿菌的某些基因移植到棉花體內(nèi)，培育出抗蟲棉③我國科學家通過返回式衛(wèi)星搭載種子培育出太空椒④科學工作者將豬的胰島素轉(zhuǎn)變成人的胰島素⑤將人的α－抗胰蛋白酶基因?qū)氲窖虻模腘A分子中A。①②⑤B．①②④⑤C．②④⑤D．①②③④⑤39.轉(zhuǎn)基因抗蟲棉可以有效地用于棉鈴蟲的防治。在大田中種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的同時,間隔種植少量非轉(zhuǎn)基因的棉花或其他作物，供棉鈴蟲取食.這種做法的主要目的是A。維持棉田物種多樣性B．減緩棉鈴蟲抗性基因頻率增加的速度Ｃ．使食蟲鳥有蟲可食?D．維持棉田生態(tài)系統(tǒng)中的能量流動４0．下列哪項不是轉(zhuǎn)基因食物潛在的安全隱患A．轉(zhuǎn)基因植物有可能合成出對人體有直接毒性或潛在毒性的蛋白質(zhì)B.轉(zhuǎn)基因植物合成的某些新的蛋白質(zhì)有可能成為某些人的過敏源C．某些轉(zhuǎn)基因生物可以合成干擾素，進人人體增強相應(yīng)細胞的免疫力Ｄ。某些基因足以使植物體內(nèi)某些代謝途徑發(fā)生變化,導(dǎo)致轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物營養(yǎng)成分的改變二、填空題1、番茄果實成熟過程中,某種酶（PG）開始合成并顯著增加,促使果實變紅變軟。但不利于長途運輸和長期保鮮。科學家利用反義RNA技術(shù)（見圖解),可有效解決此問題。該技術(shù)的核心是，從番茄體細胞中獲得指導(dǎo)PG合成的信使RNA,繼而以該信使RNＡ為模板人工合成反義基因并將之導(dǎo)入離體番茄體細胞,經(jīng)組織培養(yǎng)獲得完整植株。新植株在果實發(fā)育過程中，反義基因經(jīng)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的反義RNA與細胞原有mRNA（靶mRNA）互補形成雙鏈RNＡ,阻止靶mＲＮA進一步翻譯形成ＰG,從而達到抑制果實成熟的目的。請結(jié)合圖解回答：（１)反義基因像一般基因一樣是一段雙鏈的DNA分子，合成該分子的第一條鏈時，使用的模板是細胞質(zhì)中的信使RNA，原料是四種,所用的酶是.(2）如果指導(dǎo)番茄合成PG的信使ＲＮA的堿基序列是—Ａ-U—Ｃ—C—Ａ—G—G—Ｕ—Ｃ—,那么,ＰG反義基因的這段堿基對序列是.（３）將人工合成的反義基因?qū)敕讶~肉細胞原生質(zhì)體的運輸工具是,在受體細胞中該基因指導(dǎo)合成的最終產(chǎn)物是。２、隨著科學技術(shù)的發(fā)展,化學農(nóng)藥的產(chǎn)量和品種逐年增加,但害蟲的抗藥性也不斷增強，對農(nóng)作物危害仍然很嚴重.如近年來，棉鈴蟲在我國大面積暴發(fā)成災(zāi),造成經(jīng)濟損失每年達100億以上。針對這種情況,江蘇農(nóng)科院開展“轉(zhuǎn)基因抗蟲棉”的科技攻關(guān)研究,成功地將某種能產(chǎn)生抗蟲毒蛋白細菌的抗蟲基因?qū)朊藁毎?得到的棉花新品種對棉鈴蟲的毒殺效果高達80%以上。就以上材料，分析回答：(１）細菌的抗蟲基因之所以能“插入”到棉花體內(nèi)，原因是。（2)從細菌的DNA中“剪下"抗蟲基因的酶是。將細菌的抗蟲基因“插入”棉花體細胞中的酶是。(３)“轉(zhuǎn)基因抗蟲棉”具有抗害蟲的能力，這表明棉花體內(nèi)產(chǎn)生了抗蟲的＿_＿_＿_______＿物質(zhì)。這種變異屬于。這個事實說明,害蟲和植物共用一套____________＿。（4)假設(shè)抗蟲基因含有１20０0個堿基對，則該基因控制合成的蛋白質(zhì)共有個氨基酸。（5）棉花的DNA分子被“嫁接”上或“切割”掉某個基因，實際并不影響遺傳信息的表達功能。這說明—--—————--————。（6)“轉(zhuǎn)基因抗蟲棉”抗害蟲的遺傳信息傳遞過程可表示為＿____＿＿＿_________＿_。（7)該項科技成果在環(huán)境保護上的作用是___＿＿___＿_____＿＿_＿＿。（8)科學家預(yù)言，此種“轉(zhuǎn)基因抗蟲棉”獨立種植若干代以后，也將出現(xiàn)不抗蟲的植株,此現(xiàn)象來源于____。(9）害蟲抗藥性的增強是的結(jié)果；3．在培育轉(zhuǎn)基因植物研究中，卡那霉素抗性基因(kan）常作為標記基因,只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長.下圖為獲得抗蟲棉的技術(shù)流程.A構(gòu)建抗蟲基因?qū)階構(gòu)建抗蟲基因?qū)隑培養(yǎng)選擇含重組質(zhì)粒土壤農(nóng)桿菌重組質(zhì)粒B培養(yǎng)選擇含重組質(zhì)粒土壤農(nóng)桿菌重組質(zhì)粒土壤農(nóng)桿菌含kan質(zhì)粒含kan質(zhì)粒侵染侵染分化C誘導(dǎo)選擇D檢測離體棉花葉片組織分化C誘導(dǎo)選擇D檢測離體棉花葉片組織再生植株愈傷組織轉(zhuǎn)基因抗蟲植株轉(zhuǎn)基因抗蟲植株(1)Ｂ過程及其結(jié)果體現(xiàn)了質(zhì)粒作為運載體必須具備的兩個條件是=1＼*GＢ3①＿＿_＿__________＿___＿____＿_＿___＿______＿_＿__＿____＿__＿＿＿_____,=2\*GB３②＿＿＿_____________＿＿＿＿____＿＿___＿＿__＿___＿__＿_______＿__＿_____.(2）如果利用DＮA分子雜交原理對再生植株進行檢測,Ｄ過程應(yīng)該用________＿＿______________＿_____＿_＿＿_____＿_＿_＿__＿_____＿___＿作為探針(3)科學家發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因植株的卡那霉素抗性基因的傳遞符合孟德爾遺傳規(guī)律。經(jīng)分析,該植株含有一個攜帶目的基因的DNA片段,因此可以把它看作是雜合子。＝1\＊GB3①將轉(zhuǎn)基因植株與___________＿_____雜交,其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數(shù)量比為1:1。＝２\＊ＧB3②若該轉(zhuǎn)基因植株自交，則其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數(shù)量比為__＿_。③若將該轉(zhuǎn)基因植株的花藥在卡那霉素培養(yǎng)基上作離體培養(yǎng)，則獲得的再生植株群體中抗卡那霉素型植株占____＿_______%。(4）種植上述轉(zhuǎn)基因植物，它所攜帶的目的基因可以通過花粉傳遞給近緣物種，造成“基因污染”.如果把目的基因?qū)巳~綠體ＤＮA中,就可以避免“基因污染”,原因是__＿＿＿＿___＿__。4、請閱讀下列幾段文字后回答：Ａ．有人把蠶的DＮＡ分離出來，用一種酶“剪切”下制造絲蛋白的基因，再從細菌細胞中提取一種叫“質(zhì)粒”的ＤNA分子，把它和絲蛋白基因拼接在一起再送回細菌細胞中，結(jié)果，此細菌就有生產(chǎn)蠶絲的本領(lǐng)。B．法國科學家發(fā)現(xiàn)，玉米、煙草等植物含有類似人體血紅蛋白的基因,如加入“Fe”原子,就可以制造出人的血紅蛋白，從而由植物提供醫(yī)療中所需要的人體血液。Ｃ。19９1年，我國復(fù)旦大學遺傳所科學家成功的進行了世界上首例用基因療法治療血友病的臨床實驗。D．江蘇農(nóng)科院開展轉(zhuǎn)基因抗蟲棉花的研究，得到的棉花新品種對棉鈴蟲等害蟲毒殺效果高達80%～100%。（1）所有這些實驗統(tǒng)稱為工程，所有這些實驗的結(jié)果，有沒有生成前所未有的新型蛋白質(zhì)?。(2）A段中實驗結(jié)果的細菌能生產(chǎn)蠶絲,說明.在將質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌時，一般要用__＿處理該菌,以使處于細胞狀態(tài)，以便吸收周圍環(huán)境中的DNA分子。(3）B段中由玉米、煙草的基因生產(chǎn)人類血紅蛋白為什么要加入“Fe”原子?,植物中含類似人類血紅蛋白基因,從進化上看,說明.（4)人類基因組計劃（HGＰ)測定了人體中條染色體的雙鏈DNＡ分子的脫氧核苷酸序列，C段中血友病基因療法中有關(guān)的染色體是染色體；5、如下圖所示，在a、b試管內(nèi)加入的ＤNA都含有30對堿基，四個試管內(nèi)都有產(chǎn)物生成。請回答:RNAATP酶RNAATP酶脫氧核苷酸DNAATP酶核糖核苷酸DNAATP酶脫氧核苷酸RRNAATP酶核糖核苷酸ａbcｄ（１)a、d兩試管內(nèi)的產(chǎn)物是相同的，但ａ試管內(nèi)模擬的是過程;ｄ試管內(nèi)模擬的是過程。（２）b、c兩試管內(nèi)的產(chǎn)物都是,但b試管內(nèi)模擬的是過程;c試管內(nèi)模擬的是過程；ｂ試管的產(chǎn)物中１個分子中最多含有堿基,有個密碼子。(3)d試管中與ａ試管相比,特有的酶是。６.熒火蟲能發(fā)光是因為熒火蟲體內(nèi)可以通過熒光素酶催化的系列反應(yīng)所產(chǎn)生的現(xiàn)象。如果熒光素酶存在于植物體內(nèi)，也可使植物體發(fā)光。一直以來熒光素酶的惟一來源是從熒火蟲腹部提取的。但加利福利亞大學的一組科學家成功地通過轉(zhuǎn)基因工程實現(xiàn)了將熒光素酶基因?qū)氲酱竽c桿菌體內(nèi),并在大腸桿菌體４內(nèi)產(chǎn)生熒光素酶.請你根據(jù)已有的知識回答下列有關(guān)問題：（1）在此轉(zhuǎn)基因工程中，目的基因是，提取目的基因的方法通常有兩種,提取該目的基因的方法最可能的途徑是。（2)將此目的基因?qū)氲酱竽c桿菌體內(nèi)需要運載體的幫助。下列所列各項是選取運載體的時候必須考慮的是A.能夠在宿主細胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存 Ｂ。具有特定的限制酶切點C．具有與目的基因相同的堿基片斷?D．具有某些標記基因(3)下列可作為受體細胞的生物有Ａ。土壤農(nóng)桿菌?B.結(jié)核桿菌 C。噬菌體?D?？莶輻U菌（4)在此轉(zhuǎn)基因工程中,是由質(zhì)粒承擔運載體的，除此結(jié)構(gòu)外，常作為載體的物質(zhì)還有。在將體外重組體DＮＡ導(dǎo)入大腸桿菌體內(nèi)之前通常要用處理大腸桿菌，目的是。(5）與雜交育種、誘變育種相比,通過基因工程來培育新品種的主要優(yōu)點是和.７、糖尿病是一種常見病,且發(fā)病率有逐年增加的趨勢，以致發(fā)達國家把它列為第三號“殺手"。（1）目前對糖尿?、裥偷闹委?大多采用激素療法，所用激素為__＿＿______＿__,由___＿_____＿＿＿＿__＿_細胞分泌。（2)目前檢測尿糖常用的試劑為，糖尿遇該試劑加熱后呈色。(3）讓一健康人和糖尿病患者于空腹時同時口服葡萄糖，服用量按每人每千克體重1克計算，隨后每隔一段時間，測定各人的血糖濃度如圖甲所示,圖中表示糖尿病患者的曲線是___（4）這種治療用的激素過去主要是從動物的內(nèi)臟中提取，數(shù)量有限，２0世紀70年代后，開始采用基因工程的方法生產(chǎn)，如圖乙所示，請回答：①指出圖中２、４、6、７的名稱：2_＿_＿_________，4＿___________＿,6＿__＿＿＿____＿__，7_＿__＿__＿＿___＿。②一般獲取４采用的方法是___＿__＿__＿___.③6的獲得必須用___＿__＿_＿_＿＿_切割3和4，使它們產(chǎn)生相同的____＿_＿_＿____，再加入適量的__＿__＿___＿___酶，才可形成。④2的化學本質(zhì)為.(5）大腸桿菌質(zhì)粒經(jīng)ＥcoRＩ（一種限制性核酸內(nèi)切酶)切割后所形成的黏性末端之一是,則ＥcoRI的識別序列和切點是＿＿__＿_＿＿_＿＿(切點用箭頭標在序列上）。9、下圖是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人胰島素的操作過程示意圖，請據(jù)圖作答。人胰島細胞人胰島細胞大腸桿菌胰島素mRNAA①人胰島素人胰島素大量的A重復(fù)進行③④②⑤⑥⑦⑧⑨⑩BCD（1)大腸桿菌等微生物是基因工程最早的突破口和常用的實驗材料，這是因為:①大腸桿菌結(jié)構(gòu)簡單，容易從體內(nèi)取出和導(dǎo)入；②大腸桿菌繁殖速度快，產(chǎn)量大，成本低。(2）“目的基因”能在大腸桿菌內(nèi)實現(xiàn)遺傳信息成功的表達，說明大腸桿菌具有一種細胞器是。（3)自然界中生物的變異是的，而以上的基因工程技術(shù)使大腸桿菌按照人們目的發(fā)生的變異.(4）若Ａ中共有a個堿基對，其中鳥嘌呤有ｂ個，則③④⑤過程連續(xù)進行４次,至少需要提供胸腺嘧啶個。（５）家蠶的體細胞共有５６條染色體,對家蠶的基因組進行分析（參照人類基因組計劃要求）,應(yīng)測定家蠶的條雙鏈ＤNA分子上的核苷酸序列，它們分別是。（6）為了提高蠶絲的產(chǎn)量和品質(zhì)，可以通過家蠶遺傳物質(zhì)改變引起變異和進一步的選育來完成.這些變異的來源有：。8．將動物致病菌的抗原基因?qū)腭R鈴薯制成植物疫苗，飼喂轉(zhuǎn)基因馬鈴薯可使動物獲得免疫力。以下是與植物疫苗制備過程相關(guān)的圖和表。請根據(jù)以上圖表回答下列問題。（1）在采用常規(guī)PＣR方法擴增目的基因的過程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物體內(nèi)的ＤNA聚合酶,其最主要的特點是。(2)PＣR過程中退火（復(fù)性）溫度必須根據(jù)引物的堿基數(shù)量和種類來設(shè)定。表1為根據(jù)模板設(shè)計的兩對引物序列,圖2為引物對與模板結(jié)合示意圖。請判斷哪一對引物可采用較高的退火溫度？__________.（３)圖1步驟③所用的DNA連接酶對所連接的DNA兩端堿基序列是否有專一性要求?。（4）為將外源基因轉(zhuǎn)入馬鈴薯,圖1步驟⑥轉(zhuǎn)基因所用的細菌Ｂ通常為。（5)對符合設(shè)計要求的重組質(zhì)粒Ｔ進行酶切,假設(shè)所用的酶均可將識別位點完全切開，請根據(jù)圖1中標示的酶切位點和表2所列的識別序列,對以下酶切結(jié)果作出判斷。①采用EｃoRⅠ和PsｔⅠ酶切，得到__＿_＿_＿__種ＤNA片斷。②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切,得到____＿＿___種DＮＡ片斷。練習題答案一、選擇題1--—5CBＢＣＣ６---１0CCCCＢ1１—-—15DＤCCC１６—-—20ＣＣBCC21——-25ＤBAAC26——－３0BADDＤ31--—3５CDＢCD36－—-4０BCＡBＣ二、填空題1、答案:(１）脫氧核苷酸；逆轉(zhuǎn)錄酶（２)-T—A-G—G—T—C—Ｃ—Ａ-Ｇ-—A—Ｔ-C—C-A—G-Ｇ—T—C—(3）質(zhì)粒（或運載體、病毒）；（反義）ＲＮＡ2、(1）①人和羊DNA分子的空間結(jié)構(gòu)、化學組成相同；②有互補的堿基序列（答出其中一點即可）（2）限制酶;DＮＡ連接酶（3)毒蛋白基因重組遺傳密碼（4）４000（5）基因是遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位(6)ＤNA(基因）→RＮA→蛋白質(zhì)（7）減少農(nóng)藥對環(huán)境的污染，保護生態(tài)環(huán)境或生態(tài)平衡(8）基因突變（９)農(nóng)藥對害蟲抗藥性的變異進行定向選擇3．（1）具有標記基因能在宿主細胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存（2)放射性元素標記的抗蟲基因（3）①非轉(zhuǎn)基因②3:1③1０0（4)葉綠體遺傳表現(xiàn)為母系遺傳,目的基因不會通過花粉傳遞而在下一代中顯現(xiàn)出來4、（1）基因沒有（2)蠶的絲蛋白基因在細菌體內(nèi)得以表達Ca2＋感受態(tài)（3）人類的血紅蛋白是一種含F(xiàn)e的特殊蛋白質(zhì)不同生物之間具有一定的親緣關(guān)系（4)24X5、(１)DNＡ的復(fù)制逆轉(zhuǎn)錄（２）ＲＮＡ轉(zhuǎn)錄RNA的復(fù)制30１0(3）逆轉(zhuǎn)錄酶6．（1)熒光素酶基因；人工合成法（2)AＢD（3)AD(4）動植物病毒、噬菌體；CaCl２以增大細胞壁的通透性，使重組基因能夠?qū)氲绞荏w細胞內(nèi)（5）目的明確培育周期短可以克服遠緣雜交的不親和性(只要合理,兩點即得分)7、（１)胰島素胰島B細胞（2）斐林試劑磚紅色（3）B(4）①質(zhì)粒胰島素基因重組DNＡ受體細胞②人工合成③限制酶黏性末端ＤNA連接酶④DNA（5）—GAATTC－８、(1）質(zhì)粒(2）核糖體（3）不定向定向(４）15（ａ-b)(5）29２7條常染色體+XＹ兩條性染色體（6)基因突變、基因重組、染色體變異9．(１）耐高溫(2)引物對B(3）否（4）農(nóng)桿菌（5）①2②１基因工程原理習題集1、DNA分子克隆技術(shù):克隆，指含有單一的DNA重組體的無性繁殖系，或指將DNA重組體引入宿主細胞建立無性繁殖系的過程。DNA分子克隆技術(shù)也稱基因克隆技術(shù),是在體外將ＤＮA分子片段與載體DＮＡ片段連接，轉(zhuǎn)入細胞獲得大量拷貝的過程。其基本步驟包括：制備目的基因→將目的基因與載體用限制性內(nèi)切酶切割和連接,制成DNA重組→導(dǎo)入宿主細胞→篩選、鑒定→擴增和表達.載體在細胞內(nèi)自我復(fù)制，并帶動重組的分子片段共同增殖，從而產(chǎn)生大量的DNA分子片段。主要目的是獲得某一基因或DNＡ片段的大量拷貝,有了這些與親本分子完全相同的分子克隆，就可以深入分析基因的結(jié)構(gòu)與功能,隨著引入的DＮＡ片段不同，有兩種DＮA庫，一種是基因組文庫，另一種是cDNＡ庫。２、分子雜交：兩條不同來源的DＮA（或RＮA）鏈或DNA與RNA之間存在互補順序時,在一定條件下可以發(fā)生互補配對形成雙螺旋分子，這種分子稱為雜交分子.形成雜交分子的過程稱為分子雜交.3、限制性片段長度多態(tài)性:從不同個體制備的ＤＮA,使用同一種限制性內(nèi)切酶酶切,切得的片段長度各不相同。酶切片段的長度可以作為物理圖譜或者連接圖譜中的標記子。通常是在酶切位點處發(fā)生突變而引發(fā)的。4、報告基因：一種編碼可被檢測的蛋白質(zhì)或酶的基因,也就是說,是一個表達產(chǎn)物非常容易被鑒定的基因、5、多聚酶鏈式反應(yīng)（PCR):一種體外擴增DＮA的方法。PCR使用一種耐熱的多聚酶，以及兩個單鏈引物。以過高溫變性將模板DNA分離成兩條鏈。低溫退火使得引物和一條模板單鏈結(jié)合，然后是中溫延伸，反應(yīng)液的游離核苷酸緊接著引物從5/端到3／端合成一條互補的新鏈。而新合成的ＤNA又可以繼續(xù)進行上述循環(huán),因此DＮA的數(shù)目不斷倍增。６、核酸的凝膠電泳:將某種分子放到特定的電場中，它就會以一定的速度向適當?shù)碾姌O移動。某物質(zhì)在電場作用下的遷移速度叫做電泳的遷移率,它與電場強度成正比，與該分子所攜帶的凈電荷數(shù)成正比，而與分子的摩擦系數(shù)成反比（分子大小、極性、介質(zhì)的粘度系數(shù)等）。在生理條件下，核酸分子中的磷酸基團是離子化的，所以，DNＡ和RＮA實際上呈多聚陰離子狀態(tài).將DNA、ＲＮA放到電場中，它就會由負極向正極移動。在凝膠電泳中，一般加入溴化乙錠進行染色，此時，核酸分子在紫外光下發(fā)出熒光，肉眼能看到約５0ngDNA所形成的條帶。７、細菌轉(zhuǎn)化:所謂細菌轉(zhuǎn)化，是指一種細菌菌株由于捕獲了來自另一種細菌菌株的ＤNＡ，而導(dǎo)致遺傳特性發(fā)生改變的過程。這種提供轉(zhuǎn)化DＮA的菌株叫做供體菌株,而接受轉(zhuǎn)化DNA的菌株則叫做受體菌株。大腸桿菌是使用最廣泛的實驗菌株。8、反義核酸：指與靶DNA或RNA堿基互補,并能與之結(jié)合的一段DNA或RNA。９、ＲNAiｎｔｅrfeｒeｎce：是一種進化上保守的抵御轉(zhuǎn)基因或外來病毒侵犯的防御機制。將與靶基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRＮA存在同源互補序列的雙鏈ＲNA導(dǎo)入細胞后，能特異性地降解該ｍRＮA，從而產(chǎn)生相應(yīng)的功能表型缺失，這一過程屬于轉(zhuǎn)錄后基因沉默機制范疇。１0、Ｓpｉ：λ噬菌體體重組克隆的一種篩選方法,其篩選方法是Spi+：λ不能感染E.cｏｌｉ（p2）；Spi－:λ（rｅd-gam—)能感染E.cｏli(p２)，形成小噬斑/hoｓtｒecA+／chi.λ包裝時若ｇａm—，需ｒｅcA產(chǎn)物的作用才可形成噬斑（但為小噬斑）,所以對宿主菌有要求(reｃＡ＋）但rｅcA+可引起其它重組：載體改為red—/gam+可在recA-受體中增殖。11、ＤNA文庫：將某種生物的基因組ＤNＡ切割成一定大小的片段，并與合適的載體重組后導(dǎo)入宿主細胞,進行克隆。這些存在于所有重組體內(nèi)的基因組DNA片段的集合，即基因組文庫,它包含了該生物的所有基因。12、cDNA：cＤNA是指以ｍRＮＡ為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下形成的互補DNA。13、ｃＤNA文庫：以細胞的全部ｍＲNA逆轉(zhuǎn)錄合成的cDNA組成的重組克隆群體稱為cＤＮA文庫。１4、DNＡ探針：是帶有標記的一段已知序列DNA，用以檢測未知序列、篩選目的基因等方面廣泛應(yīng)用。１5、轉(zhuǎn)導(dǎo)（作用)：借助于病毒載體，遺傳信息從一個細胞轉(zhuǎn)移到另一個細胞.16、染色體步移：通過相互重疊的基因組克隆之間進行一連串雜交從而實現(xiàn)染色體上基因的定位。17、斑點雜交：將被檢標本點到膜上，烘烤固定后與探針進行雜交。這種方法耗時短，可做半定量分析,一張膜上可同時檢測多個樣品.18、α—complｅmenｔation：質(zhì)粒載體重組克隆的篩選方法,LaｃZ基因上缺失近操縱基因區(qū)段的突變體與帶有完整的近操縱基因區(qū)段的β—半乳糖苷酶陰性的突變體之間實現(xiàn)互補。ＬacＺ△M１5:放在F質(zhì)粒上，隨宿主傳代;ＬaｃZ'：放在載體上，作為篩選標記。1９、菌落原位雜交：將細胞從培養(yǎng)平板轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素濾膜上,然后將濾膜上的菌落裂解以釋放出ＤＮA。將DNＡ烘干固定于膜上與３2P標記的探針雜交，放射自顯影檢測菌落雜交信號,并與平板上的菌落對位。２0、核酸原位雜交:標記探針與細胞或組織切片中的核酸進行雜交的方法.21、限制性內(nèi)切酶:識別DNA的特異序列，并在識別點或其周圍切割雙鏈DNA的一類核酸內(nèi)切酶。22、酶切位點:DNＡ上一段堿基的特定序列，限制性內(nèi)切酶能夠識別出這個序列并在此將DＮＡ酶切成兩段。23、DＮA連接酶:催化DＮA中相鄰的5／磷酸基與3/羥基間形成磷酸二酯鍵，使DＮA切囗封合，連接DNA片段.２4、持家基因:是指對所有類型組織細胞在任何時候都需要其表達的基因，通常都是維持細胞基本生存所必須的基因，其表達常保持在固定的水平。又稱為組成性表達基因。25、奢侈基因：只在某特定的細胞類型中表達或者說只在發(fā)育階段的某些時期表達的基因叫做奢侈基因。26、Tm值：是反映DNA的熱穩(wěn)定性的一個參數(shù),稱為ＤNA的熔解溫度,系指一半的雙鏈DNA解離成為單鏈時的溫度.２7、分子標記：廣義的分子標記是指可遺傳的并可檢測的ＤNA序列或蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)標記包括種子貯藏蛋白和同工酶(指由一個以上基因位點編碼的酶的不同分子形式)及等位酶(指由同一基因位點的不同等位基因編碼的酶的不同分子形式）。狹義的分子標記是指能夠用來作為指紋鑒定或區(qū)分個體特點的DＮA片段。2８、基因工程:指在體外將核酸分子插入病毒、質(zhì)?；蚱渌d體分子中，構(gòu)成遺傳物質(zhì)的重新組合，使之進入原先沒有這類分子的寄主細胞內(nèi)并進行持續(xù)穩(wěn)定的繁殖和表達的過程。29、載體：是攜帶外源ＤＮA進入宿主細胞進行擴增和表達的DNＡ,它們一般是通過改造質(zhì)粒、噬菌體或病毒等構(gòu)建的。30、衛(wèi)星DNA:又稱短串聯(lián)重復(fù)，２～6個核苷酸組成的重復(fù)單位串聯(lián)重復(fù)（１0～60次),兩側(cè)為特異的單拷貝序列,人類基因組中每1０kｂＤNA序列至少有一個STR序列.31、多克隆位點：ＤNA中含有兩個以上密集的、能被多種限制性內(nèi)切酶識別和切割的位點區(qū).32、定位克?。阂卜Q為圖位克隆，是在獲取基因在染色體上的位置信息后，采用各種實驗方法對基因進行克隆和定位.定位克隆包括定位和克隆兩個過程,定位是通過連鎖分析找出與目的基因緊密連鎖的遺傳標記在染色體上的位置，克隆是從定位的染色體區(qū)段內(nèi)分離克隆所要的基因，并進一步研究其功能。也可以回答為“通過遺傳標記”先獲得某一表型基因在染色體上的定位,再在候選區(qū)域內(nèi)選擇已知基因,進行突變的篩選，并獲得cDＮＡ及全基因的過程。33、基因芯片:基因芯片又稱為DNA微陣列，以基因序列為分析對象的微陣列,是通過縮微技術(shù)，根據(jù)分子間特異性地相互作用的原理,將生命科學領(lǐng)域中不連續(xù)的分析過程集成于硅芯片或玻璃芯片表面的微型生物化學分析系統(tǒng),以實現(xiàn)對細胞、蛋白質(zhì)、基因及其他生物組分的準確、快速、大信息量的檢測。3４、RT-PCR:是以ＲNA為起始材料經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)產(chǎn)生cDNＡ,再以cＤNＡ為模板進行PＣR擴增，從而獲取目的基因或檢測基因表達。主要用于分析基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，克隆ｃDNA及合成cＤNA探針，改造cDNA序列等.3５、錨定PＣＲ：用于在體外擴增未知序列的DNA片段的方法，一般的ＰＣＲ必須預(yù)先知道欲擴增DNA片段兩側(cè)的序列，但人們經(jīng)常需要分析一端序列未知的基因片段,可利用錨定ＰＣR.該法的基本原理是在基因未知序列端添加同聚物尾，人為賦予未知基因末端序列信息，再用人工合成的與多聚尾互補的引物作為錨定引物，在與基因另一側(cè)配對的特異引物參與下，擴增帶有同聚物尾的序列。錨定引物PCR對分析未知序列基因有特殊用途。3６、反向PCＲ:常規(guī)PCR可擴增位于兩個引物之間的DNA片段,但不能擴增引物外側(cè)的ＤNA序列,反向PCR則可擴增引物外側(cè)的DＮＡ片段，對已知ＤNA片段兩側(cè)的未知序列進行擴增和研究。其原理為：先用一種在目標DNＡ區(qū)段上沒有識別位點的限制性內(nèi)切酶從距離目標DNA一定距離的兩側(cè)位置切割DNＡ分子,然后將這些片斷進行分子內(nèi)連接形成環(huán)，根據(jù)已知的目標DNA序列按照向外延伸的要求設(shè)計一對向外引物,保證被擴增的是目標ＤNA區(qū)段兩側(cè)的未知序列.３7、多重ＰCR：在同一反應(yīng)中采用多對引物同時擴增幾個不同ＤNA片段,如果基因某一區(qū)段缺失，則相應(yīng)的電泳圖譜上此區(qū)段ＰＣR擴增產(chǎn)物消失,從而發(fā)現(xiàn)基因異常。多重PCＲ具有靈敏、快速的特點,特別適用于檢測單拷貝基因缺失、重排、插入等異常改變，其結(jié)果與soｕtｈernbｌotｔinｇ一樣可靠。38、質(zhì)粒：是染色體外能夠進行自主復(fù)制的遺傳單位,包括真核生物的細胞器和細菌細胞中染色體以外的脫氧核糖核酸（ＤNＡ)分子?，F(xiàn)在習慣上用來專指細菌、酵母菌和放線菌等生物中染色體以外的DＮA分子。在基因工程中質(zhì)粒常被用做載體。39、粘粒載體:也叫柯斯質(zhì)粒，是一類人工構(gòu)建的含有λＤNA的cos序列和復(fù)制子的特殊特殊類型的質(zhì)粒載體。40、穿梭質(zhì)粒載體：是人工構(gòu)建的一類具有兩種不同復(fù)制起點和選擇記號,因而可以在兩種不同寄主細胞中存活和復(fù)制的質(zhì)粒載體.41、基因突變：基因突變是指由于DNA堿基對的置換、增添或缺失而引起的基因結(jié)構(gòu)的變化,亦稱點突變。42、逆轉(zhuǎn)錄酶：在體內(nèi)、外均能轉(zhuǎn)錄病毒性RNＡ成為DＮA，稱為依賴RNA多聚酶，，即為逆轉(zhuǎn)錄酶。分布在病毒的類核內(nèi).逆轉(zhuǎn)錄酶與三種功能有關(guān):①使RＮＡ一DNA雜合雙鏈形成；②切除雜合雙鏈中的RNA鏈；③進而再生成DNＡ一DＮA的雙鏈.43、扣除雜交:就是用一般細胞的mRNA與特殊細胞的cDNＡ雜交,先扣除一般共有的ｃDＮＡ，再將剩下的特異的cDNA進行克隆，用此方法已成功克隆出控制動物胚胎發(fā)育和組織分化的基因.4４、測序酶為修飾的T7DＮApｏｌymerasｅ，９9％3’-5’外切活性被除去（Ｖeｒｓion1。0）；完全除去（V２.０)；用于測序反應(yīng)（測序酶）。4５、ＹAＣ載體酵母人工染色體載體；含酵母染色體復(fù)制起點ori，自主復(fù)制序列AＲS;著絲粒(ＣＥN）;兩個端粒（ＴEL）。用于克隆50kｂ以上甚至—Mb(２00-50０kb）。原生質(zhì)體電轉(zhuǎn)化,URA3-trp－ａde2－1赭石突變酵母菌，紅色菌落插入失活。４6、同尾酶一類產(chǎn)生相同粘性末端的限制性內(nèi)切酶。47、cI篩選法CⅠ基因發(fā)生突變時不能溶源化，CⅠ-:在hflＡ（高頻溶源化）中形成噬斑。ＣⅠ+在ｈｆlA中形成溶源,產(chǎn)生混濁噬斑.48、Ｓａnｇer測序即酶法測序,用雙脫氧核苷酸作為鏈終止試劑,通過聚合酶的引物延伸產(chǎn)生一系列大小不同的分子后再進行分離的方法。4９、同裂酶:DNＡ經(jīng)限制性內(nèi)切酶切割后,產(chǎn)生相同粘性末端，這類限制性內(nèi)切酶稱為同裂酶。５０、復(fù)制起點：ＤＮA復(fù)制的起始位點,DNA復(fù)制在起始位點處形成復(fù)制叉進行雙向復(fù)制，通常DNA復(fù)制的起始DNＡ序列存在重復(fù)倒位序列.51、啟動子：啟動子是DNＡ分子可以與RNＡ聚合酶特異結(jié)合的部位,也就是使轉(zhuǎn)錄開始的部位.在ＲNＡ合成開始位點的上游大約10bp和３5ｂp處有兩個共同的順序,稱為－10和-３５序列.這兩個序列的共同順序如下,—35區(qū)“AATGTGTＧGAＡT”，-１0區(qū)“TＴＧACAＴATATT”。大多數(shù)啟動子均有共同順序（coｎsenｓｕsｓｅｑueｎce），只有少數(shù)幾個核苷酸的差別。52、起始密碼子：ＡUG不僅是Meｔ或者fＭet（在原核細胞)的密碼子，也是肽鏈合成的起始信號，故稱AUＧ為起始密碼子。５3、起始因子:在蛋白質(zhì)生物合成的起始階段與核糖體亞基結(jié)合，起始蛋白質(zhì)的合成.在E.coli中已分離出三種IＦ。IF1、ＩF2和IＦ3。其中，IF3具有形成三元復(fù)合物和解離因子活性，使70S核糖體顆粒解離為30S和50S亞基；IF2形成30Ｓ前起始復(fù)合物；IF1無特異功能，但具有加強IF2和IF3的活性作用.54、復(fù)制終點ＤNA復(fù)制的終止位點,DＮA復(fù)制在起始位點處形成復(fù)制叉進行雙向復(fù)制，在終止位點處終止DNA復(fù)制,通常DNA復(fù)制的終點DNA序列存在重復(fù)倒位序列。5５、終止子：細菌DＮA中有轉(zhuǎn)錄終止信號,稱為終止子。作用是在DNA模板的特異位點處終止ＲNA的合成。在終止子處，RＮA聚合酶停止其聚合作用,將新生RNA鏈釋出,并離開模板DＮＡ。5６、終止密碼子：UＡA、ＵＡG和UGＡ為終止密碼子,不代表任何氨基酸，也稱為無意義密碼子.57、終止因子：蛋白質(zhì)肽鏈合成的終止因子,在E．cｏli中已分離出三種釋放因子.RＦ１,RF2和RＦ3。其中，只有RＦ3與GＴＰ（或ＧＤP)能結(jié)合。它們均具有識別mRNA鏈上終止密碼子的作用，使肽鏈釋放,核糖體解聚。二、選擇題１、對限制性內(nèi)切酶的作用，下列哪能個不正確？—－－——--A、識別序列長度一般為4~６bpB、只能識別和切割原核生物DNA分子C、識別序列具有回文結(jié)構(gòu)D、切割原核生物ＤNA分子2、1、同一種質(zhì)粒DNA,以三種不同的形式存在,電泳時，它們的遷移速率是:A、OCＤNA＞ＳＣDNA＞ＬDＮA。B、ＳCDNA〉LDNA＞OCDＮＡ.C、LDNA＞OＣDNA〉ＳCDNA。Ｄ、SＣDNＡ＞OCDNＡ>LDＮA。3、下列關(guān)于基因克隆操作方法的敘述哪一個是不正確的。A、選擇合適的限制酶，使其在特定的位點切開DＮA分子。B、選擇能夠進行自我復(fù)制的小分子DNA作為載體DNAC、基因克隆就是分子雜交D、制備所需要的DNA片段,用ＤNA連接酶使其和載體DNA連接成重組DNＡ。４、酵母雙雜交體系被用來研究____＿A、哺乳動物功能基因的表型分析Ｂ、酵母細胞的功能基因C、蛋白質(zhì)的相互作用Ｄ、基因的表達調(diào)控5、有關(guān)反轉(zhuǎn)錄的正確敘述是＿_＿___＿Ａ、反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)不需要引物B、反轉(zhuǎn)錄后的產(chǎn)物是ｃＤNAC、反轉(zhuǎn)錄的模板可以是RＮA，也可以是DＮAＤ、合成鏈的方向是3/→５／６、關(guān)于禽類ＲNA病毒逆轉(zhuǎn)錄酶有關(guān)活性的描述,正確的選擇是______A、ＤNＡ聚合酶活性，3/→5/的外切酶活性，DNA旋轉(zhuǎn)酶活性Ｂ、DNA聚合酶活性,５/→3/的外切酶活性，DNA旋轉(zhuǎn)酶活性Ｃ、DNA聚合酶活性,DNA內(nèi)切酶活性,ＤNＡ旋轉(zhuǎn)酶活性７、用于分子生物學和基因工程研究的載體必須具備兩個條件＿＿＿___Ａ、含有復(fù)制原點，抗選擇基因Ｂ、含有復(fù)制原點，合適的酶切位點C、抗性基因，合適的酶切位點８、關(guān)于核酸電泳的敘述,錯誤的是?__＿_＿_Ａ、泳動速率與分子構(gòu)象有關(guān)B、聚丙烯酰胺凝膠電泳的分辨率最高C、分子泳動的方向與凈電荷有關(guān)D、泳動速率與分子大小有關(guān)9、ｍRNA的序列是5/ACUGAＧＣU３/,那么通過反轉(zhuǎn)錄合成的ｃDNＡ的序列應(yīng)該是:＿___Ａ、5/TGＡCＴCＧA3/B、5／AＧCＴCＡGT３/C、5/ＡGCＵＣAＧU3／D、５/AＣＴGAＧＣＴ3/1０、ＰCR實驗的特異性主要取決于______A、DNA聚合酶的種類Ｂ、反應(yīng)體系中模板DNＡ的量C、引物序列的結(jié)構(gòu)和長度Ｄ、四種dＮTP的濃度11、下列關(guān)于限制性核酸內(nèi)切酶的敘述哪一個是不正確的？Ａ、限制性內(nèi)切酶存在于許多種細菌中B、限制酶的功能是識別和降解外來的DNAＣ、限制酶是識別和降解DNA的酶的總稱D、限制酶能識別DNＡ分子上特定的核苷酸序列并在特定的位點切割DNA12、下列關(guān)于ｃDNＡ文庫與基因組文庫的敘述中,哪一項是不正確的?Ａ、cDNA文庫代表了mRＮＡ來源B、從不同類型細胞制備的