分解尿素、纖維素的微生物

15.0g瓊脂1.0g尿素10.0g葡萄糖0.2gMgSO4`7H2O2.1gNaH2PO41.4gKH2PO4土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)所需培養(yǎng)基：①從物理性質(zhì)看此培養(yǎng)基屬于哪類？固體培養(yǎng)基課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)②在此培養(yǎng)基中哪些作為碳源、氮源？碳源：葡萄糖氮源：尿素培養(yǎng)基的氮源為尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長(zhǎng)發(fā)育繁殖，而受到抑制，所以用此培養(yǎng)基就能夠選擇出分解尿素的微生物。培養(yǎng)基選擇分解尿素的微生物的原理（四）鑒定：篩選后必鑒定鑒別培養(yǎng)基：不影響微生物的生存酚紅培養(yǎng)基：鑒定分解尿素的細(xì)菌。原理：脲酶催化尿素分解成氨→培養(yǎng)基堿性增強(qiáng)→酚紅變紅→脲酶陽性37℃倒置培養(yǎng)按濃度捆成一摞恒溫37℃培養(yǎng)10-4

、10-3,、10-2

纖維素是一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物，是含量最豐富的多糖類物質(zhì)。纖維素能被土壤中某些微生物分解利用，這是因?yàn)樗鼈兡軌虍a(chǎn)生纖維素酶。草食性動(dòng)物是怎樣消化食物中纖維素的？

棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物，纖維素的分解需要在纖維素酶的催化作用下完成，請(qǐng)完成下列過程：（一）纖維素與纖維素酶

纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。纖維素纖維二糖葡萄糖C1酶Cx酶葡萄糖苷酶濾紙崩潰法纖維素酶活性的測(cè)定實(shí)驗(yàn)：下列生物能分解纖維素的是（）①人②兔③牛④蘑菇⑤纖維桿菌A.①②③④⑤B.②③⑤C.②③④⑤D.③⑤C（二）纖維素分解菌的篩選1、篩選纖維素分解菌的方法是______________。該方法可以通過________反應(yīng)直接篩選。剛果紅染色法顏色2、其原理是：剛果紅可以與纖維素形成____________，當(dāng)纖維素被_________分解后，紅色復(fù)合物無法形成，出現(xiàn)以_____________為中心的________，我們可以通過____________來篩選纖維素分解菌。紅色復(fù)合物纖維素酶纖維素分解菌

透明圈是否產(chǎn)生透明圈練一練：1.下列關(guān)于纖維素酶的說法，錯(cuò)誤的是A.纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括三種B.纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C.纖維素酶可用于去掉植物的細(xì)胞壁D.葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖2.利用剛果紅法可以篩選出纖維素分解菌，下列說法錯(cuò)誤的是A.剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物B.剛果紅能與纖維二糖形成紅色復(fù)合物C.剛果紅不能與葡萄糖形成紅色復(fù)合物D.若培養(yǎng)基上產(chǎn)生了透明圈，則說明已篩

選出了纖維素分解菌土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

纖維素分解菌大多分布在____________的環(huán)境中。采集土樣時(shí)，應(yīng)選擇富含纖維素的環(huán)境。如樹林中多年落葉形成的腐殖土，多年積累的枯枝敗葉等等。也可將濾紙埋在土壤中一個(gè)月左右，這樣會(huì)有能分解纖維素的微生物生長(zhǎng)。土壤取樣

富含纖維素為什么要在富含纖維素的環(huán)境中找纖維素分解菌？

根據(jù)生物與環(huán)境的互相依存關(guān)系，在富含纖維素的環(huán)境中纖維素分解菌的含量相對(duì)提高，因此從這種土壤中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。將濾紙埋在土壤中有什么作用？你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋進(jìn)土壤多深？

人工設(shè)置適宜環(huán)境，使纖維素分解菌相對(duì)聚集。將紙埋于深約10cm的腐殖土壤中。1、纖維素分解菌選擇培養(yǎng)基屬于______（固體、液體）培養(yǎng)基，原因是____________________。選擇培養(yǎng)閱讀資料二“選擇培養(yǎng)基”，回答以下幾個(gè)問題：液體沒有添加瓊脂成分2、該培養(yǎng)基對(duì)微生物________（具有，不具有）選擇作用。如果具有，其選擇機(jī)制是_______________________________________________________。以纖維素粉為唯一碳源，能分解纖維素的微生物可以大量繁殖

具有若設(shè)置一個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn)說明選擇培養(yǎng)的作用，應(yīng)控制的變量是將__________改為_________。3、你能否設(shè)計(jì)一個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn)，說明選擇培養(yǎng)基的作用？葡萄糖纖維素粉實(shí)驗(yàn)流程中“選擇培養(yǎng)”的目的是什么？

其目的是增加纖維素分解菌的濃度，以確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物。選擇培養(yǎng)的操作方法

將土樣加入裝有30ml選擇培養(yǎng)基的錐形瓶中，將錐形瓶固定在搖床上，在一定溫度下震蕩培養(yǎng)1～2天，直至培養(yǎng)液變渾濁。也可重復(fù)選擇培養(yǎng)。梯度稀釋

按照課題1的稀釋操作方法，將選擇培養(yǎng)后的培養(yǎng)基進(jìn)行等比稀釋，稀釋最大倍數(shù)到106將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上1.制備培養(yǎng)基:

參照旁欄中的比例2.涂布平板：

將稀釋度為104～106的菌懸液各取0.1ml涂布在培養(yǎng)基上，30℃倒置培養(yǎng)挑選產(chǎn)生透明圈的菌落

挑取產(chǎn)生明顯的透明圈的菌落，一般即為分解纖維素的菌落。接種到纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上，在300C－370C培養(yǎng)，可獲得純培養(yǎng)。剛果紅染色法方法一：先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)方法二：在倒平板時(shí)就加入剛果紅染色法優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)方法一

方法二

顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用

操作繁瑣，剛果紅會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜操作簡(jiǎn)便，不存在菌落混雜問題

產(chǎn)生淀粉酶的微生物也產(chǎn)生模糊透明圈，有些微生物能降解色素，形成明顯的透明圈。思考：這兩種方法各有哪些優(yōu)點(diǎn)與不足D1、下列材料中纖維素含量最高的是()A．楊樹B．小麥

C．玉米D．棉花C2、纖維素酶能夠分解()A．纖維素的微生物

B．淀粉的微生物

C．纖維素

D．淀粉B3、剛果紅能與哪項(xiàng)物質(zhì)形成紅色復(fù)合物()A．纖維二糖B．纖維素

C．葡萄糖D．麥芽糖B4、尋找纖維素分解菌應(yīng)到…()A．濕潤(rùn)的環(huán)境中

B．富含纖維素的環(huán)境中

C．富含無機(jī)鹽的環(huán)境中

D．池塘中D5、纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基有選擇作用，原因在于其含有()A．NaNO3B．KClC．酵母膏D．纖維素粉A6、下列哪種生物能產(chǎn)生纖維素酶…()A．纖維素分解菌B．牛C．羊D．兔D7、選擇培養(yǎng)時(shí)應(yīng)將錐形瓶固定在…()A．桌子上B．溫箱里

C．窗臺(tái)上D．搖床上B8、選擇培養(yǎng)的結(jié)果：培養(yǎng)液變()A．清澈B．渾濁

C．紅色D．產(chǎn)生透明圈C9、剛果紅染色時(shí)，加入剛果紅可在()①制備培養(yǎng)基時(shí)②梯度稀釋時(shí)③倒平板時(shí)④涂布時(shí)