2021年《化妝品微生物標準檢驗方法》

一、（2021.03.07Principle1范圍本規(guī)范規(guī)定了化妝品微生學(xué)檢驗總則。本規(guī)范適用于化妝品樣品采集、保存、供檢樣品制備。2儀和設(shè)備天。高滅菌器。振器。三瓶。玻珠。玻棒?？涛堋Ｑ?。均器。2.10恒水浴箱。2.11采用具：不銹鋼勺，剪刀，開罐器等。3培基和試生鹽水成分：氯化鈉蒸餾水加至mL溶解后，分裝到加玻璃珠三角瓶內(nèi)，每瓶，103.43kPa(15lb)20min高滅菌。SCDLP液培養(yǎng)基成分：酪白胨大豆蛋白胨氯化鈉5g磷酸氫二鉀葡萄糖卵磷脂1g吐溫7g蒸餾水制法：先將卵磷脂在少量餾水中加溫溶解后，再與其它成分混合，加熱溶解，調(diào)pH為7.3分，高壓滅菌。注意振蕩，使沉于底層的吐溫80充分混合，冷卻至25左使用。注：如無酪蛋白胨和大豆白胨，也可用多胨代替。滅液體石。

*陽光明*編3.4滅吐溫。4樣的采集注意事項

所采集的樣，應(yīng)具有代表性，一般視每批化妝品數(shù)量大，隨機抽取相應(yīng)數(shù)量的包裝位。檢驗時，應(yīng)分別從兩個包裝單位以上的樣品中共取10mL包裝量小的品，采樣量應(yīng)適量增加，其總量應(yīng)大于16g。供檢驗樣品應(yīng)嚴格保持原有的包裝狀態(tài)，進口產(chǎn)品應(yīng)為售包裝。容器不應(yīng)有破裂，檢驗前不得打開，防止樣品被污染。接到樣品后應(yīng)立即登記，編寫檢驗序號，并按檢驗要求快檢驗。如不能及時檢驗，品應(yīng)放在室溫陰涼干燥處，不要冷藏或冷凍。若只有一份品而同時需做多種分析，如微生物、毒理、學(xué)等，應(yīng)先做微生物檢驗，將剩余樣品做其它分析。在檢驗過程，從打開包裝到全部檢驗操作結(jié)束，均須防微生物的再污染和擴散，所采樣用具、器皿及材料均應(yīng)事先滅菌，全部操作應(yīng)在無菌室內(nèi)進，或在相應(yīng)條件下，按無菌操作規(guī)定進行。5供樣品的備液樣品5.1.1溶性的液體樣品，量取10mL到滅生理鹽水中混勻后，制成1:10檢。5.1.2油液體樣品，取樣品10mL，加菌液體石蠟混勻，再加10mL滅菌的吐溫，在℃～44℃水浴振蕩混合10min加入滅菌的生理鹽水在40℃44水浴中預(yù)溫)，在40～44水浴中乳化，制成的懸。膏霜、乳半固體狀樣品5.2.1水性的樣品，稱取10g加到裝有玻璃珠及滅菌生理鹽水的三角瓶中，充分振混勻，靜置。取其上清液作為的檢液。5.2.2水性樣品，稱取10g放到滅菌的研缽中，加10mL滅液體石蠟，研磨成粘稠狀，加入10mL滅吐溫，磨待溶解后，加滅生理鹽水，在40～44水中充分混合，制成檢液。固樣，稱取10g加滅生鹽水中，充分振蕩混勻，使其分散混懸，靜后，取上清液作為1:10的液。如有均質(zhì)器，上述水溶性、霜、粉劑等，可稱10g樣加滅菌生理鹽水，均質(zhì)～2min疏水性膏、霜及眉筆、口紅等，稱10g樣，加滅液體石蠟滅吐80滅生理鹽水，均質(zhì)～5min二、菌落總數(shù)Count1范*陽光明*編

*陽光明*編本規(guī)范規(guī)定了化妝品中菌總數(shù)的檢驗方法。本規(guī)范適用于化妝品菌落數(shù)的測定。2定本規(guī)范采用下列定義菌落總數(shù)(aerobicbacterialcount)指化妝品檢樣經(jīng)過處理，在一定條件下培養(yǎng)后(如養(yǎng)基成分、培養(yǎng)度、培養(yǎng)時間、pH值需氧性質(zhì)等，1g(1mL)中所含菌落的總數(shù)。得結(jié)果只包括一群本方法規(guī)定的條件下生的嗜中溫的需氧性菌落總數(shù)。測定菌落總數(shù)便于判明樣被細菌污染的程度，是對樣品進行衛(wèi)生學(xué)總評價的綜合依據(jù)。3儀和設(shè)備三瓶。量?；蚓躳H試。高滅茵器試。平：徑9cm刻吸管：、2mL1mL酒燈。恒培養(yǎng)箱。3.10放鏡。4培基和試劑生鹽水見總則中。卵脂、溫80營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基4.2.1成：蛋白胨牛肉膏氯化鈉瓊脂卵磷脂

3g5g15g1g吐溫7g蒸餾水4.2.2制：先將卵磷脂加到少量蒸水中，加熱溶解，加入吐溫80，其他成分(瓊脂外加到其余的蒸餾水中，溶解加入已溶解的卵磷脂、吐溫80，勻調(diào)為7.1～加入瓊脂，103.43kPa(15lb)20min高滅菌，存于冷暗處備用。0.5%化苯氮terazoliumchloride,TTC)成分：TTC蒸餾水100mL溶解后過濾，高壓滅菌，裝于棕色試瓶，置4℃箱用。5操步驟用菌吸管取1:10稀的檢液2mL別注入到兩個滅菌平*陽光明*編

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皿內(nèi)，每皿1mL另注到滅生理鹽水試管中(注意勿使吸管接觸液面更換一支吸管，并充分混勻，制成1:100檢液。吸取2mL分別注入到兩個滅菌平皿內(nèi)，每皿1mL。樣含菌量高，還可再稀釋成1:1000，…等，每種稀釋度應(yīng)換1支吸管。將化冷至45℃℃卵脂溫營養(yǎng)脂培養(yǎng)基傾注到平皿內(nèi)，每皿約15mL即轉(zhuǎn)動平皿，使樣品與培養(yǎng)基充分混合均勻，待瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平皿，置℃養(yǎng)內(nèi)養(yǎng)。另取一個不加樣品的滅菌平皿，加入約15mL卵脂吐溫營瓊脂培養(yǎng)基，待瓊脂凝固，翻轉(zhuǎn)平皿，置37培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h為白對照。為便于區(qū)別妝品中的顆粒與菌落，可在每100mL卵脂吐溫80營瓊脂中加入1mL0.5%溶液，如有細存在，培養(yǎng)后菌落呈紅色，而化妝品的粒顏色無變化。6菌計數(shù)方先用肉眼觀察，點數(shù)菌落，然后再用放大510倍放大鏡檢查，以防遺漏。記下各皿的菌落數(shù)后，求出同一稀釋度各平皿生長的平均菌落數(shù)。若平中有連成片狀的菌落或花點樣菌落蔓延生長時，該平皿不宜計數(shù)若片狀菌落不到平皿中的一半，而其余一半中菌落數(shù)分布又很均，則可將此半個平皿菌落計數(shù)后乘以，以代表全皿落數(shù)。7菌計數(shù)及告方法首選平均菌落數(shù)在30個之間的平皿，作為菌落總數(shù)測定的范圍。當(dāng)只有一個釋度的平均菌落數(shù)符合此范圍時，即以該平皿菌落數(shù)乘其稀釋倍見表例。若兩稀釋度，其平均菌落數(shù)均在30個間，則求出兩菌落總數(shù)之比值來決，若其比值小于或等于，報其平均數(shù)，若大于2報告其中稀度較低的平皿的菌落(表例2及例。若有釋度的平均菌落數(shù)均大于300個，則應(yīng)按稀釋最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍報告(表1中。若有稀釋的平均菌落數(shù)均小于個則按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)告(表例。若有釋度的平均菌落數(shù)均不在30個間，其中一個稀釋度大于個，相鄰的另一稀釋度小于30時，則以接近30或300平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報之(表1中6)。若有稀釋度均無菌生長，報告數(shù)為每g或mL小10CFU菌計數(shù)的告，菌落數(shù)在10以時，按實有數(shù)值報告之，大于100時采二位有效數(shù)字，在二位有效數(shù)字后面的數(shù)值應(yīng)以四舍五入法計算。為了縮數(shù)字后面零的個數(shù)，可用10的數(shù)來表示表1報方欄)。報告菌落數(shù)為“不計，應(yīng)注明樣*陽光明*編

*陽光明*編品的稀釋度。

表落計結(jié)果及報告方式例次

不同稀釋度平均菌落數(shù)

兩稀釋度

菌落總數(shù)

報告方式1

10-110-210-3136516420

菌數(shù)之比

CFU/mL或CFU/mL或CFU/gCFU/g1640016000或1.610423

2760295461.62890271602.2

3800038000或1042710027000或2.71044567

不可計465051327115不可計30512000

513000510000或5.1105270270或2.71023050031000或3.1104＜１10＜10＊CFU菌形成位。三、糞大腸菌群1范本規(guī)范規(guī)定了化妝品中糞腸菌群的檢驗方法。本規(guī)范適用于化妝品中糞腸菌群的檢驗。

定義本規(guī)范采用下列定義糞大腸菌群(coliforms)一群需氧及兼性厭氧革蘭氏陰性無芽胞桿菌，在44.5℃養(yǎng)24h發(fā)酵乳糖酸并產(chǎn)氣。該菌來自人和溫血動物糞，是重要的衛(wèi)生指示菌。3儀恒水浴箱隔水式恒溫箱：44℃±0.5溫計。顯鏡。載片。接環(huán)。電。三瓶。試。小管。3.10pH或試。3.11高滅茵器。3.12刻吸管：10mL2mL。3.13平。4培基和試雙乳糖膽鹽培養(yǎng)基成分：白胨豬膽鹽乳糖

40g10g10g溴酚水溶液*陽光明*編

*陽光明*編蒸餾水

制法：將蛋白胨、膽鹽及糖溶解于蒸餾水中，調(diào)pH7.4加入溴酚紫水溶液5mL混，分裝試(支試管中加一個小倒管)68.95kPa(10滅。伊美蘭EMB)脂成分：白胨乳糖磷酸氫二鉀瓊脂

10g10g2g20g伊紅水溶液20mL美水液蒸餾水

制法：先將瓊脂加到蒸水中，加熱溶，然后加入磷酸氫二、蛋，混，之解。以水補足。正為7.2，裝于三角瓶內(nèi)，103.43kPa(15lb)15min高壓滅菌備用。臨用時加入乳糖并加熱融瓊脂。冷至60左無菌操作加入滅菌的紅美藍溶液，搖勻。傾注平皿備用。蛋胨水(靛基質(zhì)試驗用)成分：白胨(胰白)20g氯化鈉蒸餾水

5g制法：將上述成分加熱融，調(diào)pH值7.0～7.2分裝小試管，高滅菌。靛質(zhì)試劑柯凡克試劑：將5g對甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊中然緩慢加入濃鹽酸試驗方法：接種細菌于蛋胨水中，于℃養(yǎng)。沿壁加柯凡克試劑0.30.5mL輕搖試管。陽性者于試劑層顯玫瑰紅色。注：蛋白胨應(yīng)含有豐富的氨酸，每批蛋白胨買來后，應(yīng)先用已知菌種鑒定后方可使用。革氏染色：4.5.1染制備4.5.1.1結(jié)紫染色：結(jié)晶紫95%醇

1g草酸銨水溶液80mL將結(jié)晶紫溶于乙醇中，然與草酸銨溶液混合。4.5.1.2革氏碘液碘碘化鉀

1g2g*陽光明*編

*陽光明*編蒸餾水加至

300mL

將碘與碘化鉀先進行混合加入蒸餾水少許，充分振搖，待完全溶解后，再加蒸餾水至。4.5.1.3脫液：95%醇4.5.1.4復(fù)液：沙黃復(fù)染液：沙黃95%醇蒸餾水

將沙黃溶解于乙醇中，然用蒸餾水稀釋。稀碳酸復(fù)紅液：稱取堿性紅10g研細，加乙醇，放置過夜，濾紙過濾。取該液10mL加5%碳酸水溶液混，為石碳酸復(fù)紅液。再取此液10mL加90mL即為稀石碳酸復(fù)紅液。4.5.2染法4.5.2.1將涂片在火上固定，滴加結(jié)晶紫染色液，染，洗。4.5.2.2滴革蘭氏液，作用1min水。4.5.2.3滴乙脫色，約30s或?qū)⒁掖嫉螡M整個涂片，立傾去，再用乙醇滴滿整個片，脫色10s水洗。4.5.2.4滴復(fù)染液復(fù)染，水洗，待干，鏡檢。4.5.3染結(jié)果革蘭氏陽性菌呈紫色，革氏陰性菌呈紅色。注：如用1:10釋石碳酸復(fù)紅染色液作復(fù)，復(fù)染時間僅需10s。5操步驟取10mL1:10稀的檢液，加到10mL倍濃的乳糖膽鹽培養(yǎng)基中，置℃±0.5℃培箱中培養(yǎng)24h48h如產(chǎn)也產(chǎn)，則報告為糞大腸菌群陰性如產(chǎn)酸產(chǎn)氣劃線接種到伊紅美藍瓊脂平板上，置℃養(yǎng)18h24h同取該培養(yǎng)2滴接種到蛋白胨水中，置44±0.5℃養(yǎng)。經(jīng)培養(yǎng)后，在上述平板上察有無典型菌落生長。糞大腸菌群在伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基上的型菌落呈深紫黑色，圓形，邊緣整齊，表面光滑濕潤，常具有金光澤。也有的呈紫黑色，不帶或略帶金屬光澤，或粉紫色，中心深的菌落，亦常為糞大腸菌群，應(yīng)注意挑選。挑上述可菌落，涂片作革蘭氏染色鏡檢。蛋白胨水養(yǎng)液中，加入靛基質(zhì)試劑約0.5mL，察靛基質(zhì)反應(yīng)。陽性者液面呈玫瑰色；陰性反應(yīng)液面呈試劑本色。6檢結(jié)果報根據(jù)發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，板上有典型菌落，并經(jīng)證實為革蘭氏陰性短桿菌，靛基質(zhì)試陽性，則可報告被檢樣品中檢出糞大腸*陽光明*編

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菌群。四、綠膿桿菌Aeruginosa1范本規(guī)范規(guī)定了化妝品中綠桿菌的檢驗方法。本規(guī)范適用于化妝品中綠桿菌的檢驗。

定義本規(guī)范采用下列定義。綠膿桿菌于假單胞菌屬，為革氏陰性桿菌，氧化酶陽性，能生綠膿菌素。此外還能液化明膠，還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，在42條件下能生長。該菌對人有致病力，可使處化膿，引起敗血癥等。3儀恒培養(yǎng)箱37℃℃三瓶。試。平?？涛埽?、、。顯鏡。載片。接針、接環(huán)。電。3.10高滅茵器。4培基和試SCDLP液培養(yǎng)基見總則中。十烷基三基溴化銨培養(yǎng)基成分：肉膏蛋白胨10g氯化鈉十六烷基三甲基溴化銨瓊脂20g蒸餾水制法：除瓊脂外，將上述分混合加熱溶解，調(diào)為7.47.6加瓊脂，68.95kPa(10滅后，制成平板用。乙胺培養(yǎng)成分：酰胺10g氯化鈉無水磷酸氫二鉀無水磷酸二氫鉀硫酸鎂酚紅（溶）*陽光明*編

*陽光明*編瓊脂20g蒸餾水

制法：除瓊脂和酚紅外，其它成分加到蒸餾水中，加熱溶解，調(diào)pH為7.2加入瓊脂、酚紅，103.43kPa(15lb)20min高壓滅菌后，制成平板備用。綠菌素測用培養(yǎng)基成分：白胨氯化鎂1.4g硫酸鉀10g瓊脂甘油化學(xué)純)10g蒸餾水制法：將蛋白胨、氯化鎂硫酸鉀加到蒸餾水中，加溫使其溶解，調(diào)至7.4，入瓊脂和甘油，加熱解，分裝于試管內(nèi)，68.95kPa(10壓滅菌后，制成斜面?zhèn)溆?。明培養(yǎng)基成分：肉膏3g蛋白胨明膠蒸餾水制法：取各成分加到蒸餾中浸泡20min時攪拌加溫使之溶解，調(diào)pH至分裝于試管內(nèi)，經(jīng)68.95kPa(10lb)20min滅菌后，直立制成高層備用。硝鹽蛋白水培養(yǎng)基成分：白胨酵母浸膏硝酸鉀亞硝酸鈉0.5g蒸餾水制法：將蛋白胨和酵母浸加到蒸餾水中，加熱使之溶解，調(diào)為，過濾后補足液量，加入硝酸鉀和亞硝酸鈉，溶混勻，分裝到加有小倒管的管中，lb)20min菌后備用。普瓊脂斜培養(yǎng)基成分：白胨牛肉膏3g氯化鈉瓊脂蒸餾水制法：除瓊脂外，將其余分溶解于蒸餾水中，調(diào)pH為～7.4加瓊脂，加熱溶，分裝試管，103.43kPa(15lb)20min高滅菌后，制成斜面?zhèn)溆谩?陽光明*編

5操步驟

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增培：取1:10樣稀釋液加液培養(yǎng)基中，置37培～24h如有綠膿桿菌生長，培養(yǎng)液表面多有一層薄菌膜，培養(yǎng)液呈黃綠色或藍綠色。分離培養(yǎng)：培養(yǎng)液的薄膜處挑取培養(yǎng)物，劃線接種在十烷基三甲基溴化銨瓊脂平板，置℃養(yǎng)～。膿桿菌在此培養(yǎng)基上，其菌落扁無定型，向周邊擴散或略有蔓延，表面濕潤，菌落呈灰白色，菌周圍培養(yǎng)基常擴散有水溶性色素，此培養(yǎng)基選擇性強，大腸艾希菌不能生長，革蘭氏陽性菌生長較差。在缺乏十六烷基三甲基溴銨培養(yǎng)基時也可用乙酰胺培養(yǎng)基進行分離，將菌液劃線接種于板上，放℃24h，膿桿菌在此培養(yǎng)基上生長良好，菌落平，邊緣不整，菌落周圍培養(yǎng)基略帶粉紅色，其它菌不生長。染色鏡檢：取可疑的菌落，涂片，革蘭氏染色，鏡檢為蘭氏陰性者應(yīng)進行氧化酶試。氧化酶試驗取一小塊潔凈的白色濾紙片放在滅菌平皿內(nèi)用無菌玻璃棒挑取綠膿桿菌疑菌落涂在濾紙片上，然后在其上滴加一滴新配制的1%甲對苯二試液，在～30s之，出現(xiàn)粉紅色或紫紅色時，為氧化試驗陽性；若培養(yǎng)物不變色，為氧化酶試驗陰性。綠菌素試：取可疑菌落2～3個分別接種在綠膿菌素測定培養(yǎng)基上，置℃養(yǎng)24h加入氯仿～5mL充振蕩使培養(yǎng)物中的綠膿菌素溶解于仿液內(nèi)，待氯仿提取液呈藍色時，用吸管將氯仿移到另一試管中加入1mol/L的酸1mL左右，振蕩后，靜置片刻。如上層鹽液內(nèi)出現(xiàn)粉紅色到紫紅色時為陽性，表示被檢物中有綠膿菌素存。硝酸鹽還原氣試驗：挑取可疑的綠膿桿菌純培養(yǎng)物，接在硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基中置37℃養(yǎng)，觀察結(jié)果。凡在硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基內(nèi)的小管中有氣體者，即為陽性，表明該菌能還原硝酸鹽，并將亞硝酸分解產(chǎn)生氮氣。明膠液化試，取綠膿桿菌可疑菌落的純培養(yǎng)物，穿刺接在明膠培養(yǎng)基內(nèi)，置37培養(yǎng)，出放冰箱10min30min如仍呈溶解狀時即為明膠液試驗陽性；如凝固不溶者為陰性。42℃長驗挑可的綠膿桿菌純培養(yǎng)物，接種在普通瓊脂斜面培養(yǎng)基上，放在～℃箱中，培養(yǎng)～，膿桿菌能生長，為陽性，而似的熒光假單胞菌則不能生長。6檢結(jié)果報被檢樣品經(jīng)增菌分離培養(yǎng)，在分離平板上有典型或可疑菌落生長，經(jīng)證實為革蘭氏陰性菌，氧化酶及綠膿菌素試驗皆為陽性者，即可報告被檢樣品中出綠膿桿菌；如綠膿菌素試驗陰性而液化明膠、硝酸鹽還原產(chǎn)氣℃試驗三者皆為陽性時，仍可報告被檢樣品中檢出綠膿桿。*陽光明*編

*陽光明*編五、金黃色葡萄球菌Aureus

1范本規(guī)范規(guī)定了化妝品中金金色葡萄球菌的檢驗方法。本規(guī)范適用于化妝品中金色葡萄球菌的檢驗。

定義本規(guī)范采用下列定義金黃色葡萄球菌aureus)為革蘭氏陽性球菌，呈萄狀排列，無芽胞，無莢，能分解甘露醇，血漿凝固酶陽性。該菌是葡萄球菌中對人類病力最強的一種，能引起人體局部化膿性病灶，嚴重時可導(dǎo)敗血癥。3儀和設(shè)備顯鏡。恒培養(yǎng)箱離機。刻吸管：1mL5mL。試。載片。酒燈。4培基和試SCDLP液培養(yǎng)基見總則中。4.2

Baird氏養(yǎng)基成分：胰白胨牛肉膏酵母浸膏1g丙酮酸鈉甘氨酸12g氯化鋰瓊脂20g蒸餾水7.0±0.2增菌劑的配制：30%黃水除菌過濾的1%碲鉀溶液混，保存于冰箱內(nèi)。制法：將各成分加到蒸水中，加熱煮沸完全溶解，校正pH分裝每瓶95mL高滅菌。用時加熱溶化瓊脂培養(yǎng)基，每加預(yù)至℃卵亞碲酸增菌劑5mL搖勻后制成平板。培養(yǎng)基應(yīng)致密不透明的。使用前在冰箱貯存不得超過48h血脂培養(yǎng)基成分：營瓊脂100mL脫纖維羊血(兔血10mL*陽光明*編

4.*陽光明*編4.制法：將營養(yǎng)瓊脂加熱融，待冷至℃右菌操作加入脫纖維羊血，搖勻，制成平，置冰箱內(nèi)備用。甘醇發(fā)酵培養(yǎng)基成分：蛋胨氯化鈉甘露醇10g牛肉膏5g麝草藍溶液12mL蒸餾水制法：將白、氯化、牛肉膏加到蒸餾水中，加熱溶解，調(diào)pH7.4，入甘露醇和指示劑混勻后分裝試管中，68.95kPa(10lb)20min菌備用。兔人)漿制備取3.8%檸酸鈉溶，高壓滅菌，1加兔人)血4份，勻靜置；～3000離～5min血下，上面血漿。無菌液體石蠟。5操步驟增菌：取1:10稀的品10mL接到SCDLP體培養(yǎng)基中，置37培養(yǎng)箱，培養(yǎng)。分離：自述增菌培養(yǎng)液中，取～接種環(huán)，劃線接種在BairdParker平，如無此培養(yǎng)基也劃線接種到血瓊脂平板，置37培養(yǎng)～。血瓊脂平板上菌落呈金黃色，大而突，圓形，不透明，表面光滑，圍有溶血圈。在Baird板上為圓形，光滑，凸起，濕潤直徑為～，色呈灰色到黑色，邊緣為淡色，周圍為混濁帶，在其外層有一透明帶。用接種針接觸菌落似有奶油樹膠軟度。偶然會遇到非脂肪溶解的類似菌落，但無混濁帶及透明帶挑取單個菌落分純在血瓊脂平板上，置37培養(yǎng)。染色鏡檢：取分純菌落，涂片，進行革蘭氏染色，鏡檢金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽菌，排列成葡萄狀，無芽胞，無夾膜，致病性葡萄球菌，菌體較，直徑約為0.5μm1μm露醇發(fā)試驗：取上述分純菌落接種到甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)中，在培養(yǎng)基液面上加入2mm3mm的菌液體石蠟，置37℃養(yǎng)24h金黃色葡萄球菌應(yīng)能發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸。血凝酶試驗：吸取新血0.5mL放入滅菌試管中，加入待檢菌24h湯培養(yǎng)物0.5mL。勻，放℃溫或恒溫水浴中，每半小時觀察次之如呈現(xiàn)凝塊即為陽性。同時以已知血漿凝固酶陽性和性菌株肉湯培養(yǎng)物及肉湯培養(yǎng)基各0.5mL分別加入滅菌1:4血0.5mL混勻，作為對照。6檢結(jié)果報經(jīng)增菌培養(yǎng)后，在分離平上有典型或可疑菌