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肉雞脂質(zhì)代謝相關(guān)機(jī)制探索演示文稿現(xiàn)在是1頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日(優(yōu)選)肉雞脂質(zhì)代謝相關(guān)機(jī)制探索現(xiàn)在是2頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日1胰島素抵抗概述現(xiàn)在是3頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日定義

胰島素抵抗(Insulinresistance,IR)是指胰島素的外周靶組織對(duì)內(nèi)源性或外源性胰島素的敏感性和反應(yīng)性降低,導(dǎo)致生理劑量的胰島素產(chǎn)生低于正常的生理效應(yīng),即要超過(guò)正常量的胰島素才能維持血糖的穩(wěn)定。1.胰島素抵抗概述現(xiàn)在是4頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日肝臟肌肉脂肪胰島素典型的效應(yīng)器官現(xiàn)在是5頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日肝臟肌肉脂肪優(yōu)于其它靶組織首先發(fā)生胰島素抵抗最重要的靶組織對(duì)胰島素抵抗的發(fā)生發(fā)展起重要作用現(xiàn)在是6頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日主要表現(xiàn)肥胖凝血功能異常動(dòng)脈粥樣硬化高胰島素血癥血清甘油三酯升高和/或高密度脂蛋白膽固醇降低空腹血糖調(diào)節(jié)受損和/或糖耐量降低高尿酸血癥現(xiàn)在是7頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日如何緩解胰島素抵抗、提高胰島素的敏感性己成為防治2型糖尿病、肥胖、高血糖癥等疾病的重要課題?,F(xiàn)在是8頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日2胰島素抵抗產(chǎn)生分子機(jī)制現(xiàn)在是9頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日糖原合成激酶-3β(GSK-3β)激活細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶活性降低磷脂酰肌醇-3-羥激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB)胰島素信號(hào)通路受阻葡萄糖運(yùn)載體4(GLUT4)易位異常胰島素抵抗的發(fā)生現(xiàn)在是10頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日2.1PI3K/PKB胰島素信號(hào)通路與胰島素抵抗12PI3K/PKB胰島素信號(hào)通路MAPK胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑胰島素信號(hào)通路現(xiàn)在是11頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日PI3K/PKB胰島素信號(hào)通路現(xiàn)在是12頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日2.2PI3K/PKB通路關(guān)鍵基因—IRIRIRSPI3KPKBGSK3胰島素受體(insulinreceptor,IR)是由2個(gè)α亞基和2個(gè)β亞基通過(guò)二硫鍵聯(lián)接組成且高度糖基化的跨膜四聚體蛋白。IR結(jié)構(gòu)現(xiàn)在是13頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日IR功能α亞基與胰島素結(jié)合β亞基的構(gòu)型酪氨酸蛋白激酶改變激活自我磷酸化胰島素受體底物磷酸化傳遞信號(hào)IRIRSPI3KPKBGSK3現(xiàn)在是14頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日IRS結(jié)構(gòu)胰島素受體底物(insulinreceptorsubstrate,IRS)是指能夠被激活的胰島素受體酪氨酸激酶作用的底物,其上具有十幾個(gè)酪氨酸殘基,可被磷酸化。PI3K/PKB通路關(guān)鍵基因—IRSIRIRSPI3KPKBGSK3現(xiàn)在是15頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日對(duì)傳入的信號(hào)進(jìn)行整合、放大IRS功能活化的IRS作為“停泊蛋白”發(fā)揮作用,與數(shù)種含有SH2結(jié)構(gòu)域的適配蛋白聚合,如PI3K,使得這些適配蛋白被活化。IRIRSPI3KPKBGSK3現(xiàn)在是16頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日胰島素受體底物1(IRS-1)Shc胰島素受體底物2(IRS-2)IRS分類通過(guò)cDNA克隆篩選到的編碼SH結(jié)構(gòu)域的基因的蛋白產(chǎn)物主要對(duì)肌肉組織的葡萄糖代謝產(chǎn)生影響廣泛表達(dá)于胰島素的敏感組織中,如肌肉、脂肪、肝臟、胰島等現(xiàn)在是17頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日PI3K結(jié)構(gòu)PI3K/PKB通路關(guān)鍵基因—PI3KIRIRSPI3KPKBGSK3磷脂酰肌醇-3-激酶(Phosphatidylinositol3-kinase,PI3K)是一種胞內(nèi)磷脂酰肌醇激酶,包含1個(gè)p110催化亞基和1個(gè)p85調(diào)節(jié)亞基。P110P85催化亞基調(diào)節(jié)亞基現(xiàn)在是18頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日PI3K功能其中p85調(diào)節(jié)亞基含有兩個(gè)SH2結(jié)構(gòu)域,可以與磷酸化的IRS配合,將p110催化亞基轉(zhuǎn)移至細(xì)胞膜上,激活PI3K,進(jìn)一步將胰島素信號(hào)向下傳遞。IRIRSPI3KPKBGSK3現(xiàn)在是19頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日PI3K/PKB通路關(guān)鍵基因—PKB

PKB,也稱作Akt,是一種絲氨酸和蘇氨酸蛋白激酶,位于PI3K的下游,作為PI3K/PKB胰島素信號(hào)通路中的一個(gè)關(guān)鍵信號(hào)蛋白,參與調(diào)節(jié)葡萄糖的轉(zhuǎn)運(yùn)和糖原的合成。IRIRSPI3KPKBGSK3PKB概念現(xiàn)在是20頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日。

PI3K/PKB通路關(guān)鍵基因—PKBPKB功能PKBGSK3GLUT易位促進(jìn)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)促進(jìn)糖原合成脂肪酸氧化和肝細(xì)胞糖異生血管內(nèi)皮細(xì)胞舒張抑制調(diào)控現(xiàn)在是21頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日。

糖原合成酶激酶3(glycogensynthesiskinase,GSK-3),是一種絲氨酸/蘇氨酸激酶,具有酪氨酸磷酸化激酶的活性,參與細(xì)胞增殖和調(diào)亡、細(xì)胞遷移、胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等多種細(xì)胞內(nèi)的代謝調(diào)控。GSK-3分為GSK-3α和GSK-3β兩種亞型,其中GSK-3β在糖原的合成與分解過(guò)程中起到調(diào)控作用。PI3K/PKB通路關(guān)鍵基因—GSK3GSK-3概念I(lǐng)RIRSPI3KPKBGSK-3現(xiàn)在是22頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日GSK-3功能(p-)

Ser9(p+)

Tyr216(p-)PKBGSK3抑制糖原合成IR/IRSSer9(p+)

Tyr216(p-)阻斷胰島素信號(hào)向下傳遞現(xiàn)在是23頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日3脂肪細(xì)胞因子與胰島素抵抗現(xiàn)在是24頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日脂肪細(xì)胞因子是由白色脂肪分泌的一類蛋白類物質(zhì),參與調(diào)節(jié)多項(xiàng)生理代謝過(guò)程。越來(lái)越多的研究證明,脂肪細(xì)胞因子對(duì)胰島素抵抗的發(fā)生發(fā)展起著重要的作用?,F(xiàn)在是25頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日1脂聯(lián)素

瘦素腫瘤壞死因子245分泌過(guò)多或不足,就會(huì)產(chǎn)生胰島素抵抗常見(jiàn)脂肪細(xì)胞因子游離脂肪酸3抵抗素現(xiàn)在是26頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日

游離脂肪酸(Freefattyacid,F(xiàn)FA)是細(xì)胞膜脂質(zhì)結(jié)構(gòu)和前列腺素合成的供體,為脂肪代謝的中間產(chǎn)物,是機(jī)體主要供給能量的來(lái)源。3.1游離脂肪酸(FFA)現(xiàn)在是27頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日FFA導(dǎo)致IR的機(jī)制0102FFA能加速肝臟糖異生1963年Randle等提出“葡萄糖-脂肪酸循環(huán)”學(xué)說(shuō),脂肪氧化的增加可以抑制葡萄糖的氧化;葡萄糖氧化的增加也可以抑制脂肪酸的氧化,兩者之間存在著代謝競(jìng)爭(zhēng)增加肝臟葡萄糖的釋出,導(dǎo)致肝臟IR0304FFA受體的作用FFA骨骼肌內(nèi)氧化障礙中、長(zhǎng)鏈游離脂肪酸(LCFA)的受體GPR40可能參與了FFAs對(duì)胰島β細(xì)胞脂毒性作用,致使高胰島素血癥和IR,目前此觀點(diǎn)仍存在爭(zhēng)議

骨骼肌內(nèi)FFA氧化障礙使IRS-1和Akt的活性降低和脂類沉積.FFA抑制葡萄糖氧化現(xiàn)在是28頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日瘦素(Leptin)由肥胖基因(ob基因)編碼產(chǎn)生,脂肪細(xì)胞分泌的分子量為16kDa的脂肪調(diào)節(jié)激素,是一種抗肥胖激素。3.2瘦素

(Leptin)現(xiàn)在是29頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日下丘腦的代謝調(diào)節(jié)中樞瘦素抑制食欲、減少能量攝取促進(jìn)能量消耗、抑制脂肪合成、促進(jìn)脂肪分解提高血清游離脂肪酸含量高血糖、肥胖高胰島素血癥和胰島素抵抗的發(fā)生瘦素導(dǎo)致IR的機(jī)制現(xiàn)在是30頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日抵抗素(Resistin)主要由白色脂肪組織分泌的一種富含半胱氨酸的多肽類激素,因具有抵抗胰島素的作用而被命名,與胰島素抵抗呈正相關(guān)性。3.3抵抗素(Resistin)現(xiàn)在是31頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日抑制胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)1使FFA水平增高2Clickheretoaddyourtitle抵抗素導(dǎo)致IR的機(jī)制抑制InR及IRS-1分子中酪氨酸殘基磷酸化,使PI3K和PKB的激活減少,從而引起脂肪細(xì)胞的IR過(guò)度表達(dá)抵抗素的動(dòng)物體內(nèi)TG含量升高,HLD水平下調(diào),F(xiàn)FA水平增高,引發(fā)IR現(xiàn)在是32頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日3.4腫瘤壞死因子-α(TNF-α)

腫瘤壞死因子-α(TNF-α)由單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的一種跨膜蛋白,TNF-α作為一種典型的前炎癥細(xì)胞因子,在胰島素抵抗個(gè)體中高表達(dá)。現(xiàn)在是33頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日

TNF-α誘發(fā)和加重IR的機(jī)制123直接作用于胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)使GLUT4的表達(dá)減少,從而抑制胰島素刺激的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)增強(qiáng)IRS-1和IRS-2的絲氨酸磷酸化,引發(fā)胰島素受體酪氨酸自身磷酸化的減少及受體酪氨酸激酶活力的降低,引發(fā)胰島素抵抗刺激脂肪分解提高FFA水平,F(xiàn)FA水平增高是引起IR的重要代謝因素現(xiàn)在是34頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日

脂聯(lián)素(Adiponectin)是成熟脂肪組織特異性分泌的蛋白質(zhì),具有與瘦素相似的抗糖尿病特性,主要表達(dá)于脂肪組織。在機(jī)體內(nèi)作為一種胰島素增敏激素發(fā)揮作用,是與胰島素抵抗呈負(fù)相關(guān)性的脂肪細(xì)胞因子。

3.5脂聯(lián)素(Adiponectin)現(xiàn)在是35頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日脂聯(lián)素抑制IR的機(jī)制1脂聯(lián)素能激活A(yù)MPK通路,促進(jìn)肝臟脂肪酸的氧化和骨骼肌葡萄糖的攝取,從而抑制胰島素抵抗2通過(guò)增加FFA氧化,降低TG儲(chǔ)存,使肌肉對(duì)胰島素敏感性上升3脂聯(lián)素還可通過(guò)降低FFA轉(zhuǎn)運(yùn)子在細(xì)胞膜上的聚集,減少脂質(zhì)堆積,改善骨骼肌細(xì)胞胰島素敏感性現(xiàn)在是36頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日4IR實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的建立現(xiàn)在是37頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日

遺傳型(自發(fā)型)轉(zhuǎn)基因型Yourtext高糖、高脂飲食誘發(fā)型、飲食加藥物誘發(fā)型、藥物誘發(fā)型*IR動(dòng)物模型分類

誘導(dǎo)型

(實(shí)驗(yàn)型)現(xiàn)在是38頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日4.1高脂飲食誘發(fā)型類型主要成分脂肪熱量比例成模時(shí)間成模率研究者高脂飼料豬油、膽固醇、蛋黃45%~60%2~5月80%Sumiyoshi等,2006高脂飼料不飽和脂肪酸59%28天胰島素敏感性指數(shù),空腹血漿胰島素李晨鐘等,2000高脂飼料14%豬油、1%膽固醇59%8周TG、FFA顯著高于正常組;血清胰島素升高;葡萄糖輸注率(GIR)明顯低于正常組陳世清等,2005高脂飼料44.1%10周胰島素敏感性李蕾等,2009高脂飼料豬油、雞蛋54%12周FPG及FINS濃度胰島素敏感性血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇濃度亦明顯高于正常對(duì)照組;肝細(xì)胞大量脂肪變陳津津等,2011現(xiàn)在是39頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日4.2高糖飲食誘發(fā)型類型主要成分比例成模時(shí)間成模率研究者高糖飼料果糖60%35天空腹血糖、血漿胰島素、均明顯高于正常對(duì)照組;胰島素敏感性指數(shù)易瑋,2002高糖飼料果糖10%14周空腹血糖張閩等,2007高糖飼料果糖66%8周TGFFA、FINS李怡等,2004現(xiàn)在是40頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日類型主要成分成模時(shí)間成模情況研究者高糖高脂飼料高脂乳劑180g·L-1的蔗糖水10周血清LDL-C、FFA、FBG、FINS含量,IRI水平血清HDL-C中重度脂肪性肝炎張蕾等,2009高糖高脂飼料l0%豬油10%蛋黃粉0.1%他巴唑8周高血糖高血壓胰島素抵抗陳曉興等,20134.3高糖高脂飲食誘發(fā)型現(xiàn)在是41頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日

類型飲食類型STZ注射量成模時(shí)間成模情況研究者飲食加藥物飼料高熱量飼料喂養(yǎng)4周腹腔注射35mg/kg,給藥2周6周糖耐量異常、腹型肥胖、IR特征田愛(ài)平等,2006飲食加藥物飼料高糖高脂飼料4周腹腔注射35mg/kg8周胰島素抵抗和胰島素分泌不足,成模率93.3%孫曉芳等,2009飲食加藥物飼料高脂喂養(yǎng)8周腹腔注射30mg/kg繼續(xù)高糖高脂喂養(yǎng)2周血糖升高,糖耐量異常,胰島素減少,肝糖原合成減少王繼勇,20134.4飲食加藥物誘發(fā)型現(xiàn)在是42頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日藥物類型注射方法注射劑量成模情況研究者小劑量地塞米松連續(xù)皮下注射14~21d20~200μg/kg成本低、周期短、動(dòng)物狀態(tài)良好,并出現(xiàn)IR現(xiàn)象孫靜等,2008鏈脲佐菌素(STZ)大劑量單次注射;小劑量連續(xù)注射5d180mg/kg;50mg/kg高血糖及多飲多尿癥狀鄭素玲等,2010鏈脲佐菌素(STZ)大劑量一次性腹腔注射40~90mg/kg破壞胰島B細(xì)胞,導(dǎo)致1型糖尿病沈亞非等,2006;蔣升等,2006鏈脲佐菌素(STZ)小劑量多次注射15mg/kg少量β細(xì)胞不斷破壞,胰島素分泌不足,2型糖尿病沈亞非等,2006;蔣升等,2006鏈脲佐菌素(STZ)靜脈注射60mg/kg血糖在40d內(nèi)穩(wěn)定在較高水平,且糖耐量異常,表現(xiàn)胰島素抵抗王蕾等,20094.5藥物誘發(fā)型現(xiàn)在是43頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日

槲皮素對(duì)鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的高血糖肉雞的作用及機(jī)制學(xué)生:韓春艷導(dǎo)師:李垚教授現(xiàn)在是44頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日目錄研究背景、目的及意義技術(shù)路線13試驗(yàn)方案2預(yù)期效果45試驗(yàn)進(jìn)程現(xiàn)在是45頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日

槲皮素(Quercetin)是一種植源性黃酮類化合物。黃酮類化合物可以改善血液循環(huán),具有降低血糖、血脂和膽固醇的作用。具有調(diào)節(jié)畜禽脂質(zhì)代謝的生物學(xué)作用,多種黃酮類化合物都能通過(guò)調(diào)節(jié)畜禽體內(nèi)脂肪沉積,改善胴體品質(zhì)。

1.1研究背景1.研究背景、目的及意義現(xiàn)在是46頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日大規(guī)模集約化養(yǎng)殖高能量飼料添加劑的使用畜禽體脂含量增加肉品質(zhì)及加工性能明顯下降皮下、腹部脂肪大量沉積肉色淺淡、風(fēng)味缺乏、pH下降過(guò)快、肉嫩度和保水性較差過(guò)量脂肪不僅降低了感官品質(zhì),同時(shí)降低了營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,不符合現(xiàn)代營(yíng)養(yǎng)、安全、低脂肉食品消費(fèi)的發(fā)展趨勢(shì)?,F(xiàn)在是47頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日前期試驗(yàn)表明,黃酮類化合物具有降血脂、調(diào)節(jié)畜禽脂質(zhì)代謝等生物學(xué)作用;降低血清總膽固醇、甘油三酯水平以及肝組織中總膽固醇含量,并增加高密度脂蛋白含量,并且畜禽肉品質(zhì)得到良好改善;提示黃酮類物質(zhì)對(duì)畜禽體內(nèi)的脂肪沉積有一定影響,從而改善肉雞肉品質(zhì)。

現(xiàn)在是48頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日鏈脲佐菌素(STZ)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白GLUT2破壞胰島β細(xì)胞糖脂代謝紊亂誘發(fā)高血糖STZ對(duì)機(jī)體組織毒性相對(duì)較小,動(dòng)物存活率高,是目國(guó)內(nèi)外使用較多的建立高血糖動(dòng)物模型的最佳藥物。現(xiàn)在是49頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日1.2研究目的及意義

為了解肉雞脂質(zhì)代謝和肉品質(zhì)與血糖關(guān)系,我們通過(guò)建立高血糖肉雞模型,以探討血糖控制對(duì)血脂變化的影響;并在飼糧中添加不同水平槲皮素進(jìn)行治療,通過(guò)檢測(cè)肌肉、脂肪和肝臟組織中脂質(zhì)代謝相關(guān)基因的表達(dá),來(lái)研究槲皮素能否或是如何通過(guò)降低血糖來(lái)影響脂質(zhì)代謝,從而改善肉品質(zhì)的?,F(xiàn)在是50頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日2.技術(shù)路線

肉雞飼養(yǎng)空腹血糖(FPG)生長(zhǎng)性能指標(biāo)肝組織化學(xué)染色檢測(cè)不同劑量STZ正式試驗(yàn)檸檬酸緩沖液預(yù)試驗(yàn)采血空腹胰島素(FINS)計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)STZ+3水平槲皮素組空白對(duì)照組STZ組屠宰性能指標(biāo)血液生化指標(biāo)肉品質(zhì)分子指標(biāo)3水平槲皮素組判斷合適的STZ注射劑量現(xiàn)在是51頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日2.技術(shù)路線生長(zhǎng)性能指標(biāo)屠宰性能指標(biāo)肉品質(zhì)血液生化指標(biāo)分子指標(biāo)日增重、采食量、料重比活重、屠宰率、半凈堂率、全凈堂率、胸肌率、腿肌率、腹脂率、腿脂率

肉色、滴水損失、pH值(pH45min和pH24h)剪切力、肌肉粗脂肪含量FPG、FINS、IRI;TC、TG、LDL-C、HDL-C、FFA;MDA、FFA;Scr;脂肪細(xì)胞因子脂聯(lián)素、瘦素和TNF-α含量肌肉/脂肪InsR、IRS-1、PI3K、PKB、PKC、AMPK、GLUT2、GKmRNA及蛋白表達(dá)量;肝臟InsR、IRS-2、PI3K、PKB、GLUT2、GK、GS、GSK-3βmRNA及蛋白表達(dá)量;現(xiàn)在是52頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日3.試驗(yàn)方案3.1預(yù)試驗(yàn)3.1.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選取1日齡健康、體重相近的AA肉仔雞120只,適應(yīng)一周后,隨機(jī)分為正常對(duì)照組(n=30只)和造模Ⅰ、Ⅱ、

Ⅲ組(n=30只),造模組設(shè)3個(gè)鏈脲佐菌素(STZ)劑量,分別為40、50、60mg/kg,每個(gè)劑量組30只肉雞?,F(xiàn)在是53頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日表3-1預(yù)試驗(yàn)設(shè)計(jì)

組別處理

正常對(duì)照組注射無(wú)菌檸檬酸緩沖液造模Ⅰ組注射40mg/kgSTZ造模Ⅱ組

注射50mg/kgSTZ造模Ⅲ組

注射60mg/kgSTZ現(xiàn)在是54頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日造模組肉雞禁食不禁水12h后,將STZ溶于0.1mol/L無(wú)菌檸檬酸緩沖液(pH=4.5)中,冰浴條件下配制成2%STZ溶液,立即經(jīng)腹部皮下快速注射(30min內(nèi)完成),正常對(duì)照組注射檸檬酸緩沖液。注射完成72h、1W、2W、3W、4W、5W、6W,每周每組隨機(jī)選取6只肉雞翅靜脈采血,檢測(cè)空腹血糖(FPG)、空腹胰島素(FINS)含量,計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)(insulinresistanceindex,HOMA-IR),公式為HOMA-IR=(FPG×FINS)/22.5,來(lái)判斷高血糖模型是否成功。觀察血糖與用量的關(guān)系,確定合適注射劑量。3.1.2試驗(yàn)方法現(xiàn)在是55頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日3.2正式試驗(yàn)3.2.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選取1日齡健康、體重相近的AA肉仔雞(公)520只,適應(yīng)一周后(7日齡前自由采食和飲水),隨機(jī)分為8組,空白對(duì)照組、3水平槲皮素組和鏈脲佐菌素(STZ)組、STZ+3水平槲皮素組,每組6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10只雞,每組5只備用,試驗(yàn)期6周,試驗(yàn)設(shè)計(jì)見(jiàn)表3-2?,F(xiàn)在是56頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日組別處理空白組基礎(chǔ)飼糧槲皮素I組基礎(chǔ)飼糧+0.02%槲皮素槲皮素II組基礎(chǔ)飼糧+0.04%槲皮素槲皮素III組基礎(chǔ)飼糧+0.06%槲皮素STZ組STZ組+0.02%槲皮素組STZ組+0.04%槲皮素組STZ組+0.06%槲皮素組基礎(chǔ)飼糧+?mg/kgSTZ基礎(chǔ)飼糧+?mg/kgSTZ+0.02%槲皮素基礎(chǔ)飼糧+?mg/kgSTZ+0.04%槲皮素基礎(chǔ)飼糧+?mg/kgSTZ+0.06%槲皮素表3-2正式試驗(yàn)設(shè)計(jì)現(xiàn)在是57頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日3.2.2試驗(yàn)方法

空白組飼喂基礎(chǔ)日糧,槲皮素Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組分別在基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)上添加0.02%、0.04%、0.06%槲皮素;所有STZ組肉雞在第7天適應(yīng)期結(jié)束后禁食不禁水12h,立即經(jīng)腹部皮下快速注射合適劑量的STZ;注射完成后72h以及每周每組隨機(jī)選取6只肉雞翅靜脈采血,檢測(cè)空腹血糖(FPG)、空腹胰島素(FINS)含量,計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)(insulinresistanceindex,HOMA-IR),公式為HOMA-IR=(FPG×FINS)/22.5,來(lái)監(jiān)測(cè)血糖水平。注射一周后開(kāi)始飼喂不同劑量的槲皮素?,F(xiàn)在是58頁(yè)\一共有61頁(yè)\編輯于星期日表3-3

基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分日糧成分(%)1~4周5~6周營(yíng)養(yǎng)水平1~4周5~6周玉米57.5062.30代謝能(MJ/kg)12.3312.50豆粕34.5030.00粗蛋白(%)21.7519.72植物油3.003.00賴氨酸(%)1.181.04魚(yú)粉1.001.00蛋氨酸(%)0.910.86蛋氨酸0.200

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