色譜分析法概述課件

色譜分析法概述主講教師2007-2008學(xué)年2學(xué)期4/7/20231色譜法是一種重要的分離、分析技術(shù)混合試樣→分離→單組分→檢測→定性、定量分析4/7/20232色譜法的由來色譜法的創(chuàng)始人－俄國植物學(xué)家茨維特(M.Tswett)4/7/20233色譜法的由來

在該實(shí)驗(yàn)中，碳酸鈣上混合色素被分成不同色帶的現(xiàn)象，像一束光線通過棱鏡時被分成不同色帶的光譜現(xiàn)象一樣，因此茨維特把這種現(xiàn)象稱為色譜，相應(yīng)的分離方法稱為色譜法（色層法，層析法）

4/7/20235色譜法實(shí)質(zhì)是分離色譜分離的基本條件：

1.互不相溶的兩相（流動相、固定相）；2.被分離組分在兩相之間作相對運(yùn)動4/7/20236色譜法實(shí)質(zhì)—分離分離依據(jù)：

各組分在兩相之間作用力不同(吸附能力分配系數(shù)離子交換能力大小排阻能力其他親合作用)各組分差速異行→分離4/7/20237色譜法分類按分離過程機(jī)制分

吸附色譜法—利用吸附劑表面對不同組分物理吸附性能的差異分配色譜法—組分在兩相中分配系數(shù)不同

離子交換色譜法—利用離子交換原理

排阻色譜法—利用多孔性物質(zhì)對不同大小分子的排阻作用

等等4/7/20239色譜法分類按固定相的固定形式分4/7/202310色譜法分類附：根據(jù)所使用的技術(shù)不同分

高效液相色譜(HPLC)化學(xué)鍵合相色譜衍生氣相(液相)色譜裂解色譜頂空氣相色譜色譜制備色譜分析4/7/202311色譜圖

被分析試樣從進(jìn)樣開始，經(jīng)色譜柱分離，到各組分全部流過檢測器在此期間所記錄下來的響應(yīng)信號隨時間而變化的曲線（分布的圖像），稱為色譜流出曲線或色譜圖。色譜圖及常用術(shù)語4/7/202313色譜峰

在一定色譜條件下，組分通過檢測器時，響應(yīng)信號隨時間而變化的曲線稱為色譜峰。

色譜過程按近理想條件和分配系數(shù)恒定時的流出曲線為對稱的高斯分布曲線，對應(yīng)的高斯分布函數(shù)為：色譜圖及常用術(shù)語4/7/202314基線在色譜操作條件下僅有流動相通過檢測器時，反映檢測器噪聲隨時間變化的曲線。穩(wěn)定的基線是一條直線。4/7/202315區(qū)域?qū)挾?/p>

1.峰底寬度在色譜峰兩邊的轉(zhuǎn)折點(diǎn)(也叫拐點(diǎn)即EF)所畫的切線與基線相交的截距。兩個拐點(diǎn)E和F之間的距離為EF=，分別位于處。4/7/202317區(qū)域?qū)挾?.半峰寬

峰高一半處的寬度GH4/7/2023183.標(biāo)準(zhǔn)偏差σ兩個拐點(diǎn)E和F之間的距離的一半4.峰面積A色譜峰與基線延長線所包圍的面積，精確計(jì)算時

4/7/202319保留值的定義2.死時間不被固定相保留的組分，從進(jìn)樣開始到色譜峰最大值出現(xiàn)時所需的時間。(空氣、甲烷或乙醚峰的保留時間）。實(shí)際上為流動相流經(jīng)色譜柱所需要的時間：——柱長（cm)——流動相平均線速度(cm/s)4/7/202321保留值的定義3.調(diào)整保留時間

組分的保留時間與死時間之差4/7/202322

色譜保留值

表明色譜峰在色譜圖中的位置（可用時間t、體積V、距離d表示）。它是由色譜分離過程中的熱力學(xué)因素所決定的。色譜常用術(shù)語4/7/202323相對保留值

某一組分與基準(zhǔn)物質(zhì)的調(diào)整保留值之比：4/7/2023254/7/202326色譜柱效的測定有效理論板數(shù)有效理論板高4/7/202329

標(biāo)準(zhǔn)保留值校正法定性4/7/202330色譜常用的簡單定性方法絕對保留值定性法加入已知物增加峰高法相對保留值定性法另外有