顯微測微尺與血球計(jì)數(shù)板的使用

顯微測微尺與血球計(jì)數(shù)板的使用第1頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六Index顯微測微尺血球計(jì)數(shù)板第2頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六顯微測微尺的使用

目鏡測微尺鏡臺測微尺第3頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六基本原理目鏡測微尺：是一塊放在目鏡內(nèi)隔板上的圓形小玻片。它的中央刻有精確刻度，有等分50小格或100小格兩種，每5小格之間有一長線隔開。目鏡測微尺每小格所代表的實(shí)際長度不一樣，不能直接用來測量微小標(biāo)本的大小，使用前要用鏡臺測微尺校正。第4頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六鏡臺測微尺：中央部分刻有精確等分線的載玻片。一般每小格的長度是0.01mm，是專用于校正目鏡測微尺的每格長度的。第5頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六使用方法

目鏡測微尺的校正（10×為例）A放置鏡臺測微尺，使其刻度面朝上。B鏡下看清鏡臺測微尺，轉(zhuǎn)動目鏡，使目鏡測微尺的刻度平行于鏡臺測微尺的刻度。C移動鏡臺測微尺使兩種測微尺在某一區(qū)間內(nèi)的兩對刻度線完全重合，然后計(jì)數(shù)出兩對重合線間各自所占的格數(shù)。D計(jì)算第6頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六微生物或細(xì)胞大小的測定：A移去鏡臺測微尺，換上微生物或細(xì)胞染色玻片標(biāo)本，調(diào)節(jié)焦距使物像清晰B轉(zhuǎn)動染色標(biāo)本或目鏡測微尺，測出微生物或細(xì)胞的長度和寬度所占的格數(shù)，換算為單個標(biāo)本的大小。C一般而言，為準(zhǔn)確起見可以采用多次測量求平均值的辦法確定微生物或細(xì)胞的大小。D

復(fù)原：取出目鏡測微尺，復(fù)原顯微鏡，將所用過的兩種測微尺擦干凈放回盒內(nèi)保存。第7頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六血球計(jì)數(shù)板的使用第8頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六基本原理血球計(jì)數(shù)板：是一塊特制的載玻片，其上表面中央部分由四條槽分成三個平臺。中間平臺又被一短槽一分為二，每邊各有一個方格網(wǎng)，每個方格網(wǎng)有九個大小相等的大方格，中間的一個大方格即計(jì)數(shù)室，就是計(jì)數(shù)微生物或細(xì)胞的部位，第9頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六第10頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六計(jì)數(shù)室刻度一般有兩種規(guī)格：A、大方格分成16個中方格，而中方格又分成25個小方格的一種(圖左)B、大方格分成25個中方格，而中方格又分成16個小方格的一種(圖右)。但兩種規(guī)格的計(jì)數(shù)板均有400個(16×25或25×16)小方格。第11頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六第12頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六計(jì)數(shù)室容積一定，將待測標(biāo)本的均勻懸液放在計(jì)數(shù)室中并在顯微鏡下計(jì)數(shù)，就可算出單位體積內(nèi)的微生物總數(shù)目。計(jì)數(shù)室容積為1×1×0.1=0.1mm3＝10－4ml計(jì)數(shù)公式：

1ml懸液中的微生物總數(shù)(個)=A×B×n×104

A為每個中方格中的微生物數(shù)平均值，B為稀釋倍數(shù)，n為每大方格中的中方格數(shù)。第13頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六使用方法(1)稀釋、將濃的標(biāo)本懸液進(jìn)行適當(dāng)稀釋。(2)鏡檢、加樣前，先要檢查計(jì)數(shù)室內(nèi)有無污物，若有則需清洗后烘干使用。(3)加樣、血球計(jì)數(shù)板上蓋上清潔干燥的蓋玻片，用無菌的細(xì)口滴管將稀釋的微生物懸液從蓋玻片邊緣滴一小滴(不宜過多)。這樣通過毛細(xì)滲透作用液體可沿縫隙進(jìn)入計(jì)數(shù)室，注意要使計(jì)數(shù)室中不產(chǎn)生氣泡并且充盈稀釋液。第14頁，共16頁，2023年，2月20日，星期六(4)計(jì)數(shù)、將計(jì)數(shù)板置于載物臺上靜置5分鐘左右，先用低倍鏡找到計(jì)數(shù)室，然后換上高倍物鏡。分別計(jì)數(shù)任意5個中方格內(nèi)的微生物數(shù)(最好選4個角和中央的方格)。位于格線上的菌體或微生物一般只數(shù)上線和右線上的或下線和左線上的。要計(jì)數(shù)兩個計(jì)數(shù)室求平均值。(5)清洗、一般用水沖洗血球計(jì)數(shù)板，切勿用硬物洗刷