實(shí)驗(yàn)二細(xì)胞結(jié)構(gòu)和大小測量

實(shí)驗(yàn)二細(xì)胞結(jié)構(gòu)和大小測量第一頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二一、目的與要求

1、掌握光學(xué)顯微鏡下的細(xì)胞形態(tài)與結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、了解油鏡觀察自制標(biāo)本操作方法

2、了解制片技術(shù)的種類與用途

3、初步掌握臨時(shí)制片的方法與染色方法

4、了解顯微測微尺的使用方法

5、學(xué)會(huì)利用軟件處理細(xì)胞，求各細(xì)胞的大小和核質(zhì)比第二頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二二、試劑、材料與器材1、材料：洋蔥，小白菜，新鮮的豬腦、番茄2、藥品：0．1％亞甲基藍(lán)染液，0．9％生理鹽水，1％碘液3、器材：顯微鏡，載玻片，蓋玻片，鑷子，滴管，擦鏡紙，小刀，顯微測微尺和電腦等第三頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二三、操作與觀察（一）制片方法與種類1、玻片分類：臨時(shí)玻片標(biāo)本與永久玻片標(biāo)本2、制片方法的分類：裝片法和切片法（二）臨時(shí)玻片標(biāo)本制備方法想一想應(yīng)該怎么制作？第四頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二

（三）永久玻片標(biāo)本制備方法

清潔玻片取材固定沖洗染色脫水封片第五頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二（四）幾種臨時(shí)裝片的制作

1、洋蔥鱗莖表皮細(xì)胞（染劑1％碘液或用0.1%亞甲基藍(lán)液)清潔玻片取材滴生理鹽水展平蓋上蓋玻片染色觀察第六頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二思考1、為什么說洋蔥表皮細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與功能相適應(yīng)？2、為什么用0.1%亞甲基藍(lán)液染色？它使細(xì)胞結(jié)構(gòu)中哪一部分更能觀察清楚？3、如何使用高倍物鏡？怎樣調(diào)節(jié)顯微鏡才能更清楚的觀察標(biāo)本?4、怎樣可避免標(biāo)本中產(chǎn)生的氣泡？第七頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二2、植物的葉肉細(xì)胞和果肉細(xì)胞

染劑：1％碘液

清潔玻片取材滴生理鹽水涂散開蓋上蓋玻片觀察染色第八頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二思考

1）怎樣制作植物葉肉細(xì)胞和果肉細(xì)胞？我們主要可觀察到什么細(xì)胞器？2）想一想果肉細(xì)胞與表皮細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)有什么不同？其最顯著的特征是什么？第九頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二3、人的口腔上皮細(xì)胞染劑：0．1％亞甲基藍(lán)染液

清潔玻片滴生理鹽水輕刮兩頰壁涂散開染色觀察蓋上蓋玻片第十頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二

思考

1）怎么制作人的口腔上皮細(xì)胞？關(guān)鍵在哪一步？2）比較洋蔥表皮細(xì)胞和人的口腔上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)上有何差別？第十一頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二4、動(dòng)物脊髓神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察

染劑：0．1％亞甲基藍(lán)染液清潔玻片滴生理鹽水取材涂散開蓋上蓋玻片染色觀察第十二頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二HE染色方法：（蘇木精-伊紅染液）

1）含義蘇木精：堿性染料，使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)及細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的核糖體染成紫藍(lán)色。伊紅：酸性染料，細(xì)胞質(zhì)和胞外基質(zhì)中的成分染成紅色。第十三頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二第十四頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二

（1）、0.5~1%的伊紅酒精溶液：

稱取伊紅Y0.5~1g，加少量蒸餾水溶解后，再滴加冰醋酸直至漿糊狀。以濾紙過濾，將濾渣在烘箱中烤干后，以95%酒精100毫升溶解。（2）、蘇木精染液配方：(配制3000ml，可按比例減少)

蘇木精

6g

無水乙醇

100ml

硫酸鋁鉀

150g

蒸餾水

2000ml

碘酸鈉

1.2g

冰醋酸

120ml

甘油

900ml

第十五頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二配制方法：將蘇木精溶于無水乙醇，再將硫酸鋁鉀溶于蒸餾水，溶解后將甘油傾入一起混合，最后加入冰醋酸和碘酸鈉。

（3）、1%鹽酸酒精分色液：將1毫升濃鹽酸加入99毫升70%酒精中即可第十六頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二2）染色的步驟固定：入100%、95%、85%、70%酒精分別脫水2-5min，再入蒸餾水清洗3min。蘇木精染液染色：5-15min脫色：蒸餾水漂洗2min分色：1%鹽酸酒精分色液分色5min，鏡檢脫色:流水沖洗20min，鏡檢漂洗：蒸餾水漂洗2min染色：1%的伊紅酒精液染色3min脫水：70%、85%、95%、100%酒精分別脫水2-5min。第十七頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二（五）細(xì)胞大小的測量1、顯微測微尺的用法（1）顯微測微尺的組成（2）測量：長度的測量，厚度的測量和對(duì)圓形，橢圓形細(xì)胞的測量第十八頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二1）顯微測微尺的組成分目鏡測微尺和鏡臺(tái)測微尺，兩尺配合使用。（1）鏡臺(tái)測微尺在一個(gè)載玻片中央封固的尺，長1毫米(1000μm)，被分為100格，每格長度是10微米。第十九頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二（2）目鏡測微尺是一個(gè)放在目鏡像平面上的玻璃圓片。圓片中央刻有一條直線，此線被分為若干格，每格代表的長度隨不同物鏡的放大倍數(shù)而異。因此，用前必須測定。第二十頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二2）使用方法將鏡臺(tái)測微尺放在顯微鏡的載物臺(tái)上夾好，小心轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡測微尺和移動(dòng)鏡臺(tái)測微尺使兩尺平行，記錄鏡臺(tái)測微尺若干格所對(duì)應(yīng)的目鏡測微尺的格數(shù)。第二十一頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二2、電腦軟件圖象處理系統(tǒng)

（各種不同倍數(shù)下的）啟動(dòng)圖像處理系統(tǒng)圖像采集窗捕捉靜態(tài)圖像關(guān)閉圖像采集窗測量校準(zhǔn)向?qū)аb入標(biāo)準(zhǔn)圖像確定物鏡倍數(shù)校準(zhǔn)圓直徑（μm）校準(zhǔn)標(biāo)定名保存最小化第二十二頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二DigilabII-cLogin確定選擇細(xì)胞手動(dòng)拍照拍照打開圖像處理系統(tǒng)點(diǎn)線、點(diǎn)圓、點(diǎn)多邊形尋找目標(biāo)細(xì)胞第二十三頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求:

1、計(jì)算2—3個(gè)細(xì)胞的大小

2、計(jì)算球形細(xì)胞的核質(zhì)比

3、繪人的