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實驗六次溴酸鈉法測定海水中的氨氮第一頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期二海水中的營養(yǎng)元素:氧、碳、氮、磷、硅等主要元素,還有鐵、錳、銅、鉬等微量元素第二頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期二第三頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期二第四頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期二第五頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期二第六頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期二第七頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期二第八頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期二氮化合物在海洋中的存在形態(tài):NH4+(NH3)、NO2-、NO3-三種無機(jī)化合氮溶解有機(jī)氮化合物不溶于海水的顆粒氮其中無機(jī)氮化合物是海洋植物最重要的營養(yǎng)物質(zhì)第九頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期二3.吸光光度法原理:在一定的實驗條件下,物質(zhì)對光的吸收與物質(zhì)的濃度成正比。顯色劑:波長的選擇:第十頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期二孔雀綠的吸收光譜第十一頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期二7.2.1吸光分析的幾種方法目視比色法標(biāo)準(zhǔn)系列未知樣品特點利用自然光比較吸收光的互補(bǔ)色光準(zhǔn)確度低(半定量)不可分辨多組分方法簡便,靈敏度低第十二頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期二光電比色法分光光度法(紫外-可見分光光度法)UV-VISUltravioletVisualSpectroscopy0.575光源單色器吸收池檢測器顯示第十三頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期二實驗原理:在堿性條件下,以次溴酸鈉為氧化劑,將海水中的氨氧化為亞硝酸鹽,亞硝酸鹽在一定的pH值下與磺胺及鹽酸萘乙二胺作用形成深紅色偶氮染料,于543毫微米波長處進(jìn)行光度測定。使用液注意:氧化劑儲備液第十四頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期二實驗步驟:工作曲線的制作1分別移取0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0毫升NH4Cl標(biāo)準(zhǔn)使用液于6個比色管,用人工海水稀釋至刻度線(溶液濃度分別為0、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00微克氨/升)3用移液管依次加入5毫升氧化劑(以次溴酸鈉)使用液,混勻放置30分鐘2量取2份水樣于50毫升比色管中,管上做標(biāo)簽,與1一起做下面步驟第十五頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期二5用移液管依次加入5毫升磺胺溶液,混勻放置5分鐘6用移液管依次加入1毫升鹽酸萘乙二胺液,混勻放置10分鐘7在分光光度計上543毫微米波長處測量1的吸光值A(chǔ),未加NH4Cl溶液的吸光值為空白吸光值A(chǔ)b,樣品的吸光值A(chǔ)W,NO2--N的吸光值A(chǔ)NO2-N
4量取2份水樣于50毫升比色管中,管上做標(biāo)簽,與前面的一起做下面步驟,來測定海水中的NO2--N第十六頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期二NH4+濃度A-Ab第十七頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期二7以1的NH4-N濃度和A-Ab為橫縱坐標(biāo)作圖,得到工作曲線8水樣的NH4-N吸光值為:A(NH4-N)=AW-Ab-ANO2-N
9根據(jù)A(NH4-N)在工作曲線上查出水樣氨-氮的濃度第十八頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期二721型分光光度計的使用方法1用調(diào)波長的旋鈕調(diào)波長至543毫微米2將上面的蓋子打開,用中間的調(diào)零旋鈕調(diào)透光值至零3將里面盛比色皿的盒子拿出來4用手拿比色皿的側(cè)面(避免用手接觸光面),用蒸餾水里外沖洗兩次第十九頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期二5最里面的比色皿盛蒸餾水(80%滿),剩下的三個由顏色淺到深的順序盛樣品,在盛之前要用樣品潤洗相對應(yīng)的比色皿2次,然后盛入對應(yīng)的樣品(80%滿)。6先用濾紙擦比色皿外面一遍,然后用擦鏡紙擦干凈(特別是光面),按順序放入盛比色皿的盒子中(放正),用盒子上的鐵皮固定好第二十頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期二7將盒子放入分光光度計內(nèi),注意和下面固定孔對好,蓋住分光光度計的蓋子8在蒸餾水位置,旋轉(zhuǎn)100%旋鈕調(diào)透光值至10
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