兩種木賊提取物對AS早期大鼠血管平滑肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)影響

兩種木賊提取物對AS早期大鼠血管平滑肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)影響【摘要】目的研究麻杏石甘湯治療支氣管哮喘的藥效學(xué)。方法采用豚鼠磷酸組胺引喘實驗、二甲苯致小鼠耳廓腫脹實驗、氨水引起的小鼠咳嗽、小鼠氣管酚紅法等進(jìn)行研究。結(jié)果實驗組能增強(qiáng)豚鼠對磷酸組胺所致哮喘的抵抗力；抑制二甲苯所致小鼠耳廓腫脹；抑制氨水引起的小鼠咳嗽；增強(qiáng)小鼠氣管酚紅分泌量，與陰性對照組比較，有顯著性差異。與陽性對照組比較，多數(shù)指標(biāo)無顯著性差異。結(jié)論麻杏石甘湯具有良好的抗支氣管哮喘的作用，應(yīng)進(jìn)一步深入探討其治療哮喘的作用機(jī)制。

【關(guān)鍵詞】麻杏石甘湯；支氣管哮喘；藥效學(xué)

ExperimentalStudyontheEffectofMaxingShiganCompositiononBronchialAsthma

Abstract:ObjectiveToinvestigatethetherapeuticeffectofMaxingshiganCompositiononBronchialphosphonicacidandhistaminetoevokecobayaasthma.Tousethedimethylbenzeneinducethemusculusalbusauresengorgement.Touseammoniawatertoinducecough.Themethodofmousephenolsulfonphthaleinwasalsoused.AllabovemethodsweretoinvestigatethetherapeuticeffectofMaxingshiganComposition.ResultsMaxingshiganCompositioncouldenhancecobaya‘santi-asthmaablility,depressthemice‘sauriculartumefaction,depressthemice‘soncoughcausedbyhistaminephosphate,increaseexcretoryrateoftheeffectofMaxingshiganCompositionwasshowntobesuperiortothatintheblankgroup(P＜P＜）.ConclusionThedrugplaysasignificantroleincuringasthma,increasingtheresistancetoanoxiaandfatigue,andhasanti-inflammatoryeffect.

Keywords:MaxingshiganComposition;Bronchialasthma;Pharmacodynamics

支氣管哮喘是機(jī)體對抗原性或非抗原性刺激引起的一種氣管-支氣管反應(yīng)性過度增高的疾病，簡稱哮喘，已成為嚴(yán)重威脅人類健康的疾病之一。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計，全球約有哮喘患者億，年死亡率在%～5%之間，每年約10萬人死于哮喘。盡管已有多種治療哮喘的方法，但仍有近40%的成人哮喘病人有癥狀性發(fā)作，且有近50%為難以控制的哮喘，這可能與其復(fù)雜、多因素的發(fā)病機(jī)制有關(guān)［1］。麻杏石甘湯是《傷寒論》經(jīng)典方劑之一，由麻黃、杏仁、石膏、炙甘草諸藥組成，具有辛涼宣肺、清肺平喘的功效?，F(xiàn)代藥理研究表明麻杏石甘湯對肺炎雙球菌、金黃色葡萄球菌感染有顯著抑制作用，對流感病毒、副流感病毒感染具有一定的抵抗作用［2］。無論是古代還是現(xiàn)代，許多醫(yī)家用麻杏石甘湯辨證治療哮喘都取得了良好的療效。本實驗采用DNFP誘導(dǎo)小鼠DTH法，以及致敏BALB/C小鼠支氣管肺泡灌洗法，對熱哮方治療支氣管哮喘的作用機(jī)理進(jìn)行探討?，F(xiàn)報道如下。

1材料

儀器及試劑722型分光光度計，尤尼柯儀器有限公司產(chǎn)品；電子分析天平，沈陽龍騰電子稱量儀器有限公司產(chǎn)品；ES120J-4，CSW-28超聲霧化治療儀，上海合力醫(yī)療器材廠產(chǎn)品；1%磷酸組胺，美國Sigma公司產(chǎn)品；酚紅及氨水，廣州化學(xué)試劑廠產(chǎn)品。

動物DHP豚鼠：雌雄各半；昆明種小鼠：雌雄各半；均購自廣州中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心。

藥物氯化銨，汕頭市化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，批號20050721；麻杏石甘湯水煎劑；地塞米松，mg/片，天津藥業(yè)集團(tuán)新鄭股份有限公司產(chǎn)品，批號050715；復(fù)方甘草片，長春市人民藥廠產(chǎn)品，批號20050607。

麻杏石甘湯的制備麻杏石甘湯由麻黃、杏仁、石膏、炙甘草組成。按古方比例及煎煮要求在蒸餾水煎汁后用生理鹽水配制成濃度為g/ml。

2方法與結(jié)果

組胺引喘實驗［3］選取g豚鼠，雌雄各半。放入密閉的玻璃鐘罩內(nèi)，用超聲霧化器噴入%His20s，記錄從噴霧開始到出現(xiàn)喘息、呼吸困難甚至抽搐跌倒的時間，即為引喘潛伏期，若引喘潛伏期大于120s者則作為不敏感而舍棄。挑選合格動物隨機(jī)分組，然后按10ml/kg的體積灌胃給予待試藥及對照藥，空白對照組按相同體積給予生理鹽水，1次/d，連續(xù)3d。末次給藥后1h，以上述方法引喘，觀察并記錄引喘潛伏期，超過120s不喘不跌倒者以120s計算。計算潛伏期抑制率并進(jìn)行統(tǒng)計分析。實驗結(jié)果見表1。

引喘潛伏期抑制率=給藥前潛伏期×100%

結(jié)果表示，與對照組相比，給藥前麻杏石甘湯各劑量組和地塞米松組對組胺噴霧所致哮喘的引喘潛伏期無顯著差異；給藥后麻杏石甘湯中、高劑量及地塞米松組對引喘潛伏期及抑制率有顯著抑制作用。

小鼠耳廓腫脹實驗［4］取昆明種小鼠50只，雌雄各半，體重g，隨機(jī)分為5組，即：麻杏石甘湯大劑量組、麻杏石甘湯中劑量組、麻杏石甘湯小劑量組、陽性對照組、陰性對照組。灌胃給藥，1次/d。第5天給藥1h后，將二甲苯涂于小鼠右耳前后兩面，40μl/只，2h后將小鼠脫頸處死，沿耳廓基線剪下兩耳，用9mm打孔器分別在同一部位打下圓耳片，稱重，計算腫脹率。

小鼠耳廓腫脹率=左耳重×100%

用生理鹽水作對照，中藥大、中、小劑量組均能顯著減輕小鼠由二甲苯所致的耳廓腫脹程度，且隨劑量增大作用逐漸增強(qiáng)；中藥大、中劑量組與地塞米松組比較，作用無顯著性差異。見表2。

對氨水引起小鼠咳嗽的影響取昆明種小鼠100只，雌雄各半，體重g，隨機(jī)分為5組，分為對照組，陽性對照組，麻杏石甘湯高、中、低3個劑量組，各組分別按表3劑量灌胃給藥，1次/d，連續(xù)4d，對照組給同體積蒸餾水。末次給藥1h后，將動物置于500ml玻璃罩內(nèi)，噴入10%氨水10ml，分別記錄各組動物咳嗽的陽性率。結(jié)果見表3。說明麻杏石甘湯對氨水引起的咳嗽則有明顯的止咳作用。

表1麻杏石甘湯對組胺噴霧致喘的影響

與空白組比較，*P＜,**P＜;與地塞米松組比較，▲P＜,▲▲P＜;n=10

表2麻杏石甘湯對小鼠二甲苯致耳腫脹的影響

與空白組比較，*P＜,**P＜;與地塞米松組比較，▲P＜,▲▲P＜;n=10

表3麻杏石甘湯對氨水引起小鼠咳嗽的影響

對小鼠氣管酚紅分泌量的影響［5］選取昆明種小鼠，體重g，雌雄各半，隨機(jī)分組，灌胃給藥1次/d，連續(xù)3d。末次給藥后30min，腹腔注射酚紅ml/10g,30min后處死動物，仔細(xì)分離氣管，用2ml生理鹽水加ml1mol/LNaOH浸泡，避光靜置30min，用722型分光光度計，測OD值。同時，用萬分之一分析天平準(zhǔn)確稱取一定量酚紅以5%NaHCO3溶解，使1ml含酚紅1000μg，依次稀釋成每毫升含酚紅，，，，1，3，5μg，測OD值，以酚紅劑量為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，作出標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計算出小鼠酚紅分泌量。實驗結(jié)果顯示，與空白對照組相比較，麻杏石甘湯中、高劑量及氯化銨都增加小鼠氣管酚紅分泌。

3討論

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，哮喘之為病，乃有“夙根”為祟，與伏痰、留飲有關(guān)。其發(fā)作之病機(jī)為“內(nèi)有壅塞之氣，外有非時之感，膈有膠固之痰，三者相合，閉拒氣道,搏擊有聲，發(fā)為哮病”?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，哮喘是一種以EOS、淋巴細(xì)胞和肥大細(xì)胞浸潤為主的氣道慢性炎癥性疾病，發(fā)作時表現(xiàn)為呼氣性呼吸困難，煩躁不安，并常伴有咳嗽、喉中痰鳴等癥狀，嚴(yán)重者呈端坐呼吸，張口抬肩，不能平臥，甚至紫紺。

表4麻杏石甘湯對小鼠氣管酚紅分泌量的影響

與空白組比較，*P＜,**P＜;與氯化銨組比較，▲P＜,▲▲P＜;n=20

根據(jù)中西醫(yī)對哮喘的認(rèn)識及哮喘發(fā)作的主要臨床表現(xiàn)癥狀，我們通過選擇止咳、祛痰、平喘及抗炎實驗來進(jìn)行麻杏石甘湯治療哮喘的藥效學(xué)研究。結(jié)果顯示麻杏石甘湯可減少豚鼠咳嗽次數(shù)和增加小鼠氣管酚紅分泌量、抑制小鼠二甲苯耳腫脹的作用，且隨著劑量的加大，平喘、止咳祛痰及抗炎作用也增強(qiáng)。應(yīng)進(jìn)一步深入探討其治療哮喘的作用機(jī)理。

【參考文獻(xiàn)】

［1］HeaneyLG,Robinsonasthmatreatment:needforcharacterizingpatients［J］.Lancet,2005,365(9463)：974.