電刺激迷走神經(jīng)對缺血再灌注影響0規(guī)范

指導老師：黃齡瑾組員：胡雪瑩陳藝萍劉少野周俊成迷走神經(jīng)(mízǒu-shéngjīng)電刺激對大白鼠腸缺血-再灌注后血壓的影響第一頁，共十三頁。編輯課件目的:觀察迷走神經(jīng)電刺激對大鼠腸缺血再灌注(I/R)后血壓的影響。方法:2只雄性大白鼠隨機分為2組:(1)A鼠組:暴露腹腔后夾閉腸系膜上動脈(SMA)1h，開放再灌注2h;(2)B鼠組:在夾閉前及再灌注開始(kāishǐ)均以5V、2ms和1Hz強度的電能持續(xù)刺激左頸部迷走神經(jīng)遠端20min;頸動脈插管監(jiān)測平均動脈壓(MAP)。結(jié)果:各組大鼠MAP在缺血期基本保持平穩(wěn)。而在再灌注期，B鼠的MAP隨時間延長明顯高于A鼠。結(jié)論:電刺激迷走神經(jīng)能能改善A鼠腸再灌注期的循環(huán)血壓。摘要(zhāiyào)第二頁，共十三頁。編輯課件腸缺血再灌注(intestinalischemia-reperfusion，I/R)損傷是外科臨床中常見的器官損傷之一，I/R不僅可引起消化道局部組織的結(jié)構(gòu)和功能的損害，而且因腸粘膜屏障功能的損害可引發(fā)腸道菌群移位(yíwèi)和內(nèi)毒素血癥，產(chǎn)生全身炎性反應綜合征，還可能對其它臟器造成繼發(fā)性損傷，甚至多器官功能衰竭，導致并發(fā)癥和死亡率增加[1]。然而，在臨床上對I/R損傷目前仍無有效的防治手段，因而進一步展開對其機制及防治的研究無疑是具有臨床意義。近年來實驗研究表明，通過傳出迷走神經(jīng)電刺激而釋放乙酰膽堿(acetylcholine，ACh)并特異性結(jié)合于組織巨噬細胞表面的α7亞基煙堿受體，抑制致炎性細胞因子釋放，具有保護臟器功能，維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定作用[2]。但迷走神經(jīng)電刺激對I/R后腸粘膜損傷是否也有影響未見研究報道。本實驗擬對此進行驗證。第三頁，共十三頁。編輯課件1.試劑與儀器

1%戊巴比妥鈉，肝素鈉注射液，生理鹽水，大白鼠手術(shù)臺，大白鼠器械，大鼠氣管插管，麻醉(mázuì)用藥注射器（5ml），BL-420生物機能實驗系統(tǒng)（簡稱BL系統(tǒng)），壓力換能器，紗布，線，動脈插管，動脈夾。一、材料(cáiliào)與方法第四頁，共十三頁。編輯課件2.動物模型的建立

清潔及健康的雄性大鼠2只，體重250~350g，手術(shù)前禁食12h，自由飲水。腹腔注射1%戊巴比妥鈉(0.5ml/100mg)麻醉后，行氣管切開插管以保持自主呼吸通暢。鈍性分離雙側(cè)頸總動脈和迷走神經(jīng)，用絲線靠頭端結(jié)扎左側(cè)迷走神經(jīng)，遠端與雙鉑電極連接;右側(cè)頸總動脈置管，連接壓力傳感器。雙鉑電極導線、壓力傳感器導線連接于BL系統(tǒng)，連續(xù)監(jiān)測平均動脈壓并提供持續(xù)電刺激迷走神經(jīng)。盡量(jǐnliàng)按無菌操作開腹，分離暴露腸系膜上動脈，自腹主動脈分出的根部用無損傷小動脈夾夾閉之，避免鉗夾腸系膜上靜脈。缺血1h后重新打開腹腔，去除動脈夾再灌注2h。第五頁，共十三頁。編輯課件3.動物分組

上述大鼠隨機分為2組:A鼠組:夾閉SMA1h后松夾再灌注(guànzhù)2h，不刺激迷走神經(jīng);迷走神經(jīng)刺激B鼠組:在夾閉前及再灌注(guànzhù)開始均以5V、2ms和1Hz強度的電能持續(xù)刺激左側(cè)迷走神經(jīng)遠端20min。第六頁，共十三頁。編輯課件4.動脈血壓監(jiān)測

記錄時點:①迷走神經(jīng)刺激前(基礎(chǔ)值T0)、②夾閉0min(T1)、③夾閉30min(T2)、④再灌注0min(T3)、⑤再灌注30min(T4)、⑥再灌注60min(T5)、⑦再灌注90min(T6)、⑧再灌注120min(T7)。每次記錄監(jiān)測波形持續(xù)30s，取其平均(píngjūn)值作為該時點的測量值。動脈血壓以平均(píngjūn)動脈壓(MAP)表示。第七頁，共十三頁。編輯課件1.一般情況

各組大鼠體重及實驗室溫度均無顯著差異。術(shù)中均存活，麻醉效果滿意。2.MAP的變化

各組大鼠MAP在缺血期基本保持平穩(wěn)。而在再灌注期(T3-T7)，A鼠的MAP隨時間延長而明顯下降，與B鼠同時點相比有顯著差異;A鼠不能改善MAP。

表1各組大白鼠腸缺血再灌注不同(bùtónɡ)時期MAP的變化(mmHg)組T0T1T2T3T4T5T6T7A7643.358.7843.7643.0945.8433.6620.11B797977.1174.1174.5268.7952.0338.15二、結(jié)果(jiēguǒ)第八頁，共十三頁。編輯課件本研究通過阻斷腸系膜上動脈1h再灌注2h復制了I/R腸損傷模型，表明，A鼠組的病變程度最重，顯著高于B鼠組。提示迷走神經(jīng)電刺激預處理能在一定程度上減輕I/R后腸組織病理變化。同時本實驗也表明，與A鼠組相比，VNS能明顯改善再灌注期MAP下降趨勢，防止(fángzhǐ)低血壓發(fā)生。目前對VNS這種保護作用的機制還不是太清楚，可能與迷走神經(jīng)興奮后釋放的ACh作用有關(guān)[2，4-6]。小腸粘膜對缺血非常敏感，在遭受30min缺血后，發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應，缺血-再灌注損傷時氧自由基生成，對細胞膜產(chǎn)生損傷。迷走神經(jīng)電刺激預處理能明顯降低I/R后血漿MDA含量，這提示迷走神經(jīng)電刺激能一定程度上減少MDA的生成，具有抗氧化應激損傷作用，這與石德光等[7]報道的電刺激迷走神經(jīng)減少內(nèi)毒素血癥動物肺MDA生成的研究結(jié)果有相似之處。三、討論(tǎolùn)第九頁，共十三頁。編輯課件TNFα具有多種生物學效應，是啟動和加速各種炎性連鎖反應的關(guān)鍵(guānjiàn)因子[8]。在I/R損傷中，TNF通過刺激使自身和其它致炎性介質(zhì)合成增加，使免疫反應被放大;另外，TNFα作為致炎細胞因子可致白細胞的趨化、聚積并釋放化學物質(zhì)引起組織損傷[9]。文獻報道迷走神經(jīng)電刺激能降低內(nèi)毒素血癥、嚴重低血量失血性休克、主動脈鉗夾缺血再灌注大鼠血漿TNFα的研究結(jié)果[4-6，7]。另外，必須強調(diào)的是組織與血漿中的TNFα濃度變化并不完全一致，血中TNFα濃度不能完全反映不同組織TNFα的含量，而組織中的水平似乎更具有臨床和生物學意義[10]。綜上所述，大鼠腸缺血1h后再灌注2h導致腸粘膜結(jié)構(gòu)明顯損傷，電刺激迷走神經(jīng)能顯著減輕I/R腸粘膜結(jié)構(gòu)的病理改變并使再灌注期的循環(huán)血壓得到一定改善，其保護效應可能與減少脂質(zhì)過氧化、下調(diào)TNFα生成有關(guān)，其確切機制有待進一步研究。第十頁，共十三頁。編輯課件[1]SwankGM，DeitchEA.Roleofthegutinmultipleorganfailure:bacterialtranslocationandpermeabilitychanges[J].WorldJSurg，1996，20(4):411-417.[2]PavlovVA，WangH，CzuraCJ，etal.Thecholinergicanti-inflammatorypathway:amissinglinkinneuroimmunomodulation[J].MolMed，2003，9(5-8):125-134.[3]ChiuCJ，McArdleAH，BrownR，etal.Intestinalmucosallesioninlow-flowstates.I.Amorphological，hemodynamic，andmetabolicreappraisal[J].ArchSurg，1970，101(4):478-483.[4]BorovikovaLV，IvanovaS，ZhangM，etal.Vagusnervestimulationattenuatesthesystemicinflammatoryresponsetoendotoxin[J].Nature，2000，405(6785):458-462.[5]BernikTR，F(xiàn)riedmanSG，OchaniM，etal.Cholinergicantiinflammatorypathwayinhibitionoftumornecrosisfactorduringischemiareperfusion[J].JVascSurg，2002，36(6):1231-1236.參考文獻第十一頁，共十三頁。編輯課件[6]GuariniS，AltavillaD，CainazzoMM，etal.Efferentvagalfibrestimulationbluntsnuclearfactor-kappaBactivationandprotectsagainsthypovolemichemorrhagicshock[7]

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