金銀花浸膏提取工藝研究

金銀花浸膏提取工藝研究

金銀花是薔薇科植物科的一個(gè)干燥的花蕾和花朵。具有清熱解毒,涼散風(fēng)熱之功?，F(xiàn)代藥理研究表明,其有較廣泛的抗菌、抗病毒作用,主要有效成分為綠原酸,2005年版一部藥典規(guī)定藥材含綠原酸不得少于1.5%;浸膏含綠原酸不得低于15%。為了保證含金銀花中藥制劑的臨床療效,對(duì)其提取工藝研究,探索含量高,成本低的提取方法。1實(shí)驗(yàn)部分1.1高效液相色譜法干燥的金銀花藥材,藥用乙醇,無(wú)水碳酸鈉,濃鹽酸,綠原酸對(duì)照品(購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所,批號(hào)0753-200111),乙腈、甲醇為色譜醇,美國(guó)Agilent1100高效液相色譜儀,分析天平(上海天平廠出品)。1.2原料的提取與測(cè)定含水率取忍冬的干燥花蕾或帶初開(kāi)的花,除去雜質(zhì),切碎,混勻?yàn)樘崛≡?。稱取混勻的原料200g,加10倍量水煎煮2次,每次2h,合并水煎液,靜置過(guò)夜,過(guò)濾,濾液水浴上濃縮成稠膏狀,再在真空干燥箱(60℃)中干燥成干浸膏,稱重。測(cè)含水率,結(jié)果見(jiàn)表1。稱取混勻的原料200g,加10倍量水煎煮2次,每次2h,合并水煎液,靜置過(guò)夜,過(guò)濾,濾液水浴上濃縮成1:1的稠膏,加乙醇至含醇量達(dá)60%,再靜置過(guò)夜,過(guò)濾,濾液減壓回收乙醇,得無(wú)醇味濃縮膏,真空干燥箱中(60℃)干燥成干浸膏,稱重。測(cè)含水率,結(jié)果見(jiàn)表1。取混勻的原料200g,置3000mL燒瓶中,加80%乙醇回流提取2次,每次加10倍量乙醇,每次回流2h,合并醇提液,過(guò)濾,濾液減壓回收乙醇至無(wú)醇味,水浴上濃縮成1∶1稠膏,置真空干燥箱中干燥成干浸膏,稱重。測(cè)含水率,結(jié)果見(jiàn)表1。稱取混勻的原料200g,共計(jì)3份,分別加1%、0.5%、0.1%碳酸鈉水煎煮2次,第1次10倍量水,2h,第2次8倍量水,2h,合并水煎液,測(cè)定pH值,用鹽酸調(diào)pH近中性,水浴上濃縮至稠膏,置真空干燥箱(60℃)中干燥成干膏,稱重。測(cè)含水率,結(jié)果見(jiàn)表1。1.3計(jì)算含水率用快速水分測(cè)定儀測(cè)定,預(yù)熱30min,調(diào)零點(diǎn),樣品加熱30s,讀數(shù)據(jù),得失重量,計(jì)算含水率(δ)=失重量(g)/樣品重(g)×100%。結(jié)果見(jiàn)表1。1.4重復(fù)性與穩(wěn)定性試驗(yàn)美國(guó)Agilent1100高效液相色譜儀,G1311A四元梯度泵,G1315B二極管陳列檢測(cè)器。色譜柱DiamonsiTMC18柱(4.6mm×250mm,5μm);流動(dòng)相:乙腈-0.4%磷酸(10:90);檢測(cè)波長(zhǎng):327nm;柱溫:30℃;流速:1.0mL/min。精密吸取濃度為0.0416mg/mL的綠原酸對(duì)照品溶液2.0、4.0、6.0、8.0、10.0μL,注入液相色譜儀中,按上述色譜條件測(cè)定峰面積(見(jiàn)表2),以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo),色譜峰面積為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,經(jīng)線性回歸,得回歸方程為Y=224.71X-7.61,r=0.9999。由此可見(jiàn),綠原酸在0.0832～0.4160μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。標(biāo)準(zhǔn)曲線見(jiàn)圖1。重復(fù)性與穩(wěn)定性試驗(yàn)精密度:精密吸取同一供試品溶液,分別測(cè)定5次,得綠原酸峰面積的RSD為1.1%。重復(fù)性:精密稱取同一原料,共5份,分別制得5份供試品溶液,進(jìn)樣測(cè)定,得綠原酸含量RSD為2.2%。表明本方法重復(fù)性較好。穩(wěn)定性:精密吸取同一供試品溶液,分別于配制后0、2、4、8和12h進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果得綠原酸峰面積的RSD為1.1%。表明本品溶液在12h內(nèi)穩(wěn)定。精密稱取已知含量的同一樣品,共5份,分別加入綠原酸對(duì)照品溶液(0.10mg/mL)1.0mL,按樣品含量測(cè)定下操作,測(cè)定結(jié)果平均回收率為98.8%,RSD為2.4%。精密稱取各樣品細(xì)粉2g,置具塞錐形瓶中,精密加入50%甲醇25mL,密塞,稱定重量,超聲提取30min,放冷,再稱定重量,加50%甲醇補(bǔ)足減失重量,搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液即得。精密吸取對(duì)照品溶液5μL與供試品溶液20μL,注入高效液相色譜儀,測(cè)定,計(jì)算。結(jié)果見(jiàn)圖2～3,表3。2水提醇提取總量低,醇提效率低綠原酸為酚酸類化合物,可溶于水,易溶于醇,加堿形成有機(jī)酸鹽更易溶于水,加酸后,變?yōu)樵?水提取雖然成本低,但綠原酸提取總量偏低,水提醇沉收率及提取總量最低,醇提耗用乙醇成本高,綠原酸總量也不高,不宜采用;3種堿水提取比較,0.5%堿水提取,綠原酸提取總量最高,且含水率最低,所用碳酸鈉量和濃鹽酸量較低,綜上所述,用0.5%堿水提取工藝適用于工業(yè)生產(chǎn)。3種堿水提取煎煮過(guò)程中,要不斷補(bǔ)充蒸發(fā)掉的水分,以保持堿度。1.2.1