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文檔簡介
分子生物化學補充復習題:核酸可以分為哪二類,各自的重要分布場所?核酸分脫氧核糖核酸和核糖核酸兩類,DNA重要分布在細胞核的染色質(zhì)中(占95%),線粒體和葉綠體中也有(占5%)。RNA90%重要在細胞質(zhì)中,10%存在與細胞核中。rRNA重要存在于核糖體。核酸分子雜交和探針?分子雜交(molecularhybridization)指具有一定同原序列的兩條核酸單鏈(DNA或RNA)在一定條件下通過堿基互補配對原則經(jīng)退火處理形成異質(zhì)雙鏈的過程。探針:已知序列的單鏈核酸片段什么叫變性和復性?變性(denaturation)是指當核酸溶液受到某些物理或化學原因的影響,使核酸的雙螺旋構(gòu)造破壞,氫鍵斷裂,變成單鏈,從而引起核酸理化性質(zhì)的變化以及生物功能的減小或喪失。復性(renaturation):導致變性的原因解除后,因變性而分開的兩條單鏈即可再聚合成本來的雙螺旋,其原有性質(zhì)可得到部分恢復。此即為DNA復性。SouthernBlotting?5、NorthernBlotting?6、WesternBlotting?SouthernBlotting雜交是指DNA與DNA的雜交。NorthernBlotting雜交是檢測RNA的雜交。Westernblotting又稱為蛋白質(zhì)印記或免疫印記。熔解溫度(meltingtemperature,Tm)?指DNA雙螺旋構(gòu)造解開二分之一時的溫度,決定于C-G堿基對的比例和DNA變性條件。A、T、G、C、U的構(gòu)造式?9、限制性內(nèi)切酶?10、簡述嘌呤核苷酸的分解代謝途徑?腺嘌呤核苷酸及鳥嘌呤核苷酸有對應的5”-磷酸化酶催化,加水脫磷酸生成腺苷。腺苷經(jīng)腺苷脫氨酶核苷磷酸化酶作用生成次黃嘌呤,次黃嘌呤經(jīng)黃嘌呤氧化酶作用變?yōu)辄S嘌呤,鳥苷經(jīng)核苷磷酸化酶作用生成鳥嘌呤,鳥嘌呤經(jīng)鳥嘌呤脫氨酶作用生成黃嘌呤(嘌呤分解代謝共同中間產(chǎn)物),黃嘌呤經(jīng)黃嘌呤氧化酶作用變?yōu)槟蛩?。簡述嘧啶核苷酸的分解代謝途徑?首先通過核苷酸酶及核苷磷酸化酶的作用,分別除去磷酸和核糖,產(chǎn)生的嘧啶堿再深入分解。嘧啶的分解代謝重要在肝臟中進行。分解代謝過程中有脫氨基、氧化、還原及脫羧基等反應。胞嘧啶脫氨基轉(zhuǎn)變?yōu)槟蜞奏?。尿嘧啶和胸腺嘧啶先在二氫嘧啶脫氫酶的催化下,由NADPH+H+供氫,分別還原為二氫尿嘧啶和二氫胸腺嘧啶。二氫嘧啶酶催化嘧啶環(huán)水解,分別生成β-丙氨酸(β-alanine)和β-氨基異丁酸(β-aminosiobutyrate)。β-丙氨酸和β氨基異丁酸可繼續(xù)分解代謝。β-氨基異丁酸亦可隨尿排出體外。尿嘧啶最終身成NH3、CO2及β-丙氨酸。胸腺嘧啶降解成β-氨基異丁酸。12、簡述嘌呤核甘酸與嘧啶核苷酸合成的異同點?嘌呤核苷酸與嘧啶核苷酸從頭合成過程中,嘌呤核苷酸合成的原料是天冬氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、CO2、一碳單位和PRPP。在5-磷酸核糖分子基礎(chǔ)上逐漸加合先形成嘌呤環(huán),再逐漸形成IMP,再轉(zhuǎn)變成AMP、GMP。重要在肝臟,另一方面是小腸黏膜和胸腺細胞合成。終產(chǎn)物IMPAMPGMP克制PRPP合成酶和PRPP酰胺轉(zhuǎn)移酶.嘧啶核苷酸的合成原料是天冬氨酸、谷氨酰胺、CO2、PRPP、一碳單位、(僅胸苷酸合成),在形成氨基甲酰磷酸的基礎(chǔ)上先形成嘧啶環(huán),再與磷酸核糖結(jié)合形成嘧啶核苷酸,其產(chǎn)物UMP反饋克制氨基甲酰磷酸合成酶II。PRPP合成酶即影響嘌呤核苷酸合成也影響嘧啶核苷酸合成。簡述嘌呤及嘧啶的補救合成途徑及其意義?大多數(shù)細胞更新其核酸(尤其是RNA)過程中,要分解核酸產(chǎn)生核苷和游離堿基。細胞運用游離堿基或核苷重新合成對應核苷酸的過程稱為補救合成。與從頭合成不一樣,補救合成過程較簡樸,消耗能量亦較少。由二種特異性不一樣的酶參與嘌呤核苷酸的補救合成。腺嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶催化PRPP與腺嘌呤合成AMP.人體由嘌呤核苷的補救合成只能通過腺苷激酶催化,使腺嘌呤核苷生成腺嘌呤核苷酸。嘌呤核苷酸補救合成是一種次要途徑。其生理意義首先在于可以節(jié)省能量及減少氨基酸的消耗。另首先對某些缺乏重要合成途徑的組織,如人的白細胞和血小板、腦、骨髓、脾等,具有重要的生理意義。簡述嘧啶核苷酸的從頭合成調(diào)整上微生物與哺乳動物的差異?在細菌中,天冬氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(ATCase)是嘧啶核苷酸從頭合成的重要調(diào)整酶。在大腸桿菌中,ATCase受ATP的變構(gòu)激活,而CTP為其變構(gòu)克制劑。而在許多細菌中、UTP是ATCase的重要變構(gòu)克制劑。在動物細胞中,ATCase不是調(diào)整酶。嘧啶核苷酸合成重要由CPS-Ⅱ調(diào)控。UDP和UTP克制其活性,而ATP和PRPP為其激活劑。第二水平的調(diào)整是OMP脫羧酶,UMP和CMP為其競爭克制劑。此外,OMP的生成受PRPP的影響。15、什么叫外顯子和內(nèi)含子?內(nèi)含子:DNA及hnRNA分子中的能轉(zhuǎn)錄而不能編碼氨基酸的序列。外顯子:DNA及hnRNA分子中的能轉(zhuǎn)錄又能編碼氨基酸的序列。什么叫管家基因和奢侈基因?奢侈基因(Luxurygene):即組織特異性基因(tissue-specificgenes),在高等生物中,奢侈基因選擇性體現(xiàn),因此它只在特定的細胞內(nèi)體現(xiàn)。(例如血紅蛋白基因只在血細胞內(nèi)體現(xiàn),因此血紅蛋白基因便是奢侈基因。)管家基因(house-keeping
genes):在所有細胞中都能體現(xiàn)的基因,與細胞分化無關(guān),其產(chǎn)物是對維持細胞基本生命活動所必需的。如微管蛋白基因、糖酵解酶系基因與核糖體蛋白基因等。17、什么叫基因家族?定義:真核細胞中,許多有關(guān)的基因常按功能成套組合,被稱為基因家族。特點:是具有明顯相似性的一組基因,編碼相似的蛋白質(zhì)產(chǎn)物。同一家族中的組員有時緊密的排列在一起,成為一種基因簇;更多的時候,它們卻分散在同一染色體的不一樣部位,甚至位于不一樣染色體上,具有各自不一樣的體現(xiàn)調(diào)控模式。什么叫進化鐘?某一蛋白在不一樣物種間的取代數(shù)與所研究物種間的分歧時間靠近正線性關(guān)系,進而將分子水平的這種恒速變異稱為“分子鐘”。分子進化鐘。19、遺傳信息傳遞的中心法則?是指遺傳信息從DNA傳遞給RNA,再從RNA傳遞給蛋白質(zhì),即完畢遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯的過程。也可以從DNA傳遞給DNA,即完畢DNA的復制過程。這是所有有細胞構(gòu)造的生物所遵照的法則。在某些病毒中的RNA自我復制(如煙草花葉病毒等)和在某些病毒中能以RNA為模板逆轉(zhuǎn)錄成DNA的過程(某些致癌病毒)是對中心法則的補充。DNA的二級構(gòu)造?DNA雙螺旋構(gòu)造DNA雙螺旋構(gòu)造的穩(wěn)定性原因?堿基堆積力是使DNA構(gòu)造穩(wěn)定的重要原因氫鍵AT之間有兩條氫鍵,CG之間由三條氫鍵,GC對含量越多,DNA分子越穩(wěn)定相反電荷的穩(wěn)定作用磷酸基團上的負電荷與介質(zhì)中的陽離子形成離子鍵,有效屏蔽靜電斥力。DNA復制的基本原則?DNA的半保留復制,半不持續(xù)復制方式,需要RNA作為引物和復制一般雙向進行。原核生物DNA復制的基本方式?θ型復制、滾環(huán)復制、D環(huán)復制24、什么是端粒酶?細胞中有種酶負責端粒的延長,其名為端粒酶。具有一種RNA分子和具有催化活性的蛋白質(zhì),是一種反轉(zhuǎn)錄酶。25、誘發(fā)突變重要包括哪些原因?誘發(fā)突變(inducedmutation):誘變劑誘發(fā)的突變(一)物理誘變1、電離:x射線射線a射線b射線質(zhì)子中子2、非電離:紫外線加熱(二)化學誘變1.堿基類似物如:5-溴尿嘧啶(5-bromouracil,5-BU);氨基嘌呤(2-aminopurine2-AP);迭氮胸苷(AZT,azidothymidine)2.堿基的修飾劑:亞硝酸(introusacid,NA);羥胺;烷化劑,它們的作用是使堿基烷基化3.DNA插入劑:原黃素(proflavin);吖啶橙(acridineorange);溴化3,8-二氨基-5-乙基-6-苯基菲啶鎓etnidiumbramide);ICR的復合物等。26、什么叫位點特異性重組?位點特異性重組是在專一酶的作用下,在DNA特定為電商發(fā)生的斷裂和重接,從而產(chǎn)生精確地DNA重排方式。其只發(fā)生在特殊DNA區(qū)域,有短的同源次序,供重組蛋白識別。什么叫轉(zhuǎn)座子?轉(zhuǎn)座子又稱跳躍因子,是存在于染色體DNA上可自主復制和位移的基本單位,其實質(zhì)是基因組上不必借助于同源序列就可引動的DNA片段,他們可以直接從基因組內(nèi)的一種位點移到另一種位點。遺傳多樣性的檢測措施有哪些?形態(tài)學標識,細胞學標識,生化標識,分子標識30、真核生物轉(zhuǎn)錄的基本過程?31、什么是RNA聚合酶?RNA聚合酶(RNApolymerase):在RNA合成過程中指導NTP同模板DNA或模板RNA堿基配對,并催化磷酸二酯鍵的形成的一類酶。什么是DNA聚合酶?DNA聚合酶是以脫氧核苷酸三磷酸為底物,沿模板的3'→5'方向,將對應的脫氧核苷酸連接到新生DNA鏈的3'端,使新生鏈沿5'→3'方向延長的一類酶。33、簡述原核基因組與真核基因組有那些異同。DNA鏈;[4]催化dNTP加到生長中的DNA鏈的3'-OH末端;[5]催化DNA合成的方向是5'→區(qū)別:1、真核生物基因組指一種物種的單倍體染色體組(1n)所具有的一整套基因。還包括葉綠體、線粒體的基因組。原核生物一般只有一種環(huán)狀的DNA分子,其上所具有的基由于一種基因組。2、原核生物的染色體分子量較小,基因組具有大量單一次序(unique-sequences),DNA僅有少許的反復次序和基因。真核生物基因組存在大量的非編碼序列。包括:.內(nèi)含子和外顯子、.基因家族和假基因、反復DNA序列。真核生物的基因組的反復次序不僅大量,并且存在復雜譜系。3、原核生物的細胞中除了主染色體以外,還具有多種質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子。質(zhì)粒常為雙鏈環(huán)狀DNA,可獨立復制,有的既可以游離于細胞質(zhì)中,也可以整合到染色體上。轉(zhuǎn)座因子一般都是整合在基因組中。真核生物除了核染色體以外,還存在細胞器DNA,如線粒體和葉綠體的DNA,為雙鏈環(huán)狀,可自主復制。有的真核細胞中也存在質(zhì)粒,如酵母和植物。4、原核生物的DNA位于細胞的中央,稱為類核(nucleoid)。真核生物有細胞核,DNA序列壓縮為染色體存在于細胞核中。5、真核基因組都是由DNA序列構(gòu)成,原核基因組尚有也許由RNA構(gòu)成,如RNA病毒。34、原核生物啟動子的構(gòu)造特點?有三個功能部位:一種是起始部位,此處有轉(zhuǎn)錄生成的RNA鏈中第一種核苷酸互補的堿基對。另一種是再轉(zhuǎn)錄起點上游-10堿基對處有一段富含A-T堿基對的TATAAT序列,稱Pribnow框。尚有一種是識別部位,其位置在-35堿基對附近,序列特性為TTGACA,這是RNA聚合酶的初始識別部位。35、什么叫核酶?是指一種可以催化特定生化反應的RNA分子,具有酶的特性,能自我催化分解。36、什么是密碼子?什么叫起始密碼子和終止密碼子?在mRNA的開放閱讀框架區(qū),以每三個相鄰的核苷酸為一組,代表一種氨基酸或者起始和終止信號,這種三聯(lián)體形式的核苷酸序列稱為密碼子。共有64個密碼子,閱讀方向是5’-3’起始:編碼甲硫氨酸的密碼子同步也作為多肽鏈合成的起始信號,多為AUG終止:不編碼任何氨基酸,只作為肽鏈合成終止信號,有UAA、UAG、UGA等。37、RNA重要有哪幾類?各自的功能?RNA重要有mRNA、rRNA、tRNA三種:①mRNA是合成蛋白質(zhì)多肽鏈的直接模板,其開放閱讀框架內(nèi)每相鄰的三個核苷酸構(gòu)成密碼子,他們代表氨基酸或肽鏈合成的起一直止等信號。②rRNA與多種蛋白質(zhì)分子構(gòu)成核蛋白體,是蛋白質(zhì)的合成場所。③tRNA是氨基酸的運載體,tRNA即可通過其反密碼子與mRNA序列中的密碼子結(jié)合,又可借助其氨基酸臂與氨基酸結(jié)合,因而可以按mRNA的遺傳密碼將特定的氨基酸運載到核蛋白體上合成多肽鏈。38.tRNA的三葉草構(gòu)造特點?氨基酸臂、D環(huán)、反密碼子環(huán)、額外環(huán)和可變環(huán)、TψC環(huán)(1)3"端含CCA-OH序列。由于該序列是單股突伸出來,并且氨基酸總是接在該序列腺苷酸殘基(A)上,因此CCA-OH序列稱為氨基酸接受臂(aminoacidacceptorarm)。CCA一般接在3"端第4個可變苷酸上。3"端第5-11位核苷酸與5"端第1-7位核苷酸形成螺旋區(qū),稱為氨基酸接受莖(aminoacidacceptorstem)。(2)TψC環(huán)(TψCloop)。TψC環(huán)是第一種環(huán),由7個不配對的大基構(gòu)成,幾乎總是含5"GTψC3"序列。該環(huán)波及tRNA與核糖體表面的結(jié)合,有人認為GTψC序列可與5SrRNA的GAAC序列反應。(3)額外環(huán)或可變環(huán)(extrovariableloop)。這個環(huán)的堿基種類和數(shù)量高度可變,在3-18個不等,往往富有稀有堿基。(4)反密碼子環(huán)(anticodonloop)。由7個不配對的堿基構(gòu)成,處在中間位的3個堿基為反密碼子。反密碼子可與mRNA中的密碼子結(jié)合。毗鄰反密碼子的3"端堿基往往為烷化修飾嘌呤,其5"端為U,即:-U-反密碼子-修飾的嘌呤。(5)二氫尿嘧啶環(huán)(dihydr-Uloop或D-loop)由8-12個不配對的堿基構(gòu)成,重要特性是具有(2+1或2-1)個修飾的堿基(D)。(6)上述的TψC環(huán),反密碼子環(huán),和二氫尿嘧啶不分別連接在由4或5個堿基構(gòu)成的螺旋區(qū)上,依次稱為TψC莖,反密碼子莖和二氫尿嘧啶莖。此外,前述的15-16個固定堿基幾乎所有位于這些環(huán)上。簡述原核生物轉(zhuǎn)錄的基本過程?轉(zhuǎn)錄起始位點,轉(zhuǎn)錄的起始,RNA合成的延伸,RNA合成的終止。(1)模板識別:形成轉(zhuǎn)錄起始前復合物全酶形成后就通過一種嘗試錯誤的方式去尋找啟動子,它是依托σ亞基尋找并識別-35序列(識別機制:氫鍵互補學說),然后全酶與-35序列結(jié)合,這樣就形成一種所謂的封閉的啟動子復合物。不過結(jié)合并不是很牢固,而是在其附近進行滑動,這時候就形成所謂的開放式啟動子復合物構(gòu)造。在RNA聚合酶上有兩個核苷酸位點,一種是起始核苷酸位點,一種是延長核苷酸位點。在開放式的啟動子復合物中,RNA聚合酶的起始位點和延長位點被對應最初的兩個核苷酸前體充斥,然后在這兩個核苷酸之間形成一種磷酸二酯鍵,這樣的話呢,就形成了一種三元復合體,即由RNA聚合酶、DNA模板、新形成的RNA短鏈共同構(gòu)成一種所謂的三元復合物。(2)流產(chǎn)起始三元復合物一旦形成,σ亞基并不是立即就脫離下來。這時候的RNA聚合酶已經(jīng)結(jié)合到轉(zhuǎn)錄起始點上,不過并不往下移動,而是在這個三元復合物中合成了一段程度為2~9個核苷酸的RNA短鏈。然后這個短鏈從三元復合體中釋放出來這才算是轉(zhuǎn)錄的成功開始,這個時候,RNA聚合酶再重新開始合成RNA。sigam因子就被釋放出來,于是轉(zhuǎn)錄繼續(xù),并且伴隨RNA聚合酶的移動,形成的RNA不停延伸。(3)轉(zhuǎn)錄延伸σ因子從全酶上脫離,RNA聚合酶關(guān)鍵酶變構(gòu),繼續(xù)沿DNA鏈移動,按照堿基互補原則,不停聚合RNA。在關(guān)鍵酶作用下,NTP不停聚合,RNA鏈不停延長,延長的RNA鏈不停的被釋放出來。(4)轉(zhuǎn)錄終止轉(zhuǎn)錄的終止作用需要有終止子提供終止信號,這種終止信號稱為終止子。不過真正起終止作用的不是DNA序列自身而是由此轉(zhuǎn)錄出來的RNA,在這一點上啟動子和終止子是不一樣的。簡述肽鏈合成的重要過程?氨基酸的活化、肽鏈合成的起始、肽鏈的延長、肽鏈合成的終止。41、什么叫分子伴侶?分子伴侶(molecularchaperones)是細胞中一大類蛋白質(zhì),是由不有關(guān)的蛋白質(zhì)構(gòu)成的一種家系,它們介導其他蛋白質(zhì)的對的裝配,但自己不成為最終功能構(gòu)造中的組分。分子伴侶是細胞內(nèi)一類可識別肽鏈的非天然構(gòu)象、增進各功能域和整體蛋白質(zhì)對的折疊的保守蛋白質(zhì)。肽鏈剪接的常見方式有哪些?N端fMet或Met的切除、N端信號序列的切除、前體的剪切、蛋白質(zhì)的剪接等。(1)肽鏈N端fMet或Met的切除。蛋白質(zhì)剛剛被合成時都以fMet(formylMet,見于原核生物)或Met(見于真核生物)開始。肽鏈合成后,其N端fMet或Met殘基一般在氨肽酶的催化作用下被切除,部分原核生物的蛋白質(zhì)保留Met,但需要在脫甲酰酶的作用下清除甲?;?。(2)信號序列的切除,需要被運送到各細胞器及細胞外的蛋白質(zhì)N端一般有一段信號序列,用于指導蛋白質(zhì)的輸送,這一信號序列一般在完畢任務后被對應的蛋白水解酶切除。(3)蛋白與多肽前體的切除,胰島素、甲狀旁腺素、生長激素等激素初合成后是無活性的前體,經(jīng)蛋白水解酶切去中間的部分肽段而成熟。(4)蛋白質(zhì)的剪接,指前體蛋白中間的蛋白質(zhì)肽段被剪切出來,其兩側(cè)的肽鏈通過新的肽鍵連接起來,形成成熟蛋白質(zhì)的加工過程,包括分子內(nèi)的轉(zhuǎn)換、中間產(chǎn)物的形成、Asn的環(huán)化、肽鍵的斷裂和形成等環(huán)節(jié),其中肽鍵的斷裂和形成是蛋白質(zhì)剪接的關(guān)鍵反應。43、什么叫信號肽?N端的一段或幾段特殊的氨基酸序列,可用于引導蛋白質(zhì)定向進入細胞中的特定部位,這些特殊的氨基酸序列稱為信號肽,是決定蛋白質(zhì)定向運送最重要的原件。什么叫同源重組?同源重組(HomologousRecombination)是指發(fā)生在同源序列的DNA分子之間或分子之內(nèi)的重新組合,其發(fā)生依賴于大片段同源DNA序列的配對、鏈斷裂、互換和再連接。非編碼RNA的分類?非編碼RNA(Non-codingRNA)是指不編碼蛋白質(zhì)的RNA。其中包括rRNA,tRNA,snRNA,snoRNA和microRNA等多種已知功能的RNA,還包括未知功能的RNA。非編碼RNA從長度上來劃分可以分為3類:不不小于50nt,包括microRNA,siRNA,piRNA;50nt到500nt,包括rRNA,tRNA,snRNA,snoRNA,SLRNA,SRPRNA等等;不小于500nt,包括長的mRNA-like的非編碼RNA,長的不帶polyA尾巴的非編碼RNA等等。46、原核生物轉(zhuǎn)錄終止的類型?一類是不需要任何輔助因子,關(guān)鍵酶就可以在某些終止信號上獨立完畢轉(zhuǎn)錄的終止,這種終止子稱為不依賴因子ρ的終止子。第二類是需要輔助因子ρ蛋白才能完畢終止,稱為依賴ρ因子的終止子。轉(zhuǎn)錄調(diào)控的順式作用元件?真核生物:啟動子,增強子,沉默子和絕緣子原核生物:啟動子48、原核生物DNA復制過程中需要哪些元件?除DNA聚合酶外,還包括使DNA模板雙鏈解鏈的解旋酶、消除前進時產(chǎn)生的拓撲應力的拓撲異構(gòu)酶、保護解開的DNA單鏈的單鏈結(jié)合蛋白、合成RNA引物的引物酶和鏈接相鄰DNA片段的DNA連接酶。乳糖操縱子的構(gòu)造?乳糖操縱子含Z、Y及A三個構(gòu)造基因,分別編碼β-半乳糖苷酶、透酶和乙?;D(zhuǎn)移酶,一種操縱序列O、一種啟動序列P及一種調(diào)整基因I。Z---編碼β-半乳糖苷酶:將乳糖水解成葡萄糖和半乳糖Y---編碼β-半乳糖苷透過酶:使外界的β-半乳糖苷(如乳糖)能透過大腸桿菌細胞壁和原生質(zhì)膜進入細胞內(nèi)。A---編碼β-半乳糖苷乙?;D(zhuǎn)移酶:乙酰輔酶A上的乙?;D(zhuǎn)到β-半乳糖苷上,形成乙酰半乳糖。50、簡述色氨酸操縱子通過弱化作用調(diào)控轉(zhuǎn)錄的機制?trp操縱子轉(zhuǎn)錄終止的調(diào)控是通過弱化作用實現(xiàn)的。在大腸桿菌trpoperon,前導區(qū)的堿基序列包括4個分別以1、2、3和4表達的片段,能以兩種不一樣的方式進行堿基配對,1-2和3-4配對,或2-3配對,3-4配對區(qū)恰好位于終止密碼子的識別區(qū)。前導序列有相鄰的兩個色氨酸密碼子,當培養(yǎng)基中Trp濃度很低時,負載有Trp的tRNATrp也就少,這樣翻譯通過兩個相鄰色氨酸密碼子的速度就會很慢,當4區(qū)被轉(zhuǎn)錄完畢時,核糖體滯留1區(qū),這時的前導區(qū)構(gòu)造是2-3配對,不形成3-4配對的終止構(gòu)造,因此轉(zhuǎn)錄可繼續(xù)進行。反之,核糖體可順利通過兩個相鄰的色氨酸密碼子,在4區(qū)被轉(zhuǎn)錄之前,核糖體就抵達2區(qū),這樣使2-3不能配對,3-4區(qū)可以配對形成終止子構(gòu)造,轉(zhuǎn)錄停止。什么是增強子?增強子是由兩個或兩個以上的增強子元件構(gòu)成,可以遠距離作用調(diào)整啟動子來增長轉(zhuǎn)錄效率的DNA序列,與啟動子不一樣,他能雙向提高上游下游基因的轉(zhuǎn)錄效率。增強子(enhanser)是真核生物中通過啟動子來增強轉(zhuǎn)錄的一種遠端遺傳性順式作用元件,有效的增強子可以位于5’、3’、甚至基因內(nèi)部的內(nèi)含子中,其基本關(guān)鍵元件常由8-12bp構(gòu)成,常形成回文序列,并以單拷貝或者多拷貝的串聯(lián)形式存在。52、什么叫順式元件和反式作用因子?順式作用元件(cis-actingelement)存在于基因旁側(cè)序列中能影響基因體現(xiàn)的序列。順式作用元件包括啟動子、增強子、調(diào)控序列和可誘導元件等,它們的作用是參與基因體現(xiàn)的調(diào)控。順式作用元件自身不編碼任何蛋白質(zhì),僅僅提供一種作用位點,要與反式作用因子互相作用而起作用。反式作用因子是指能直接或間接地識別或結(jié)合在各類順式作用元件關(guān)鍵序列上參與調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄效率的蛋白質(zhì)。有時也稱轉(zhuǎn)錄因子。真核生物轉(zhuǎn)錄調(diào)整因子由他的編碼基因體現(xiàn)后,通過與特異的順式作用元件的識別、結(jié)合,反式激活另一基因轉(zhuǎn)錄,故稱反式作用因子。53、原核生物DNA聚合酶的種類及其功能?DNA聚合酶I:(1)聚合作用:在引物RNA‘-OH末端,以dNTP為底物,按模板DNA上的指令由DNApolI逐一將核苷酸加上去,就是DNApolI的聚合作用。(2)3'→5'外切酶活性──校對作用:重要功能是從3’→5’方向識別和切除不配對的DNA生長鏈末端的核苷酸。(3)5’→3’外切酶活性——切除修復作用:5’→3’外切酶活性就是從5’→3’方向水解DNA生長鏈前方的DNA鏈,重要產(chǎn)生5‘-脫氧核苷酸。(4)這種酶活性在DNA損傷的修復中也許起著重要作用。對岡崎片段5’末端DNA引物的清除也依賴此種外切酶活性。DNA聚合酶Ⅰ:在DNA復制過程中負責清除RNA引物,以及修復功能。DNA聚合酶Ⅱ:修復功能DNA聚合酶Ⅲ:復制功能54、真核生物RNA聚合酶的種類及其功能?有三種:即RNA聚合酶I、II、III。RNA聚合酶I存在于核仁中,其功能重要是負責合成5.8SrRNA,18SrRNA,28SrRNA;RNA聚合酶II存在于核質(zhì)中,負責合成mRNA和snRNA;RNA聚合酶III也存在于核質(zhì)中,其功能是合成tRNA,和5SrRNA以及轉(zhuǎn)錄某些特殊序列如Alu序列。55、復制和轉(zhuǎn)錄的差異?復制轉(zhuǎn)錄①模板不一樣:兩股鏈均復制模板鏈轉(zhuǎn)錄(不對稱轉(zhuǎn)錄)②原料不一樣:dNTPNTP③酶不一樣:DNA聚合酶RNA聚合酶(RNA-pol)④產(chǎn)物不一樣:子代雙鏈DNA)mRNA,tRNA,rRNA⑤配對不一樣:A-T,G-CA-U,T-A,G-C⑥機制不一樣:半保留復制全保留復制56、DNA標識的基本分類?基于DNA-DNA雜交的DNA標識、基于PCR的DNA標識、基于PCR與限制性內(nèi)切酶技術(shù)相結(jié)合的DNA標識、基于單核苷酸多態(tài)性的DNA標識。原核生物和真核生物mRNA的異同?相似點:都是由DNA到RNA;都需要有關(guān)的酶系統(tǒng);均有啟動子、均有調(diào)控,如原核生物的終止子和真核的增強子等等。從分子構(gòu)造上來看,真核生物和原核生物的mRNA是完全同樣的,都是核糖核酸,由四種核糖核苷酸構(gòu)成,并且都是由基因轉(zhuǎn)錄而來。不一樣點:(1)原核生物mRNA常以多順反子的形式存在。真核生物mRNA一般以單順反子的形式存在。(2)原核生物mRNA的轉(zhuǎn)錄與翻譯一般是偶聯(lián)的,真核生物轉(zhuǎn)錄的mRNA前體則需經(jīng)轉(zhuǎn)錄后加工,加工為成熟的mRNA與蛋白質(zhì)結(jié)合生成信息體后才開始工作。(3)原核生物mRNA半壽期很短,一般為幾分鐘。真核生物mRNA的半壽期較長,有的可達數(shù)日。(4)原核與真核生物mRNA的構(gòu)造特點也不一樣。真核生物mRNA由5′端帽子構(gòu)造、5′端不翻譯區(qū)、翻譯區(qū)、
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