艾葉及其炮制品的揮發(fā)油成分對比研究

艾葉及其炮制品的揮發(fā)油成分對比研究

艾葉是薔薇科植物的愛斯基亞、et總莖。是中醫(yī)臨床常用藥。其味苦、辛,性溫;有小毒。歸肝、脾、腎經(jīng)。有散寒止痛,溫經(jīng)止血之功。其炮制方法以醋制和炒炭為主。醋制后溫而不燥,并能增強(qiáng)逐寒止痛作用,適用于虛寒之癥。揮發(fā)油為艾葉的主要成分之一,具有抗炎鎮(zhèn)痛、抗菌抗病毒、鎮(zhèn)咳平喘、祛痰、鎮(zhèn)靜、利膽、抗癌等功效。已有文獻(xiàn)報(bào)道,艾葉炮制后其揮發(fā)油總含量降低,但其成分組成、各成分含量以及成分的變化與藥效的關(guān)系尚不明確。本文采用水蒸氣蒸餾法提取艾葉及各炮制品揮發(fā)油,采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)進(jìn)行分析,為從揮發(fā)油角度探討艾葉的炮制目的提供參考。1儀器和試劑盒1.1提取器和相色譜-質(zhì)譜條件美國Agilent6890GC/5973MS氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀;HP-5MS(30.0m×250mm×0.25mm)彈性石英毛細(xì)管柱;揮發(fā)油提取器;中藥炮制控溫爐(哈爾濱市測電器廠)。1.2測試劑1.3培育抗艾植物艾艾葉購自安徽滬譙中藥飲片廠,產(chǎn)地安徽,經(jīng)山東省中醫(yī)藥研究院李英霞副研究員鑒定為菊科植物艾ArtemisiaargyiLevl.etVant.的干燥葉。醋炒品、清炒品、清炒拌醋品、生拌醋品均為實(shí)驗(yàn)室自制。2方法和結(jié)果2.1最佳的采出液,把好國內(nèi)熱2.1.1醋炒品的制備照《中國藥典》2005版一部附錄ⅡD項(xiàng)下醋炙法,取艾葉適量,除去雜質(zhì)及梗,加15%醋及適量水,拌勻,悶透,置鍋內(nèi),炒干,取出,放涼。2.1.2清炒品的制備取艾葉適量,除去雜質(zhì)及梗,加適量水(加水量與醋炒品中醋水總量一致),拌勻,悶透,置鍋內(nèi),炒干,取出,放涼。2.1.3清炒拌醋品的制備照醋炒品制備法制備清炒品,根據(jù)飲片相當(dāng)于生艾葉飲片的量,加15%醋與適量水(醋水總量同上),拌勻,悶透,攤開晾干。2.1.4生拌醋品的制備取艾葉適量,除去雜質(zhì)及梗,加15%醋及適量水(醋水總量同上),拌勻,悶透,攤開晾干。2.2揮發(fā)油含量測定分別取艾葉生品、醋炒品、清炒品、清炒拌醋品、生拌醋品粉末(過二號篩),照《中國藥典》2005版一部附錄XD揮發(fā)油測定法甲法提取。所得揮發(fā)油用無水硫酸鈉脫水。結(jié)果生拌醋品揮發(fā)油含量與生品比較無明顯差異,含量均為0.87%;加熱炮制品(醋炒品,清炒品,清炒拌醋品)含量較生品明顯降低,均為0.51%。艾葉經(jīng)加熱炮制(醋炒品、清炒品和清炒拌醋品)后揮發(fā)油含量降低,而生拌醋品與生品比較無明顯差異。2.3條件2.2回用溫度氣相色譜條件:色譜柱為HP-5MS(30.0m×250mm×0.25mm)彈性石英毛細(xì)管柱;載氣為氦氣(99.99%),流速為1mL/min;進(jìn)樣量為1μL。進(jìn)樣口溫度:220℃;柱溫:40℃;程序升溫:45℃保持1min,再以15℃/min升至280℃穩(wěn)定5min;傳輸線溫度:250℃。質(zhì)譜條件:電離方式為EI源,源溫:250℃,電離電壓為100ev,質(zhì)量范圍m/z38~400全程掃描。2.4揮發(fā)油中總離子的測定對各供試樣品進(jìn)行了分析,獲得了各樣品的總離子圖(見圖1~5),鑒定了含量大于0.1%的78個(gè)成分,并求得它們在揮發(fā)油中的相對百分含量。結(jié)果見表1。3不同制劑醋對艾葉揮發(fā)油組分含量的影響3.1GC-MS測定結(jié)果表明,含量大于0.1%的成分在生品中鑒定出42個(gè),占揮發(fā)油總量的89.23%;醋炒品中鑒定出42個(gè),占揮發(fā)油總量的88.10%;清炒品中鑒定出44個(gè),占揮發(fā)油總量的88.46%;清炒拌醋品中鑒定出37個(gè),占揮發(fā)油總量的83.00%;生拌醋品中鑒定出36個(gè),占揮發(fā)油總量的3.2艾葉經(jīng)炮制后揮發(fā)油在成分組成上發(fā)生了較大變化。醋炒品中檢出了17個(gè)生品中沒有的新成分,清炒品檢出了17個(gè)新成分,清炒拌醋品中檢出了15個(gè)新成分,生拌醋品中檢出了13個(gè)新成分。醋炒品、清炒品與清炒拌醋品中有而生拌醋品中無的新成分有1個(gè),醋炒品、清炒拌醋品與生拌醋品中有而清炒品中無的成分有2個(gè)。醋炒品、清炒品和清炒拌醋品中特有的成分各有5個(gè),生拌醋品中特有成分有3個(gè)。因此,炮制及輔料醋對艾葉揮發(fā)油有較大的影響,且不同炮制方法(加熱與加醋)影響有所差異。3.3生品中的廣藿香烷(10.565%)經(jīng)炮制后消失,醋炒品與清炒拌醋品中產(chǎn)生了新成分藍(lán)桉醇(含量分別為12.343%、13.491%),清炒品與生拌醋品中產(chǎn)生了新成分愈創(chuàng)木烯(含量分別為11.187%、11.335%),三種成分的結(jié)構(gòu)相似,且含量相近。各化合物的結(jié)構(gòu)圖見下圖。故推測艾葉生品中的廣藿香烷在醋炒品和清炒拌醋品中轉(zhuǎn)化為藍(lán)桉醇,在清炒品和生拌醋品中轉(zhuǎn)化為愈創(chuàng)木烯。這些結(jié)構(gòu)上的轉(zhuǎn)化可能是加熱或加醋的作用下產(chǎn)生的,動(dòng)態(tài)變化過程及其對藥理作用的影響均有待于進(jìn)一步研究。3.4艾葉生品中的異龍腦(6.555%)在加醋的炮制品(醋炒品、清炒拌醋品和生拌醋品)中消失,且均產(chǎn)生了新的成分龍腦(含量分別為6.664%、6.323%、7.005%),二者為差向異構(gòu)體,故推測生品中的異龍腦在加醋的炮制品中轉(zhuǎn)化為龍腦,此構(gòu)型轉(zhuǎn)化可能是輔料醋的作用。有文獻(xiàn)報(bào)道,龍腦的毒性較異龍腦小,這可能與艾葉醋制后毒性降低有關(guān)。3.5艾葉及其炮制品揮發(fā)油中均含有石竹烯及其氧化物、桉油精、4-萜品烯醇、α-松油醇等主要成分,但同一成分含量變化較大。具有平喘作用及抗菌活性的石竹烯及其氧化物經(jīng)炮制后均顯著增加,并以醋炒品中含量最高,在各樣品中的含量分別為:R118.587%、R518.833%、R319.492%、R419.832%、R221.794%;具有解熱、抗炎、抗菌作用的桉油精經(jīng)炮制后均顯著減少,在各樣品中的含量分別為:R111.25%、R59.293%、R38.762%、R26.476%、R44.938%;具有止咳、解熱、抑菌作用的α-松油醇經(jīng)炮制后均減少,在各樣品中的含量分別為:R13.333%、R53.265%、R32.96%、R42.946%、R22.845%;具有鎮(zhèn)咳祛痰作用的4-萜品烯醇經(jīng)炮制后均顯著減少,在各樣品中的含量分別為:R15.879%、R55.871%、R35.557%、R4