烯效唑浸種對小麥幼苗的影響

.頁眉.頁腳..烯效唑（S-3307）浸種對小麥幼苗的影響摘要：本實(shí)驗(yàn)以“川育20”小麥為材料，研究不同濃度（0mg/L、10mg/L、20mg/L和40mg/L）的烯效唑浸種對小麥的形態(tài)指標(biāo)和生理指標(biāo)的影響。結(jié)果表明，烯效唑能促進(jìn)根系和葉片的生長，促進(jìn)植株矮化，增加葉綠素的含量，提高植物抗性，40mg/L濃度的烯效唑最適宜小麥生長。關(guān)鍵詞：烯效唑；生理指標(biāo)；形態(tài)指標(biāo)；幼苗素質(zhì)前言：烯效唑，化學(xué)名稱為(E)-1-對氯苯基-2-(1,

2,

4-三唑-1-基)-4,

4-二甲基-1-戊烯-3-醇（C15H18ClN3O）。烯效唑有很廣泛的生理作用，具有促進(jìn)分蘗、矮化植株,防止倒伏和控長壯稈,抗逆,防衰老的作用【1】，是一種生長延緩劑，能增加植物抗性，用于小麥時(shí)，可控制其營養(yǎng)生長，抑制細(xì)胞伸長，縮短節(jié)間，促進(jìn)側(cè)芽生長，促進(jìn)莖、葉、根生長，打破頂端優(yōu)勢，防止衰老。本文主要目的是研究烯效唑?qū)π←溣酌缧螒B(tài)和生理如株高、根長、根系活力、葉綠素含量等方面的影響。材料與方法1.1供試材料：小麥：川育20，由四川農(nóng)業(yè)大學(xué)植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供。1.2種子處理1.2.1表面消毒：將種子放在0.1%升汞中浸泡消毒10分鐘，然后用清水沖洗4~5遍。1.2.2浸種24h：分別用0mg/L、10mg/L、20mg/L和40mg/L的S-3307浸泡種子24h，在用清水沖洗干凈。1.2.3催芽：將種子放在25℃的恒溫箱中催芽3~5天。1.2.4幼苗移栽：兩個(gè)人一組，每人一杯200ml的培養(yǎng)基，以一杯30株的數(shù)量將小麥幼苗移栽至培養(yǎng)基中，再將培養(yǎng)基放置在生長室中培養(yǎng)兩周以便實(shí)驗(yàn)使用。1.3根系活力的測定（TTC法）【2】1.3.1發(fā)芽種子根系活力的測定：取1.5cm長的根尖40條，置于盛有2mlTTC和2ml磷酸緩沖液的小玻璃瓶中，在37℃條件下保溫1h。取出根尖后吸干根尖表面的水分，加入5ml乙酸乙酯一起在研缽中研磨，把紅色提取液移入試管，并用少量乙酸乙酯洗滌殘?jiān)?~3次，并移入試管，定容至10ml。以空白乙酸乙酯做參比，在分光光度計(jì)上測定485nm下的吸光度。1.3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線制作（全班共用一個(gè)）：取1mg/L的TTC于50mL容量瓶中，加一勺保險(xiǎn)粉和乙酸乙酯后劇烈震蕩，使TTC充分還原為紅色的TPF并溶與乙酸乙酯，然后用乙酸乙酯定容到容量瓶刻度線。此時(shí)溶液中TPF的濃度為20ug/ml。將上述TPF溶液稀釋成系列濃度，取10mL容量瓶8個(gè)，分別編號，一次向各管加入TPF溶液0、2.00、4.00、8.00、10.00、12.00、12.00、14.00ug/ml，再加乙酸乙酯定容到10ml。以空白乙酸乙酯做參比在分光光度計(jì)上測定485nm下的吸光度，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。1.4形態(tài)指標(biāo)的測定幼苗培養(yǎng)兩周后，每個(gè)濃度分別隨機(jī)選取10株幼苗，測定小麥平均苗高（基部至最長葉尖處）、葉片數(shù)、根長（測量最長的一條）、根數(shù)（從根基部數(shù)，避免數(shù)到側(cè)根）、葉片及根的干重（先在105℃溫度下殺青10~15min，再在80℃溫度下烘干至恒重），并計(jì)算根冠比值（根干重：冠干重）。1.5葉綠素含量的測定（分光光度法）【3】取10株小麥幼苗擦凈組織表面污物，每株小麥取第一片葉切下葉中段2cm，量出葉寬并計(jì)算葉面積，再放入研缽中，加少量石英砂和碳酸鈣粉，研成均漿，過濾，濾液入25ml容量瓶，用80%丙酮反復(fù)洗滌殘?jiān)瑸V紙至無綠色，合并濾液，定容。取葉綠體色素提取液在波長665nm、645nm

和652nm

下測定吸光度，以80%丙酮為參比液。1.6脯氨酸的測定（茚三酮比色法）【4】【5】測定脯氨酸含量的方法通常用磺基水楊酸或酒精提取再與酸性茚三酮反應(yīng)生成穩(wěn)定的紅色產(chǎn)物，然后于波長520nm處比色，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線或回歸方程計(jì)算脯氨酸的含量。1.6.1脯氨酸的浸提：取小麥葉片20片剪碎混合，稱取1.0g，加入少許石英砂和80%乙醇2ml左右在研缽中研磨成勻漿，將勻漿轉(zhuǎn)入大試管，用乙醇洗滌研缽，乙醇總量15~20ml左右，搖勻，加塞，80℃水浴20min，同時(shí)，稱一份樣品，測定葉片含水量。1.6.2脫色和去雜：向大試管加約0.25g活性炭和1g人造沸石，劇烈震蕩5~6min，過濾或離心，濾液入25ml容量瓶，定容。1.6.3顯色反應(yīng)：吸取3ml濾液加入試管，再加3ml冰醋酸、3ml酸性茚三酮，加塞，置于沸水浴中，80%乙醇做空白對照。反應(yīng)15min，將空白及樣品從沸水中取出，在冷水中冷卻。1.6.4比色：以空白為參比液，在分光光度計(jì)上以515nm（或520nm）波長下測定樣品反應(yīng)液的光密度，根據(jù)光密度值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出樣品液的脯氨酸濃度。1.6.5標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作：用標(biāo)準(zhǔn)脯氨酸溶液配制成含脯氨酸0、2、4、8、12、16、20μg/ml的溶液。按上述相同方法，以脯氨酸濃度為橫坐標(biāo)，光密度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。1.7丙二醛含量的測定【6】1.7.1MDA的提取：稱取剪碎的試材1g，加入2ml10％TCA和少量石英砂，研磨至勻漿，再加8mlTCA進(jìn)一步研磨，勻漿在3000g下離心10min，上清液為樣品提取液。

1.7.2顯色反應(yīng)和測定：吸取離心的上清液3ml（對照加3mlTCA），加入3ml0.5%TBA溶液，混勻物于沸水浴上反應(yīng)10min，迅速冷卻，若有沉淀應(yīng)離心。取上清液測定532nm、600nm和430nm波長下的消光度。結(jié)果與分析2.1烯效唑浸種對小麥幼苗形態(tài)指標(biāo)的影響S3307（mg/L）根長（cm）根數(shù)（條）苗高（cm）葉片數(shù)（片）根干重（g）苗干重（g）根冠比06.221015.812.360.08430.1750.4901011.18810.672.330.09350.1680.552209.36911.272.440.09030.1640.5534014.161010.582.530.1040.1730.603根據(jù)表中數(shù)據(jù)可知：烯效唑的使用使根長均有增加，在濃度為40mg/L時(shí)最長為14.16cm，說明烯效唑?qū)Ω纳L起促進(jìn)作用。根的條數(shù)在本次實(shí)驗(yàn)中隨著烯效唑濃度由10mg/L變到40mg/L在逐漸升高，但是10mg/L和20mg/L時(shí)根數(shù)是比對照少的，因此，在10mg/L和20mg/L時(shí)發(fā)根受到抑制。使用了烯效唑的幼苗高度都比不使用烯效唑的幼苗矮，可知烯效唑能矮化植株。烯效唑10mg/L時(shí)葉片數(shù)小于對照，其他兩種濃度都高于對照。40mg/L時(shí)最多為2.53片。根干重和苗干重都隨烯效唑濃度升高而增加，說明烯效唑能促進(jìn)莖、葉、根的生長。根冠比是植物地下部分干重與地上部分干重的比值【7】，隨著烯效唑的濃度升高，呈上升趨勢，說明了烯效唑促進(jìn)地上部分生長的能力遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于促進(jìn)地下部分生長的能力。綜上所訴，烯效唑在40mg/L時(shí)，最有利于小麥的生長。2.2烯效唑浸種對小麥生理指標(biāo)的影響S3307（mg/L）根系活力（μgTTF/根/h）葉綠素a（mg/g）葉綠素b（mg/g）葉綠素總量（mg/g）脯氨酸（μg/gdw）丙二醛（μmol/gFW）00.640.01610.00760.023778.690.063100.9890.01950.01950.026934.990.0072200.9610.02290.01350.036668.630.0062401.1310.03080.01120.0418472.70.0045根據(jù)表中數(shù)據(jù)可知：使用烯效唑浸種的小麥的根系活力都比沒使用烯效唑浸種的小麥的根系活力高，表明烯效唑能促進(jìn)根系活力的提高，其中40mg/L時(shí)根系活力最高，為1.131μgTTF/根/h。葉綠素a和葉綠素b含量都在提高，其中葉綠素a在40mg/L時(shí)最高為0.0308mg/g，而葉綠素b則是在10ml/L時(shí)含量最高，為0,0195mg/g。葉綠素總量是隨烯效唑濃度的升高而增加，40mg/L最高為0.0418mg/g。脯氨酸含量在烯效唑濃度為10mg/L和20mg/L時(shí)和對照相比減少，而40mg/L增多。脯氨酸是植物體內(nèi)最重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)之一。當(dāng)植物遇到干旱、鹽堿、高溫、低溫、大氣污染等逆境時(shí)，體內(nèi)游離的脯氨酸的含量增高，抗性強(qiáng)的植物尤為顯著，因此常以游離的脯氨酸含量作為抗逆性的指標(biāo)。因此40mg/L時(shí)抗性最好。丙二醛含量隨烯效唑濃度的升高而下降，丙二醛的含量與植物的抗逆性呈負(fù)相關(guān)的關(guān)系，丙二醛含量越高，說明植物的抗逆性越差。當(dāng)烯效唑濃度為40mg/L時(shí)丙二醛含量最少，因此40mg/L時(shí)抗性最好。綜上所訴，烯效唑在40mg/L時(shí)，最有利于小麥的生長。討論不同濃度的烯效唑?qū)π←湹纳L產(chǎn)生了不同的影響，本文中得出的最有利于小麥生長的烯效唑濃度是40mg/L和楊春桃，鄭翰等【8】得出的根系活力最高、葉綠素含量最高、抗性最好等最適宜的烯效唑濃度是20mg/L的結(jié)論不符合，可能原因是實(shí)驗(yàn)操作過程中產(chǎn)生的誤差。而烯效唑能增加葉綠素含量、促進(jìn)植物矮化、提高根系活力和提高植物抗性等結(jié)論則與楊春桃【8】和朱木蘭【9】等的結(jié)論一致。參考文獻(xiàn)：【1】周欣,楊向平,潘珉,陳建國烯效唑?qū)π←溣酌缟L的影響.云南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)2001,23(植物學(xué)專輯):96~98CN53-1045/NISSN0258-7971.【2】熊慶娥.植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)教程.

四川科學(xué)技術(shù)出版社.2013年7月.30~31.【3】熊慶娥.植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)教程.

四川科學(xué)技術(shù)出版社.2013年7月.55~56.【4】李紹軍，龔月樺，王俊儒，梁宗鎖關(guān)于茚三酮法測定脯氨酸含量中脯氨酸與茚三酮反應(yīng)之探討.西北農(nóng)林科技大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，陜西楊凌712100植物生理學(xué)通訊第41卷第3期,2005年6月.【5】熊慶娥.植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)教程.四川科學(xué)技術(shù)出版社.2013年7月.123~124.【6】熊慶