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技能點(diǎn)27雞法氏囊高免蛋卵黃抗體效價(jià)的測(cè)定主要內(nèi)容：一、目的要求二、儀器及材料三、方法與步驟一、目的要求掌握傳染性法氏囊病的卵黃抗體效價(jià)的測(cè)定方法和判定標(biāo)準(zhǔn)，明確此試驗(yàn)在生產(chǎn)中的應(yīng)用。知識(shí)拓展-傳染性法氏囊病主要危害法氏囊腫脹、出血、后期萎縮發(fā)病率可達(dá)100%，死亡率約20%~30%卵黃抗體效價(jià)測(cè)定的意義制備高免卵黃抗體時(shí)需測(cè)定抗體效價(jià)，待卵黃瓊擴(kuò)反應(yīng)效價(jià)達(dá)1∶128以上即可收蛋。瓊擴(kuò)抗體效價(jià)應(yīng)≥1∶32，才具有良好的治療及預(yù)防作用。瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)定性檢測(cè)定量檢測(cè)是以2的倍數(shù)稀釋二、儀器材料氯化鈉、瓊脂粉、培養(yǎng)皿、打孔器、酒精燈、高免卵黃抗體、96孔血凝板、微量移液器、燒杯、帶蓋瓷盤、注射器、生理鹽水、蒸餾水、標(biāo)準(zhǔn)抗原等。三、方法與步驟（一）1%瓊脂平板制備（二）稀釋卵黃（三）加樣（四）反應(yīng)（五）結(jié)果判定及結(jié)論（一）
1%瓊脂平板制備及打孔1.制板用8～10%氯化鈉溶液配制1%瓊脂溶液，電爐加熱使之充分溶化后，倒入直徑90mm培養(yǎng)皿，制成厚度為2.5～3mm瓊脂平板；平置，在室溫下冷卻凝固后打孔。2.打孔在瓊脂板上按7孔一組的梅花形打孔（中間1孔，周圍6孔），孔徑5mm，孔距2～5mm，將孔內(nèi)的瓊脂用8號(hào)針頭斜面向上輕輕將瓊脂挑出，勿傷邊緣或使瓊脂層脫離皿底。一般打兩組孔。3.封底用酒精燈輕烤平皿底部至瓊脂板底部剛剛要溶化（手背感覺(jué)微燙手）為止，封閉孔底部，以防側(cè)漏。4.編號(hào)在平皿底用蠟筆編號(hào)，第一組編號(hào)1～6，第二組編號(hào)7～12。（二）卵黃稀釋用微量移液器在96孔血凝板加生理鹽水，每孔50微升，共加1~12孔；再于第一孔加50微升卵黃，倍比稀釋至12孔。（三）加樣中央孔加入傳染性法氏囊病病毒標(biāo)準(zhǔn)抗原，外周孔分別加稀釋的卵黃，血凝板孔號(hào)與瓊擴(kuò)板孔號(hào)要一一對(duì)應(yīng)，加樣從低濃度開(kāi)始加樣，每加一個(gè)濃度，吸嘴盡量噴干凈。加樣量以“滿而不溢”為原則。（四）反應(yīng)加樣完畢后，靜置5～10min，然后將平皿輕輕倒置放入濕盒內(nèi)，37℃溫箱中擴(kuò)散24～48
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